葉氏腎康方在腎臟病中的開(kāi)發(fā)及研究進(jìn)展

吳 玲，趙良斌，呂李澤宇，蔣 廷，劉 昱，李明權(quán)

（成都中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院腎病二科，四川 成都 610072）

葉傳蕙教授是全國(guó)知名中西醫(yī)結(jié)合腎病專(zhuān)家，從醫(yī)近六十年，長(zhǎng)期帶領(lǐng)團(tuán)隊(duì)從事腎臟病研究，逐漸形成獨(dú)特的中醫(yī)腎病理論體系。葉傳蕙教授認(rèn)為“虛、瘀、濕、毒”是急慢性腎衰竭的基本病機(jī)，當(dāng)以“益氣活血、祛濕排毒” 為基本治法，以腎康方為基礎(chǔ)方，多獲良效。該方由生黃芪、酒大黃、丹參、紅花組成，大黃為君，性苦寒，功在逐瘀泄?jié)帷㈧顫衽哦?，使?jié)穸究沙?、瘀滯得通，正所謂“邪去則正自安”； 配以黃芪、丹參和紅花為臣，黃芪甘溫，意在益氣扶正，增強(qiáng)君藥?kù)钚爸?，正所謂“正安則邪不擾” “正盛則邪易去”。丹參苦、微寒，紅花辛溫寒溫并用，活血祛瘀，助大黃以祛瘀。諸藥配伍，緊扣腎衰“虛、瘀、濕、毒” 病機(jī)，邪正兼顧，虛實(shí)并重，達(dá)到標(biāo)本兼治、邪去正安的作用。

在長(zhǎng)期的實(shí)踐中，葉老發(fā)現(xiàn)急慢性腎衰竭患者多伴惡心嘔吐等消化道癥狀，影響口服藥物吸收； 且多數(shù)患者因容量負(fù)荷需限制液體入量，尤其是急性腎衰竭（ARF）患者不便于使用口服湯藥?；诖耍~老提出應(yīng)改變傳統(tǒng)口服劑型的觀點(diǎn)，以腎康方為基礎(chǔ)方進(jìn)行新藥開(kāi)發(fā)，研制了3 種劑型，分別為注射液、栓劑、灌腸劑。2019 年，中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)腎臟疾病專(zhuān)業(yè)委員會(huì)頒布了《腎康制劑治療慢性腎臟病合理應(yīng)用專(zhuān)家共識(shí)》，提出腎康制劑臨床適應(yīng)癥，（1）適用于按照國(guó)際慢性腎臟?。–KD）診斷標(biāo)準(zhǔn)CKD 2～5 期非透析患者； （2）中醫(yī)臨床表現(xiàn)為身重困倦、惡心嘔吐、食欲減退、腹脹、肢體麻木、舌質(zhì)紫暗等濕濁血瘀證［1］。

1 腎康注射液

腎康注射液是葉老以腎康方為基礎(chǔ)研制的代表性中成藥?kù)o脈注射劑，已被國(guó)家藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)用于治療慢性腎功能衰竭（CRF）。注射劑可直接進(jìn)入血循環(huán)，不受消化液及食物影響，起效迅速，可有效保證血藥濃度； 臨床使用劑量為每天60～100 mL，按1 ∶1～1 ∶3 比例稀釋?zhuān)o脈滴注，2～4 周為1 個(gè)療程。

1.1 臨床研究 腎康注射液可用于多種腎臟疾病，以CRF為主，多項(xiàng)研究顯示，腎康注射液具有改善腎功能、改善臨床癥狀、提高生活質(zhì)量等多方面作用。

