賈倩 吳曉 錢可峰 蔡義忠 葉榮建
(1 中國(guó)種子集團(tuán)有限公司生命科學(xué)技術(shù)中心,武漢 430206;2 作物育種技術(shù)創(chuàng)新與集成國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,武漢 430206;3 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)作物遺傳改良國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,武漢 430070;4 豐疆智能科技股份有限公司,武漢 430073;第一作者:jiaqian@sinochem.com;*通訊作者:yerongjian@sinochem.com)
秈稻作為我國(guó)南方主要水稻類型,其種植面積和產(chǎn)量大約占全國(guó)稻谷的三分之二[1-2]。我國(guó)秈稻主產(chǎn)省份是湖南、江西、湖北、四川、廣東和廣西,安徽和江蘇為秈稻、粳稻混種區(qū)。
近年來,隨著經(jīng)濟(jì)發(fā)展和人民生活水平的提高,優(yōu)質(zhì)稻米越來越受到市場(chǎng)的青睞。然而,稻米食味品質(zhì)受品種、產(chǎn)地、種植、收獲及儲(chǔ)藏加工等諸多因素的影響[3-5],加上不同地域消費(fèi)者對(duì)于米飯的食味要求有所不同,使得優(yōu)質(zhì)稻米早期選育階段更為復(fù)雜。目前稻米食味品質(zhì)的評(píng)價(jià)方法主要以感官評(píng)價(jià)法為主,其次是理化指標(biāo)間接評(píng)價(jià)法和儀器評(píng)價(jià)法[6-7]。理化指標(biāo)間接評(píng)價(jià)可以快速測(cè)定品種食味品質(zhì)的好壞,但與真實(shí)值有一定差距。感官評(píng)價(jià)法可以對(duì)稻米食味品質(zhì)進(jìn)行最直觀的評(píng)價(jià),但具有一定的主觀性且操作繁瑣,需要專業(yè)的品嘗員,難以實(shí)現(xiàn)育種材料的規(guī)模篩選。
米飯食味計(jì)具有用量少、易操作、結(jié)果重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn),已被廣泛應(yīng)用于稻米食味品質(zhì)評(píng)價(jià)等研究[8]??焖僬扯葴y(cè)定儀(Rapid Viscosity Analyzer,RVA)特征譜,能很好的反應(yīng)淀粉粘度特性,其應(yīng)用更加豐富了稻米食味品質(zhì)測(cè)定的技術(shù)手段[9-10]。相對(duì)于人工品嘗法,米飯食味計(jì)和RVA 由于可以進(jìn)行批量分析,在優(yōu)質(zhì)稻米早期選育階段具有很好的應(yīng)用價(jià)值。因此,根據(jù)稻米食味的理化指標(biāo)及食味測(cè)定值、RVA 譜特征值來綜合評(píng)價(jià)稻米食味品質(zhì)是高效、可行的[11]。
由于光照、溫度及栽培條件不同,我國(guó)不同地域培育的秈稻品種品質(zhì)存在較大差異[12]。目前利用不同地域秈稻品種為材料對(duì)稻米理化指標(biāo)、RVA 譜特征值及食味品質(zhì)特性進(jìn)行系統(tǒng)研究的報(bào)道尚少,將各省份秈稻進(jìn)行同時(shí)比較的研究也不多。鑒于此,本研究收集了廣西、廣東、湖北、湖南、四川、江西等6 個(gè)秈稻主產(chǎn)省的93 份稻谷樣品,對(duì)其加工品質(zhì)(整精米率、糙米率)、外觀品質(zhì)(粒長(zhǎng)、粒寬、長(zhǎng)寬比、堊白粒率、堊白度)、蒸煮品質(zhì)(直鏈淀粉含量、堿消值、膠稠度)、蛋白質(zhì)含量、RVA 譜特征值以及米飯食味進(jìn)行測(cè)定,分析各品質(zhì)指標(biāo)的差異、相關(guān)性以及RVA 譜特征值對(duì)稻米食味品質(zhì)的影響,旨在了解我國(guó)不同地區(qū)秈稻品種的品質(zhì)性狀,為育種工作選擇出適合不同地區(qū)的優(yōu)質(zhì)秈稻品種提供理論依據(jù)。
