主要環(huán)境因子和混養(yǎng)對(duì)單環(huán)刺螠幼螠成活和生長的影響

丁子媛，劉統(tǒng)昊，劉順，王松林，孟霄，周超儀，許星鴻

（江蘇海洋大學(xué)海洋科學(xué)與水產(chǎn)學(xué)院，江蘇 連云港 222005）

單環(huán)刺螠（Urechis unicinctus）（俗稱海腸）屬于螠蟲動(dòng)物門（Echiura）、螠綱（Echiurida）、無管螠目（Xenopneusta）、刺螠科（Urechidae）、刺螠屬（Urechis），主要分布于中國、朝鮮、俄羅斯和日本，是我國沿海僅有的無管螠目種類[1]。單環(huán)刺螠體壁肌肉味鮮美、富含蛋白質(zhì)和不飽和脂肪酸；體腔液可提取纖溶酶、速激肽等藥用活性物質(zhì)，具有較大的開發(fā)利用價(jià)值[2,3]。過度捕撈和環(huán)境污染等因素使單環(huán)刺螠自然資源量日益減少，亟待開展單環(huán)刺螠的人工增養(yǎng)殖。幼體培育是海洋經(jīng)濟(jì)動(dòng)物人工繁育的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，關(guān)于單環(huán)刺螠幼螠的研究多集中在生理生化等方面。許星鴻等[4]采用熱滴片法分析了單環(huán)刺螠幼螠的染色體數(shù)目和核型；楊成林[5]分析了幼螠對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪等營養(yǎng)的基本需求量；張立濤[6]發(fā)現(xiàn)，單環(huán)刺螠不同器官硫雙加氧酶在硫化物應(yīng)激時(shí)具有不同程度的氧化解毒作用。然而，關(guān)于人工增養(yǎng)殖環(huán)境條件的研究僅有少量報(bào)道。常林瑞等[7]測定了不同餌料（微綠擬球藻Nannochloropsis sp.和三角褐指藻Phaeodactylum tricornutum）對(duì)幼螠生長及攝食強(qiáng)度的影響；李海涵等[8]分析了不同鹽度（15、20、25 和30）和底質(zhì)（泥底、泥沙混合底、40 目沙底、60 目沙底）對(duì)幼螠增重率和成活率的影響；孫濤等[9]報(bào)道pH 為8 時(shí)，單環(huán)刺螠的蛋白質(zhì)積累水平最高，弱堿環(huán)境是其適宜生長環(huán)境。在幼螠的自然海域環(huán)境及人工繁育生產(chǎn)過程中，雨水少的季節(jié)海水鹽度可能高于30，海沙過篩成40 目或60 目底質(zhì)耗費(fèi)大量人力，天然水體中單環(huán)刺螠和其他海洋生物共存，且人工單養(yǎng)效益低，但高鹽度海水、未過濾的天然海沙、混養(yǎng)生物以及常用的水產(chǎn)餌料如小新月菱形藻（Nitzschia closterium f.minutissima）、扁藻（Platymonas subcordiformis）、螺旋藻（Spirulina）、鼠尾藻（Sargassum thunbergii）等對(duì)幼螠存活及生長的影響迄今未見報(bào)道。

本研究通過檢測不同溫度、鹽度、底質(zhì)、餌料等環(huán)境因子對(duì)單環(huán)刺螠幼螠成活率和增重率的影響，研究與魚、蝦、蟹等生物混養(yǎng)時(shí)幼螠的存活和生長，以豐富單環(huán)刺螠苗種培育的基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 材料

實(shí)驗(yàn)用單環(huán)刺螠、日本螠（Charybdis japonica）、脊尾白蝦（Exopalaemon carinicauda）和矛尾復(fù)蝦虎魚（Synechogobius hasta）等，于2020 年4 月購自江蘇省連云港市海州區(qū)海寧中路水產(chǎn)品市場。挑選活力較強(qiáng)的單環(huán)刺螠成熟個(gè)體，進(jìn)行人工授精，培育出大小均勻、收縮力強(qiáng)、健康強(qiáng)壯的幼螠作為實(shí)驗(yàn)材料。養(yǎng)殖生物具體個(gè)數(shù)及初始體質(zhì)量見表1。

