抗凝劑物質(zhì)對(duì)便攜式血糖儀比對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響研究

王紅

糖尿病屬于發(fā)病率較高的慢性疾病之一,患者體內(nèi)由于胰島素分泌不足或外周組織對(duì)胰島素不敏感引起的全身代謝性疾病,臨床上以持續(xù)的高血糖為特征。隨著病程的延長,持續(xù)的高血糖將會(huì)引起各種組織、臟器的長期損害、功能不全或衰竭［1］。根據(jù)糖尿病的發(fā)病機(jī)制不同可分為I 型糖尿病、Ⅱ型糖尿病、妊娠糖尿病及其他類型糖尿病等多種類型,導(dǎo)致患者糖尿病腎病、視網(wǎng)膜病變及糖尿病足發(fā)生率較高［2］。世界衛(wèi)生組織(WHO)規(guī)定,以血糖作為糖尿病主要診斷依據(jù),是判斷病情、控制情況的主要指標(biāo)［3］。當(dāng)前,血糖常用的監(jiān)測(cè)方法包括點(diǎn)式血糖監(jiān)測(cè)、糖化血紅蛋白(HbA1c)監(jiān)測(cè)、連續(xù)血糖監(jiān)測(cè)等,且隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展,便攜式血糖儀開始用于臨床,但是該監(jiān)測(cè)方法必須建立血糖儀檢測(cè)質(zhì)量保證體系,包括完善的室內(nèi)質(zhì)控與室間質(zhì)評(píng)體系［4］。既往研究表明［5］：不同抗凝劑對(duì)血糖檢測(cè)存在一定的影響,且不同品牌即時(shí)檢驗(yàn)(POCT)血糖儀在不同抗凝物質(zhì)組成的基準(zhǔn)物質(zhì)比對(duì)中,測(cè)定值存在差異,導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。本研究參考GB/T19634-2005 標(biāo)準(zhǔn),制備低濃度、正常范圍、高濃度標(biāo)本合計(jì)100 份,探討抗凝劑物質(zhì)對(duì)便攜式血糖儀比對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響,現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1材料來源 根據(jù)中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T19634-2005 制備低濃度、正常范圍、高濃度血糖標(biāo)本共100 份。本研究獲得倫理委員會(huì)批準(zhǔn),且血液標(biāo)本采集均嚴(yán)格遵循要求制備,不同濃度的標(biāo)本采用不同抗凝劑抗凝。

1.2儀器與設(shè)備 ①比對(duì)系統(tǒng)：日立全自動(dòng)生化分析儀；②參比系統(tǒng)：拜爾抗RO、強(qiáng)生穩(wěn)豪、羅氏、韓國i-SENS4 種便攜式血糖儀及配套的原裝試劑盒；全自動(dòng)血糖檢測(cè)試劑(購自葡萄糖測(cè)定試劑盒,采用已糖激酶法監(jiān)測(cè))；4 種便攜式血糖配套試劑盒,均采用葡萄糖脫氫酶法測(cè)定；維生素C(VC)配制標(biāo)準(zhǔn)溶液10 g/L,分別加入上述已經(jīng)調(diào)整濃度的低、中、高糖標(biāo)本中。

1.3方法

1.3.1標(biāo)本采集及血糖濃度測(cè)定 分別制備低濃度、正常范圍、高濃度標(biāo)本共100 份。以肝素鋰、乙二胺四乙酸二鉀鹽(EDTA-K2)及氟化鈉作為抗凝物質(zhì),血糖濃度和樣本數(shù)：≤2.77 mmol/L 樣本4 份,2.78～4.44 mmol/L 樣本16 份,4.45～6.66 mmol/L 樣本20 份,6.67～11.10 mmol/L 樣本30 份,11.11～16.65 mmol/L 樣本16 份,16.66～22.20 mmol/L 樣本10 份,≥22.21 mmol/L樣本4 份。選擇健康體檢者,肝素鋰、EDTA-K2及氟化鈉作抗凝,用于抗干擾能力檢測(cè)分析。采集的血液標(biāo)本充分混均后,每份平均分為3 管,10 ml/管。血糖濃度分別調(diào)整為低濃度(1.1～3.3 mmol/L)、正常范圍(11.1～16.7 mmol/L)、高濃度(18.1～22.2 mmol/L)標(biāo)本［6,7］。