以近年中國(guó)種子集團(tuán)有限公司收集的93 份秈稻品種樣品(雜交稻78 份,常規(guī)稻15 份)為分析材料,涉及廣東(13 份)、廣西(19 份)、江西(11 份)、湖南(18份)、湖北(19 份)和四川(13 份)6 個(gè)省。具體樣品信息見表1。
表1 6 個(gè)秈稻主產(chǎn)省收集的93 份樣品信息
用到的儀器和設(shè)備有JLG-Ⅲ型礱谷機(jī)(成都糧食研究所)、Pearlest 型碾米機(jī)(日本Kett)、SC-E 型大米外觀品質(zhì)判定儀(杭州萬深)、UV-1800 紫外分光光度計(jì)(日本島津)、CT410 旋風(fēng)磨100 目(瑞典FOSS)、RVA-TecMaster 快速黏度分析儀(瑞典波通公司)、STA1B 型米飯食味計(jì)(日本佐竹公司)、BSA124S-CW分析天平(德國(guó)Sartorius)、DA7250 近紅外谷物分析儀(瑞典波通公司)。
1.3.1 加工品質(zhì)
糙米率、精米率和整精米率,參照NY/T 83-2017《米質(zhì)測(cè)定方法》進(jìn)行測(cè)定。
1.3.2 外觀品質(zhì)
外觀品質(zhì)測(cè)定項(xiàng)目包括粒長(zhǎng)、粒寬、長(zhǎng)寬比、堊白粒率、堊白度和透明度,參照NY/T 2334-2013《稻米整精米率、粒型、堊白粒率、堊白度及透明度的測(cè)定圖像法》進(jìn)行測(cè)定。
1.3.3 理化指標(biāo)
直鏈淀粉含量測(cè)定參照GB/T 15683-2008《大米直鏈淀粉含量的測(cè)定》;膠稠度測(cè)定參照GB/T 22294-2008《糧油檢驗(yàn)大米膠稠度的測(cè)定》;堿消值測(cè)定參照NY 147-88《米質(zhì)測(cè)定方法》;利用瑞典波通公司的DA7250 近紅外谷物分析儀對(duì)蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3 次,取平均值。
1.3.4 RVA 譜特征值
RVA 譜特征值的測(cè)定參照GB/T 24852-2010《大米及米粉糊化特性測(cè)定快速粘度儀法》。開啟快速粘度分析儀電源,預(yù)熱30 min,稱取樣品3 g (含水量12%),蒸餾水25 mL。采用升溫/降溫循環(huán)程序:從室溫升溫至50 ℃(0~1.00 min);從50 ℃升高至95 ℃(1.00~4.45 min);保持95 ℃4.45~7.15 min;從95 ℃冷卻至50 ℃(7.15~11.00 min);保持50 ℃11.00~13.00 min。根據(jù)計(jì)算機(jī)屏幕顯示的黏度變化曲線,導(dǎo)出相應(yīng)的最高黏度、冷膠黏度、熱漿黏度、峰值時(shí)間等值。
1.3.5 米飯食味值
采用日本佐竹公司研發(fā)的STA1B 型米飯食味計(jì)對(duì)米飯食味值進(jìn)行測(cè)定。稱取精米30.0 g,放入不銹鋼罐中,用流水沖洗20 s,加入適量的水(米水質(zhì)量比1∶1.4),浸泡30 min 后加蓋,放入蒸鍋上蒸煮40 min 后保溫10 min。再放入專用冷卻箱中冷卻20 min,然后在室溫下冷卻1.5 h 后供米飯食味計(jì)測(cè)定。每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3 次,取平均值。
采用Excel 2016 進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),SPSS 18.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行描述性分析、相關(guān)性分析和主成分分析。