養(yǎng)殖容器為50 cm×40 cm×35 cm 的塑料箱。餌料包括小新月菱形藻、扁藻、螺旋藻粉、鼠尾藻粉、海參開口料等。小新月菱形藻、扁藻為本實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的藻液，密度均為107個(gè)細(xì)胞/mL，直接撒入水體。螺旋藻粉、鼠尾藻粉、海參開口料為市售干粉，用300 目篩絹網(wǎng)濾入水體中投喂。樣品使用電子分析天平測量（精確到0.0001 g）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

單環(huán)刺螠耐受環(huán)境為溫度-2～31℃、鹽度13.8～35.9，在自然海域中棲息在泥沙底質(zhì)中，為濾食性[10,11]。本實(shí)驗(yàn)采用靜水法，實(shí)驗(yàn)期間連續(xù)充氧，每天換水1/3～1/2，早晚各投喂1 次，室內(nèi)自然光照，養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)時(shí)間為一個(gè)月。

1.2.1 溫度實(shí)驗(yàn)

設(shè)10℃、15℃、20℃、25℃和30℃組，每組3 個(gè)平行，每放入15 個(gè)大小相近的幼螠，加入5 L 鹽度25 的海水，底質(zhì)為40 目沙，投喂混合藻粉（螺旋藻粉+鼠尾藻粉+海參開口料），3 種餌料投喂量均為2 mg/個(gè)幼螠），每天早晚各投喂一次。養(yǎng)殖箱放入生化培養(yǎng)箱內(nèi)調(diào)控溫度。

1.2.2 鹽度實(shí)驗(yàn)

設(shè)15、20、25、30 和35 鹽度組，每組3 個(gè)平行，不同鹽度梯度的海水一次性配制5 L，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中放入15 個(gè)大小相近的幼螠，水溫20℃，底質(zhì)為40 目沙，投喂混合藻粉。

1.2.3 底質(zhì)實(shí)驗(yàn)

設(shè)無底質(zhì)、泥、泥沙、天然海沙、40 目沙和60 目沙6 個(gè)底質(zhì)處理組，每組3 個(gè)平行，加入5 L 鹽度25 的海水，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組中放幼螠數(shù)、水溫和投喂同上。

1.2.4 餌料種類實(shí)驗(yàn)

設(shè)螺旋藻粉（投喂量為6 mg/個(gè)幼螠）、混合藻液（小新月菱形藻和扁藻按投喂量各3 mL/ 個(gè)幼螠）、螺旋藻粉+混合藻液（螺旋藻粉投喂量為3 mg/個(gè)幼螠，小新月菱形藻和扁藻按投喂量各1.5 mL/個(gè)幼螠）、混合藻液+海參開口料（海參開口料投喂量為3 mg/個(gè)幼螠，小新月菱形藻和扁藻按投喂量各1.5 mL/個(gè)幼螠）和混合藻粉（螺旋藻粉+鼠尾藻粉+海參開口料3 種餌料投喂量均為2 mg/個(gè)幼螠）共5 個(gè)組。每組3 個(gè)平行，底質(zhì)為40 目沙，每組中幼螠數(shù)、水溫、鹽度和投喂同上。

1.2.5 混養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

混養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分為7 組，每組3 個(gè)平行（表1）。7 組實(shí)驗(yàn)均控制溫度為20℃，鹽度為25，pH 為7.5～8.0，底質(zhì)為40 目沙。在第2、5 組的養(yǎng)殖箱中放入2根直徑為10 cm 的PVC 管作為蟹棲息處。

表1 混養(yǎng)實(shí)驗(yàn)組設(shè)置Tab.1 Setting of mixed breeding experimental group

第1 組投喂螺旋藻粉，投喂量為6 mg/個(gè)；第2、3、5、6 組投喂正大水產(chǎn)混合飼料，投喂量為40 mg/個(gè)；第4、7 組選用凍干紅蟲餌料，投喂量為150 mg/個(gè)?；祓B(yǎng)組中單環(huán)刺螠不單獨(dú)投喂。如果有個(gè)體死亡，及時(shí)取出，保持水質(zhì)良好。

1.3 數(shù)據(jù)采集與處理

本實(shí)驗(yàn)采用SPSS 25 分析軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析（One-Way ANOVA），LSD 多重比較和Duncan's 檢驗(yàn)，顯著水平設(shè)為P＜0.05。

成活率（%）=（實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)存活的幼螠數(shù)/實(shí)驗(yàn)初始幼螠數(shù)）×100%；

