液基細(xì)胞學(xué)檢查與高危型人乳頭瘤病毒DNA 檢測(cè)在宮頸癌患者篩查中的臨床價(jià)值

徐淑華，鄭圓花，余小燕

（1.江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院體檢科，江西 南昌 330000；2.南昌市第三醫(yī)院婦產(chǎn)科，江西 南昌 330000；3.上猶縣婦幼保健院婦產(chǎn)科，江西 上猶 341200）

宮頸癌（cervical cancer）是由子宮頸上皮內(nèi)瘤變引起的婦科惡性腫瘤，是女性生殖系統(tǒng)中僅次于乳腺癌的第2 大癌癥，嚴(yán)重威脅著婦女的身心健康。據(jù)2020 年數(shù)據(jù)顯示[1，2]，全球大約有60.4 萬新病例和34.21 萬死亡病例。其中，大約90%的患者來自低收入和中等收入國家，這些國家的死亡率是發(fā)達(dá)國家的18 倍[3]，而我國宮頸癌發(fā)病率與死亡率達(dá)到了全球?qū)m頸癌發(fā)病率和死亡率的30%。高危型人乳頭狀瘤病毒（HPV）感染已被證實(shí)是宮頸癌發(fā)生、發(fā)展中最重要的致病因素，其中以HPV16、18 最為密切[4-6]。因此，宮頸癌的早期篩查與診斷對(duì)宮頸癌的防治具有重要意義。目前，臨床常見的宮頸癌診斷方法包含有高危型人乳頭瘤病毒DNA 檢測(cè)（HPV-DNA）及基液細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）、電子陰道鏡檢查等，其中TCT可有效觀察宮頸上皮的異型細(xì)胞，評(píng)估早期病變。而HPV-DNA 主要篩查機(jī)體感染HPV 病毒情況，通過分析不同高危分型患者HPV 感染情況，篩查早期宮頸癌患者[7，8]。以上方法提高了宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌的檢出率，但單獨(dú)使用各有弊端，無法保證篩檢的準(zhǔn)確率[9]。因此，本研究通過研究TCT 與HPV-DNA在宮頸癌患者篩查中的應(yīng)用效果，旨在為宮頸癌的早期篩查提供臨床依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2020 年1 月-2021 年9 月江西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院收治的宮頸癌患者120 例為研究對(duì)象，年齡21～62 歲，平均年齡（40.22±9.83）歲。本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)審批同意，患者對(duì)研究?jī)?nèi)容知情同意并簽署知情同意書。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①均接受TCT、HPV 檢測(cè)與病理活檢；②均有婚孕史，既往宮頸無病史，具備一定的宮頸癌體征與癥狀表現(xiàn)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在相關(guān)進(jìn)展性內(nèi)科疾病者；②存在感染情況發(fā)生者；③合并其他部位腫瘤者；④存在嚴(yán)重器質(zhì)性損傷疾病者；⑤存在精神類疾病或認(rèn)知功能障礙者。

1.3 方法

1.3.1 TCT 檢測(cè) 囑咐患者檢查前24 h 禁性生活，檢查前72 h 禁止沖洗陰道或陰道用藥，且檢查避開經(jīng)期。對(duì)采集的宮頸細(xì)胞標(biāo)本進(jìn)行TCT 制片處理，制備為薄層細(xì)胞圖片，再以95%濃度的酒精溶液進(jìn)行固定，巴氏染色處理后送往檢驗(yàn)科鏡檢。依據(jù)伯塞斯達(dá)系統(tǒng)（TBS）宮頸細(xì)胞學(xué)分類法對(duì)結(jié)果進(jìn)行判讀[10]：炎癥或正常（NIML）、意義不明的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASCUS）、不排除高度鱗狀細(xì)胞內(nèi)瘤變（ASCH）、低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌（SCC），ASCUS 及其以上病變?yōu)門CT 診斷陽性。

1.3.2 HPV-DNA 檢測(cè) 通過窺陰器將患者宮頸充分暴露，將宮頸口周圍的過量分泌物予以潔凈處理，采用專業(yè)HPV 采集器置于患者宮頸口以采集其中脫落細(xì)胞，采集完成后，以專用標(biāo)本儲(chǔ)藏瓶收容標(biāo)本，進(jìn)行規(guī)范標(biāo)記并隔離保存。聯(lián)合HC-2 基因雜交捕獲儀自動(dòng)檢測(cè)所采集到的細(xì)胞樣本，儀器操作嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書內(nèi)容執(zhí)行。

1.3.3 病理活檢 所有患者均行病理活檢以作最終診斷依據(jù)。病理活檢期間，指導(dǎo)患者保持截石位，充分暴露宮頸組織，對(duì)患者宮頸表面的分泌物進(jìn)行潔凈處理，并觀察患者宮頸口外觀，必要時(shí)可適當(dāng)以宮頸鉗微擴(kuò)張宮頸外口，并于3、6、9、12 點(diǎn)處與經(jīng)管處或可疑病變位置取組織采樣，以10%濃度的福爾馬林固定，經(jīng)包埋、切片、染色后鏡檢以明確病理診斷。按照病理學(xué)的診斷標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果[11，12]，檢驗(yàn)結(jié)果陰性（炎癥）、陽性包含宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤樣變（CIN），CIN 依照疾病演進(jìn)過程由輕至重可分為3級(jí)，依次為CINⅠ、CINⅡ及CINⅢ。

