飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)、腸道組織形態(tài)及盲腸菌群的影響

方紫依 徐百昌 蒙錦燕 崔慶含 李泓漫 司紅彬

(廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，南寧 530004)

我國(guó)是畜牧業(yè)大國(guó)，飼料需求量大且增長(zhǎng)迅速，然而我國(guó)的飼料原料尤其是蛋白質(zhì)原料大量依賴進(jìn)口，“人畜爭(zhēng)糧”問(wèn)題凸顯，開(kāi)發(fā)非常規(guī)的飼料資源是解決這一問(wèn)題的重要手段。雜交構(gòu)樹(shù)(Broussonetiapapyrifera)在我國(guó)擁有廣泛的種植面積，雜交構(gòu)樹(shù)營(yíng)養(yǎng)成分豐富并且降解率高，是一種高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的木本飼料原料[1]。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部已將雜交構(gòu)樹(shù)納入《飼料原料目錄》并允許其用于替代豬、雞飼糧中的部分豆粕。此外，構(gòu)樹(shù)葉是一種傳統(tǒng)的中草藥，《本草綱目》中記載，構(gòu)樹(shù)葉有涼血、利水的功效，可用于治療吐血、血崩外傷出血、水腫、疝氣、痢疾、癬瘡等病癥。現(xiàn)代藥理研究證實(shí)構(gòu)樹(shù)及其提取物具有抑菌、抗炎、抗氧化、增強(qiáng)免疫力、調(diào)節(jié)血糖和血脂等功效[2]。已經(jīng)研究證明構(gòu)樹(shù)葉對(duì)腸道健康具有一定的保護(hù)效果。唐亮[3]報(bào)道了在飼糧中添加一定比例的構(gòu)樹(shù)葉粉能降低生長(zhǎng)豬的腹瀉率、腹瀉頻率及腹瀉指數(shù)。研究發(fā)現(xiàn)構(gòu)樹(shù)葉提取物對(duì)多種腸道致病菌都具有一定的體外抑制效果[4]，并且在飼糧中添加構(gòu)樹(shù)葉可以在一定程度上改善柔嫩艾美耳球蟲(chóng)造成的雞腸道出血和腸屏障損傷[5]。廣西三黃雞作為我國(guó)重要的地方品種，在廣西大范圍養(yǎng)殖，同時(shí)廣西擁有豐富的雜交構(gòu)樹(shù)資源，因此在飼糧中添加適宜比例的雜交構(gòu)樹(shù)葉不僅可以降低三黃雞的養(yǎng)殖成本，還能合理地開(kāi)發(fā)和利用雜交構(gòu)樹(shù)資源。本試驗(yàn)通過(guò)在基礎(chǔ)飼糧中添加不同比例的雜交構(gòu)樹(shù)葉，研究其對(duì)廣西三黃雞生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)、免疫性能、腸道組織形態(tài)和盲腸菌群的影響，以確定雜交構(gòu)樹(shù)葉在三黃雞飼糧中的添加比例，為雜交構(gòu)樹(shù)葉在畜禽生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)所用基礎(chǔ)飼糧由廣西某飼料有限公司提供；雜交構(gòu)樹(shù)葉購(gòu)自廣西某農(nóng)民專業(yè)合作社，新鮮雜交構(gòu)樹(shù)葉自然晾干后粉碎過(guò)40目篩制成雜交構(gòu)樹(shù)葉粉，經(jīng)檢測(cè)其營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 雜交構(gòu)樹(shù)葉粉營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Nutrient levels of Broussonetia papyrifera leaf powder (air-dry basis) %

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取120只健康的1日齡廣西三黃雞，隨機(jī)分成4個(gè)組，每個(gè)組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。A組為對(duì)照組，飼喂不添加雜交構(gòu)樹(shù)葉的基礎(chǔ)飼糧，基礎(chǔ)飼糧營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表2。B、C、D組分別在基礎(chǔ)飼糧中添加3%、6%和9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉粉。試驗(yàn)期為21 d，試驗(yàn)期間雞只自由采食、飲水，按常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫接種。