1.1.1 慢性腎衰竭 腎康注射液是目前用于治療CRF 應(yīng)用最廣泛的中成藥注射劑。目前，多項(xiàng)臨床研究顯示腎康注射液可改善CRF 患者的腎功能及多項(xiàng)臨床指標(biāo)。王仲鵬等［2］將140 例CKD 患者隨機(jī)分為觀察組和對(duì)照組，觀察組在對(duì)照組的治療基礎(chǔ)上加用每日靜滴腎康注射液（每天100 mL，加入10%葡萄糖溶液300 mL），療程1 個(gè)月，觀察組總有效率為91.43%，高于對(duì)照組的68.57%，且觀察組治療后血肌酐、尿素氮、24 h 尿蛋白、胱抑素C 低于對(duì)照組，血清IgG、CD3＋、CD4＋／CD8＋、NK 水平及腎小球?yàn)V過(guò)率高于對(duì)照組，提示在常規(guī)西醫(yī)治療的基礎(chǔ)上加用腎康注射液可顯著改善CKD 患者的腎臟功能，提高患者免疫力。邱杰山等［3］納入71 例符合血瘀證診斷的CKD 2 ～3 期患者，給予腎康注射液治療（100 mL 加入5%葡萄糖溶液250 mL，每天1 次），連續(xù)治療4 周后，比較治療前后差異，發(fā)現(xiàn)腎康注射液可顯著改善患者的血瘀證評(píng)分及分級(jí)，改善血液流變學(xué)及腎功能。Song 等［4］檢索了7 個(gè)數(shù)據(jù)庫(kù)，納入隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)研究進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)及Meta 分析，結(jié)果顯示腎康注射液可有效改善CKD 患者的凝血功能，且無(wú)明顯的不良反應(yīng)。由此可見(jiàn)，腎康注射液治療CRF 療效良好，具有顯著優(yōu)勢(shì)。

1.1.2 聯(lián)合血液透析治療尿毒癥 除單獨(dú)使用腎康注射液外，腎康注射液聯(lián)合血液透析治療尿毒癥，可提高治療有效率，減少不良反應(yīng)。陳鵬等［5］經(jīng)過(guò)3 周的臨床試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用每天1.5 mL／kg 腎康注射液稀釋靜脈滴注聯(lián)合高通量血液透析（2 次／周，4 h ／次），連續(xù)治療3 周，可明顯改善CKD 5 期患者臨床療效、證候評(píng)分、電導(dǎo)率及微炎癥狀態(tài)，且不良反應(yīng)少。廖效竹等［6］進(jìn)行了一項(xiàng)120 例血液透析患者的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)，治療組每天靜滴80 mL 腎康注射液，連續(xù)4 周后停藥2 周，持續(xù)4 個(gè)療程，觀察6 個(gè)月后發(fā)現(xiàn)腎康注射液可緩解患者心衰癥狀，下調(diào)腦鈉肽水平，提高射血分?jǐn)?shù)，降低C 反應(yīng)蛋白水平，增加抗氧化酶含量，提示腎康注射液治療可改善血透患者的心功能，作用機(jī)制可能與改善機(jī)體微炎癥和氧化應(yīng)激有關(guān)。張曉川等［7］檢索數(shù)據(jù)庫(kù)中從建庫(kù)至2018 年7 月所有關(guān)于腎康注射液聯(lián)合血液透析治療CRF 的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)文獻(xiàn)并進(jìn)行系統(tǒng)評(píng)價(jià)，與單純血液透析相比，腎康注射液聯(lián)合血液透析治療CRF 可以顯著提高治療有效率，改善腎功能指標(biāo)，改善患者營(yíng)養(yǎng)狀況，提高血紅蛋白和白蛋白水平。

