牛子宮內(nèi)膜炎病原菌分離鑒定及臨床治療效果觀察

朱曉琳

（山東省博興縣畜牧獸醫(yī)服務(wù)中心，山東 濱州 256600）

0 引言

牛飼養(yǎng)過程中，子宮內(nèi)膜炎病是一種存在較大危害的產(chǎn)科疾病，主要是牛產(chǎn)后感染細(xì)菌，導(dǎo)致子宮內(nèi)發(fā)生膜粘液性、膿性局部炎癥反應(yīng)，若治療不到位將會(huì)導(dǎo)致炎癥快速擴(kuò)散，誘發(fā)卵巢炎和輸卵管炎等疾病，母牛產(chǎn)生發(fā)情、妊娠推遲、繁殖力下降、產(chǎn)犢時(shí)間間隔延長(zhǎng)等癥狀，若癥狀嚴(yán)重，對(duì)牛體健康與繁殖性能造成影響。根據(jù)牛子宮內(nèi)膜炎病原菌展開分析，需要開展分離鑒定，觀察臨床治療效果，總結(jié)治療子宮內(nèi)膜炎的有效方法，提高牛子宮內(nèi)膜病的治療水平。

1 發(fā)病原因及判斷標(biāo)準(zhǔn)

1.1 病因

牛的飼養(yǎng)產(chǎn)業(yè)一直以來呈持續(xù)增長(zhǎng)趨勢(shì)，逐漸形成規(guī)?；B(yǎng)殖模式。但在此期間也增加牛的繁殖障礙病的發(fā)病率，子宮內(nèi)膜炎便是其中之一[1]。該病是牛飼養(yǎng)中比較常見的疾病之一，無(wú)論國(guó)內(nèi)還是國(guó)外都有很高的發(fā)病率。如調(diào)查顯示，牛的子宮內(nèi)膜炎發(fā)病率為10%～70%。我國(guó)奶?；甲訉m內(nèi)膜炎的發(fā)病率同樣較高，在成年母牛中占比大于17%。牛子宮內(nèi)膜炎在繁殖與產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)等方面均會(huì)帶來非常嚴(yán)重的損失。

母牛在生產(chǎn)后，子宮機(jī)能的恢復(fù)一般和細(xì)菌感染有很大關(guān)系，病原菌引發(fā)子宮疾病，是導(dǎo)致母牛不孕癥其中一個(gè)非常重要的病因。子宮內(nèi)膜炎這類繁殖障礙病導(dǎo)致牛無(wú)法發(fā)情、不孕，因牛本身屬于單胎動(dòng)物，在患子宮內(nèi)膜炎后，延長(zhǎng)繁殖間距，飼養(yǎng)者的飼養(yǎng)成本與治療成本也會(huì)不斷增加。面對(duì)子宮內(nèi)膜炎這一疾病，必須重視治療工作。

1.2 判斷標(biāo)準(zhǔn)

子宮內(nèi)膜炎主要發(fā)生于子宮內(nèi)膜部位，是母畜生產(chǎn)后比較常見的一種生殖器官疾病。通常產(chǎn)后子宮感染的原因是受到細(xì)菌污染，牛產(chǎn)后子宮內(nèi)部會(huì)有細(xì)菌分離，但?？勺孕袃艋?。數(shù)據(jù)顯示，10%～17%母牛在產(chǎn)后因入侵病原菌導(dǎo)致子宮感染。一旦造成子宮感染，致病菌會(huì)直接粘附于子宮黏膜，植入或是穿透上皮組織后將細(xì)菌釋放，引發(fā)子宮疾病[2]。針對(duì)子宮內(nèi)膜炎的有關(guān)研究中，子宮感染共有4類，分別是子宮內(nèi)膜炎、子宮炎、化膿性肌炎、子宮蓄膿。

發(fā)生子宮內(nèi)膜炎的時(shí)間是在產(chǎn)后10 d內(nèi)，臨床癥狀主要有體溫驟增、精神欠佳、食欲不振等，還會(huì)伴有舉尾、努責(zé)的癥狀，陰門部位會(huì)有灰白褐色黏液流出，甚至?xí)袗撼粑兜?。飼養(yǎng)人員透過直腸檢查牛子宮，發(fā)現(xiàn)比較明顯的子宮角增粗、子宮壁增厚及彈性減弱等癥狀。很多產(chǎn)后牛無(wú)明顯臨床癥狀，平時(shí)發(fā)情周期無(wú)異常，只是出現(xiàn)屢配不孕現(xiàn)象。對(duì)此類牛進(jìn)行陰道檢查，子宮無(wú)異常，當(dāng)其發(fā)情可發(fā)現(xiàn)分泌物明顯增加，同時(shí)還會(huì)有渾濁與絮狀物[3]。