增重率（%）=（Wt-W0）/W0×100%。

注：Wt和W0分別為實(shí)驗(yàn)初始和結(jié)束時(shí)幼螠體質(zhì)量（g）。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對(duì)幼螠成活率和增重率的影響

單環(huán)刺螠的成活率隨溫度的升高呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)（圖1）。當(dāng)溫度為30℃時(shí)，幼螠的成活率降至31.11%，與其他溫度組差異顯著（P＜0.05）；當(dāng)溫度為15℃～25℃時(shí)，幼螠的成活率受溫度影響不大，基本上可達(dá)到95%，各溫度組無顯著性差異（P＞0.05）；當(dāng)溫度處于15℃～20℃時(shí)，幼螠成活率最高，可達(dá)97.78%。

圖1 不同溫度對(duì)幼螠成活率的影響Fig.1 Effect of different temperature on survival rate of echiuran worm Urechis unicinctus juveniles

單環(huán)刺螠的增重率隨溫度的升高呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，各溫度組之間存在顯著性差異（P＜0.05），低溫或高溫均會(huì)抑制幼螠的生長發(fā)育，且低溫對(duì)單環(huán)刺螠幼螠的增重率影響更大，當(dāng)水溫為10℃時(shí)，幼螠的增重率僅有（2.16±0.65）%，20℃時(shí)，幼螠的增重率最高，可達(dá)（98.89±1.95）%（表2）。從圖1 和表2 可得，15℃～20℃時(shí)，單環(huán)刺螠幼螠的成活率無顯著性差異，但20℃時(shí)幼螠的增重率最高，結(jié)合不同溫度實(shí)驗(yàn)組幼螠的增重率和成活率可得，單環(huán)刺螠幼螠的最適生長溫度為20℃。

表2 不同溫度對(duì)幼螠增重率的影響Tab.2 Effect of different temperature on weight gain rate of echiuran worm Urechis unicinctus juveniles

2.2 鹽度對(duì)幼螠成活率和增重率的影響

單環(huán)刺螠的成活率隨鹽度的升高呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)（圖2）。當(dāng)鹽度為15 和35 時(shí)，幼螠的成活率最低，為75.56%，與其他鹽度組差異顯著（P＜0.05）；當(dāng)鹽度為20～30 之間，各鹽度實(shí)驗(yàn)組幼螠的成活率無顯著性差異（P＞0.05）；當(dāng)鹽度處于25～30 時(shí)，幼螠成活率最高，可達(dá)100%。單環(huán)刺螠幼螠的增重率隨鹽度的升高呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，低鹽或高鹽幼螠的增重率均會(huì)降低，抑制幼螠的生長發(fā)育。25、30 鹽度組中幼螠的增重率無顯著性差異，但與其他鹽度組差異顯著（P＜0.05），其中鹽度為25 時(shí)幼螠的增重率最高，為（106.06±1.15）%。15、35 鹽度組中幼螠的增重率無顯著性差異，但與其他鹽度組差異顯著（P ＜0.05），其中鹽度為15 時(shí)幼螠的增重率最低，僅有（7.50±0.17）%（表3）。結(jié)合不同鹽度實(shí)驗(yàn)組幼螠的增重率和成活率可得，單環(huán)刺螠幼螠的最適生長鹽度為25～30。

表3 不同鹽度對(duì)幼螠增重率的影響Tab.3 Effect of different salinity on weight gain rate of echiuran worm Urechis unicinctus juveniles

圖2 不同鹽度對(duì)幼螠成活率的影響Fig.2 Effect of different salinities on the survival rate of echiuran worm Urechis unicinctus juveniles

