2021 年青海省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果分析

孫生禎，趙全邦，游瀟倩，闞 威，馬艷萍，張茂華，張曉英，曾戰(zhàn)壕

（青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，青海 西寧 810000）

獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室作為動(dòng)物疫病防控體系中的重要組成部分，對(duì)動(dòng)物疫病的檢測(cè)診斷具有重要的支撐作用[1]。實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證是為確保實(shí)驗(yàn)室維持較高的檢測(cè)水平而對(duì)其能力進(jìn)行考核、監(jiān)督和確認(rèn)的一種活動(dòng)[2]。在獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證中，實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)作為當(dāng)前常用的驗(yàn)證方法和體現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室綜合能力的重要技術(shù)手段 , 直觀地反映了獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量管理和生物安全水平。定期開(kāi)展獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)，評(píng)估各級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力，對(duì)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)、運(yùn)行及管理可起到促進(jìn)和警示作用[3-5]。

組織全省動(dòng)物疫病預(yù)防控制系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室參加檢測(cè)能力比對(duì)，是農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳獸醫(yī)局多年堅(jiān)持的一項(xiàng)常規(guī)工作。2021 年9 月，青海省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心按照中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心關(guān)于印發(fā)《2021 年省級(jí)獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)實(shí)施方案》的通知（農(nóng)牧便函【2021】76 號(hào)）要求，制定下發(fā)了《2021 年青海省州縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作實(shí)施方案的通知》（青疫控【2021】44 號(hào)）[6-7]，組織全省47 個(gè)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展了檢測(cè)能力比對(duì)工作，要求在規(guī)定時(shí)間內(nèi)報(bào)送檢測(cè)結(jié)果。比對(duì)試驗(yàn)結(jié)果總體上客觀反映了青海省省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)能力和技術(shù)水平。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 比對(duì)范圍 全省8 個(gè)市（州）、39 個(gè)縣（市）動(dòng)物疫控中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室全部參加了能力比對(duì)工作。

1.1.2 比對(duì)項(xiàng)目 根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部畜牧獸醫(yī)局關(guān)于開(kāi)展2021 年獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作通知的相關(guān)要求，本中心制定了2021 年青海省州縣級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作實(shí)施方案，本次比對(duì)市（州）級(jí)實(shí)驗(yàn)室共設(shè)置了3 個(gè)比對(duì)項(xiàng)目，分別為非洲豬瘟病毒核酸檢測(cè)、高致病性禽流感H5/H7 亞型鑒別診斷和口蹄疫病毒O型抗體檢測(cè)，其中非洲豬瘟病毒核酸檢測(cè)和高致病性禽流感H5/H7 亞型鑒別診斷這兩項(xiàng)實(shí)驗(yàn)各市（州）級(jí)根據(jù)當(dāng)?shù)匾卟”O(jiān)測(cè)實(shí)際情況任選一項(xiàng)。縣（市、區(qū)）級(jí)實(shí)驗(yàn)室共設(shè)置了4 個(gè)比對(duì)項(xiàng)目，分別為口蹄疫病毒O 型抗體檢測(cè)、布魯氏菌抗體檢測(cè)、細(xì)菌染色鏡檢和非洲豬瘟病毒核酸檢測(cè)。

1.1.3 比對(duì)樣品 非洲豬瘟配套盲樣血清樣品由青島立見(jiàn)生物有限公司制備與標(biāo)定，高致病性禽流感配套盲樣血清樣品由哈爾濱國(guó)生生物科技股份有限公司制備與標(biāo)定 , 口蹄疫配套盲樣血清樣品由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所制備與標(biāo)定，布魯菌配套盲樣血清樣品和細(xì)菌染色鏡檢所用樣品由本中心制備，所有盲樣經(jīng)省中心驗(yàn)證后，由省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)完成樣品的分裝和編號(hào)，并將樣品在統(tǒng)一時(shí)間發(fā)放給參與比對(duì)的各個(gè)實(shí)驗(yàn)室，每個(gè)試驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)置盲樣5 份。

1.2 方法

1.2.1 比對(duì)方法 5 個(gè)檢測(cè)能力比對(duì)項(xiàng)目所均采用相應(yīng)的國(guó)家現(xiàn)行標(biāo) 準(zhǔn)、農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公布或推薦的檢測(cè)方法進(jìn)行比對(duì)，具體見(jiàn)表1。

表1 比對(duì)試驗(yàn)的方法和參考標(biāo)準(zhǔn)

1.2.2 結(jié)果評(píng)判標(biāo)準(zhǔn) 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)詳見(jiàn)表2。