從表2可知,各性狀最大值和最小值品種間差異較大,說明所選品種覆蓋范圍廣。其中,糙米率和精米率變異系數(shù)較小,說明這兩個(gè)指標(biāo)測(cè)定值穩(wěn)定性強(qiáng),在各品種間差異小。堊白粒率、堊白度變幅較大,且變異系數(shù)相對(duì)較高,說明其穩(wěn)定性較差,品種間差異大??梢?,不同省份不同秈稻品種間的外觀品質(zhì)差異較大,尤其是堊白性狀,已成為影響秈稻品質(zhì)的一個(gè)重要因素。堿消值變異系數(shù)較大,說明在品種間差異大;食味值平均值為79.87,且變異系數(shù)相對(duì)較小,說明收集的這93份秈稻品種的食味值綜合評(píng)價(jià)較好。其余指標(biāo)的變異系數(shù)居中(7.00%~20.00%),其測(cè)定值穩(wěn)定性較強(qiáng)。
表2 93 份秈稻品種稻米品質(zhì)性狀描述性分析
從表3可見,堊白度和直鏈淀粉含量6 個(gè)省份間相差較大,堊白度湖北品種最高為8.1%、湖南品種最低為4.9%,直鏈淀粉含量江西品種最高為17.3%、廣東品種最低為14.9%。廣東品種長(zhǎng)寬比均值達(dá)3.5,粒型在6 個(gè)省份中最長(zhǎng)。江西品種的膠稠度和堿消值均值最低,分別為73.5 mm 和4.1。廣西品種整精米率平均值最高達(dá)66.0%,四川品種最低為52.1%。
表3 6 個(gè)省份間秈稻品種6 項(xiàng)理化指標(biāo)均值比較
由表4可知,消減值的變異系數(shù)最大,說明消減值在品種間差異較大,然后依次是回復(fù)值、崩解值、熱漿黏度、冷膠黏度,而與其他糊化指標(biāo)相比,峰值時(shí)間和起漿溫度的變異系數(shù)相對(duì)較小,說明其穩(wěn)定性強(qiáng),各品種間差異較小。
表4 93 份秈稻品種稻米R(shí)VA 譜特征值的描述性分析
從表5看,四川品種的最高黏度最高,顯著高于其他5 個(gè)省份,其他5 個(gè)省份間差異不顯著;四川品種的熱漿黏度、冷膠黏度和消減值最高,廣東品種最低;廣東品種的崩解值最大,廣西品種次之,其余省份差異不顯著;江西品種的回復(fù)值最大,廣東品種最小,其余省份差異不顯著;四川品種的峰值時(shí)間最長(zhǎng),其他5 個(gè)省份差異不顯著;在起漿溫度上,湖南、江西、四川、湖北品種較高,廣東和廣西品種較低。
表5 6 個(gè)省份秈稻品種RVA 譜特征值均值比較
2.3.1 稻米常規(guī)品質(zhì)性狀與食味值的相關(guān)分析
從表6可以看出,加工品質(zhì)與食味值相關(guān)性不顯著;外觀品質(zhì)中,粒長(zhǎng)和長(zhǎng)寬比與食味值呈極顯著正相關(guān),粒寬與食味值呈顯著負(fù)相關(guān),堊白粒率、堊白度與透明度均與食味值呈極顯著負(fù)相關(guān)。就外觀而言,選擇粒寬較小,長(zhǎng)寬比較大,堊白率較低,堊白度、透明度較小的品種有利于提高秈稻米的食味品質(zhì)。理化性狀與食味值的相關(guān)分析表明,直鏈淀粉含量和蛋白質(zhì)含量與食味值呈極顯著負(fù)相關(guān),膠稠度與食味值呈極顯著正相關(guān),而堿消值與食味值的相關(guān)性不顯著。稻米品質(zhì)性狀間也存在復(fù)雜的相關(guān)性,隨著堊白粒率、堊白度增加,整精米率降低,加工品質(zhì)變差。單一品質(zhì)性狀的變化可能會(huì)帶動(dòng)其他品質(zhì)性狀同時(shí)發(fā)生變化,品質(zhì)改良是各項(xiàng)品質(zhì)性狀協(xié)調(diào)的過程[13]。
表6 93 份秈稻品種稻米品質(zhì)性狀與食味值的相關(guān)分析
2.3.2 RVA 譜特征值與食味值的相關(guān)分析
