一起鴨傳染性漿膜炎疫情的緊急流行病學(xué)調(diào)查

劉亞娟，李 濤，張 霞，王 慧

（1.貴陽市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽 550000；2.貴州省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州貴陽 550000）

2020 年4 月15 日，貴州省某農(nóng)民專業(yè)合作社從外地購入25 日齡麻鴨5 300 羽、30 日齡麻鴨4 700 羽，購入后直接放入簡(jiǎn)易大棚及河邊飼養(yǎng)。4月18 日，購入的30 日齡麻鴨相繼出現(xiàn)精神沉郁、食欲減退、不愿走動(dòng)、共濟(jì)失調(diào)、呈犬坐姿勢(shì)、抽搐、搖頭晃腦、糞便稀薄呈黃綠色、眼流出黏性分泌物等癥狀；發(fā)病當(dāng)日就有10 多羽麻鴨死亡，此后發(fā)病數(shù)和死亡數(shù)逐日上升，4 月21 日開始每日死亡數(shù)高達(dá)100 多羽。將氟苯尼考和阿莫西林混合拌料飼喂治療，未見好轉(zhuǎn)。4 月23 日，該合作社將發(fā)病死亡情況上報(bào)至當(dāng)?shù)厥袆?dòng)物疫病預(yù)防控制中心。為了找出鴨發(fā)病死亡的病因，以便提出針對(duì)性防控建議，當(dāng)?shù)厥袆?dòng)物疫病預(yù)防控制中心工作人員分別于4 月24 日和4 月30 日到該養(yǎng)鴨基地進(jìn)行了現(xiàn)場(chǎng)流行病學(xué)調(diào)查。

1 材料與方法

通過現(xiàn)場(chǎng)詢問養(yǎng)殖人員和實(shí)地調(diào)查，了解養(yǎng)鴨基地的養(yǎng)殖和生產(chǎn)管理情況，收集鴨發(fā)病死亡情況、臨床癥狀、用藥情況等信息。對(duì)發(fā)病鴨進(jìn)行臨床診斷，解剖病死鴨觀察其病理變化，并采集血液樣本、組織樣本和泄殖腔拭子進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，同時(shí)采集河水上下游的水環(huán)境樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1.1 病例定義

1.1.1 疑似病例 2020 年4 月18 日至5 月2 日，該養(yǎng)鴨基地養(yǎng)殖的麻鴨出現(xiàn)至少以下3 種癥狀的病例：精神沉郁、食欲減退、不愿走動(dòng)、共濟(jì)失調(diào)、呈犬坐姿勢(shì)、抽搐、搖頭晃腦、糞便稀薄呈黃綠色、眼流出黏性分泌物。

1.1.2 確診病例 經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確定為鴨疫巴氏桿菌感染的疑似病例。

1.2 核實(shí)診斷

采集3 羽病死鴨的血液樣本、組織（肺臟、肝臟、心臟）樣本和泄殖腔拭子在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行相關(guān)病原的病原學(xué)檢測(cè)及病原分離鑒定。鴨瘟病毒熒光PCR、鴨病毒性肝炎病毒I 型熒光RT-PCR 檢測(cè)試劑盒，購自武漢科前生物股份有限公司；病原分離鑒定和生化試驗(yàn)，參考《鴨漿膜炎診斷技術(shù)》（NY/T 3188—2018）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

使用Microsoft Excel 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理，通過IBM SPSS Statistics 25 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行卡方（χ2）檢驗(yàn)，顯著性水準(zhǔn)設(shè)為0.05，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

2.1 養(yǎng)鴨基地基本情況

該養(yǎng)鴨基地共有50 個(gè)36 m×7 m 的簡(jiǎn)易大棚，建于2017 年，四面環(huán)山。大棚建成后起初種植蔬菜，后飼養(yǎng)昆蟲；2020 年當(dāng)?shù)卣畣?dòng)扶貧項(xiàng)目，出資20 萬在這些大棚中養(yǎng)殖肉鴨。本次從外地購入的10 000 羽麻鴨（雛鴨）由當(dāng)?shù)劓?zhèn)政府牽頭購買，有動(dòng)物檢疫合格證明，貧困戶負(fù)責(zé)飼喂工作，出售所獲利潤(rùn)全部由貧困戶所得。該批麻鴨包括25 日齡和30 日齡兩個(gè)日齡段，分別飼養(yǎng)在河上游和下游區(qū)域的鴨棚，養(yǎng)殖模式均為放養(yǎng)；白天鴨群基本在鴨棚旁邊的草地以及河中覓食飲水，晚上部分鴨群回到鴨棚休息，部分鴨群則在旁邊的草地休息（圖1）。鴨群主要飼喂從飼料生產(chǎn)公司購買的配合飼料，養(yǎng)殖人員將飼料倒入直徑約60 cm 的大圓盆中，由鴨群自由采食。河水為鴨群唯一的飲水來源，鴨棚中有從河中接入的飲水管道，但鴨群主要在河中直接飲水。該基地共有工作人員（當(dāng)?shù)刎毨簦? 名，河上、下游區(qū)域各2 名，無駐場(chǎng)獸醫(yī)，沒有設(shè)置消毒區(qū)。工作人員介紹，在引入鴨苗前進(jìn)行過場(chǎng)內(nèi)消毒，引進(jìn)的麻鴨出現(xiàn)死亡后，每天有工作人員用背負(fù)式手動(dòng)噴霧器在麻鴨活動(dòng)區(qū)域內(nèi)消毒。根據(jù)麻鴨購入地提供的信息，該批麻鴨接種過“花肝病”、黃病毒病、漿膜炎、流感等4 種疫苗。