1.1.3 其他類(lèi)型CRF 此外，也有學(xué)者針對(duì)導(dǎo)致CRF 的不同類(lèi)型基礎(chǔ)腎臟疾病開(kāi)展了研究，如慢性腎小球腎炎、糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）、造影劑腎病、IgA腎病等。王永麗等［8］納入96 例慢性腎小球腎炎進(jìn)行單中心隨機(jī)對(duì)照研究，結(jié)果顯示每天靜脈滴注60 mL 連續(xù)8 周的腎康注射液聯(lián)合口服纈沙坦可顯著改善慢性腎小球腎炎患者腎功能，降低尿蛋白，增強(qiáng)免疫功能。勾筱娟等［9］將血肌酐高于正常且在200 μmol／L 以下的IgA 腎病分為常規(guī)治療組及腎康組，治療3 周后，結(jié)果顯示腎康組24 h 尿蛋白定量、血肌酐、C 反應(yīng)蛋白及收縮壓均較治療前下降，且較常規(guī)治療組降低，提示腎康注射液可改善IgA 腎病患者的腎功能，可能與改善機(jī)體炎癥狀態(tài)有關(guān)。陳海威等［10］將206 例擬行冠狀動(dòng)脈造影的老年CKD 患者隨機(jī)分為水化組、腎康組和對(duì)照組，腎康組于術(shù)前3 天至術(shù)后4 天連續(xù)靜滴腎康注射液（每天60 mL），結(jié)果顯示腎康治療與造影劑腎病的發(fā)生率和24 h 血肌酐變化呈負(fù)相關(guān)，提示腎康注射液對(duì)老年CKD 患者的造影劑腎病具有一定的防治作用。錢(qián)文娟等［11］納入70 例DN 患者進(jìn)行研究，以14 天為1 個(gè)療程，共觀察2 個(gè)療程后，發(fā)現(xiàn)在西醫(yī)治療基礎(chǔ)上，加用腎康注射液（100 mL／d，1 次／天）可有效改善老年DN 患者的血糖、血脂、腎功能及臨床癥狀，且具有較高安全性。

1.1.4 急性腎損傷 除了CRF 外，也有學(xué)者對(duì)腎康注射液治療急性腎損傷（acute kidney injury，AKI）進(jìn)行了臨床研究。如聶衛(wèi)群等［12］開(kāi)展了一項(xiàng)42 例AKI 患者的隨機(jī)對(duì)照研究，治療組在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上每日靜滴腎康注射液（每天60～80 mL），治療7 天，治療組血肌酐、胱抑素C與急性生理與慢性健康狀況評(píng)分Ⅱ（APACHE Ⅱ）較對(duì)照組下降更明顯（P＜0.05）。張春玲等［13］納入96 例AKI 患者，經(jīng)7 天治療后，腎康注射液組（每天100 mL）的少尿期、多尿期及血肌酐恢復(fù)正常的時(shí)間均短于對(duì)照組，且炎癥因子水平降低，提示腎康注射液可減輕AKI 患者的炎癥反應(yīng)，且更快地促進(jìn)腎功能恢復(fù)。研究初步提示腎康注射液對(duì)AKI 患者也具有腎臟保護(hù)作用，還需進(jìn)一步的探索研究。

1.2 機(jī)制研究 現(xiàn)有研究證明，腎康注射液含有許多活性物質(zhì)，可通過(guò)多種信號(hào)通路的作用機(jī)制治療多種腎臟疾病［14］。

1.2.1 慢性腎衰竭模型 腎臟纖維化是CKD 進(jìn)展至終末期腎病的關(guān)鍵病理機(jī)制，多項(xiàng)研究表明，腎康注射液具有延緩腎臟纖維化的作用，其作用機(jī)制復(fù)雜，涉及多個(gè)信號(hào)通路。馬躍榮教授［15］團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，腎康注射液可減輕單側(cè)輸尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction，UUO）大鼠的腎功能異常，并可通過(guò)減輕腎小管擴(kuò)張、膠原蛋白沉積和腎小管間質(zhì)腔擴(kuò)張來(lái)改善腎小管間質(zhì)損傷和纖維化； 此外，腎康注射液通過(guò)促進(jìn)Smad7 與Smad 泛素調(diào)節(jié)因子Smurf2的表達(dá)，促進(jìn)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β （transforming growth factor-β，TGF-β）受體復(fù)合物的降解，抑制Smad2／3 的磷酸化，提示腎康注射液可通過(guò)泛素化的方式調(diào)節(jié)TGF-β／Smad 信號(hào)通路，減輕腎間質(zhì)纖維化。Wu 等［16］采用5／6 腎切除建立CKD 大鼠模型，結(jié)合體外實(shí)驗(yàn)，同樣證實(shí)腎康注射液通過(guò)下調(diào)TGF-β／Smad3 信號(hào)通路，抑制腎臟纖維化和氧化應(yīng)激。Qin 等［17］發(fā)現(xiàn)腎康注射液可通過(guò)調(diào)節(jié)JAK2／STAT3 通路抑制UUO 大鼠腎組織成纖維細(xì)胞的活化。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)腎康注射液可通過(guò)降低UUO 小鼠模型的血管細(xì)胞黏附蛋白1、維生素D 受體、環(huán)氧合酶-2 和基質(zhì)金屬蛋白酶-9 （matrix metalloprteinase-9，MMP-9）蛋白表達(dá)，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，抑制細(xì)胞外基質(zhì)的異常積聚，發(fā)揮抗腎臟纖維化的作用［18］。Liu 等［19］發(fā)現(xiàn)高劑量（5 g／kg）腎康注射液通過(guò)抑制腎臟中血小板衍生生長(zhǎng)因子受體和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體信號(hào)的激活，抑制肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化，發(fā)揮改善UUO 大鼠腎臟纖維化的作用。楊晶晶等［20］發(fā)現(xiàn)經(jīng)腎康注射液干預(yù)后，UUO 大鼠的血肌酐、尿素氮、尿酸、白蛋白、尿蛋白及腎臟組織形態(tài)均得到不同程度的改善，且腎組織MMP-2、MMP-9 蛋白表達(dá)下調(diào)，其作用機(jī)制與ERK1／2／MMPs 信號(hào)通路相關(guān)。Liu 等［21］建立5／6 腎切除損傷模型，給予腎康注射液治療后，血肌酐和尿素氮水平顯著降低，腎組織病理?yè)p傷明顯改善，并通過(guò)MAPK 信號(hào)通路阻滯H2O2誘導(dǎo)的HK-2 細(xì)胞凋亡。由此可見(jiàn)，腎康注射液可通過(guò)多種信號(hào)途徑改善腎臟纖維化，延緩腎衰竭，發(fā)揮腎臟保護(hù)作用。

