飼糧添加乙酸鈉對奶山羊泌乳性能和瘤胃微生物區(qū)系的影響

王亞玲 孔鵬輝 袁冬冬 田鑫淼 李 君 蔡含芳 李 明* 許會芬*

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院，鄭州 450046；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動物科技學(xué)院，楊凌 712100；3.河南牧業(yè)經(jīng)濟(jì)學(xué)院動物科技學(xué)院，鄭州 450046)

我國是畜牧業(yè)大國，隨著人民生活水平的提高，消費(fèi)者對奶制品的需求增大。羊奶因具有營養(yǎng)豐富、脂肪球小和易被人體吸收等特點(diǎn)，逐漸成為倍受歡迎的保健乳品[1-3]；此外，羊奶中含有特殊的活性成分(表皮生長因子和環(huán)磷腺苷等)，有助于增強(qiáng)抵抗力，更適于特殊人群飲用[4-5]。乳脂是羊奶的主要成分之一，主要來源于2個途徑：一是乳腺上皮細(xì)胞從血液中攝取中長鏈脂肪酸，加工形成脂滴；二是利用瘤胃內(nèi)揮發(fā)性脂肪酸(volatile fatty acid，VFA)在多種酶的作用下進(jìn)行合成[6]。瘤胃是反芻動物營養(yǎng)物質(zhì)發(fā)酵、消化和代謝的重要場所，對反芻動物營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收起著至關(guān)重要的作用[7]。反芻動物飼糧中的營養(yǎng)物質(zhì)首先通過瘤胃微生物的降解作用轉(zhuǎn)化為可供機(jī)體利用的小分子物質(zhì)，再進(jìn)入各個系統(tǒng)發(fā)揮功能[8]。乙酸是瘤胃中的VFA之一，占比高達(dá)60%～70%，不僅作為乳脂合成前體物直接參與乳腺內(nèi)脂肪酸的從頭合成，還作為信號分子調(diào)節(jié)乳腺脂肪酸代謝，進(jìn)而調(diào)控乳脂的合成[9]。Urrutia等[10]研究發(fā)現(xiàn)，在奶牛飼糧中添加乙酸鈉可以提高乳脂產(chǎn)量。Matamoros等[11]進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，乙酸鈉可通過提高乳腺中從頭合成脂肪酸(C≤16)的產(chǎn)量，顯著提高奶牛的乳脂產(chǎn)量。然而，作為重要的代謝底物及能量供應(yīng)物質(zhì)，乙酸鈉的添加是否也對奶山羊乳脂合成具有相似的效果，目前尚未見到報道。因此，本研究通過探索在飼糧中添加乳脂前體物乙酸鈉對奶山羊泌乳性能和瘤胃微生物區(qū)系的影響，為提高羊奶品質(zhì)的技術(shù)開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用乙酸鈉由某生物科技有限公司提供，為粉末狀，食品級，純度為99%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用15只體重[(53.54±3.07) kg]相近、胎次(2胎次)相同且處于泌乳中期[(60±5) d]的健康西農(nóng)薩能奶山羊母羊，隨機(jī)分為3個組，每組5個重復(fù)。對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧；試驗(yàn)組參考乙酸鈉在奶牛上的添加劑量[10]，分別在基礎(chǔ)飼糧的基礎(chǔ)上添加30(試驗(yàn)Ⅰ組)和60 g/(d·頭)(試驗(yàn)Ⅱ組)的乙酸鈉。基礎(chǔ)飼糧組成參照NRC(2007)奶山羊營養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)，可滿足奶山羊營養(yǎng)需要，其組成及營養(yǎng)水平見表1。養(yǎng)殖試驗(yàn)于2021年5—6月在西北農(nóng)林科技大學(xué)薩能羊原種場進(jìn)行，試驗(yàn)預(yù)試期7 d，正試期21 d。每組試驗(yàn)羊分欄飼養(yǎng)，試驗(yàn)期間羊只自由采食和飲水，每日觀察記錄羊的采食情況。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of the basal diet (DM basis) g/kg

