羊魏氏梭菌病研究進(jìn)展

蔣昀軒，李 寧，魏 凱

（山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 泰安 271018）

魏氏梭菌（Clostridium welchii），又稱(chēng)產(chǎn)氣莢膜梭菌（Clostridium perfringens），是一種革蘭陽(yáng)性厭氧桿菌。有研究表明它在大量生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程中產(chǎn)生的多種酶以及各類(lèi)毒素是導(dǎo)致宿主發(fā)病的主要原因[1-2]。根據(jù)這幾種毒素和酶產(chǎn)生情況的不同，又將魏氏梭菌分為 A、B、C、D 和E5種菌型，其中A、E 型魏氏梭菌主要感染禽類(lèi)，造成宿主腸道出血，導(dǎo)致組織感染從而導(dǎo)致壞疽等疾病的產(chǎn)生[3]，B、C、D 型魏氏梭菌感染羊后會(huì)引發(fā)羔羊痢疾、羊猝狙以及羊腸毒血癥，也是目前可以從羊體內(nèi)分離出的菌型。

1 羊魏氏梭菌的生物學(xué)特性

魏氏梭菌形似粗桿，兩端為鈍圓型。菌體形態(tài)會(huì)隨著生長(zhǎng)時(shí)期不同也會(huì)產(chǎn)生不一樣的變化，在細(xì)菌生長(zhǎng)早期主要是球形，由于培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成分的不斷耗盡，在生長(zhǎng)末期，經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)絲狀、蝌蚪狀和顆粒狀。魏氏梭菌具有莢膜、芽孢等特殊結(jié)構(gòu)，沒(méi)有鞭毛，不具備自主運(yùn)動(dòng)的能力。它通過(guò)產(chǎn)生大量的芽孢，使其能夠在土壤及污水等營(yíng)養(yǎng)匱乏的極端條件下生長(zhǎng)繁殖[4]。

1.1 致病性及毒性

魏氏梭菌在健康動(dòng)物腸道中也有發(fā)現(xiàn)，如果宿主因各種原因引起機(jī)體免疫力下降它便會(huì)大量增殖，從而導(dǎo)致人和動(dòng)物的腸道菌群失調(diào)，同時(shí)還會(huì)產(chǎn)生大量毒素，嚴(yán)重破壞腸道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致宿主的一系列疾病[5]。它還可以在宿主體內(nèi)增殖過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生大量的外毒素，通過(guò)其產(chǎn)生的毒素和酶降解宿主體內(nèi)的組織，來(lái)獲得其缺少的20種必需氨基酸，維持它的生長(zhǎng)繁殖[6]。魏氏梭菌的大量增殖還會(huì)造成機(jī)體新陳代謝紊亂，組織學(xué)損傷，還會(huì)通過(guò)改變細(xì)胞膜的通透性，導(dǎo)致細(xì)胞膠體滲透壓的動(dòng)態(tài)平衡遭到破壞，抑制細(xì)胞的新陳代謝，直至細(xì)胞死亡。

1.2 基因型及遺傳特性

魏氏梭菌基因組大小范圍在3.0~4.1MB 左右，基因組中GC 含量較低，在27 % 左右，已經(jīng)檢測(cè)出有大小在2 500~3 600 bp 的基因片段存在于各個(gè)菌型的基因組中[7]。魏氏梭菌與其他條件致病菌相同，主要通過(guò) VirR/VirS 雙組分調(diào)控系統(tǒng)來(lái)調(diào)控基因的表達(dá)。VirS 作為一種十分重要的傳感器，對(duì)生存環(huán)境中的組胺酸激酶信號(hào)十分敏感，可以迅速做出應(yīng)答，進(jìn)而不斷磷酸化VirR，磷酸化的VirR 可調(diào)控靶基因的轉(zhuǎn)錄，從而使基因得到表達(dá)[8]。魏氏梭菌基因組中只發(fā)現(xiàn)了少數(shù)的毒力基因，已知魏氏梭菌菌株攜帶質(zhì)粒，該質(zhì)粒通常編碼毒素基因和一些抗性基因[9]。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)存在于質(zhì)粒上與疾病相關(guān)的毒素基因有CPE, ε 毒素, ι 毒素等。通過(guò)分析質(zhì)粒編碼的毒力基因可以補(bǔ)充并完善魏氏梭菌基因組圖譜，并發(fā)現(xiàn)新的潛在的毒素或毒力基因[10]

2 羊魏氏梭菌病的臨床癥狀以及危害

B、C、D 型魏氏梭菌作為羊產(chǎn)業(yè)中重要的病原菌，可以引起羔羊痢疾、羊猝狙和羊腸毒血癥?；疾⊙蛲ǔＭ蝗坏沟?，并出現(xiàn)全身肌肉震顫，痙攣，頭頸不斷抽搐，流涎磨牙，眼球無(wú)規(guī)則轉(zhuǎn)動(dòng)，四肢無(wú)意識(shí)劃動(dòng)等癥狀。病情較緩的病羊，會(huì)表現(xiàn)出精神沉郁，食欲減退，有的還伴有一定的神經(jīng)癥狀[11]。這幾種疾病發(fā)病急，呈地方流行性，沒(méi)有明顯的征兆，通常會(huì)因?yàn)榫戎尾患皶r(shí)而造成動(dòng)物的大量死亡，并且由于抗生素的不合理使用，出現(xiàn)了許多強(qiáng)耐藥性菌株，給羊產(chǎn)業(yè)造巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