表2 基礎(chǔ)飼糧營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 2 Nutrient levels of the basal diet (air-dry basis) %

1.3 檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1 生長(zhǎng)性能

每天對(duì)雛雞以重復(fù)為單位進(jìn)行空腹稱重，準(zhǔn)確記錄雛雞的體重和日采食量，計(jì)算各組平均日增重(g/d)、平均日采食量(g/d)和料重比(平均日采食量/平均日增重)。

1.3.2 血清生化指標(biāo)

試驗(yàn)第21天從每個(gè)重復(fù)分別選取5只體重接近平均體重的健康雞，記錄體重，頸靜脈采血，血樣室溫靜置1 h后3 000 r/min離心10 min分離血清。按照試劑盒(購(gòu)自南京建成生物工程研究所)說(shuō)明，采用全自動(dòng)血清生化儀測(cè)定血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)活性與甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量。

1.3.3 免疫器官指數(shù)

試雞采血后分離脾臟、法氏囊、胸腺并稱重，計(jì)算免疫器官指數(shù)。

免疫器官指數(shù)(%)=(免疫器官重量/體重)×100。

1.3.4 腸道組織形態(tài)

分別采集1～2 cm的十二指腸、空腸、回腸腸段，置于10%的福爾馬林固定液中。將固定完全的腸道組織經(jīng)過(guò)切塊、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、制片、染色等一系列處理后，觀察小腸黏膜結(jié)構(gòu)，用Leica Qwin圖像分析系統(tǒng)測(cè)量絨毛高度(villous height,VH)和隱窩深度(crypt depth,CD)，并計(jì)算二者的比值即絨隱比(V/C)。

1.3.5 盲腸菌群

采集2 g左右盲腸內(nèi)容物于滅菌后的2 mL離心管中，液氮封存，隨后轉(zhuǎn)移至-80 ℃冰箱備用。分別從A組中選擇3份、C組中選擇6份盲腸內(nèi)容物樣品，選擇16S rDNA的通用引物338F(5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3’)和806R(5’-GGACTACHVGGGTWTCTAAT-3’)擴(kuò)增V3～V4高變區(qū)，由上海美吉生物醫(yī)藥科技有限公司進(jìn)行16S rDNA測(cè)序。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示，采用SPSS 20.0進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANVOA)，以P<0.05表示差異顯著，P>0.05表示差異不顯著。差異顯著時(shí)采用Tukey HSD法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 生長(zhǎng)性能

由表3可知，與對(duì)照組相比，添加3%～9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)1～21日齡廣西三黃雞的平均日采食量無(wú)顯著影響(P>0.05)，但是添加9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉會(huì)顯著增加料重比(P<0.05)，并顯著降低平均日增重(P<0.05)。

表3 飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞生長(zhǎng)性能的影響Table 3 Effects of dietary Broussonetia papyrifera leaves on growth performance of Guangxi Sanhuang chickens

2.2 血清生化指標(biāo)

由表4可知，與對(duì)照組相比，添加3%～9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)1～21日齡廣西三黃雞血清中AST活性與TG、TC、HDL-C、LDL-C含量均無(wú)顯著影響(P>0.05)，但是添加9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉會(huì)顯著提高血清中ALT活性(P<0.05)，提示添加過(guò)高比例的雜交構(gòu)樹(shù)葉可能對(duì)廣西三黃雞的肝功能造成一定的負(fù)面影響。

表4 飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞血清生化指標(biāo)的影響Table 4 Effects of dietary Broussonetia papyrifera leaves on serum biochemical indexes of Guangxi Sanhuang chickens

2.3 免疫器官指數(shù)

由表5可知，與對(duì)照組相比，添加3%～9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞的胸腺指數(shù)無(wú)顯著影響(P>0.05)，添加6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉可以顯著提高法氏囊指數(shù)(P<0.05)，而添加9%雜交構(gòu)樹(shù)葉則會(huì)顯著降低脾臟指數(shù)(P<0.05)。