2.3 底質(zhì)對(duì)幼螠成活率和增重率的影響

無底質(zhì)組單環(huán)刺螠幼螠的成活率為0%；在一個(gè)月內(nèi)各底質(zhì)組幼螠成活率均高于90%，其中以40目沙為底質(zhì)的實(shí)驗(yàn)組幼螠成活率最高，為97.78%，以泥為底質(zhì)的組幼螠的成活率最低，為91.11%，但各底質(zhì)組之間成活率差異不顯著（P＞0.05）（圖3）。以泥為底質(zhì)和以泥沙為底質(zhì)的實(shí)驗(yàn)組單環(huán)刺螠幼螠的增重率顯著低于以天然海沙、40 目沙和60 目沙為底質(zhì)的實(shí)驗(yàn)組（P＜0.05），且以泥為底質(zhì)的實(shí)驗(yàn)組幼螠的增重率最低，僅（19.76±2.30）%。以40 目沙、60 目沙和天然海沙為底質(zhì)的實(shí)驗(yàn)組幼螠的增重率無顯著性差異（P＞0.05）（表4）。結(jié)合不同底質(zhì)梯度實(shí)驗(yàn)組幼螠的增重率和成活率可得，40 目沙底組幼螠成活率和增重率均略高于60 目沙底組、天然海沙底質(zhì)組幼螠的成活率和增重率，但差異不顯著（P＞0.05），因此，底質(zhì)對(duì)單環(huán)刺螠幼螠的生長發(fā)育不可缺少，沙底比泥底或泥沙混合底質(zhì)更適宜，但沙子顆粒大小對(duì)其影響不大。

圖3 不同底質(zhì)對(duì)幼螠成活率的影響Fig.3 Effect of different substrate on the survival rate of echiuran worm Urechis unicinctus juveniles

2.4 餌料對(duì)幼螠成活率和增重率的影響

不同餌料組單環(huán)刺螠幼螠的成活率都較高，餌料無顯著影響（P＞0.05）；混合藻液、（混合藻液+螺旋藻粉）、（螺旋藻粉+開口料+鼠尾藻粉）實(shí)驗(yàn)組幼螠的成活率最高，為97.78%（圖4）。投喂螺旋藻粉組幼螠增重率最低，僅有（42.91±2.35）%；投喂（螺旋藻粉+開口料+鼠尾藻粉）組幼螠增重率也偏低，為（48.65±1.57）%；投喂（混合藻液+螺旋藻粉）和（混合藻液+開口料）的實(shí)驗(yàn)組幼螠增重率明顯高于其他實(shí)驗(yàn)組（P＜0.05），但兩組幼螠增重率無顯著差異（P＞0.05）（表5）。結(jié)合成活率和增重率可得，投喂（混合藻液+螺旋藻粉）或（混合藻液+刺參開口料）更適宜幼螠生長發(fā)育。

表5 不同餌料對(duì)幼螠增重率的影響Tab.5 Effect of different diets on weight gain rate of echiuran worm Urechis unicinctus juveniles

圖4 不同餌料對(duì)幼螠成活率的影響Fig.4 Effect of different diets on the survival rate of echiuran worm Urechis unicinctus juveniles

2.5 混養(yǎng)對(duì)幼螠成活率和增重率的影響

不同混養(yǎng)條件下單環(huán)刺螠幼螠的成活率不同，與脊尾白蝦混養(yǎng)組幼螠成活率與幼螠單獨(dú)養(yǎng)殖組（以下稱對(duì)照1 組）幼螠成活率無顯著差異（P＞0.05），但與日本蟳混養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)組和矛尾復(fù)蝦虎魚混養(yǎng)組幼螠的成活率相比明顯較高（P＜0.05），為93.33%（圖5）。

圖5 不同混養(yǎng)生物對(duì)幼螠成活率的影響Fig.5 Effect of different polyculture patterns on the survival rate of echiuran worm Urechis unicinctus juveniles

單養(yǎng)幼螠的增重率為（80.71±3.81）%，與脊尾白蝦混養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)組幼螠的增重率為（79.62±3.29）%，與對(duì)照1 組幼螠的增重率相比差異不顯著，與日本蟳混養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)組幼螠的增重率為（88.92±3.20）%，與對(duì)照1 組和蝦螠混養(yǎng)實(shí)驗(yàn)組中幼螠的增重率相比有明顯差異（P＜0.05），魚螠混養(yǎng)系統(tǒng)中幼螠的增重率為（92.71±4.64）%，明顯高于對(duì)照組1 組和蝦螠混養(yǎng)組（P＜0.05），與蟹螠混養(yǎng)組無顯著性差異（P＞0.05）（圖6）。

圖6 不同混養(yǎng)生物對(duì)幼螠增重率的影響Fig.6 Effect of different polyculture patterns on the weight gain rate of echiuran worm Urechis unicinctus juveniles