1.3.2血糖儀、生化分析儀檢測(cè)方法 ①血糖儀檢測(cè)：根據(jù)便攜式血糖儀說明書完成有關(guān)操作,每管標(biāo)本充分混合后進(jìn)行測(cè)定,每臺(tái)血糖儀均對(duì)100 份標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定,用于評(píng)估便攜式血糖儀的精密度；②生化分析儀檢測(cè)：檢驗(yàn)人員根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)相關(guān)文件完成標(biāo)本的葡萄糖測(cè)定,標(biāo)本離心后取血漿,并于30 min 內(nèi)完成血糖水平測(cè)定,為了降低人為因素引起的誤差,每份標(biāo)本均測(cè)定2 次,取平均值,上述所有操作均嚴(yán)格遵循儀器與試劑盒說明書完成［8］。

1.3.3便攜式血糖儀評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 參考《醫(yī)療機(jī)構(gòu)便攜式血糖測(cè)定儀管理和臨床操作規(guī)范(試行)》的要求,對(duì)不同類型便攜式血糖儀和不同抗凝劑物質(zhì)測(cè)定結(jié)果進(jìn)行判斷。①準(zhǔn)確度評(píng)價(jià)：當(dāng)血糖濃度<4.2 mmol/L 時(shí),至少95%檢測(cè)結(jié)果偏差在±0.83 mmol/L 范圍內(nèi)；當(dāng)血糖濃度≥4.2 mmol/L 時(shí),至少95.0%檢測(cè)結(jié)果偏差在±20.0%范圍內(nèi)。即每臺(tái)儀器檢測(cè)20 個(gè)標(biāo)本中至少19 個(gè)結(jié)果在偏差允許范圍內(nèi),否則為比對(duì)試驗(yàn)不通過或不合格［9］。②精密度評(píng)價(jià)：檢測(cè)標(biāo)本濃度為9.1 mmol/L,CV≤7.5%為合格［10］。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS24.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t 檢驗(yàn),多組比較采用F 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1不同類型便攜式血糖儀比對(duì)試驗(yàn)通過率比較 采用拜爾抗RO、強(qiáng)生穩(wěn)豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀30 臺(tái)完成血糖儀試驗(yàn),30 臺(tái)便攜式血糖儀中3臺(tái)儀器未通過,通過率為90.0%,其中拜爾抗RO 通過率為100.00%,而韓國i-SENS 便攜式血糖儀通過率最低,為66.67%。見表1。

表1 不同類型便攜式血糖儀比對(duì)試驗(yàn)通過率比較(臺(tái),%)

2.2各便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測(cè)結(jié)果比較拜爾抗RO、強(qiáng)生穩(wěn)豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀對(duì)低濃度、正常范圍、高濃度標(biāo)本的測(cè)定結(jié)果與生化分析儀比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2 各便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測(cè)結(jié)果比較(,n=100)

表2 各便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測(cè)結(jié)果比較(,n=100)

注：與生化分析儀比較,aP>0.05

2.3抗凝劑物質(zhì)對(duì)便攜式血糖儀比對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響為了分析肝素鋰、EDTA-K2及氟化鈉不同類型抗凝劑物質(zhì)對(duì)便攜式血糖儀測(cè)定結(jié)果的影響,通過不同血糖濃度下利用4 種便攜式血糖儀測(cè)定,結(jié)果表明：血糖濃度1.1～3.3 mmol/L、11.1～16.7 mmol/L、18.1～22.2 mmol/L 下拜爾抗RO、強(qiáng)生穩(wěn)豪、羅氏、韓國i-SENS便攜式血糖儀采用肝素鋰、EDT-K2抗凝對(duì)血糖測(cè)定結(jié)果無影響；拜爾抗RO、強(qiáng)生穩(wěn)豪、羅氏、韓國i-SENS便攜式血糖儀采用氟化鈉作為抗凝物質(zhì)測(cè)定結(jié)果高于肝素鋰和EDTA-K2,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 抗凝劑物質(zhì)對(duì)便攜式血糖儀比對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響(,n=100)