1.2.2 糖尿病腎病模型 DN 是目前我國(guó)中老年人發(fā)生終末期腎?。╡nd-stage renal disease，ESRD）的首要病因，尋找有效的防治方法是目前的研究重點(diǎn)。許多學(xué)者發(fā)現(xiàn)腎康注射液可有效延緩糖尿病引起的腎組織損傷。Wang等［22］設(shè)計(jì)了體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)研究腎康注射液在糖尿病性腎小管病變中的作用，腎康注射液可改善DN 大鼠的一般狀況、腎臟形態(tài)和腎功能指標(biāo)，減輕腎臟損傷和上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)分化，其作用機(jī)制與抑制PERK-eIF2α-ATF4-CHOP 信號(hào)通路的激活、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及細(xì)胞凋亡有關(guān)。劉洋等［23］采用高糖高脂飲食誘導(dǎo)聯(lián)合鏈脲佐菌素的方法建立2 型糖尿病大鼠模型，觀察發(fā)現(xiàn)腎康注射液可減輕糖尿病大鼠的早期腎小管間質(zhì)損傷，其機(jī)制可能與減少腎組織toll 樣受體的表達(dá)、抑制炎癥介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)有關(guān)。王荔等［24］發(fā)現(xiàn)腎康注射液可抑制高糖誘導(dǎo)的小鼠腹膜間皮細(xì)胞中的腫瘤壞死因子-α （tumor necrosis factor-α，TNF-α）、TGF-β、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、結(jié)締組織生長(zhǎng)因子的表達(dá)和轉(zhuǎn)錄，并呈劑量依賴(lài)性。腎康注射液還可通過(guò)提高抗衰老分子Klotho、sirt1 和PPAR-g 的表達(dá)，抑制促衰老分子mTOR 和p66Shc的水平來(lái)防治高糖誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞衰老［25］。此外，Xu 等［26］通過(guò)體外研究發(fā)現(xiàn)高糖處理促進(jìn)腎小球系膜細(xì)胞（RMC）的增殖，而腎康注射液可通過(guò)誘導(dǎo)G1期細(xì)胞周期阻滯抑制高糖誘導(dǎo)的RMC 增殖，并通過(guò)上調(diào)促凋亡介質(zhì)bax 和caspase-3 促進(jìn)細(xì)胞凋亡，發(fā)揮抑制RMC 增殖的作用。