表2 檢測(cè)項(xiàng)目結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

2 結(jié)果與分析

2.1 總體結(jié)果

全省8 個(gè)市（州）、39 個(gè)縣（市）動(dòng)物疫控中心獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室全部參加了能力比對(duì)，共檢測(cè)盲樣700 份，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確559 份，總準(zhǔn)確率為79.86 %（559/700），其中準(zhǔn)確率為100 % 的實(shí)驗(yàn)室有12 個(gè)，占參與比對(duì)實(shí)驗(yàn)室總數(shù)的25.53 %（12/47），詳見(jiàn)表3。

表3 2021 年青海省獸醫(yī)系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)室能力比對(duì)結(jié)果

2.2 非洲豬瘟病毒核酸檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果

共檢測(cè)盲樣70 份，結(jié)果準(zhǔn)確69 份，準(zhǔn)確率為98.57 %。14 個(gè)參與比對(duì)的實(shí)驗(yàn)室中5 份盲樣檢測(cè)結(jié)果均準(zhǔn)確的有13 個(gè)，占參與比對(duì)實(shí)驗(yàn)室總數(shù)的92.86 %。

2.3 高致病性禽流感H5 亞型和H7 亞型鑒別診斷能力比對(duì)結(jié)果

8 個(gè)市（州）級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室只有黃南州選擇了該比對(duì)項(xiàng)目，共檢測(cè)盲樣5 份，結(jié)果準(zhǔn)確2份，準(zhǔn)確率為40 %。

2.4 口蹄疫病毒O 型抗體檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果

共檢測(cè)盲樣235 份，結(jié)果準(zhǔn)確208 份，準(zhǔn)確率為88.51 %。47 個(gè)參與比對(duì)的實(shí)驗(yàn)室中5 份盲樣檢測(cè)結(jié)果均準(zhǔn)確的有32 個(gè)，占參與比對(duì)實(shí)驗(yàn)室總數(shù)的68.09 %。

2.5 布魯氏菌抗體檢測(cè)能力比對(duì)結(jié)果

共檢測(cè)盲樣195 份，結(jié)果準(zhǔn)確127 份，準(zhǔn)確率65.13 %。39 個(gè)參與比對(duì)的實(shí)驗(yàn)室中5 份盲樣檢測(cè)結(jié)果均準(zhǔn)確的有15 個(gè)，占參與比對(duì)實(shí)驗(yàn)室總數(shù)的38.46 %。

2.6 細(xì)菌染色鏡檢能力比對(duì)結(jié)果

共檢測(cè)盲樣195 份，結(jié)果準(zhǔn)確153 份，準(zhǔn)確率78.46 %。39 個(gè)參與比對(duì)的實(shí)驗(yàn)室中5 份盲樣檢測(cè)結(jié)果均準(zhǔn)確的有21 個(gè)，占參與比對(duì)實(shí)驗(yàn)室總數(shù)的53.85 %。

3 討論

3.1 比對(duì)項(xiàng)目設(shè)置緊貼本省實(shí)際

在比對(duì)項(xiàng)目設(shè)置上充分考慮重大動(dòng)物疫病、人獸共患病與地方性流行疫病相結(jié)合；兼顧不同檢測(cè)方法的原則，既設(shè)置了口蹄疫病毒抗體檢測(cè)、布魯氏菌抗體檢測(cè)等傳統(tǒng)檢測(cè)項(xiàng)目，又按照當(dāng)前疫情防控形勢(shì)設(shè)置了非洲豬瘟病毒核酸檢測(cè)和高致病性禽流感H5、H7 亞型鑒別診斷，同時(shí)根據(jù)各州級(jí)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有硬件設(shè)施情況，相同項(xiàng)目具體檢測(cè)方法也有所區(qū)別，對(duì)縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室設(shè)置了細(xì)菌染色鏡檢項(xiàng)目，以加強(qiáng)對(duì)基礎(chǔ)檢測(cè)方法的應(yīng)用和能力提升。

3.2 市（州）級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)準(zhǔn)確率較高

比對(duì)結(jié)果顯示，8 個(gè)市（州）級(jí)實(shí)驗(yàn)室總的檢測(cè)準(zhǔn)確率達(dá)到了62.5 %，除3 個(gè)實(shí)驗(yàn)室個(gè)別項(xiàng)目有偏差外，其余5 個(gè)實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確率均達(dá)到100 %，表明本省市（州）級(jí)實(shí)驗(yàn)室綜合檢測(cè)能力得到了持續(xù)提升。