表3 抗凝劑物質(zhì)對(duì)便攜式血糖儀比對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響(,n=100)

注：與氟化鈉比較,aP<0.05

2.4不同類型便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性分析 采用Pearson 相關(guān)性分析軟件,以生化分析儀作為因變量,便攜式血糖儀為自變量,完成線性回歸分析,拜爾抗RO、強(qiáng)生穩(wěn)豪、羅氏、韓國i-SENS便攜式血糖儀的r 值分別為0.999、0.994、0.984、0.987。見表4。

表4 不同類型便攜式血糖儀與生化分析儀血糖檢測(cè)結(jié)果的相關(guān)性分析

2.5不同類型便攜式血糖儀精密度分析 以便攜式血糖測(cè)定儀重復(fù)測(cè)定100 份標(biāo)本進(jìn)行計(jì)算,拜爾抗RO、強(qiáng)生穩(wěn)豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀CV 分別為1.49%～2.21%、1.84%～2.51%、5.29%～5.53%和5.13%～6.98%,以CV≤7.5%為標(biāo)準(zhǔn),所有儀器均合格。見圖1。

圖1 不同類型便攜式血糖儀精密度分析

3 討論

近年來,隨著居民生活方式、飲食結(jié)構(gòu)的改變,再加上勞動(dòng)強(qiáng)度的降低,人均壽命的延長,使得糖尿病發(fā)生率呈上升趨勢(shì),并成為世界各國越來越嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題［11］。當(dāng)前,血糖監(jiān)測(cè)常用方法有以下幾種：①點(diǎn)式血糖監(jiān)測(cè)：適用于血糖控制良好且穩(wěn)定患者；②連續(xù)血糖監(jiān)測(cè)：適用于新發(fā)糖尿病、治療過程中出現(xiàn)血糖波動(dòng)、開始新的或調(diào)整舊的治療方案,如需要改變飲食、用藥品種及其劑量等；③HbA1c 監(jiān)測(cè)：用于患者本項(xiàng)目監(jiān)測(cè)3 個(gè)月平均血糖水平的監(jiān)測(cè)與評(píng)價(jià)。同時(shí),血糖監(jiān)測(cè)時(shí)間和頻率亦是糖尿病管理的重要組成部分,其結(jié)果有助于評(píng)估糖尿病患者代謝紊亂程度,并制定針對(duì)性的降糖方案,亦可反映降糖治療效果,指導(dǎo)臨床治療。

目前,臨床上主要利用血糖儀完成毛細(xì)血管血糖檢測(cè),包括患者自我血糖監(jiān)測(cè)(SMBG)及在醫(yī)院內(nèi)POCT 血糖檢測(cè),均為血糖監(jiān)測(cè)的基本形式［12］。住院患者院內(nèi)血糖監(jiān)測(cè)可通過實(shí)驗(yàn)室生化分析儀完成靜脈血漿或血清葡萄糖檢測(cè),但是更多患者的血糖檢測(cè)通過快速、簡便、準(zhǔn)確的POCT 方法完成。因此,加強(qiáng)對(duì)便攜式血糖儀的規(guī)范性管理,保證檢測(cè)數(shù)據(jù)的有效性,對(duì)指導(dǎo)臨床治療具有重要的意義。本研究中,30 臺(tái)便攜式血糖儀中3 臺(tái)儀器未通過,通過率為90.0%,提示便攜式血糖儀用于血糖檢測(cè)的通過率相對(duì)較高,基本能滿足患者血糖監(jiān)測(cè)所需?！夺t(yī)療機(jī)構(gòu)便攜式血糖檢測(cè)儀管理和臨床操作規(guī)范》中指出,血糖儀屬于PCOT設(shè)備,POCT 方法只能用于糖尿病患者的血糖監(jiān)測(cè)?；颊哐躅愋汀⒉裳课?、血氧紅細(xì)胞壓積和多種內(nèi)源性、外源性物質(zhì)等均會(huì)對(duì)便攜式血糖儀檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生影響。血糖儀準(zhǔn)確性因素包括便攜式血糖儀測(cè)量結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室血糖檢測(cè)結(jié)果的一致程度,同一樣本多次重復(fù)測(cè)量后一致程度［13］。