脊尾白蝦單養(yǎng)（以下稱對(duì)照2 組）時(shí)脊尾白蝦的成活率為（53.33±11.55）%，與單環(huán)刺螠幼螠混養(yǎng)時(shí)脊尾白蝦的成活率為（73.33±11.55）%，與對(duì)照2組差異明顯（P＜0.05）；對(duì)照2 組的脊尾白蝦增重率為（44.43±2.57）%，與單環(huán)刺螠幼螠混養(yǎng)時(shí)脊尾白蝦的增重率為（64.18±2.59）%，與對(duì)照2 組差異明顯（P＜0.05）。日本蟳單養(yǎng)（以下稱對(duì)照3 組）時(shí)日本蟳的成活率為100%，與單環(huán)刺螠幼螠混合養(yǎng)殖時(shí)日本蟳的成活率亦為100%，與對(duì)照3 組相比無顯著性差異；對(duì)照3 組的日本蟳增重率為（26.00±1.70）%，與單環(huán)刺螠幼螠混養(yǎng)時(shí)日本蟳的增重率為（45.82±2.76）%，與對(duì)照3 組相比差異較明顯（P＜0.05）。矛尾復(fù)蝦虎魚單養(yǎng)（以下稱對(duì)照4 組）時(shí)矛尾復(fù)蝦虎魚的成活率為（83.33±28.88）%，與單環(huán)刺螠幼螠混養(yǎng)時(shí)矛尾復(fù)蝦虎魚的成活率為（83.33±28.87）%，與對(duì)照4 組相比無顯著性差異；對(duì)照4 組的矛尾復(fù)蝦虎魚的增重率為（25.99±1.70）%，與單環(huán)刺螠幼螠混養(yǎng)時(shí)矛尾復(fù)蝦虎魚的增重率為（45.82±2.76）%，與對(duì)照4 組相比差異較明顯（P＜0.05）（表6）。

表6 不同混養(yǎng)生物成活率和增重率對(duì)比Tab.6 Comparison of survival rate and weight gain rate of culture animals in polyculture patterns

3 討論

3.1 溫度對(duì)幼螠成活和生長的影響

溫度是影響海洋生物生長發(fā)育最重要的主要環(huán)境因子之一。溫度突變會(huì)使擔(dān)輪幼蟲期的刺螠成活率急劇下降，在較高溫環(huán)境下突變范圍超過6℃，幼螠在短期內(nèi)全部死亡，而低溫環(huán)境下往往能存活一半；在一定溫度范圍內(nèi)（13～22℃），幼螠對(duì)溫度突變有一定的適應(yīng)能力[12]。李諾等[10]研究發(fā)現(xiàn)，單環(huán)刺螠的生活溫度范圍較廣，在-2～31℃均可生存，低溫或高溫對(duì)單環(huán)刺螠的生長速度和成活狀況都會(huì)產(chǎn)生不良影響，甚至死亡。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)與該研究數(shù)據(jù)相似。對(duì)多種海洋生物的研究發(fā)現(xiàn)，溫度還與體內(nèi)免疫酶活力有關(guān)，隨著水溫升高，生物體內(nèi)的酶活力增強(qiáng)，幼體對(duì)餌料消化以及體內(nèi)同化作用隨之增高，增重率也隨之增高，幼體生長速度加快；在低溫環(huán)境下，酶活力降低，甚至失去，攝取的食物不能完全消化，抑制了幼蟲的生長發(fā)育[13-15]。與單環(huán)刺螠相似的貝類，在適溫范圍內(nèi)，不同溫度對(duì)稚貝生長速率的影響差異顯著。本研究所得結(jié)果與之相近，在適宜的溫度下，單環(huán)刺螠的成活率和增重率隨溫度的升高均呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，溫度過低或過高均會(huì)降低幼螠的成活率，抑制幼螠的生長。

單環(huán)刺螠幼螠孵化的最適溫度為15～21℃[16]；幼螠生長的適宜水溫為15～20℃[17]。本實(shí)驗(yàn)得出幼螠生長的適宜水溫為15～25℃，與相關(guān)報(bào)道略有差異，分析原因?yàn)椋緦?shí)驗(yàn)所用幼螠較為成熟，而其他的研究多為單環(huán)刺螠擔(dān)輪幼蟲期，幼螠比孵化初期的擔(dān)輪幼蟲對(duì)溫度的耐受性顯著提高。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)溫度達(dá)30℃時(shí)，幼螠的成活率明顯降低，表明幼螠與冷水性生物的適宜溫度相似。