1.3 檢測指標(biāo)及方法

1.3.1 泌乳性能

試驗(yàn)期間每天06:30和15:30進(jìn)行擠奶，記錄日產(chǎn)奶量，試驗(yàn)結(jié)束時計(jì)算21 d的平均值。每周采集1次奶樣，將上午、下午各采集的50 mL奶樣混合均勻后，采用乳成分分析儀(FOSS MilkoScanTMFT-120，美國)進(jìn)行乳成分分析。

1.3.2 瘤胃液采集及瘤胃發(fā)酵參數(shù)測定

試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天，選取乳脂率差異顯著(P<0.05)的2組奶山羊(對照組和試驗(yàn)Ⅱ組)，于晨飼前將瘤胃導(dǎo)管經(jīng)口腔插入瘤胃，并用注射器采集瘤胃液于50 mL無菌離心管內(nèi)，采集的瘤胃液先測定pH，然后用4層無菌紗布過濾，一部分用于檢測瘤胃內(nèi)VFA含量的變化，另一部分裝入凍存管中于-80 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

瘤胃液pH于采樣現(xiàn)場使用便攜式pH計(jì)測定。瘤胃液VFA含量的測定過程如下：將瘤胃液于4 000 r/min下離心10 min，取1 mL上清液于1.5 mL離心管中，加入0.2 mL的25%偏磷酸去蛋白溶液，混勻后冰浴30 min，在10 000 r/min下離心10 min，用一次性注射器吸取上清液，再用0.22 μm濾膜過濾到2 mL棕色樣品瓶后，采用氣相色譜儀器(Agilent 7890B GC System,Hewlett Packard公司，美國)檢測VFA含量；其中，內(nèi)標(biāo)物為巴豆酸，色譜柱為AT-FFAP(30 m×0.32 mm×0.50 μm)毛細(xì)管柱，檢測器溫度為250 ℃，進(jìn)樣口溫度為250 ℃，進(jìn)樣量為1.0 μL。

1.3.3 瘤胃微生物DNA樣品提取、擴(kuò)增和MiSeq測序

將凍存的瘤胃液樣品送往廣州基迪奧生物科技有限公司進(jìn)行DNA樣品提取、擴(kuò)增和純化，具體步驟為：1)將提取的DNA樣品采用1.0%瓊脂糖凝膠電泳觀察條帶有無斷裂或降解，同時使用紫外分光光度計(jì)(NanoDrop 2000，Thermo公司，美國)測量A260/A280值，以確定是否存在蛋白質(zhì)的污染，以此來檢驗(yàn)DNA樣品的質(zhì)量。2)將樣本中提取的基因組DNA，用帶有barcode的特異引物擴(kuò)增16S rDNA序列的V3～V4區(qū)，引物序列參考沈子亮等[12](上游引物為341F:5′-CCTACGGGNGGCWGCAG-3′；下游引物為806R:5′-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3′)。3)隨后將獲得的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物利用AMPure XP Beads進(jìn)行純化，純化步驟如下，加入AMPure XP磁珠試劑，磁珠與核酸結(jié)合，結(jié)合有核酸的磁珠與雜質(zhì)分離，用乙醇洗滌后，加入洗脫液，轉(zhuǎn)移洗脫產(chǎn)物，并使用Qubit 3.0熒光定量儀進(jìn)行產(chǎn)物定量。4)將純化的擴(kuò)增產(chǎn)物根據(jù)濃度進(jìn)行混合，連接測序接頭，構(gòu)建測序文庫，利用Illumina PE250上機(jī)測序。

1.3.4 泌乳性能和瘤胃發(fā)酵參數(shù)與瘤胃微生物區(qū)系的相關(guān)性分析

利用GenesCloud平臺(https://www.genescloud.cn)，使用Spearman等級相關(guān)系數(shù)算法對瘤胃微生物區(qū)系與奶山羊日產(chǎn)奶量、乳脂率、乳蛋白率、乳糖率、非脂固形物含量和瘤胃發(fā)酵參數(shù)進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)Excel 2016初步整理后，再用SPSS 26.0進(jìn)行處理分析，采用one-way ANOVA程序?qū)γ谌樾阅軘?shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，試驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，以P<0.05作為差異顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)，P<0.01作為差異極顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊泌乳性能的影響