圖1 養(yǎng)鴨基地現(xiàn)場(chǎng)環(huán)境

共有7 個(gè)簡(jiǎn)易大棚養(yǎng)殖麻鴨，河上游的4 個(gè)鴨棚飼養(yǎng)的是購入的25 日齡麻鴨（以下稱小日齡），河下游的3 個(gè)鴨棚飼養(yǎng)的是購入的30 日齡麻鴨（以下稱大日齡）。具體分布情況見圖2。

圖2 養(yǎng)鴨基地地理位置

2.2 空間分布

初期只有飼養(yǎng)在河下游的大日齡麻鴨發(fā)病死亡，累計(jì)發(fā)病1 536 羽，死亡1 172 羽；現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查前2 d，飼養(yǎng)在河上游的小日齡麻鴨有30 多羽也相繼出現(xiàn)發(fā)病死亡現(xiàn)象，累計(jì)發(fā)病950 羽，死亡721羽。工作人員并沒有將發(fā)病的麻鴨隔離飼養(yǎng)，對(duì)死亡的麻鴨也沒有及時(shí)處理，而是待當(dāng)天的飼喂、消毒工作結(jié)束后再統(tǒng)一放入到大型編織袋中進(jìn)行掩埋處理。

2.3 時(shí)間分布

養(yǎng)鴨基地4 月15 日引入這批麻鴨后并沒有對(duì)其采取隔離措施，而是直接在鴨棚和河邊放養(yǎng)。除購入前鴨苗售出公司給麻鴨接種過“花肝病”、黃病毒病、漿膜炎、流感4 種疫苗外，引進(jìn)后未再接種其他疫病疫苗。4 月18 日上午，工作人員發(fā)現(xiàn)河下游區(qū)域的1 羽麻鴨出現(xiàn)搖頭擺尾的癥狀，河邊草地上的7 羽麻鴨出現(xiàn)不愿走動(dòng)、呈犬坐姿勢(shì)、抽搐、搖頭擺尾等癥狀，午間陸續(xù)有發(fā)病麻鴨死亡，當(dāng)日共計(jì)死亡10 多羽，但養(yǎng)殖人員未采取任何措施；第二日有50 多羽麻鴨死亡，4 月21 日后每日死亡數(shù)高達(dá)100 多羽。4 月22 日河上游區(qū)域飼養(yǎng)的小日齡麻鴨也相繼出現(xiàn)類似發(fā)病死亡現(xiàn)象。

4 月21 日工作人員將阿莫西林和氟苯尼考混合拌料飼喂麻鴨進(jìn)行治療，但麻鴨發(fā)病死亡情況仍不見好轉(zhuǎn)。根據(jù)第一次現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查，麻鴨采食的飼料為顆粒狀，而使用的治療藥物均為粉末狀，在拌料飼喂時(shí)存在用量不足、混合不均勻等問題，且大部分粉末藥物都沉在盆底，導(dǎo)致麻鴨無法有效采食，因此治療效果甚微。第一次現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查后，建議每日交替注射氟苯尼考、阿莫西林進(jìn)行治療，并配合使用葡萄糖、黃芪多糖增加麻鴨免疫力，同時(shí)將健康鴨與發(fā)病鴨分群飼養(yǎng)，發(fā)病死亡情況逐步得到緩解。截至第二次調(diào)查結(jié)束，共有約1 500 羽大日齡麻鴨、約900 羽小日齡麻鴨發(fā)病。養(yǎng)鴨基地麻鴨日發(fā)病情況見圖3。