從表7可知,熱漿黏度、冷膠黏度、消減值、回復(fù)值與食味值呈極顯著負(fù)相關(guān),其中消減值與食味值的相關(guān)系數(shù)最高,達(dá)到了-0.714;而崩解值與食味值呈極顯著正相關(guān),相關(guān)系數(shù)為0.675,這說明RVA 譜特征值與食味值的相關(guān)性顯著。通過RVA 譜特征值與食味值的相關(guān)分析表明,食味品質(zhì)較優(yōu)品種的黏度特征為:冷膠黏度和熱漿黏度較低,回復(fù)值和消減值較小,崩解值較大。
表7 RVA 譜特征值與食味值的相關(guān)分析
2.3.3 RVA 譜與主要理化性狀間的相關(guān)分析
表8是稻米的RVA 譜與理化性狀間的相關(guān)分析。從表8可見,最高黏度與蛋白質(zhì)含量呈極顯著負(fù)相關(guān);崩解值與直鏈淀粉含量呈極顯著負(fù)相關(guān),而與膠稠度呈極顯著正相關(guān);起漿溫度與堿消值呈極顯著負(fù)相關(guān);熱漿黏度、冷膠黏度、消減值、回復(fù)值和峰值時(shí)間都與直鏈淀粉含量呈極顯著正相關(guān),而與膠稠度呈極顯著負(fù)相關(guān)??梢姡辨湹矸酆?、膠稠度和堿消值對(duì)RVA譜黏度特性存在較大影響,蛋白質(zhì)含量與黏度因子有一定的顯著相關(guān)性。
表8 RVA 譜特征值與主要理化性狀間的相關(guān)分析
對(duì)93 份秈稻品種稻米品質(zhì)指標(biāo)進(jìn)行主成分分析,以特征根大于1 為標(biāo)準(zhǔn),得出6 個(gè)主成分對(duì)食味品質(zhì)的累計(jì)貢獻(xiàn)率為82.0%,說明用這6 個(gè)主成分可以作為主因子,解釋影響稻米食味品質(zhì)性狀變異的82.0%以上(表9)。從表9可見,第1 主成分貢獻(xiàn)率為31.116%,該成分中因子負(fù)荷量較大的是崩解值、消減值、直鏈淀粉含量。第2 主成分貢獻(xiàn)率為18.475%,因子負(fù)荷量最大的是冷膠粘度,其次是熱漿黏度、膠稠度、回復(fù)值。說明第1、第2 主成分影響食味品質(zhì)的主要因素反映在稻米的黏性、回生性和軟硬度,對(duì)食味品質(zhì)的貢獻(xiàn)率最大。第3 主成分主要受堊白粒率、堊白度、透明度和粒型的影響,選擇粒型較長(zhǎng)、堊白較低的品種食味會(huì)相對(duì)好一些。第4 主成分體現(xiàn)了蛋白質(zhì)含量對(duì)食味的影響,蛋白質(zhì)含量越低,食味品質(zhì)相對(duì)越好。第5 和第6 主成分分別是第1 和第3 主成分的補(bǔ)充。綜上所述,RVA 譜特征值、直鏈淀粉含量、膠稠度、外觀性狀的載荷值較高,在稻米食味品質(zhì)分析中起重要作用,由于水稻品質(zhì)性狀是一個(gè)復(fù)雜的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),性狀間存在難以調(diào)和的遺傳關(guān)系,因此在稻米食味品質(zhì)篩選過程中應(yīng)兼具考慮多個(gè)性狀進(jìn)行食味品質(zhì)篩選和改良[14]。
表9 93 份秈稻品種稻米品質(zhì)性狀的主成分分析
在所測(cè)定的22 項(xiàng)品質(zhì)指標(biāo)中,15 項(xiàng)指標(biāo)的變異系數(shù)大于10%,說明本研究收集的93 份秈稻樣品范圍比較廣,處于不同的品質(zhì)水平,具有較好的代表性[15]。主要理化指標(biāo)堊白粒率、堊白度的測(cè)定值變幅較大,且變異系數(shù)相對(duì)較高,已成為影響我國(guó)秈稻品質(zhì)提高的重要因素[16]。加工品質(zhì)和外觀品質(zhì)的相關(guān)分析表明,整精米率與堊白粒率、堊白度均呈極顯著負(fù)相關(guān),這與胡珍珍等[17-19]研究結(jié)果較為一致。由于稻米中堊白部分的淀粉顆粒排列不規(guī)則[20-22],導(dǎo)致其透光性較差、質(zhì)地較為松散,硬度較低,在加工碾磨過程中容易斷裂形成碎粒米,降低稻米的商品價(jià)值。所以,降低稻米堊白粒率與堊白度不僅可以提高稻米的外觀品質(zhì),同時(shí)也能提高稻米的整精米率,提升商品價(jià)值。