3.2 鹽度對(duì)幼螠成活和生長的影響

鹽度與水生生物體內(nèi)滲透壓密切相關(guān)，低鹽環(huán)境使貝類閉殼，減少體內(nèi)外水流交換以平衡滲透壓，從而使其攝食功能下降，影響清濾率、濾食率；高鹽使貝類內(nèi)環(huán)境紊亂，不足以平衡滲透壓，影響攝食功能[18]。單環(huán)刺螠與某些貝類同為海洋濾食動(dòng)物，不適宜的鹽度對(duì)單環(huán)刺螠的影響規(guī)律與貝類相似。鹽度變化嚴(yán)重影響機(jī)體的免疫功能，在高鹽或低鹽環(huán)境下，生物體為了調(diào)節(jié)體內(nèi)外滲透壓，會(huì)適當(dāng)?shù)馗淖冄?xì)胞的密度，超過臨界值免疫功能下降[19]。鹽度突變能刺激機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，增加活性氧含量，提高超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）活性，消除高鹽或低鹽引起的過量自由基，減少氧化損傷，降低丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量，降低脂質(zhì)過氧化程度，提高免疫力，提高耐受性[20]。朱曉瑩等[21]研究發(fā)現(xiàn)，隨鹽度升高，單環(huán)刺螠血細(xì)胞密度也升高；低鹽或高鹽都會(huì)使SOD活性下降、MDA 含量升高；酸性磷酸酶（Acid Phosphatase，ACP）活性在低鹽度時(shí)先下降、后上升、最后下降，在高鹽度時(shí)先上升后下降，單環(huán)刺螠在20～30 鹽度下免疫力較強(qiáng)，低鹽比高鹽對(duì)免疫能力的影響更為顯著。

高鹽會(huì)使幼螠吐臟，因吸水能力降低而脫水；而低鹽會(huì)使單環(huán)刺螠的體壁變色，收縮能力下降等，影響其生理生長狀態(tài)。世界各大洋表層海水受人為因素、地理位置及季節(jié)變化的影響，鹽度分布不均，平均鹽度為35。研究高鹽度下幼螠生長的變化規(guī)律可補(bǔ)充基礎(chǔ)研究資料。李海涵等[8]分析了不同鹽度（15、20、25、30）對(duì)幼螠增重率和成活率的影響，發(fā)現(xiàn)幼螠的最適生長鹽度為25～30，但沒有涉及高鹽度對(duì)幼螠生長的影響。本實(shí)驗(yàn)提高鹽度梯度上限，發(fā)現(xiàn)鹽度為35 時(shí)幼螠增重率和成活率顯著較低。本研究表明：單環(huán)刺螠的成活率和增重率隨鹽度的升高均呈現(xiàn)先增高后降低的趨勢(shì)，鹽度過低或過高均降低幼螠的成活率、抑制幼螠的生長。單環(huán)刺螠幼螠的最適生長鹽度為25～30。劉峰等[22]報(bào)道，幼螠在鹽度20.8～35.2 時(shí)生長較快。鄭巖等[11]提出單環(huán)刺螠幼螠最適鹽度范圍為20.8～35，鹽度最高值均高于本實(shí)驗(yàn)結(jié)果。推測可能由于本實(shí)驗(yàn)中不同鹽度梯度的海水是提前配制好，幼螠投放水體中無過渡階段所致，如果將水體鹽度逐漸增加，可能會(huì)使幼螠對(duì)鹽度的耐受力有所提高。

3.3 底質(zhì)對(duì)幼螠成活和生長的影響

海洋中營底棲生活的生物對(duì)底質(zhì)有較強(qiáng)的依賴性。主要環(huán)境因子對(duì)單環(huán)刺螠生長發(fā)育的影響研究較多，但底質(zhì)對(duì)單環(huán)刺螠成活率和增重率的影響研究較少。單環(huán)刺螠營底棲生活，底質(zhì)的種類及顆粒大小對(duì)其生長、生活生理狀態(tài)有著至關(guān)重要的影響。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，單環(huán)刺螠幼螠的生存離不開底質(zhì)，不同底質(zhì)對(duì)幼螠的生長影響不同，但沙粒徑大小對(duì)幼螠的成活和生長沒有顯著性影響。Allan等[23]實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，有無底質(zhì)對(duì)結(jié)群新對(duì)蝦（Metapenaeus macleayi）的成活率無顯著影響，但有底質(zhì)組對(duì)蝦的生長率顯著高于無底質(zhì)組；蔡英亞等[24]報(bào)道，青蛤（Cyclina sinensis）在含沙的底質(zhì)中生長率較其他底質(zhì)組顯著增加；牛從從[25]發(fā)現(xiàn)泥質(zhì)底或泥沙質(zhì)底更加有利于單環(huán)刺螠幼蟲的附著變態(tài)，純沙或未過濾沙環(huán)境下，幼蟲停止變態(tài)甚至全部死亡。本研究結(jié)果顯示完成變態(tài)和附著階段的幼螠更適合于沙底質(zhì)中生存，表明其在不同的生長階段有著不同的環(huán)境需求。李海涵等[8]的研究也表明：單環(huán)刺螠幼螠在不同底質(zhì)環(huán)境下的成活率和增重率不同，其對(duì)底質(zhì)有明顯的選擇性，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。