表5 飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞免疫器官指數(shù)的影響Table 5 Effects of dietary Broussonetia papyrifera leaves on immune organ indexes of Guangxi Sanhuang chickens %

2.4 腸道組織形態(tài)

由表6可知，與對(duì)照組相比，添加3%～9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞的十二指腸、空腸、回腸絨毛高度、隱窩深度以及絨隱比均無(wú)顯著影響(P>0.05)。

表6 飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞腸道組織形態(tài)的影響Table 6 Effects of dietary Broussonetia papyrifera leaves on intestinal morphology of Guangxi Sanhuang chickens

2.5 盲腸菌群

2.5.1 盲腸菌群測(cè)序結(jié)果分析

如圖1所示，隨著測(cè)序深度與樣本量的增加，樣本稀釋曲線均趨于平坦，結(jié)合測(cè)序覆蓋深度均在0.99以上，表明本次的測(cè)序深度能基本覆蓋群體的微生物多樣性，滿足后續(xù)分析要求。

圖1 稀釋曲線Fig.1 Rarefaction curve

2.5.2 盲腸菌群Alpha多樣性指數(shù)分析

表7展示了盲腸菌群的Alpha多樣性，其中Sobs和Chao指數(shù)可以反映微生物群落的豐富度，Shannon和Simpson指數(shù)可以反映微生物群落的多樣性。與A組相比，C組的Sobs、Shannon、Simpson、Chao指數(shù)均有變化，但是差異均不顯著(P>0.05)。

表7 Alpha多樣性指數(shù)Table 7 Alpha-diversity indexes

2.5.3 盲腸菌群結(jié)構(gòu)分析

在門(mén)水平上，A組和C組盲腸中主要菌群均為厚壁菌門(mén)(Firmicutes)、擬桿菌門(mén)(Bacteroidota)、放線菌門(mén)(Actinobacteria)和脫硫桿菌門(mén)(Desulfobacterota)；與A組相比，C組Firmicutes、Bacteroidota的比例升高，Actinobacteriota和Desulfobacterota的比例降低。在屬水平上，A組盲腸中優(yōu)勢(shì)菌群主要是歐氏菌屬(Olsenella，31.99%)、擬桿菌屬(Bacteroides，13.50%)、糞桿菌屬(Faecalibacterium，7.31%)、理研菌科RC9腸道群(Rikenellaceae_RC9_gut_group，6.99%)、另枝菌屬(Alistipes，6.57%)、瘤胃球菌屬扭鏈群(Ruminococcus_torques_group，4.80%)、norank_f_norank_o_Clostridia_UCG-014(3.44%)和巴恩斯氏菌屬(Barnesiella，3.06%)等；而C組盲腸中優(yōu)勢(shì)菌群主要是Alistipes(27.69%)、Ruminococcus_torques_group(15.23%)、乳桿菌屬(Lactobacillus，8.41%)、Bacteroides(7.51%)、Barnesiella(6.57%)、Faecalibacterium(6.56%)和Olsenella(2.73%)等。

圖2 盲腸菌群物種組成(A：門(mén)水平；B：屬水平)Fig.2 Species composition of cecal microflora (A:phylum level;B:genus level)

2.5.4 盲腸菌群在屬水平上的差異物種

由圖3可以看出，在屬水平上，與A組相比，C組的Olsenella、Rikenellaceae_RC9_gut_group、norank_f_norank_o_Gastranaerophilales、norank_f_norank_o_RF39、脫硫弧菌屬(Desulfovibrio)、norank_f_norank_o_Rhodospirillales的比例顯著降低(P<0.05)，同時(shí)Alistipes、Lactobacillus、Sellimonas、Negativibacillus、厭氧棒狀菌屬(Anaerostipes)的比例顯著升高(P<0.05)。