1.2.3 其他腎臟疾病模型 有研究顯示［27］，腎康注射液通過(guò)抑制腹膜間皮細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化，促進(jìn)E-鈣粘蛋白的表達(dá)，抑制α-平滑肌肌動(dòng)蛋白的表達(dá)，延緩腹膜透析誘導(dǎo)的小鼠腹膜纖維化的進(jìn)展，改善腹膜形態(tài)和功能。Zhang等［28］通過(guò)每天皮下注射他克莫司（1.5 mg／kg），建立他克莫司腎損傷大鼠模型，同時(shí)每天靜脈注射腎康注射液（450 mg／kg），連續(xù)4 周，結(jié)果顯示腎康注射液可保持他克莫司腎損傷大鼠的腎小球完整性，減輕腎小管間質(zhì)纖維化，改善尿白蛋白排泄和腎功能，作用機(jī)制與抑制TGF-β／Smads信號(hào)通路、氧化應(yīng)激和細(xì)胞凋亡有關(guān)。除此之外，章韻等［29］研究發(fā)現(xiàn)，腎康注射液可改善缺血再灌注腎損傷小鼠的腎功能，減輕腎臟病理?yè)p傷，減少炎癥因子水平，提高組織超氧歧化酶的活性，降低丙二醛的活性，提示腎康注射液可改善AKI 小鼠的腎功能，其作用機(jī)制與改善氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)相關(guān)。由此可見(jiàn)，除了CRF 外，腎康注射液對(duì)多種腎臟疾病均具有腎臟保護(hù)作用，值得進(jìn)一步開(kāi)發(fā)研究。

2 腎康栓

腎康栓是腎康方的栓劑劑型，使用劑量為每日5 粒（早、中、晚各1 粒，睡前2 粒），納入肛內(nèi)2 cm 以上，8周為1 個(gè)療程。適應(yīng)癥與腎康注射液相同［1］。

腎康栓目前主要以臨床治療CRF 研究為主。李鵬等［30］將120 例CKD 3～4 期患者隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組，治療組在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用腎康栓，療程為8 周，結(jié)果顯示治療組臨床總有效率顯著高于對(duì)照組 （分別為75.0%、57.1%，P＜0.05），且腎康栓可降低CKD 患者血清硫酸吲哚酚、硫酸對(duì)甲酚的水平，提示腎康栓可通過(guò)促進(jìn)腸源性尿素癥毒素的排泄，改善CKD 患者腎功能。黃馨等［31］收治90 名CKD2～4 期患者，腎康栓治療3 個(gè)月后血肌酐、胱抑素C、血尿素氮下降，同時(shí)根據(jù)eGFR 進(jìn)行分層分析，結(jié)果提示腎康栓對(duì)早期CKD 患者［60 mL／ （min·1.73 m2）＜eGFR＜89 mL／ （min·1.73 m2）］的療效更加顯著。溫玉瑋［32］對(duì)160 例CKD3～4 期濕濁血瘀證的患者進(jìn)行前后對(duì)照研究，腎康栓治療8 周后，中醫(yī)證候總有效率為93.13%，臨床總有效率為91.88%，患者血肌酐、尿素氮顯著低于治療前，肌酐清除率顯著高于治療前。何勁松［33］為研究不同療程對(duì)腎康栓療效的影響，選取188 例CKD3～5 期患者為研究對(duì)象，按照不同療程分為治療Ⅰ組（5 粒／d*14 d）和治療Ⅱ組（5 粒／d*28 d），兩組總有效率無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但CKD3 ～4 期療效明顯優(yōu)于CKD5 期；且治療Ⅱ組對(duì)血肌酐、尿素氮等指標(biāo)改善更加顯著，提示在CKD3～5 期患者中早期足量足療程使用腎康栓，療效更佳。此外，北京醫(yī)藥衛(wèi)生經(jīng)濟(jì)研究會(huì)研究發(fā)現(xiàn)，自腎康栓納入國(guó)家基本醫(yī)保目錄后1～5 年，分別節(jié)省了0.02、0.17、0.35、0.57、0.82 億元，提示腎康栓納入醫(yī)保有利于節(jié)省醫(yī)保資金的支出［34］。由此可見(jiàn)，腎康栓可改善CKD3～5 期患者的腎功能及臨床癥狀，建議早期足療程使用腎康栓，有助于延緩腎臟疾病進(jìn)展，且從醫(yī)保角度具有經(jīng)濟(jì)優(yōu)勢(shì)。但目前腎康栓缺乏多中心大樣本的臨床隨機(jī)對(duì)照研究，且機(jī)制研究偏少，還需要更多的研究來(lái)驗(yàn)證其療效及作用機(jī)制。