第一，臨床型子宮內(nèi)膜炎。飼養(yǎng)人員可以利用直腸檢查判定，或者直接觀察陰道內(nèi)子宮分泌物性質(zhì)。在母牛產(chǎn)后21 d后，飼養(yǎng)人員采用直腸檢查的方式進(jìn)行觸診，如果發(fā)現(xiàn)子宮頸大、存在明顯波動(dòng)感和膿性子宮惡露、膿液性子宮惡露等現(xiàn)象，加之母牛并無(wú)全身癥狀，此時(shí)便可判斷為臨床型子宮內(nèi)膜炎。一般臨床層面的子宮內(nèi)膜炎，即為此類子宮內(nèi)膜炎。第二，隱性子宮內(nèi)膜炎。此類子宮內(nèi)膜炎是指陰道內(nèi)部無(wú)膿性分泌物，建議通過子宮內(nèi)部分離、培養(yǎng)分泌物的方式進(jìn)行判定，或者也可直接采用細(xì)胞學(xué)檢查、組織學(xué)檢查等方式判定是否存在子宮內(nèi)膜炎。細(xì)胞學(xué)檢查在所有檢查方法中操作最為簡(jiǎn)便且快速。研究發(fā)現(xiàn)，母牛產(chǎn)后20～33 d，子宮細(xì)胞學(xué)檢查得出PMN（polymorphonuclear leukocyte，多形核白細(xì)胞，簡(jiǎn)稱PMN）在18%以上；或者是在產(chǎn)后的34～47 d，子宮細(xì)胞學(xué)檢查PMN在10%以上，滿足以上條件即可判定為隱性子宮內(nèi)膜炎。

2 子宮內(nèi)膜炎病原菌分離鑒定

2.1 子宮內(nèi)容物細(xì)菌

針對(duì)子宮內(nèi)膜炎病原菌進(jìn)行分離鑒定，其中子宮內(nèi)容物的細(xì)菌分離，選取50頭患牛子宮內(nèi)容物，將其培養(yǎng)、分離、純化后得到78株細(xì)菌，具體包括42株革蘭氏陽(yáng)性菌、36株革蘭氏陰性細(xì)菌。經(jīng)過鑒定，發(fā)現(xiàn)此次患牛感染子宮內(nèi)膜炎的病原菌包括大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、奧斯陸莫拉菌、蘇云金芽孢桿菌、溶血葡萄球菌、乳房鏈球菌、蠟樣芽孢桿菌。在50頭患牛中選擇30頭作為對(duì)照組，組內(nèi)患牛的子宮內(nèi)容物在經(jīng)過培養(yǎng)、分離、純化后，發(fā)現(xiàn)32株細(xì)菌，其中8個(gè)樣品分離后沒有發(fā)現(xiàn)細(xì)菌，具體包括17株革蘭氏陽(yáng)性菌、15革蘭氏陰性細(xì)菌株。對(duì)比發(fā)現(xiàn)，鑒定結(jié)果和對(duì)照組內(nèi)的健康牛分離獲得的細(xì)菌相同。

2.2 細(xì)菌藥敏試驗(yàn)

分離后得到的細(xì)菌分別進(jìn)行針對(duì)阿莫西林、氨芐西林、頭孢噻呋、復(fù)方新諾明的試驗(yàn)，結(jié)果顯示細(xì)菌對(duì)上述4種藥物敏感。

2.3 細(xì)菌致病性

采集患牛子宮內(nèi)容物分離菌組織致病性試驗(yàn)，試驗(yàn)過程中選取50只小鼠，以隨機(jī)的方式分為10組，其中1組是空白對(duì)照。所有試驗(yàn)組采取腹腔注射方式，注入0.5 mL新培養(yǎng)細(xì)菌懸液。試驗(yàn)人員最后對(duì)發(fā)病與致死情況進(jìn)行觀察。發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)樣品包含大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等，當(dāng)小鼠腹腔攻毒后2 d內(nèi)出現(xiàn)死亡現(xiàn)象，尤其是大腸桿菌，腹腔攻毒后2～3 h便會(huì)致死，此時(shí)試驗(yàn)人員在病變臟器內(nèi)回收采集到接種菌。