圖3 盲腸菌群在屬水平上的差異物種Fig.3 Different species at genus level of cecal microflora

3 討 論

3.1 飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞生長(zhǎng)性能的影響

目前構(gòu)樹(shù)的主要加工方式為直接干燥粉碎和青貯發(fā)酵，與干燥粉碎后直接飼喂相比較，青貯發(fā)酵需要更為專業(yè)的設(shè)備和條件控制，其中不同菌種的選擇和發(fā)酵條件對(duì)發(fā)酵品質(zhì)影響很大，且不利于長(zhǎng)時(shí)間保存[6]。向飼糧中添加適當(dāng)比例的構(gòu)樹(shù)葉粉，不僅可為家畜提供優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)，還可替代部分飼料原料，有效控制養(yǎng)殖成本、提高養(yǎng)殖效益[1]。李艷芝[7]發(fā)現(xiàn)添加0.5%、1%、1.5%、2%的構(gòu)樹(shù)葉對(duì)產(chǎn)蛋中期和后期蛋雞采食量和料蛋比的影響差異不顯著，但可以提高產(chǎn)蛋率和蛋重。吳健平等[8]對(duì)35日齡的雌性良鳳花肉雞進(jìn)行為期36 d的飼喂試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)添加2%～6%的構(gòu)樹(shù)葉粉對(duì)良鳳花肉雞的生長(zhǎng)性能(平均日采食量、平均日增重和料重比)無(wú)顯著影響。以上研究結(jié)果說(shuō)明在家禽飼糧中添加一定比例的構(gòu)樹(shù)葉是可行的。在本研究中，飼糧中添加3%～6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響，而添加量增加到9%則會(huì)顯著增加料重比、顯著降低平均日增重；隨著雜交構(gòu)樹(shù)葉添加比例的增高，廣西三黃雞的平均日增重及平均日采食量有所降低，可能是過(guò)高比例的添加影響了飼糧的適口性，且直接添加的雜交構(gòu)樹(shù)葉中含有單寧等抗?fàn)I養(yǎng)因子，進(jìn)而影響了家禽的采食和消化吸收。

3.2 飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)是反映動(dòng)物機(jī)體物質(zhì)代謝和某些組織器官機(jī)能變化的重要指標(biāo)，其中TG、TC、HDL-C、LDL-C與機(jī)體血脂水平有關(guān)，其含量高低反映機(jī)體脂類吸收和代謝狀況；ALT、AST活性可以反映肝臟合成分解代謝蛋白質(zhì)的能力以及肝臟健康狀況。研究顯示，飼糧中添加2%～6%構(gòu)的樹(shù)葉粉對(duì)良鳳花肉雞血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量無(wú)顯著影響，但與對(duì)照組相比TG含量有不同程度的降低[8]，本研究結(jié)果與上述報(bào)道一致。在蛋雞中也發(fā)現(xiàn)添加1.5%、2%的構(gòu)樹(shù)葉可以顯著降低血清TG含量，并且對(duì)于TC、HDL-C、LDL-C含量也有不同程度的改善作用[7]。在營(yíng)養(yǎng)性肥胖小鼠模型中也發(fā)現(xiàn)添加5%的構(gòu)樹(shù)葉可以顯著改善脂質(zhì)代謝，緩解肝臟脂肪變性，減少脂肪在肝臟內(nèi)的蓄積，改善肝臟功能[9]，說(shuō)明添加構(gòu)樹(shù)葉可以改善脂質(zhì)代謝。此外，飼糧中添加3%～6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞血清中ALT、AST活性無(wú)顯著影響，而添加9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉則會(huì)提高血清中ALT活性，提示添加過(guò)高比例的雜交構(gòu)樹(shù)葉可能對(duì)廣西三黃雞的肝功能造成潛在的損傷。