由表2可知，與對照組相比，飼糧添加乙酸鈉可極顯著提高奶山羊日產(chǎn)奶量(P<0.01)，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組分別提高了0.29和0.22 kg/d(P<0.01)，但對乳蛋白率和乳糖率均無顯著影響(P>0.05)；同時，飼糧添加乙酸鈉可極顯著提高奶山羊乳脂率(P<0.01)，其中試驗(yàn)Ⅰ組乳脂率有升高趨勢，但差異不顯著(P>0.05)，而試驗(yàn)Ⅱ組乳脂率極顯著提高了1.30個百分點(diǎn)(P<0.01)；試驗(yàn)Ⅱ組乳中非脂固形物含量提高了3.10%(P>0.05)。因此，后續(xù)選擇對照組和試驗(yàn)Ⅱ組奶山羊進(jìn)行瘤胃微生物組成和結(jié)構(gòu)的分析。

表2 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊泌乳性能的影響Table 2 Effects of dietary sodium acetate on lactation performance of dairy goats

2.2 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響

由表3可知，與對照組相比，試驗(yàn)Ⅱ組奶山羊瘤胃pH和乙酸、丙酸、異丁酸、戊酸、異戊酸、總揮發(fā)性脂肪酸(TVFA)含量以及乙酸/丙酸值均無顯著差異(P>0.05)，而瘤胃丁酸含量極顯著降低(P<0.01)。

表3 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響Table 3 Effects of dietary sodium acetate on rumen fermentation parameters of dairy goats

2.3 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物區(qū)系的影響

2.3.1 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物α多樣性的影響

由表4可知，與對照組相比，試驗(yàn)Ⅱ組奶山羊瘤胃微生物的Sobs指數(shù)、Chao1指數(shù)和Ace指數(shù)顯著提高(P<0.05)，試驗(yàn)Ⅱ組瘤胃微生物的覆蓋度極顯著降低(P<0.01)。

表4 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物α多樣性的影響Table 4 Effects of dietary sodium acetate on α diversity of rumen microbiota of dairy goats

2.3.2 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物β多樣性的影響

應(yīng)用Jaccard相似度算法在操作分類單元(OTU)水平上對所有樣品進(jìn)行非度量多維尺度(NMDS)分析(圖1-A)，可以看出2組樣品明顯聚為2類，說明2組奶山羊的瘤胃微生物區(qū)系存在明顯差異。相似性分析(ANOSIM)結(jié)果也表明，奶山羊瘤胃微生物的結(jié)構(gòu)存在顯著差異(圖1-B，P<0.05)。

圖1 奶山羊瘤胃微生物OTU水平的非度量多維尺度分析(A)和相似性分析(B)Fig.1 NMSD analysis (A) and ANOSIM (B) of rumen microbiota at OTU level of dairy goats

2.3.3 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物組成的影響

如圖2所示，在門水平上共檢測到21個菌群，其中有20個門水平的菌群是2組奶山羊瘤胃微生物的共有菌群，1個門水平的菌群是試驗(yàn)Ⅱ組奶山羊瘤胃微生物獨(dú)有的菌群(圖2-A)；擬桿菌門(Bacteroidetes，對照組相對豐度為43.93%，試驗(yàn)Ⅱ組相對豐度為48.93%)和厚壁菌門(Firmicutes，對照組相對豐度37.77%，試驗(yàn)Ⅱ組相對豐度為36.86%)是2組奶山羊瘤胃微生物的優(yōu)勢菌門(圖2-C)。在屬水平上共檢測到163個菌群，其中有123個屬水平的菌群是2組奶山羊瘤胃微生物的共有菌群，24個屬水平的菌群是對照組組奶山羊瘤胃微生物獨(dú)有的菌群，16個屬水平的菌群是試驗(yàn)Ⅱ組奶山羊瘤胃微生物獨(dú)有的菌群(圖2-B)；2組奶山羊的優(yōu)勢菌屬是普雷沃氏菌屬1(Prevotella_1，對照組相對豐度為22.42%，試驗(yàn)Ⅱ組相對豐度19.16%)(圖2-D)。