3 腎衰康灌腸液

腎衰康灌腸液是葉氏腎康方的灌腸劑型，也是目前唯一以AKI 為適應(yīng)癥的中成藥。

從上個(gè)世紀(jì)七十年代開(kāi)始，葉傳蕙［35］致力于中藥灌腸防治ARF 的研究，在中醫(yī)理論的指導(dǎo)下，運(yùn)用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)手段，成功研制出“中藥結(jié)腸灌注液Ⅰ號(hào)”，臨床研究證實(shí)，其對(duì)ARF 的治愈率高達(dá)89.7%。為適應(yīng)臨床治療的需要，將結(jié)腸灌注改為直腸灌注，同時(shí)將單次灌注液用量減少到20 mL，更名為“腎衰寧灌腸液”，用于各種原因所致的111 例ARF 患者，治愈率達(dá)到83.78%［36］。在以上研究的基礎(chǔ)上，研究團(tuán)隊(duì)開(kāi)展了增加適應(yīng)癥的中藥新藥研究開(kāi)發(fā)，更名為“腎衰康灌腸液”，同時(shí)用于ARF 和CRF 的治療，成為目前臨床上用于治療ARF 的唯一上市中成藥。

腎小管上皮細(xì)胞凋亡是AKI 發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵病理機(jī)制?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，腎衰康灌腸液能有效抑制腎小管上皮細(xì)胞凋亡，其作用機(jī)制與抑制多種凋亡通路有關(guān)［37］。李明權(quán)等［38］采用人腎近端小管細(xì)胞系（HK-2）細(xì)胞建立缺氧／復(fù)氧（hypoxia reoxygenation，H／R）模型模擬腎缺血再灌注損傷，發(fā)現(xiàn)造模后4 ～12 h 細(xì)胞凋亡明顯增加，促凋亡分子Bax、caspase-3 表達(dá)升高，經(jīng)腎衰康灌腸液含藥血清處理后細(xì)胞凋亡明顯被抑制，且以劑量依賴(lài)的方式下調(diào)Bax、caspase-3 基因表達(dá)，上調(diào)Bcl-2 基因表達(dá)，驗(yàn)證了腎衰康灌腸液對(duì)HK-2 細(xì)胞凋亡的抑制作用。羅芯怡等［39］發(fā)現(xiàn)腎衰康灌腸液可抑制H／R 誘導(dǎo)的HK-2 細(xì)胞凋亡，減少葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78 （glucose-regulated protein 78，GRP78）、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)源性轉(zhuǎn)錄因子CHOP 的表達(dá)，提示含藥血清抑制缺血再灌注損傷模型的HK-2 細(xì)胞凋亡與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（endoplasmic reticulum stress，ERS）有關(guān)?；诖?，李明權(quán)等開(kāi)展了多項(xiàng)基于ERS 相關(guān)的細(xì)胞凋亡信號(hào)通路在腎衰康灌腸液改善HK-2 細(xì)胞H／R 損傷的機(jī)制研究。ERS 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡主要通過(guò)3 條途徑：CHOP、天冬氨酸特異性半肌氨酸蛋白-12 （caspase-12）和c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）。吳新萍［40］利用密閉法處理HK-2 細(xì)胞模擬腎組織缺血再灌注損傷，發(fā)現(xiàn)造模4 ～8 h后，caspase-12 表達(dá)顯著升高，而經(jīng)腎衰康灌腸液含藥血清處理后，與模型組比較，caspase-12 表達(dá)降低。Ye 等［41］結(jié)合網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和體外實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)腎衰康灌腸液可增強(qiáng)H／R損傷的HK-2 細(xì)胞活力，減少H／R 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，下調(diào)caspase-3、Bax、CHOP 的表達(dá)。同時(shí)觀察到腎衰康灌腸液含藥血清可以顯著抑制CHOP、ERO1-α 蛋白及mRNA 表達(dá)［42］。另外，腎衰康灌腸液可顯著升高HK-2 細(xì)胞的JNK表達(dá)水平，下調(diào)caspase-3 表達(dá)，減少氧化損傷，提示腎衰康灌腸液通過(guò)上調(diào)JNK 來(lái)觸發(fā)caspase-3 的抑制，從而消除H／R 誘導(dǎo)的HK-2 細(xì)胞凋亡［43］。由此可見(jiàn)腎衰康灌腸液可通過(guò)調(diào)控ERS 信號(hào)通路抑制HK-2 細(xì)胞的凋亡。另有研究顯示，腎衰康灌腸液含藥血清對(duì)Wnt4 的基因表達(dá)有上調(diào)作用，對(duì)β-catenin 的基因表達(dá)有雙向調(diào)節(jié)作用，提示腎衰康灌腸液抑制H／R 誘導(dǎo)的HK-2 細(xì)胞凋亡可能與激活Wnt／βcatenin 通路有關(guān)［44］。鄧榮榮等［45］還對(duì)腎衰康灌腸液的預(yù)防作用進(jìn)行了研究，將HK-2 細(xì)胞用腎衰康灌腸液含藥血清預(yù)處理24 h 后，再進(jìn)行H／R 處理，發(fā)現(xiàn)與模型組比較，造模4～12 h 后腎衰康灌腸液組細(xì)胞凋亡／死亡率明顯下降，活性氧比模型組更快恢復(fù)正常，提示腎衰康灌腸液可預(yù)防HK-2 細(xì)胞缺氧／復(fù)氧損傷，其機(jī)制可能與抑制細(xì)胞氧化應(yīng)激有關(guān)。此外，全柳葉等［46］發(fā)現(xiàn)腎衰康灌腸液可通過(guò)p38-MAPK 信號(hào)通路抑制細(xì)胞的凋亡。由此可見(jiàn)，腎衰康灌腸液可通過(guò)調(diào)控多種信號(hào)通路抑制腎小管上皮細(xì)胞凋亡，發(fā)揮改善腎功能的作用。目前針對(duì)腎衰康灌腸液的研究以體外研究為主，缺乏體內(nèi)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)缺乏針對(duì)AKI 的多中心大樣本研究，有待日后進(jìn)一步探索。