孫陽等[26]研究發(fā)現(xiàn)，底質(zhì)中沙的含量對(duì)單環(huán)刺螠的生存起著決定性的作用，在純沙條件下單環(huán)刺螠增重率最大、變色率最高，在含70%沙的條件下成活率最高，隨沙含量的增加單環(huán)刺螠增重率升高、變色率升高，純沙最適合刺螠生長，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果相似。目前雖已有關(guān)于過濾的40 目或60 目海沙底質(zhì)對(duì)幼螠生長的影響報(bào)道[8]，但缺乏未過濾天然海沙對(duì)幼螠培育的影響資料，且生產(chǎn)中海沙過篩耗費(fèi)大量人力、增加成本。本研究結(jié)果表明，以天然海沙為底質(zhì)，幼螠的增重率與成活率均較高，與過篩細(xì)沙中培育的幼螠無顯著差異，因此只要找到合適底質(zhì)的海區(qū)進(jìn)行人工養(yǎng)殖或放流，幼螠可以存活、生長，這為單環(huán)刺螠資源保護(hù)提供了依據(jù)。

3.4 餌料對(duì)幼螠成活和生長的影響

餌料的種類與質(zhì)量直接影響濾食性生物的存活與生長。投喂等鞭金藻（Isochrysis galbana）的硬殼蛤（Mercenaria mercenaria）稚貝成活率最高，投喂混合藻稚貝的日生長率最高[27]。不同餌料組厚殼貽貝（Mytilus coruscus）稚貝的殼長和殼高存在顯著差異[28]；混合餌料組稚貝的殼長和殼高明顯高于單一餌料組。在毛蚶（Scapharca subcrenata）生長過程中，多種藻類混合投喂時(shí)幼體的生長最快，與單一藻類投喂相比具有明顯優(yōu)勢(shì)[29]。常林瑞等[7]發(fā)現(xiàn)投喂單一微綠擬球藻時(shí)，幼螠的增重率明顯低于投喂混合餌料組（微綠擬球藻和三角褐指藻）。在本實(shí)驗(yàn)中，混合藻液組的幼螠增重率雖然比（混合藻液+螺旋藻粉）和（混合藻液+開口料）組的增重率低，但比投喂單一螺旋藻粉組的增重率顯著增加，且投喂單一螺旋藻粉組的幼螠成活率較低，表明混合餌料的營養(yǎng)成分更為全面，更適合幼螠的生長發(fā)育。野生的單環(huán)刺螠幼螠可以攝取沉積物表層的有機(jī)物來滿足自身的生長需求，但在人工培養(yǎng)過程中，底質(zhì)中有機(jī)質(zhì)含量降低，單一餌料易造成幼螠營養(yǎng)不足，導(dǎo)致幼螠生長發(fā)育緩慢、成活率下降，因此，在人工養(yǎng)殖過程中要注意餌料營養(yǎng)的均衡，以促進(jìn)幼螠快速生長。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，混合餌料的組成對(duì)幼螠的生長影響亦有影響，（螺旋藻粉+開口料+鼠尾藻粉）實(shí)驗(yàn)組幼螠的增重率明顯低于其他混合餌料組。喬洪金等[30]發(fā)現(xiàn)隨著飼料中鼠尾藻粉添加量的增加，大菱鲆幼魚的增重率、攝食率等均呈逐漸降低的趨勢(shì)。Yildirim 等[31]報(bào)道在海洋生物餌料中添加鼠尾藻粉會(huì)造成飼料風(fēng)味改變，因降低了攝食率而增重率下降。Pernado 等[32]研究表明，尼羅羅非魚（Oreochromis niloticus）對(duì)于鼠尾藻（Sargassum muticum）的消化利用率明顯低于其他藻類。因此在幼螠的餌料中添加鼠尾藻粉的比例不宜過高，既適于幼螠生長且成本低廉的餌料成分配比有待于進(jìn)一步研究。