稻米品質(zhì)是一項(xiàng)綜合指標(biāo),其中食味品質(zhì)是最直接甚至是最重要的指標(biāo)。影響稻米食味品質(zhì)的因素較多,93 份稻米外觀指標(biāo)與食味值相關(guān)結(jié)果表明,選擇長(zhǎng)粒形、堊白度較小的品種或組合有利于提高秈稻稻米的食味品質(zhì)。這與周少川等[23]的研究結(jié)果較為一致。而張亞東等[24]認(rèn)為,稻米的食味值與堊白性狀沒有明顯的相關(guān)性,這可能和選擇的樣本不同有關(guān)。因此在選育優(yōu)質(zhì)水稻品種時(shí),需兼顧外觀品質(zhì)和食味品質(zhì),不能僅僅因?yàn)橥庥^品質(zhì)稍差就徹底否定一個(gè)品種,有良好的適口性也可以成為受消費(fèi)者歡迎的品種。其他理化指標(biāo)與食味值相關(guān)結(jié)果表明,直鏈淀粉含量和蛋白質(zhì)含量與食味值呈極顯著負(fù)相關(guān),膠稠度與食味值呈極顯著正相關(guān),而堿消值與食味值的相關(guān)性不明顯。這與周治寶等[25]的研究結(jié)果一致。本研究發(fā)現(xiàn),蛋白質(zhì)含量與最高黏度呈極顯著負(fù)相關(guān),與冷膠黏度呈顯著負(fù)相關(guān),蛋白質(zhì)含量通過影響米飯的硬度和黏度,從而影響稻米的食味口感。因此,將蛋白質(zhì)含量控制在合理范圍以達(dá)到諸多育種目標(biāo)的協(xié)調(diào)平衡。
RVA 譜特征值與食品味值相關(guān)性分析結(jié)果表明,冷膠黏度、回復(fù)值和消減值與食味值呈極顯著負(fù)相關(guān),與崩解值呈顯著正相關(guān),這說明,食味品質(zhì)較優(yōu)的品種具有較高的崩解值和較低的回復(fù)值和消減值,這與前人的研究結(jié)果一致[26-27];RVA 譜黏度特性不僅與食味值直接相關(guān),還與各食味品質(zhì)性狀有密切的關(guān)系,與直鏈淀粉含量、膠稠度、堿消值這3 項(xiàng)理化指標(biāo)間存在極顯著的相關(guān)性。RVA 譜是一種快速簡(jiǎn)便的測(cè)定方法,因此,在育種中間材料進(jìn)行RVA 譜測(cè)定,可用于品質(zhì)育種的快速輔助篩選,早期淘汰產(chǎn)量一般且食味較差的株系,提高食味品質(zhì)育種的選擇效率和準(zhǔn)確性。
主成分分析表明,RVA 譜主要特征值(崩解值、消減值、回復(fù)值、冷膠黏度、熱漿黏度)、直鏈淀粉含量、膠稠度、外觀性狀、蛋白質(zhì)含量的載荷值較高,在稻米食味品質(zhì)中起重要作用,因此,這些理化性狀可作為秈稻品種食味品質(zhì)鑒定上的重要參考指標(biāo)。在秈稻品種食味品質(zhì)改良過程中,應(yīng)先利用這些理化性狀結(jié)合稻米食味測(cè)定儀、近紅外谷物分析儀等儀器進(jìn)行初步篩選,再進(jìn)行人工品嘗進(jìn)行感官評(píng)價(jià)。
一般認(rèn)為稻米性狀屬數(shù)量性狀,受多基因控制,導(dǎo)致品質(zhì)性狀間存在錯(cuò)綜復(fù)雜的關(guān)系,這是品質(zhì)育種的難度所在,雖然有些性狀與食味值達(dá)到了較高的相關(guān)性,但在育種中也不能片面的追求單個(gè)指標(biāo)的高低,單個(gè)指標(biāo)的改變必然引起其它指標(biāo)的變化,因此在稻米食味品質(zhì)篩選過程中應(yīng)兼具考慮多個(gè)性狀進(jìn)行食味品質(zhì)篩選和改良,盡量使各指標(biāo)間相互協(xié)調(diào),從而發(fā)揮最大的水稻育種綜合效果及其經(jīng)濟(jì)效益。
致謝:感謝中國(guó)種子集團(tuán)有限公司水稻業(yè)務(wù)部門的同事收集樣品。