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    CDK2及PCNA在宮頸上皮內(nèi)病變中的表達(dá)及價(jià)值研究①

    2023-01-30 02:40:30李明娜孫玉鴻
    黑龍江醫(yī)藥科學(xué) 2022年6期
    關(guān)鍵詞:細(xì)胞周期切片上皮

    李明娜,李 想,孫玉鴻

    (1.佳木斯大學(xué),黑龍江 佳木斯 154007;2.雙鴨山市人民醫(yī)院,黑龍江 雙鴨山 155100)

    宮頸癌(cervical cancer,CC)是全球女性第4大最常見的癌癥,也是女性癌癥死亡的第4大原因[1]。近年來,有研究報(bào)道許多疾病都存在漸進(jìn)性細(xì)胞增殖異常及細(xì)胞周期調(diào)控系統(tǒng)的破壞[2]。增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)是目前較為公認(rèn)的可作為評(píng)價(jià)細(xì)胞增殖狀態(tài)的客觀指標(biāo)。細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶2(CDK2)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期中的多個(gè)重要事件。目前對(duì)于CDK2和PCNA與宮頸上皮內(nèi)病變進(jìn)展為宮頸癌之間聯(lián)系的研究較少。本研究擬探討CDK2和PCNA在不同程度宮頸上皮內(nèi)病變中的表達(dá)及相關(guān)性,以評(píng)價(jià)二者作為預(yù)測(cè)宮頸病變進(jìn)展的可能性。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料

    收集2021-07~2022-06于我院進(jìn)行病理確診的不同程度宮頸病變患者石蠟切片共116例,其中同期在本院行子宮肌瘤手術(shù)患者的宮頸組織20例,作為正常宮頸組。將病變組按照不同病變程度,分為低級(jí)別宮頸上皮內(nèi)病變組(LSIL)32例、高級(jí)別宮頸上皮內(nèi)病變組(HSIL)34例和宮頸鱗癌組(SCC)30例。所有組織均經(jīng)兩位高年資病理醫(yī)師確定符合本研究要求,術(shù)前均未進(jìn)行放化療等抗腫瘤治療。

    1.2 方法

    CDK2、PCNA的檢測(cè):采用免疫組化法檢測(cè)CDK2、PCNA的表達(dá)。所用兔抗人CDK2單克隆抗體、兔抗人PCNA單克隆抗體、二抗、DAB顯色試劑盒均購(gòu)自上海碧云天生物技術(shù)有限公司。常規(guī)進(jìn)行脫蠟、水化組織切片,按照說明書條件進(jìn)行抗原修復(fù)。陽性對(duì)照采用已知陽性的乳腺癌切片,陰性對(duì)照用PBS代替一抗。

    1.3 結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)

    免疫組化檢測(cè)CDK2以細(xì)胞質(zhì)呈棕黃色為陽性,PCNA以細(xì)胞核呈棕黃色為陽性。每張切片隨機(jī)觀察5 個(gè)高倍視野(×400),每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,結(jié)果采用半定量積分法:將陽性細(xì)胞所占的百分比分值和染色強(qiáng)度分值相乘為結(jié)果:0~2分為陰性,3 分及以上為陽性。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    采用SPSS26.0軟件進(jìn)行分析,各組間的比較采用χ2檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Speraman檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 CDK2在不同程度病變中的表達(dá)

    CDK2在各組中表達(dá)差異顯著(χ2=31.041,P<0.01),表達(dá)率由低到高依次是正常宮頸組10.0%、LSIL組31.3%、HSIL組64.7%、SCC組80.0%。SCC組CDK2的表達(dá)顯著高于正常宮頸組和LSIL組,(χ2=23.558,χ2=14.859,均P<0.01),但正常組與LSIL組,HSIL組與SCC組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=3.131,χ2=1.844,P=0.077,P=0.174),見表1。

    表1 CDK2在不同程度宮頸上皮內(nèi)病變的表達(dá)

    2.2 PCNA在不同程度病變中的表達(dá)

    PCNA在各組中表達(dá)差異顯著(χ2=30.554,P<0.01),表達(dá)率由低到高依次是是正常宮頸組30.0%、LSIL組34.4%、HSIL組67.6%、SCC組93.3%。SCC組PCNA的表達(dá)顯著高于正常宮頸組、LSIL組、HSIL組(χ2=22.120,χ2=23.065,χ2=6.496,P<0.01,P<0.01,P<0.05),但LSIL組與正常宮頸組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.107,P=0.774),見表2。

    表2 PCNA在不同程度宮頸上皮內(nèi)病變的表達(dá)

    2.3 CDK2、PCNA與宮頸病變相關(guān)性分析

    經(jīng)Spearman相關(guān)性分析結(jié)果表明,CDK2與PCNA在不同級(jí)別宮頸上皮內(nèi)病變的表達(dá)呈正相關(guān),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=0.766,P=0.000),見表3。

    表3 CDK2和PCNA在不同程度宮頸上皮內(nèi)病變的相關(guān)性

    3 討論

    細(xì)胞增殖由復(fù)雜的蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)控制,這些蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)決定了細(xì)胞周期事件的順序和時(shí)間。CDK2是完成G1期和G1~S期過渡的一個(gè)關(guān)鍵的細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶。CDK2與不同的cyclin結(jié)合發(fā)揮不同的作用,并促使細(xì)胞周期規(guī)律進(jìn)行[3]。CDK2表達(dá)量的改變,與腫瘤的發(fā)生密切相關(guān),過表達(dá)可促使乳腺癌[4]、肝癌[5]、宮頸癌[6]等腫瘤的發(fā)生發(fā)展。在本研究中,CDK2在HSIL組和SCC組中的表達(dá)顯著高于其他組,可以推測(cè)CDK2的過表達(dá)對(duì)宮頸上皮內(nèi)病變進(jìn)展有促進(jìn)作用。研究發(fā)現(xiàn),PCNA在細(xì)胞周期調(diào)控方面發(fā)揮重要作用,PCNA與cyclingE-CDK2形成的復(fù)合物是控制S期的入口點(diǎn),進(jìn)入S期后PCNA又與CDK2-cyclinA形成復(fù)合物,磷酸化復(fù)制因子C和 DNA連接酶I[7]。如果S期發(fā)生細(xì)胞損傷,P21通過結(jié)合 PCNA 使Cyclin-CDK 復(fù)合物作用滅活,從而抑制 DNA 聚合酶 δ 的激活,直接抑制 DNA 受損細(xì)胞在 S 期進(jìn)一步復(fù)制[8]。當(dāng)宮頸病變發(fā)生時(shí),P21結(jié)合PCNA的能力被抑制,不能阻止受損DNA繼續(xù)復(fù)制,最終導(dǎo)致細(xì)胞惡性變[9]。本研究中,PCNA在SCC組中的表達(dá)水平,顯著高于正常宮頸組、LSIL組、HSIL組,與萬兵[10]等人的研究結(jié)果一致。通過Spearman相關(guān)性分析,CDK2與PCNA呈正相關(guān),提示二者在病變進(jìn)展中起協(xié)同作用。綜上所述,在宮頸上皮內(nèi)病變演變過程中,CDK2和PCNA的表達(dá)逐漸增加,進(jìn)一步促進(jìn)損傷細(xì)胞的惡性增殖能力,最終導(dǎo)致細(xì)胞的惡性變,二者聯(lián)合檢測(cè)有望成為預(yù)測(cè)宮頸上皮內(nèi)病變進(jìn)展的分子標(biāo)志。

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