4 結(jié)語(yǔ)

葉氏腎康方是中醫(yī)腎病專(zhuān)家葉傳蕙教授的經(jīng)驗(yàn)方，目前已經(jīng)開(kāi)發(fā)出注射劑、栓劑、灌腸液劑型，廣泛用于治療急、慢性腎衰竭，是腎臟疾病治療中應(yīng)用極為廣泛的中成藥。大量文獻(xiàn)研究顯示，腎康方的新藥開(kāi)發(fā)，療效顯著，且可通過(guò)多種作用機(jī)制發(fā)揮防止腎損傷、保護(hù)腎功能的作用。但仍有很多不足之處。（1）腎康方目前開(kāi)發(fā)出來(lái)的劑型中，注射液需住院才能使用，栓劑和灌腸液劑型，由于是直腸給藥，部分患者并不適應(yīng)或接受這種方式，且使用不方便，但目前腎康方并未開(kāi)發(fā)出口服劑型，比如顆粒、膠囊或口服液，還需要進(jìn)一步研究開(kāi)發(fā)； （2）3 種劑型中，以注射液研究最為廣泛，而栓劑和灌腸液的臨床研究和機(jī)制研究略顯不足，需進(jìn)一步探討腎康方的臨床療效及作用機(jī)制； （3）腎衰康灌腸液作為3 種劑型中唯一以AKI 為適應(yīng)癥的中成藥，目前缺乏大型臨床隨機(jī)對(duì)照研究，同時(shí)與同類(lèi)型研究相比，現(xiàn)有研究主要以體外實(shí)驗(yàn)為主，缺乏體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究，需要進(jìn)一步增加研究范圍和投入。腎康方作為臨床有效驗(yàn)方，值得進(jìn)一步研究并深度開(kāi)發(fā)，以提高臨床療效，促進(jìn)中醫(yī)藥在防治腎臟疾病中的應(yīng)用。