圖3 養(yǎng)鴨基地發(fā)病流行曲線

2.4 群間分布

該養(yǎng)鴨基地共存欄小日齡和大日齡2 個(gè)生長(zhǎng)階段的麻鴨10 000 羽。其中：小日齡麻鴨5 300 羽，發(fā)病950 羽，死亡721 羽，襲擊率為17.9%，病死率為75.9%；大日齡麻鴨4 700 羽，發(fā)病1 536 羽，死亡1 172 羽，襲擊率為32.7%，病死率為76.3%（表1）。經(jīng)卡方（χ2）檢驗(yàn)，兩種日齡麻鴨的發(fā)病率、死亡率差異不顯著（P＞0.05）。

表1 麻鴨發(fā)病死亡情況

2.5 剖檢與實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

4 月24 日第一次現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查時(shí)，共解剖了3 羽病死鴨。臨床檢查發(fā)現(xiàn)：病死鴨頸部和兩腿伸張，呈角弓反張姿勢(shì)；剖檢發(fā)現(xiàn)：心包膜覆著淡黃色干酪樣纖維素性滲出物；肝臟腫大，表面覆蓋一層灰黃色纖維素性膜（圖4）；氣囊渾濁增厚，有纖維素性滲出物，肺臟出血；消化系統(tǒng)無明顯變化。綜合臨床癥狀及剖檢結(jié)果[1-3]，初步判定此次疫情為疑似鴨傳染性漿膜炎。

圖4 病死鴨肝臟病變

對(duì)采集的病死鴨血液樣本、組織樣本和泄殖腔拭子進(jìn)行鴨瘟病毒、鴨病毒性肝炎病毒I 型的熒光PCR/熒光RT-PCR 檢測(cè)，結(jié)果均為陰性。將采集的肺臟、肝臟組織樣本以及心臟滲出物涂片，經(jīng)染色鏡檢觀察到革蘭氏陰性小桿菌；將其接種于普通瓊脂培養(yǎng)基、巧克力培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，經(jīng)病原分離鑒定和生化試驗(yàn)[4-5]確定為鴨疫巴氏桿菌。在采集的水環(huán)境樣品中未發(fā)現(xiàn)鴨疫巴氏桿菌。

3 討論

鴨傳染性漿膜炎是一種與應(yīng)激相關(guān)的傳染病[5]，運(yùn)輸、天氣變化等應(yīng)激因素以及維生素和微量元素缺乏是引起該病的主要原因。本次疫情中，首發(fā)病例為購入的大日齡麻鴨。據(jù)工作人員介紹，運(yùn)輸時(shí)，這批雛鴨被分別裝入100 多個(gè)運(yùn)輸籠中，空間狹窄擁擠；雛鴨運(yùn)輸時(shí)間長(zhǎng)達(dá)27 h，其間未給予飲水及采食；進(jìn)入養(yǎng)鴨基地的山路狹窄，大型運(yùn)輸車無法駛?cè)?，因此就將雛鴨轉(zhuǎn)移至小型運(yùn)輸車中再運(yùn)輸至養(yǎng)鴨基地，由于工作人員較少，整個(gè)轉(zhuǎn)移過程持續(xù)近3 h，而放置在運(yùn)輸車最里面運(yùn)輸籠里的雛鴨主要是大日齡麻鴨；當(dāng)天氣溫高達(dá)35 ℃，前一天又有大雨，環(huán)境尤為濕熱；雛鴨運(yùn)輸至養(yǎng)鴨基地后，即被趕至鴨棚或河邊飼養(yǎng)，未補(bǔ)充葡萄糖和免疫增強(qiáng)劑。

在采集的水環(huán)境樣品中并沒有發(fā)現(xiàn)鴨疫巴氏桿菌，另外飼養(yǎng)在河下游區(qū)域的麻鴨發(fā)病時(shí)間也早于飼養(yǎng)在河上游區(qū)域的麻鴨，基本可以排除由于水源污染而造成的疫情暴發(fā)。麻鴨采食的飼料購于飼料生產(chǎn)公司，開封后直接倒入圓盆中由鴨群自由采食，因飼料污染而造成疫情暴發(fā)的可能性低。養(yǎng)鴨基地周圍并沒有規(guī)模養(yǎng)鴨場(chǎng)，偶有一兩戶農(nóng)戶散養(yǎng)了幾羽肉鴨，但均沒有出現(xiàn)類似的發(fā)病死亡現(xiàn)象，工作人員家中也沒有飼養(yǎng)鴨，病原由外部傳入的可能性低。養(yǎng)鴨基地為開放式場(chǎng)所，面積大，引鴨前工作人員使用背負(fù)式手動(dòng)噴霧器對(duì)基地消毒很可能造成消毒不徹底，導(dǎo)致草地中依然存在鴨疫巴氏桿菌，從而感染麻鴨造成疫病暴發(fā)的可能性較高。據(jù)了解，運(yùn)輸麻鴨的大型運(yùn)輸車和轉(zhuǎn)運(yùn)的小型運(yùn)輸車之前都曾運(yùn)輸過各類家禽，推測(cè)因車輛消毒不徹底在運(yùn)輸過程中導(dǎo)致麻鴨感染鴨疫巴氏桿菌的可能性也較高。