3 羊魏氏梭菌與其他病原菌的混合感染情況

有研究發(fā)現(xiàn)羊魏氏梭菌病會(huì)與其他病原菌會(huì)發(fā)生混合感染，如支原體病、鏈球菌以及寄生蟲(chóng)病等。在我國(guó)羊魏氏梭菌與支原體病的混合感染較為普遍，主要會(huì)引起羊發(fā)生傳染性胸膜肺炎，患病羊表現(xiàn)為體溫升高、流涎、呼吸困難等，剖檢后發(fā)現(xiàn)肺部出現(xiàn)明顯的病理變化、包心包肝等。該疫病具有發(fā)病快、傳播范圍廣、病情反復(fù)等特點(diǎn)，是養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)主要疫病之一，針對(duì)這種情況，還沒(méi)有有效的治療措施。

4 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)與診斷

對(duì)于在生產(chǎn)實(shí)踐中的養(yǎng)殖戶可以通過(guò)一些典型的臨床癥狀和病理變化來(lái)初步鑒別疾病的發(fā)生。但是，實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)手段仍然是最科學(xué)，最有效的方法。目前來(lái)說(shuō)應(yīng)用于魏氏梭菌病的檢測(cè)技術(shù)主要有革蘭染色法、蛋白質(zhì)電泳實(shí)驗(yàn)、生化實(shí)驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)、中和試驗(yàn)、間接血凝抑制試驗(yàn)等方法[12]。目前在我國(guó)羊魏氏梭菌疾病的檢測(cè)主要還是依賴(lài)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)手段，但是實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)周期長(zhǎng)，容易錯(cuò)過(guò)最佳的救治時(shí)間，造成大額經(jīng)濟(jì)損失，對(duì)于一線的生產(chǎn)人員來(lái)說(shuō)，目前市場(chǎng)上尚無(wú)一種良好的產(chǎn)品用于檢測(cè)，所以急需一種檢測(cè)時(shí)間短、特異性好、靈敏度高的檢測(cè)方法。傳統(tǒng)的膠體金免疫層析技術(shù)以及新型的 CRISPR（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）檢測(cè)技術(shù)都有望成為針對(duì)魏氏梭菌病的快檢方法。

5 羊魏氏梭菌的預(yù)防和治療措施

羊魏氏梭菌病是一種重要的人畜共患病，會(huì)導(dǎo)致人和多種動(dòng)物患病，在我國(guó)被列為二類(lèi)動(dòng)物疫病。目前主要采取“預(yù)防為主，治療為輔”的策略。

5.1 加強(qiáng)免疫預(yù)防管理，規(guī)范免疫預(yù)防程序

定期給羊群接種含魏氏梭菌保護(hù)性抗原的“三聯(lián)四防”疫苗，可以有效提高羊群的抵抗力，應(yīng)結(jié)合羊群以及實(shí)地環(huán)境情況，在專(zhuān)業(yè)人員的指導(dǎo)下，制定切實(shí)有效的免疫程序，并且要注意對(duì)妊娠母羊接種時(shí)，在產(chǎn)仔前應(yīng)進(jìn)行一次補(bǔ)強(qiáng)免疫，提高新生羊羔的免疫力。

5.2 嚴(yán)格消毒，減少污染

要嚴(yán)格制定多級(jí)日常消毒制度，殺滅菌體以及其產(chǎn)生的芽孢，并且在生產(chǎn)實(shí)踐中感染動(dòng)物糞便以及排泄物必須進(jìn)行無(wú)害化處理，防止糞便中攜帶的細(xì)菌污染飼料與水源，造成二次感染。

5.3 科學(xué)的飼養(yǎng)管理

注意飼料的安全問(wèn)題，在整個(gè)養(yǎng)殖過(guò)程中，應(yīng)根據(jù)不同的生長(zhǎng)階段飼喂品質(zhì)優(yōu)良的全價(jià)配合飼料，不能給動(dòng)物食用變質(zhì)發(fā)霉的飼料，同時(shí)還應(yīng)配合一些干青草，增加腸胃蠕動(dòng)能力，便于消化。

5.4 治療措施

魏氏梭菌病主要依靠抗生素治療，常見(jiàn)的是土霉素片和維生素B 混合使用，連續(xù)使用3 d，可以基本控制羊群的病情。除土霉素外，還可使用氟苯尼考粉和胃蛋白酶加水灌服。后續(xù)應(yīng)進(jìn)行“三聯(lián)四防”疫苗的免疫。從目前看來(lái)，免疫過(guò)程良好的羊，基本都不會(huì)發(fā)病[13]。除此之外，中草藥對(duì)魏氏梭菌病也有一定的療效，如可選取白術(shù)、黨參、黃柏、郁金、白頭翁、茯苓等，將其研磨后晾干制成粉狀，過(guò)60 目篩，根據(jù)實(shí)際情況在飼料按照一定的比例中添加飼喂，可有效緩解病情的發(fā)展，起到一定的治療作用，并且使用中藥應(yīng)激性小、藥物殘留較少、抗藥性不強(qiáng)，具有一定的推廣價(jià)值。