3.3 飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞免疫器官指數(shù)的影響

免疫器官指數(shù)在一定程度上可以反映免疫器官發(fā)育狀況和機(jī)體的免疫水平。胸腺和法氏囊是禽類主要的中樞免疫器官，胸腺是T淋巴細(xì)胞發(fā)育和成熟的主要場(chǎng)所，主要參與機(jī)體的細(xì)胞免疫；法氏囊是B淋巴細(xì)胞發(fā)育和成熟的主要場(chǎng)所，主要參與機(jī)體的體液免疫；脾臟是禽類的外周免疫器官，是進(jìn)行體液免疫反應(yīng)和細(xì)胞免疫反應(yīng)的主要場(chǎng)所。構(gòu)樹(shù)葉中含有多糖、木脂素類、生物堿類、萜類化合物等多種生物活性物質(zhì)，具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力等作用效果[10-11]。研究表明，添加1.5%～2%的構(gòu)樹(shù)葉對(duì)21日齡雛雞胸腺、脾臟和法氏囊指數(shù)均有一定的提高作用，但是差異不顯著；隨著雛雞飼喂時(shí)間的延長(zhǎng)，尤其是49日齡后，免疫器官指數(shù)顯著升高[7]。左鑫[12]發(fā)現(xiàn)，添加不同比例(3%、6%、9%、12%、15%)構(gòu)樹(shù)枝葉粉對(duì)馬岡鵝的免疫器官指數(shù)也有不同程度的提高作用。本試驗(yàn)中，飼糧中添加3%～6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉均可以在一定程度上提高廣西三黃雞的胸腺和法氏囊指數(shù)，且當(dāng)添加比例為6%時(shí)可顯著提高法氏囊指數(shù)，可能是因?yàn)殡s交構(gòu)樹(shù)葉中的多糖等活性成分促進(jìn)了法氏囊的發(fā)育。

3.4 飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞腸道組織形態(tài)的影響

小腸是畜禽食物消化、吸收的主要部位，也是重要的免疫和內(nèi)分泌器官，主要包括十二指腸、空腸、回腸3段。腸道結(jié)構(gòu)的完整是其發(fā)揮消化吸收、屏障功能的基礎(chǔ)，其中絨毛高度、隱窩深度及絨隱比是反映腸道結(jié)構(gòu)完整性和評(píng)價(jià)小腸消化吸收能力的重要指標(biāo)。左鑫[12]證明了添加構(gòu)樹(shù)枝葉粉對(duì)鵝腸道發(fā)育有積極作用，添加3%～15%的構(gòu)樹(shù)枝葉粉對(duì)鵝各腸段(十二指腸、空腸、回腸)隱窩深度無(wú)顯著影響。與上述報(bào)道類似，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，飼糧中添加3%～9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞的腸道組織形態(tài)均無(wú)不利影響。

3.5 飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞盲腸菌群的影響

腸道菌群結(jié)構(gòu)與動(dòng)物體的生長(zhǎng)性能、免疫能力以及營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收等直接相關(guān)。在本研究中發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉后，廣西三黃雞盲腸中Firmicutes和Bacteroidota的比例升高，這2種菌門(mén)是雞盲腸的優(yōu)勢(shì)菌門(mén)，前者是主要的產(chǎn)丁酸菌，丁酸可以增強(qiáng)腸道的緊密連接，保護(hù)腸道屏障的完整；后者具有酵解難以分解的多糖、粗纖維等功能，能夠促進(jìn)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化和吸收[13]；同時(shí)，飼糧中添加雜交構(gòu)樹(shù)葉還可以降低盲腸中有害菌群如Actinobacteriota和Desulfobacterota的比例。