A：門水平Venn圖 Venn diagram at phylum level；B：屬水平Venn圖 Venn diagram at genus level；C：門水平的群落結(jié)構(gòu) community structure at phylum level；D ：屬水平的群落結(jié)構(gòu) community structure at genus level。圖2 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物組成的影響Fig.2 Effects of dietary sodium acetate on rumen microbiota composition of dairy goats

2.3.4 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物差異物種的影響

如圖3所示，在屬水平上，試驗(yàn)Ⅱ組奶山羊瘤胃中的瘤胃球菌屬1(Ruminococcus_1)、瘤胃球菌科UCG-005(Ruminococcaceae_UCG-005)、普雷沃氏菌科UCG-004(Prevotellaceae_UCG-004)和Lachnoclostridium_12等4個菌群的相對豐度顯著高于對照組(P<0.05)，而瘤胃中的解琥珀酸菌屬(Succiniclasticum)和甲烷短桿菌屬(Methanobrevibacter)的相對豐度顯著低于對照組(P<0.05)。

圖3 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物差異物種的影響Fig.3 Effects of dietary sodium acetate on different species in rumen microbiota of dairy goats

2.4 奶山羊泌乳性能和瘤胃發(fā)酵參數(shù)與瘤胃微生物區(qū)系的相關(guān)性分析

如圖4所示，在本試驗(yàn)中，奶山羊日產(chǎn)奶量與瘤胃球菌科UCG-013(Ruminococcaceae_UCG-013)相對豐度呈顯著正相關(guān)(P<0.05)，與Lachnoclostridium_1相對豐度呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)；乳脂率與瘤胃球菌屬1相對豐度呈顯著正相關(guān)(P<0.05)，與瘤胃球菌科UCG-005和Lachnoclostridium_12相對豐度呈極顯著正相關(guān)(P<0.01)，與解琥珀酸菌屬相對豐度呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)，與甲烷短桿菌屬相對豐度呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)；乳蛋白率和非脂固形物含量與月形單胞菌屬1(Selenomonas_1)相對豐度呈顯著負(fù)相關(guān)(P<0.05)；另外，瘤胃中乙酸含量與瘤胃球菌科UCG-005相對豐度呈顯著正相關(guān)(P<0.05)，瘤胃中丁酸含量與瘤胃球菌科UCG-005和Lachnoclostridium_12相對豐度呈極顯著負(fù)相關(guān)(P<0.01)。

*表示P<0.05，**表示P<0.01。* mean P<0.05,and ** mean P<0.01.圖4 奶山羊泌乳性能和瘤胃發(fā)酵參數(shù)與瘤胃微生物區(qū)系的關(guān)聯(lián)熱圖Fig.4 Heat map of correlations between lactation performance &rumen fermentation parameters and rumen microbiota of dairy goats

3 討 論

3.1 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊泌乳性能的影響

乙酸是胃腸道微生物發(fā)酵的主要產(chǎn)物之一，其不僅作為乳脂合成的前體物質(zhì)直接參與乳腺內(nèi)脂肪酸的從頭合成，而且還作為信號分子調(diào)節(jié)乳腺脂肪酸代謝，進(jìn)而調(diào)控乳脂的合成[13]。研究表明，在泌乳奶牛飼糧中添加2-羥基-4-丁酸和乙酸鹽可以提高牛奶中乳蛋白和乳脂的含量[14-15]，本試驗(yàn)與此結(jié)果一致。Matamoros等[11]研究也發(fā)現(xiàn)，在奶牛飼糧中添加3.25%乙酸鹽顯著提高了牛奶中的乳脂含量。Ali等[16]在牛乳腺上皮細(xì)胞中的研究發(fā)現(xiàn)，乙酸鹽和β-羥基丁酸鹽以劑量依賴性的方式促進(jìn)胞漿甘油三酯的合成及脂滴的形成。進(jìn)一步的研究結(jié)果表明，乙酸鹽可通過哺乳動物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/真核細(xì)胞起始因子4E(eIF4E)信號通路以劑量依賴性的方式增加奶牛乳腺上皮細(xì)胞中的乳脂合成[17]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼糧添加乙酸鈉后不僅促進(jìn)了奶山羊乳脂的合成，也提高了奶山羊的日產(chǎn)奶量，試驗(yàn)Ⅰ組和試驗(yàn)Ⅱ組日產(chǎn)奶量分別提高了0.29和0.22 kg/d。根據(jù)某地山羊奶收購價為6元/kg，購買的乙酸鈉價格為8元/kg，因此經(jīng)濟(jì)效益分別增加了1.50和0.84元/(頭·d)。乳脂率和非脂固體物含量的增加，可能是由于飼糧添加乙酸鈉增加了乳腺中乳脂前體物的供應(yīng)，從而促進(jìn)了乳腺乳脂的從頭合成。另外，還有研究表明乙酸鹽可以通過組蛋白乙?；龠M(jìn)脂質(zhì)合成基因表達(dá)，Hsieh等[18]研究發(fā)現(xiàn)葡萄糖饑餓能誘導(dǎo)組蛋白乙?；拈_關(guān)，從而激活糖異生和脂肪代謝基因的表達(dá)。但是，在反芻動物中是否也同樣存在這種調(diào)控機(jī)制，仍有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