3 臨床治療及飼養(yǎng)管理

3.1 診斷方法

3.1.1 臨床診斷法

母牛處于健康狀態(tài)時(shí)的子宮分泌物呈透明、拉絲狀，分泌量較多。母牛一旦患子宮內(nèi)膜炎，最為明顯的癥狀便是子宮分泌物增加，而且更加稀薄，不再拉絲。還會(huì)有部分母牛在患病后，子宮分泌量極少，顏色轉(zhuǎn)為灰白色，極為渾濁[4]。所以，采取臨床診斷法，可以按照牛的臨床癥狀進(jìn)行觀察和判斷，按照子宮分泌物特征進(jìn)行診斷，此方法比較適合患病初期的母牛。

3.1.2 直腸檢查法

直腸檢查法在子宮內(nèi)膜炎的臨床檢查中常見，規(guī)范的直腸檢查一般針對(duì)各個(gè)發(fā)病階段和各狀態(tài)的牛與子宮形態(tài)，展開反復(fù)檢查，方可準(zhǔn)確地判斷發(fā)病癥狀。直腸檢查法往往常適合經(jīng)驗(yàn)豐富的獸醫(yī)，檢查水平越高，檢查準(zhǔn)確率也就會(huì)比較高。飼養(yǎng)人員采用該方法進(jìn)行子宮內(nèi)膜炎的檢查，可能存在誤診率[5]。直腸檢查患病牛子宮頸呈粗大狀，雙側(cè)子宮角對(duì)稱度高，子宮彈性減弱，但并不會(huì)因此擴(kuò)大子宮腔。

3.1.3 內(nèi)窺鏡檢查陰道法

內(nèi)窺鏡檢查陰道法屬于一種直接檢查的方式，檢查結(jié)果準(zhǔn)確性往往較高，可以比較直接的觀察到母牛子宮頸口分泌物特性。若將內(nèi)窺鏡檢查陰道法和細(xì)菌分離組合應(yīng)用，有利于提高子宮內(nèi)膜炎檢查準(zhǔn)確率。實(shí)際上在臨床診斷中，使用該方法往往會(huì)在診斷環(huán)境、診斷設(shè)備上有比較嚴(yán)格的要求，而且價(jià)格高，這也限制此方法在臨床診斷中的應(yīng)用。此外，內(nèi)窺鏡檢查法與直腸檢查法組合應(yīng)用，也能提高診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。若母?；甲訉m內(nèi)膜炎，子宮頸外口位置必然有膿性分泌物[6]。

3.1.4 微生物培養(yǎng)法

導(dǎo)致牛子宮內(nèi)膜炎的原因與感染細(xì)菌有關(guān)，所以臨床診斷也可以通過培養(yǎng)微生物的方式進(jìn)行。診斷人員采集母牛在生產(chǎn)后子宮的排出物，便可了解子宮感染細(xì)菌的基本情況。臨床檢查環(huán)節(jié)建議將微生物培養(yǎng)法和藥敏試驗(yàn)法組合，更有后續(xù)的臨床治療。

3.1.5 子宮活組織法與細(xì)胞學(xué)檢查法

根據(jù)近年牛子宮內(nèi)膜炎積累的診斷經(jīng)驗(yàn)，細(xì)胞學(xué)檢查是相對(duì)重要的診斷方法之一，診斷準(zhǔn)確率高。診斷人員灌洗患病牛的子宮，觀察灌洗液中的多形粒細(xì)胞，如果有多形粒細(xì)胞存在即可診斷為子宮內(nèi)膜炎。子宮活組織檢查法也可以診斷母牛子宮內(nèi)膜炎，但該方法在應(yīng)用中，采樣可能會(huì)對(duì)子宮內(nèi)膜造成損壞，降低牛的機(jī)體繁殖性能。此方法往往不常用于子宮內(nèi)膜炎診斷。

3.2 治療

診斷牛患有子宮內(nèi)膜炎后，便可根據(jù)具體癥狀與類型提出治療方案。第一，急性子宮內(nèi)膜炎?；加写祟愖訉m內(nèi)膜炎的病牛，建議采用0.5%普魯卡因（200 mL）、青霉素和鏈霆素各80萬(wàn)IU、100萬(wàn)IU，將其完全混合后注入病牛的子宮，每日注入1次，1周為1個(gè)療程，待1個(gè)療程后根據(jù)恢復(fù)情況決定是否再延續(xù)。開始治療時(shí)病牛每日采取皮下注射、肌肉注射的方式，在病牛體內(nèi)注射己烯雌酚（4 mL），同時(shí)采取肌肉注射方法，注入50 IU催產(chǎn)素，待3～4 d后觀察病牛是否有全身癥狀，其間注意需要注意補(bǔ)糖、補(bǔ)鈣等[7]。