進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，在屬水平上，飼糧中添加6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉使廣西三黃雞盲腸中Olsenella、Rikenellaceae_RC9_gut_group、norank_f_norank_o_Gastranaerophilales、norank_f_norank_o_RF39、Desulfovibrio、norank_f_norank_o_Rhodospirillales的比例顯著降低。Olsenella和norank_f_norank_o_RF39比例與體重增加呈負(fù)相關(guān)[14-15]，而在本試驗(yàn)中飼糧中添加6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉后平均日增重卻有所下降，推測(cè)可能是直接添加雜交構(gòu)樹(shù)葉降低了飼糧的適口性以及雜交構(gòu)樹(shù)葉中的抗?fàn)I養(yǎng)因子影響了廣西三黃雞的消化吸收；Rikenellaceae_RC9_gut_group與高脂飲食引起的“有害指標(biāo)”呈正相關(guān)，與“有益指標(biāo)”呈負(fù)相關(guān)[16]。norank_f_norank_o_Gastranaerophilales被報(bào)道與糖尿病有關(guān)，在糖尿病小鼠的糞便中該菌的數(shù)量顯著增多[17]；Desulfovibrio是典型的硫酸鹽還原菌，該菌可以降解短鏈脂肪酸和氨基酸等物質(zhì)產(chǎn)生硫化氫，進(jìn)而引起上皮細(xì)胞的損傷[18]。norank_f_norank_o_Rhodospirillales在肝郁脾虛患者糞便中豐度明顯偏高[19]，也有研究表明該菌和蛋白質(zhì)的分解以及氨基酸的合成有關(guān)[20]。通過(guò)添加雜交構(gòu)樹(shù)葉可以減少上述可能會(huì)損害腸道健康的菌群的數(shù)量。

同時(shí)，飼糧中添加6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉后，廣西三黃雞盲腸中Alistipes、Lactobacillus、Sellimonas、Negativibacillus、Anaerostipes的比例顯著升高。其中Alistipes、Lactobacillus和Anaerostipes是產(chǎn)生短鏈脂肪酸的常見(jiàn)腸道菌群，產(chǎn)生的乙酸等可以降低腸道的pH，從而抑制腸道有害菌的生長(zhǎng)，促進(jìn)有益菌的生長(zhǎng)，起到調(diào)節(jié)腸道功能的作用[21-23]。研究表明Lactobacillus可作為免疫增強(qiáng)劑提高雞法氏囊B淋巴細(xì)胞的增殖活性，加快法氏囊的發(fā)育成熟，從而提高法氏囊指數(shù)[24]。Negativibacillus被報(bào)道與日增重呈正相關(guān)，并且可能和免疫力相關(guān)[25-26]，而飼喂添加6%雜交構(gòu)樹(shù)葉飼糧的廣西三黃雞的體重并沒(méi)有明顯的增加，推測(cè)可能是雜交構(gòu)樹(shù)葉的添加降低了飼糧的適口性及其所含的抗?fàn)I養(yǎng)因子影響了機(jī)體的消化吸收。此外，在本研究中發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉后廣西三黃雞盲腸中Sellimonas的比例也顯著增加，該菌的豐度在添加復(fù)合益生菌的雛雞盲腸中也增加[27]，但是其具體的功能還不清楚?？傮w來(lái)說(shuō)，飼糧中添加6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉增加了廣西三黃雞腸道中益生菌的數(shù)量，抑制了有害菌的增殖，調(diào)節(jié)了腸道菌群的結(jié)構(gòu)，能夠更好地維持腸道健康。

4 結(jié) 論

綜上所述，飼糧中添加3%～6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉對(duì)廣西三黃雞的生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)和腸道組織形態(tài)無(wú)顯著影響；添加6%的雜交構(gòu)樹(shù)葉可以顯著提高廣西三黃雞的法氏囊指數(shù)，改善盲腸菌群結(jié)構(gòu)，在提高部分有益菌數(shù)量的同時(shí)抑制有害菌增殖；添加9%的雜交構(gòu)樹(shù)葉則會(huì)提高血清中ALT活性，提示添加過(guò)高比例的雜交構(gòu)樹(shù)葉可能對(duì)廣西三黃雞的肝功能造成一定的損傷?；诒狙芯拷Y(jié)果，推薦廣西三黃雞飼糧中雜交構(gòu)樹(shù)葉的添加比例為6%。