3.5 混養(yǎng)對(duì)幼螠成活和生長的影響

單一養(yǎng)殖模式成本高、效益低，符合生態(tài)學(xué)的混養(yǎng)模式更加有利于養(yǎng)殖產(chǎn)量的提高[33]。本研究發(fā)現(xiàn)，蝦螠混養(yǎng)系統(tǒng)中幼螠的成活率與對(duì)照組相似，但混養(yǎng)組脊尾白蝦的成活率與增重率均比對(duì)照組高，其原因可能是由于幼螠充分?jǐn)z食了多余的餌料及蝦排泄物，減少了有機(jī)物造成的水質(zhì)惡化，使水體中的營養(yǎng)物質(zhì)和能量能夠得到良性循環(huán)，促進(jìn)了脊尾白蝦的成活與生長。青蛤、江蘺（Gracilaria）混養(yǎng)水體中總氮、總磷的濃度總體低于飼養(yǎng)單一生物，極大提高了混養(yǎng)組N、P 的利用率，蝦類、濾食性生物和大型藻類在增加經(jīng)濟(jì)收益的同時(shí)可以顯著降低養(yǎng)殖水體的污染[34]。單環(huán)刺螠屬于濾食性生物，與蝦及大型藻類混養(yǎng)，在減污的同時(shí)不影響經(jīng)濟(jì)收益，使養(yǎng)殖生物的生存空間得以充分利用，可促進(jìn)海洋漁業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，蟹螠混養(yǎng)組中幼螠存活率雖然低于單養(yǎng)幼螠組和蝦螠混養(yǎng)組，但仍高于70%，且蟹螠混養(yǎng)組中幼螠的增重率明顯高于兩組，表明單環(huán)刺螠和日本蟳混養(yǎng)具有一定的可行性。在混養(yǎng)時(shí)，先投放單環(huán)刺螠幼螠，待幼螠全部鉆沙后再放入日本蟳，同時(shí)在養(yǎng)殖池內(nèi)放入PVC 管作為日本蟳的棲息地，可減少其對(duì)幼螠的捕食。據(jù)周演根等[35]報(bào)道，蝦蟹混養(yǎng)系統(tǒng)中，蟹類在捕食大型餌料過程中可產(chǎn)生殘?jiān)?，而蝦類可充分利用所產(chǎn)生的餌料殘?jiān)?，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)推測，此優(yōu)勢(shì)同樣出現(xiàn)在蟹螠混養(yǎng)系統(tǒng)中，幼螠攝食餌料殘?jiān)?，既促進(jìn)了物質(zhì)循環(huán)，又凈化了水質(zhì)，但幼螠和蟹苗投放順序有要求，所以在生產(chǎn)實(shí)踐中實(shí)施上有一定難度。

矛尾復(fù)蝦虎魚是連云港海域特有的肉質(zhì)鮮美的魚類。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：單環(huán)刺螠幼螠不宜與矛尾復(fù)蝦虎魚混養(yǎng)，魚螠混養(yǎng)組幼螠的成活率極低，其原因?yàn)槊矎?fù)蝦虎魚盛產(chǎn)在灘涂上，在泥灘上作穴，棲息地與單環(huán)刺螠相近，兩者混養(yǎng)會(huì)捕食幼螠。裴宇[36]將凡納濱對(duì)蝦（Litopenaeus vannamei）與金錢魚（Scatophagus argus）混養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)混養(yǎng)可以改善水環(huán)境、增加能量轉(zhuǎn)化率、平衡浮游生物量，提高經(jīng)濟(jì)收益。但海水魚類一般為肉食性或雜食性，魚螠混養(yǎng)模式不適合用于生產(chǎn)實(shí)踐。

3.6 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，幼螠的養(yǎng)殖溫度為15～25℃（最適20℃），鹽度為20～30（最適25～30），底質(zhì)為沙，適合投喂（混合藻液+螺旋藻粉）或（混合藻液+海參開口料）。為改善養(yǎng)殖環(huán)境，提高養(yǎng)殖產(chǎn)量，建議將單環(huán)刺螠與蝦混養(yǎng)，建立符合生態(tài)學(xué)的新型養(yǎng)殖模式。