1.4 觀察指標(biāo) 觀察三種檢查方法的疾病檢出情況：以病理活檢作為診斷金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)估TCT、高危型HPV 檢查的靈敏度、特異度及診斷符合率。靈敏度=真陽性/（真陽性+假陰性）×100%；特異度=真陰性/（真陰性+假陽性）×100%；診斷符合率=（真陽性+真陰性）/總例數(shù)×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 22.0 處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以（±s）表示，行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理學(xué)結(jié)果 120 例宮頸標(biāo)本病理學(xué)檢查中炎癥52例、CINⅠ級(jí)23 例、CINⅡ級(jí)25 例、CINⅢ級(jí)12 例、宮頸癌8 例，病理學(xué)結(jié)果陽性68 例，陽性率為56.67%。

2.2 TCT 檢測(cè)與病理學(xué)結(jié)果關(guān)系 TCT 檢測(cè)CINⅠ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)及宮頸癌患者的陽性率高于炎癥患者（P＜0.05），見表1。

表1 TCT 檢測(cè)與病理學(xué)結(jié)果關(guān)系[n（%）]

2.3 HPV-DNA 檢測(cè)與病理學(xué)結(jié)果關(guān)系 HPV-DNA檢測(cè)CINⅠ級(jí)、CINⅡ級(jí)、CINⅢ級(jí)及宮頸癌患者的陽性率高于炎癥患者（P＜0.05），見表2。

表2 HPV-DNA 檢測(cè)與病理學(xué)結(jié)果關(guān)系[n（%）]

2.4 HPV-DNA 檢測(cè)與TCT 檢測(cè)結(jié)果比較 通過TCT 檢測(cè)的TBS 分類結(jié)果與HPV-DNA 檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，TBS 分類級(jí)別越高，HPV-DNA 的陽性率越高（P＜0.05），見表3。

表3 HPV-DNA 檢測(cè)與TCT 檢測(cè)結(jié)果比較[n（%）]

2.5 CINⅠ級(jí)病變以上患者不同檢查方法診斷價(jià)值比較 以病理學(xué)檢測(cè)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，通過對(duì)TCT 檢測(cè)及HPV 檢測(cè)單獨(dú)及兩者聯(lián)合檢測(cè)的檢出情況進(jìn)行分析，結(jié)果顯示單獨(dú)行HPV-DNA 檢測(cè)的靈敏度及診斷符合率高于TCT 檢測(cè)，特異度低于TCT 檢測(cè)（P＜0.05）；TCT 聯(lián)合HPV-DNA 檢測(cè)的靈敏度、特異度及診斷符合率均高于二者單獨(dú)檢測(cè)（P＜0.05），見表4。

表4 CINⅠ級(jí)病變以上患者不同檢查方法診斷價(jià)值比較（%）

3 討論

宮頸癌是嚴(yán)重危害女性健康的惡性腫瘤之一，宮頸癌篩查可以盡早發(fā)現(xiàn)宮頸癌及癌前病變，從而及時(shí)采取干預(yù)措施，預(yù)防腫瘤的發(fā)生發(fā)展[13]。隨著細(xì)胞學(xué)診斷技術(shù)的發(fā)展，臨床上開始采用TCT 檢測(cè)，可及時(shí)有效地發(fā)現(xiàn)早期上皮細(xì)胞的異樣，是宮頸癌篩查的重要方法之一[14]，但其受取樣、制片和診斷者的主觀影響較大，容易造成誤診、漏檢和假陽性等問題[15]。HPV 的持續(xù)感染是引起宮頸粘膜鱗狀上皮細(xì)胞癌變的主要因素。因此，HPV-DNA 檢測(cè)作為初篩手段較常用的細(xì)胞學(xué)檢查更有效，其具有客觀、可重復(fù)等優(yōu)點(diǎn)。

本研究中TCT 檢測(cè)的陽性率為53.33%，但隨著病理學(xué)分級(jí)程度的加重，陽性率增加，且炎癥患者的TCT 陽性率低于HPV-DNA，而在CINⅠ級(jí)、CIN Ⅱ級(jí)、CINⅢ級(jí)和宮頸癌患者的陽性率高于HPV-DNA，這可能是因TCT 檢測(cè)是通過細(xì)胞形態(tài)的改變進(jìn)行判斷，所以發(fā)病程度越嚴(yán)重，有效性和準(zhǔn)確性越高，而HPV-DNA 檢測(cè)是利用HPV 可以在適宜的條件下與人體的基因組表達(dá)整合，使用分子雜交捕獲技術(shù)，使得HPV 雙鏈裂解為單鏈，與特異性抗體結(jié)合，通過酶促化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)樣本中的HPV含量，但感染高危型HPV 不一定會(huì)發(fā)展成宮頸癌，因此單一的HPV-DNA 檢測(cè)也容易造成誤診。此外，本研究中HPV-DNA 聯(lián)合TCT 檢測(cè)高于HPV-DNA和TCT 單獨(dú)檢測(cè)（P＜0.05），說明HPV-DNA 聯(lián)合TCT 檢測(cè)是宮頸癌篩查的最佳選擇。

綜上所述，TCT 和HPV-DNA 的聯(lián)合使用可提高對(duì)宮頸癌或CIN 診斷的靈敏度、準(zhǔn)確度，檢測(cè)結(jié)果更加可靠。