3.2 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響

瘤胃pH是反映瘤胃發(fā)酵參數(shù)的重要指標(biāo)，主要受飼糧組成的影響，并且在發(fā)酵模式和微生物區(qū)系中發(fā)揮著關(guān)鍵作用[19]，其正常變化在5.5～7.5。本研究中，對照組和試驗(yàn)Ⅱ組奶山羊瘤胃液pH分別為6.63和6.96，均在正常范圍內(nèi)，這表明飼糧添加乙酸鈉對瘤胃微生物發(fā)酵狀態(tài)沒有影響。瘤胃VFA是反芻動物的主要能量來源，主要包括乙酸、丙酸和丁酸等，可為機(jī)體氧化供能或用于脂質(zhì)合成[20]。本試驗(yàn)中，飼糧添加乙酸鈉后發(fā)現(xiàn)奶山羊瘤胃乙酸和丙酸含量有所提高，瘤胃丁酸含量極顯著降低。乙酸含量增加的原因可能是因?yàn)橐宜徕c改善了瘤胃發(fā)酵，促進(jìn)了碳水化合物在瘤胃中的降解[21]。梁勝男等[22]研究發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)丁酸的細(xì)菌主要是厚壁菌門，本研究中，丁酸含量降低可能是由于厚壁菌門細(xì)菌數(shù)量減少所致。

3.3 飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物區(qū)系的影響

大量研究結(jié)果表明，厚壁菌門和擬桿菌門是反芻動物和部分單胃動物腸道內(nèi)主要的優(yōu)勢菌門。郭文杰等[23]和李永洙等[24]研究發(fā)現(xiàn)，牦牛和山羊腸道內(nèi)的優(yōu)勢菌門均為厚壁菌門和擬桿菌門，與本研究結(jié)果一致。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼糧添加乙酸鈉提高了奶山羊瘤胃擬桿菌門等的相對豐度，降低了厚壁菌門、變形菌門(Proteobacteria)和放線菌門(Actinobacteria)等的相對豐度，但差異不顯著。研究發(fā)現(xiàn)，擬桿菌門是促進(jìn)動物利用碳水化合物的最主要菌群，厚壁菌門是促進(jìn)動物胃腸道微生物分解纖維素的最主要菌群[25-26]，由此說明，飼糧添加乙酸鈉可能增加了擬桿菌門內(nèi)分解碳水化合物的菌群。本研究還發(fā)現(xiàn)，普雷沃氏菌屬1是奶山羊瘤胃微生物中相對豐度最高的菌屬，這與Petri等[27]和逄賓賓等[28]的研究結(jié)果一致。普雷沃氏菌屬屬于擬桿菌門，在瘤胃中分布廣泛、數(shù)量多，包括半纖維素分解菌和蛋白分解菌，可降解植物性半纖維素、蛋白質(zhì)和非纖維多糖等，并參與多種微生物代謝[29]。本研究中，試驗(yàn)Ⅱ組奶山羊瘤胃中的瘤胃球菌屬1、瘤胃球菌科UCG-005、普雷沃氏菌科UCG-004和Lachnoclostridium_12的相對豐度顯著高于對照組，而瘤胃解琥珀酸菌屬和甲烷短桿菌屬的相對豐度顯著低于對照組。Pan等[30]研究發(fā)現(xiàn)，瘤胃球菌屬1與乙酸產(chǎn)生有關(guān)，瘤胃球菌科UCG-005屬于瘤胃球菌科(Ruminococcaceae)的一個亞型。Nava等[31]研究發(fā)現(xiàn)，瘤胃球菌科具有許多有益的生理功能，包括加強(qiáng)腸道屏障功能和免疫調(diào)節(jié)。而普雷沃氏菌科UCG-004屬于擬桿菌門，胡丹丹等[32]研究發(fā)現(xiàn)擬桿菌門含有豐富的水解淀粉蛋白，可以起到高效降解纖維素的作用。解琥珀酸菌屬不發(fā)酵碳水化合物、氨基酸或單、雙及三羧酸，琥珀酸是其唯一能發(fā)酵的底物，并且只產(chǎn)生丙酸。微生物在瘤胃發(fā)酵過程中會產(chǎn)生大量的氣體(如二氧化氮和氫氣)，甲烷短桿菌屬是一種含有氫營養(yǎng)古菌屬，能將體內(nèi)的二氧化碳通過大量氫氣還原為甲烷，并參與生產(chǎn)不飽和脂肪酸，但利用率較低[33]。由此說明，飼糧添加乙酸鈉可增加奶山羊瘤胃中有益微生物的數(shù)量，促進(jìn)碳水化合物的分解。綜上可知，飼糧添加乙酸鈉可以提高奶山羊瘤胃中瘤胃球菌屬1、瘤胃球菌科UCG-005和普雷沃氏菌科UCG-004等產(chǎn)短鏈脂肪酸微生物的相對豐度，并降低甲烷短桿菌屬的豐度從而降低甲烷排放。