鴨疫巴氏桿菌對(duì)氟苯尼考、阿莫西林敏感，但由于一開始飼養(yǎng)人員沒有采用保證有效藥物用量和正確的治療方法，因此未起到治療效果。本病在污染鴨群中的感染率可達(dá)90%以上[6]，但本次疫情中兩種日齡麻鴨的襲擊率分別為17.9%和32.7%。分析原因可能是，麻鴨的飼養(yǎng)模式為放養(yǎng)，飼養(yǎng)密度小，空氣流通，緩解了病原在鴨群中的傳播速度。但由于沒有及時(shí)正確用藥，病死率高達(dá)75%以上。

鴨疫巴氏桿菌血清型較多，目前已發(fā)現(xiàn)21 個(gè)[7]，其中我國已經(jīng)鑒定的血清型就有1、2、6、10、11、13、14 型。不同的鴨疫巴氏桿菌血清型具有特異性，各型之間缺乏交叉免疫保護(hù)[6]。由于實(shí)驗(yàn)室條件限制，本次調(diào)查沒有對(duì)引起麻鴨感染的鴨疫巴氏桿菌作血清學(xué)鑒定。目前研制出的鴨疫巴氏桿菌疫苗有單價(jià)和多價(jià)滅活菌苗、弱毒疫苗和亞單位疫苗。雖然鴨苗售出公司給雛鴨免疫過漿膜炎疫苗，但沒能從鴨苗售出公司得知免疫的是哪種疫苗，故推測(cè)免疫疫苗后發(fā)病的原因可能是感染的血清型與免疫的血清型不一致或免疫失?。ㄒ呙缑庖弑Ｗo(hù)率達(dá)不到100%）。

綜合發(fā)病死亡麻鴨的臨床癥狀、剖檢變化、現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查結(jié)果和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果，判定這起鴨傳染性漿膜炎疫情，因外購鴨苗過程中管理不善，雛鴨產(chǎn)生應(yīng)激導(dǎo)致抵抗力下降，繼而感染鴨疫巴氏桿菌引起；因治療不及時(shí)，用藥方式不合理，消毒不徹底，引發(fā)疫情擴(kuò)散。大日齡麻鴨引起的應(yīng)激反應(yīng)較大，因此發(fā)病時(shí)間較早。

生長(zhǎng)發(fā)育中的雛鴨對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)能力和抵抗能力較弱，尤其在長(zhǎng)途運(yùn)輸過程中，鴨苗容易受到擠壓、驚擾，如長(zhǎng)時(shí)間處于缺水、饑餓狀態(tài)，機(jī)體抵抗力和免疫力就會(huì)嚴(yán)重下降，加上濕熱環(huán)境影響，很容易感染病原體引發(fā)疫病。建議養(yǎng)殖基地在購買鴨苗過程中，應(yīng)特別注意氣候變化，如果氣候突變或有其他較強(qiáng)烈的應(yīng)激因素存在，可在飼料或飲水中添加適量的抗菌藥物[8]。外購鴨到場(chǎng)后，要及時(shí)給其補(bǔ)充葡萄糖和黃芪多糖，減少運(yùn)輸、天氣變化以及維生素和微量元素缺乏等因素對(duì)鴨群的影響；在飼養(yǎng)過程中應(yīng)注意環(huán)境衛(wèi)生，對(duì)鴨棚、活動(dòng)場(chǎng)所及采食用具要定期清洗和消毒，發(fā)現(xiàn)病死鴨要及時(shí)作深埋或焚燒處理；河水中病原體較多，同時(shí)麻鴨會(huì)直接將排泄物排入河中從而污染水源，如果條件允許，可為麻鴨準(zhǔn)備清潔的飲用水。鴨疫巴氏桿菌血清型復(fù)雜，在我國1、2、10 型占總分離株數(shù)的96%[6]。鴨苗銷售公司應(yīng)按程序及時(shí)接種這3 種血清型疫苗，引入的養(yǎng)殖場(chǎng)也應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)伉喴甙褪蠗U菌流行菌株對(duì)引進(jìn)雛鴨及時(shí)進(jìn)行免疫，以防止疫病發(fā)生。