血糖是細(xì)胞進(jìn)行正常代謝及維持器官正常的必需條件,臨床上血糖測(cè)定的主要目的是了解患者體內(nèi)神經(jīng)激素的調(diào)節(jié)是否相對(duì)平衡,為臨床進(jìn)一步的診斷、觀察治療效果、判斷病情發(fā)展提供參考［14］。因此,葡萄糖測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性將直接影響臨床診斷。但是,血液離體后由于紅細(xì)胞能存活較長的時(shí)間,存活的紅細(xì)胞會(huì)不斷消耗血漿中的葡萄糖作為能量,使得血液中的葡萄糖降低。為了保證血糖檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,減少糖尿病患者的誤診和漏診,血糖標(biāo)本有必要使用能抑制糖分解的抗凝劑。肝素鋰、EDTA-K2及氟化鈉均為臨床上常用的抗凝劑,但是不同抗凝劑原理存在差異性。肝素是一種含硫酸基團(tuán)的黏多糖,其抗凝機(jī)制是與抗凝酶Ⅱ一起,在低濃度下抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3 之間的作用,并能加強(qiáng)抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶,從而阻止凝血酶形成。而EDTA 則是通過與水相中的鈣離子形成穩(wěn)定螯合物,阻止血液的凝固。氟化鈉亦是臨床上常用的抗凝劑,具有抗凝和防止血糖酵解雙重作用。氟化鈉能在一定程度上抑制醌蛋白葡萄糖脫氫酶的生物學(xué)活性,導(dǎo)致血糖測(cè)定儀測(cè)定的微電流強(qiáng)度降低,從而對(duì)血糖值測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。本研究中,肝素鋰、EDTA-K2抗凝對(duì)拜爾抗RO、強(qiáng)生穩(wěn)豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀檢測(cè)1.1～3.3 mmol/L、11.1～16.7 mmol/L、18.1～22.2 mmol/L 血糖的結(jié)果無影響；而采用氟化鈉抗凝的拜爾抗RO、強(qiáng)生穩(wěn)豪、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀血糖測(cè)定結(jié)果偏高,從本研究結(jié)果看出,抗凝劑物質(zhì)會(huì)對(duì)便攜式血糖儀測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生干擾,且氟化鈉抗凝對(duì)血糖檢測(cè)結(jié)果的影響最大。張霞等［15］的研究表明：氟化鈉對(duì)采用葡萄糖脫氫酶法的便攜式血糖儀測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生干擾,能在一定程度上影響疾病的診療。因此,便攜式血糖測(cè)定儀測(cè)定患者血糖時(shí),不宜使用氟化鈉進(jìn)行血液抗凝,盡可能采用EDTA-K2及肝素抗凝,降低對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生干擾。

綜上所述,拜爾抗RO、羅氏、韓國i-SENS 便攜式血糖儀的檢測(cè)結(jié)果一致性較好,而國產(chǎn)強(qiáng)生穩(wěn)豪的檢測(cè)結(jié)果受到氟化鈉抗凝物質(zhì)的影響,但是均與日立全自動(dòng)生化分析儀結(jié)果存在強(qiáng)相關(guān)性,臨床檢測(cè)時(shí)應(yīng)根據(jù)需求選擇合適的便攜式血糖儀,降低內(nèi)外源性干擾物的影響。