3.4 奶山羊泌乳性能和瘤胃發(fā)酵參數(shù)與瘤胃微生物區(qū)系的相關(guān)性分析

在反芻動物的瘤胃中，占比最高的VFA是乙酸，其生成受到瘤胃微生物的調(diào)節(jié)作用，本研究發(fā)現(xiàn)，奶山羊瘤胃乙酸含量與瘤胃球菌科UCG-005相對豐度呈顯著正相關(guān)。大量研究發(fā)現(xiàn)，反芻動物中瘤胃微生物組成和豐度與乳脂率密切相關(guān)[34-36]。瘤胃微生物將攝入的碳水化合物發(fā)酵形成VFA，其中大部分乙酸被瘤胃上皮細(xì)胞吸收進(jìn)入血液，經(jīng)三羧酸循環(huán)作用合成脂肪酸，為乳腺合成乳脂提供前體物，并最終影響乳脂含量的高低[37]。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧添加乙酸鈉對奶山羊瘤胃微生物組成和結(jié)構(gòu)有一定的影響，這與Liu等[38]研究發(fā)現(xiàn)外源添加支鏈短鏈脂肪酸可以促進(jìn)犢牛瘤胃發(fā)酵的結(jié)果一致。Song等[39]研究表明，乙酸及其他短鏈脂肪酸與瘤胃微生物之間的關(guān)系是相輔相成的，前者既可以促進(jìn)有益菌群的生長，同時這些有益菌群的增長也會刺激乙酸等合成的增加。研究表明，瘤胃球菌屬1、瘤胃球菌科UCG-005和Lachnoclostridium_12均具有產(chǎn)生短鏈脂肪酸的能力[40-43]。本研究結(jié)果也表明，奶山羊瘤胃中這3種菌相對豐度均與乳脂率呈正相關(guān)，且解琥珀酸菌屬和甲烷短桿菌屬相對豐度與乳脂率呈負(fù)相關(guān)。以上結(jié)果表明，乙酸鈉對奶山羊泌乳性能的提高作用可能部分是通過調(diào)控瘤胃微生物區(qū)系來實(shí)現(xiàn)的，然而具體是何種微生物發(fā)揮主要作用及其影響泌乳性能的機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié) 論

飼糧添加60 g/(d·頭)乙酸鈉可顯著提高奶山羊日產(chǎn)奶量和乳脂率，顯著降低瘤胃丁酸含量，并通過改善瘤胃微生物組成和結(jié)構(gòu)提升奶山羊泌乳性能。