3.3 縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室比對(duì)結(jié)果偏差較大

比對(duì)結(jié)果顯示，縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確率較低，39個(gè)實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)確率達(dá)到100 % 的只有7 個(gè)，尤其需要肉眼主觀判定的項(xiàng)目出現(xiàn)偏差較多，布魯氏菌病試管凝集實(shí)驗(yàn)和細(xì)菌染色鏡檢項(xiàng)目準(zhǔn)確率僅為65.13 % 和78.46 %，表明本省縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力還普遍不高，這可能與人員技術(shù)水平提升慢、實(shí)際操作培訓(xùn)工作滯后、部分實(shí)驗(yàn)室硬件條件較差以及機(jī)構(gòu)改革所致的實(shí)驗(yàn)室專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員變動(dòng)和崗位不足等因素有關(guān)。

3.4 重視程度和參與比對(duì)的積極性待進(jìn)一步提高

個(gè)別實(shí)驗(yàn)室未按通知要求按時(shí)領(lǐng)取檢測(cè)盲樣，雖然按時(shí)上報(bào)了比對(duì)結(jié)果，但個(gè)別實(shí)驗(yàn)室在上報(bào)結(jié)果和檢測(cè)報(bào)告時(shí)出現(xiàn)馬虎和不規(guī)范現(xiàn)象，建議加強(qiáng)各級(jí)獸醫(yī)主管部門(mén)和動(dòng)物疫控機(jī)構(gòu)對(duì)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)工作的重視程度。

3.5 試劑的不統(tǒng)一對(duì)檢測(cè)能力比對(duì)有一定的影響

2022 年開(kāi)始，能力比對(duì)的試劑由各參加比對(duì)的獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室自行準(zhǔn)備，各地采購(gòu)的試劑生產(chǎn)廠家不一、判定方法、靈敏度、符合率都有一定的區(qū)別，對(duì)樣品檢測(cè)后結(jié)果的判定帶來(lái)一定的困難。

3.6 下一步工作建議

各地要結(jié)合近幾年來(lái)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)能力比對(duì)情況，認(rèn)真總結(jié)此次比對(duì)工作，深入分析，查找問(wèn)題和不足，研究制定改進(jìn)措施，狠抓落實(shí)，并建立健全實(shí)驗(yàn)室體系文件，規(guī)范實(shí)驗(yàn)室流程，進(jìn)一步提升實(shí)驗(yàn)室管理和運(yùn)行水平。同時(shí)采取多種方式，注重實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理、生物安全管理、常見(jiàn)檢測(cè)技術(shù)和檢測(cè)結(jié)果分析等方面的培訓(xùn)工作，保證人員技術(shù)和能力。各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)高度重視實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員崗位設(shè)置工作，充實(shí)檢測(cè)隊(duì)伍，同時(shí)還要確保實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)人員的相對(duì)固定，確保實(shí)驗(yàn)室工作的正常開(kāi)展。

實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備陳舊老化，超期服役、靈敏性較差等現(xiàn)象在各級(jí)獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室，尤其是縣級(jí)實(shí)驗(yàn)室普遍存在，這也直接影響檢測(cè)的結(jié)果，只有把實(shí)驗(yàn)室環(huán)境和硬件條件提升到能滿(mǎn)足各項(xiàng)試驗(yàn)條件的前提下，才能得出準(zhǔn)確科學(xué)的檢測(cè)結(jié)果。加強(qiáng)經(jīng)費(fèi)投入。從近幾年考核、調(diào)研情況來(lái)看，各市（州）、縣（市）普遍缺少實(shí)驗(yàn)室正常運(yùn)轉(zhuǎn)經(jīng)費(fèi)，實(shí)驗(yàn)室水電暖、耗材、試劑購(gòu)置、儀器設(shè)備更新、實(shí)驗(yàn)室廢棄物無(wú)害化處理及人員培訓(xùn)等運(yùn)轉(zhuǎn)經(jīng)費(fèi)都從省級(jí)轉(zhuǎn)移支付的動(dòng)物防疫經(jīng)費(fèi)中列支，加之近年來(lái)轉(zhuǎn)移支付持續(xù)減少，各地獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室經(jīng)費(fèi)缺乏，各地應(yīng)加強(qiáng)向政府機(jī)構(gòu)、主管部門(mén)工作匯報(bào)、交流溝通，努力使實(shí)驗(yàn)室正常運(yùn)轉(zhuǎn)經(jīng)費(fèi)從地方財(cái)政預(yù)算內(nèi)得到列支，并長(zhǎng)期堅(jiān)持，使之成為實(shí)驗(yàn)室正常運(yùn)轉(zhuǎn)的有效保證。