第二，慢性子宮內(nèi)膜炎。慢性子宮內(nèi)膜炎包括慢性卡他性子宮內(nèi)膜炎、慢性卡他膿性子宮內(nèi)膜炎、慢性膿性子宮內(nèi)膜炎3種。①慢性卡他性子宮內(nèi)膜炎。需要用到土霉素（2 g）、青霉素（160萬(wàn)IU）、多粘菌素（1 g），將其與植物油（20 mL）混合后獲得混懸劑，在病牛子宮內(nèi)部1次注入，每隔2日注射1次，持續(xù)注射3次即可。另外，病牛采取肌肉注射方式注入己烯雌酚（2 mL），第2日起改為皮下注射，向病牛注入催產(chǎn)素（35 IU），每日注射1次，持續(xù)5日即可。②慢性卡他膿性子宮內(nèi)膜炎。治療此類子宮內(nèi)膜炎，需要用到5%～10%的普魯卡因（10 mL）、青霉素/鏈霉素（100 IU）、垂體后葉素/催產(chǎn)素（25～50 IU），完全混合后，在病牛的尾根側(cè)面部位小窩前方上角，采取一次性注射方式注入體內(nèi)，同時(shí)需要沖洗子宮，在子宮中灌注藥物可獲得更加理想的治療效果。③慢性膿性子宮內(nèi)膜炎。此類疾病的治療，可根據(jù)病牛的體重，將鏈霉素（5 mg/kg）、5%葡萄糖溶液（20 mL）均勻混合，以靜脈注射方式注入病牛體內(nèi)，每日注射1次，在1個(gè)療程內(nèi)持續(xù)注射3 d，待3日后再繼續(xù)1個(gè)療程。若同時(shí)檢查發(fā)現(xiàn)存在敗血癥，每日用藥2次，5 d后可調(diào)整為1次/d，13 d為1個(gè)療程，其間還需沖洗病牛子宮及子宮內(nèi)部灌注藥物。如果病牛出現(xiàn)子宮積水或是積膿現(xiàn)象，治療人員應(yīng)先擴(kuò)張子宮頸，使子宮中的液體、膿汁快速排出，隨后可沖洗子宮并在子宮內(nèi)部灌注藥物。

第三，隱性子宮內(nèi)膜炎。一般母牛輸精之前的6 h及后12 h，使用青霉素（160 IU）/鏈霉素（200 IU）和10%葡萄糖/生理鹽水（50～80 mL），將其完全混合，一次灌入子宮。若輸精前、后并無(wú)用藥，建議在3 d后灌注，持續(xù)灌注3次，便可以將子宮炎癥消除，增加母牛受孕可能性。

3.3 臨床治療效果

根據(jù)牛子宮內(nèi)膜炎病原菌分離鑒定結(jié)果與各項(xiàng)治療方法，發(fā)現(xiàn)阿莫西林鈉、氨芐西林鈉、頭孢噻呋鈉、復(fù)方新諾明4種藥物，經(jīng)過2個(gè)療程的治療后，子宮內(nèi)膜炎治愈率依次可達(dá)到91.55%、83.62%、100%、83.65%。在治療過程中使用生理鹽水，對(duì)應(yīng)的無(wú)效率是91.66%。建議針對(duì)患病牛采取阿莫西林、氨芐西林、頭孢噻呋、復(fù)方新諾明進(jìn)行治療，可保證良好的治療效果。

3.4 飼養(yǎng)管理

對(duì)于母牛的飼養(yǎng)，需要保證攝入充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，采食飼料的過程中可以攝入有利于其免疫力的礦物質(zhì)、維生素等。飼養(yǎng)人員定期清掃、消毒牛舍，確保飼養(yǎng)環(huán)境潔凈度。母牛進(jìn)入配種階段，務(wù)必要對(duì)所有需要用到器械進(jìn)行消毒，其中包括助產(chǎn)人員的消毒，以免母牛造成細(xì)菌感染。母牛分娩與助產(chǎn)階段，其間各項(xiàng)操作都要規(guī)范，不能損壞母牛生殖道。

4 結(jié)束語(yǔ)

針對(duì)牛子宮內(nèi)膜炎的治療，采取分離鑒定方法，發(fā)現(xiàn)對(duì)于治療該病比較有效的藥物。結(jié)合子宮內(nèi)膜炎的病因選擇科學(xué)有效的臨床診斷與治療方法，總結(jié)最佳治療方案。針對(duì)不同類型的子宮內(nèi)膜炎采取針對(duì)性治療對(duì)策，既可保證該病的治療效率，又能為今后牛子宮內(nèi)膜炎的治療積累經(jīng)驗(yàn)。