趙群,田園,楊沛剛,張志棟,李勇
胃癌是全球癌癥發(fā)病率居第五位、死亡率居第四位的惡性腫瘤[1]。腹腔鏡和機(jī)器人手術(shù)的發(fā)展推動(dòng)了胃癌微創(chuàng)外科的進(jìn)步。對(duì)于胃癌患者,如何能夠最大程度避免淋巴結(jié)清掃不足或盲目擴(kuò)大清掃成為了外科醫(yī)生面臨的問(wèn)題。手術(shù)中更好的質(zhì)量控制對(duì)完成D2淋巴結(jié)清掃是必要的,術(shù)后標(biāo)本淋巴結(jié)的分檢更是精確進(jìn)行胃癌病理分期的重要因素。近年來(lái),借助于各種淋巴示蹤劑進(jìn)行的淋巴導(dǎo)航技術(shù)得到了廣泛發(fā)展,利用好淋巴導(dǎo)航技術(shù)是提高術(shù)中淋巴結(jié)清掃的質(zhì)控及糾正術(shù)后淋巴結(jié)分期偏倚的重要手段。不同類型的淋巴導(dǎo)航技術(shù)為胃癌微創(chuàng)手術(shù)帶來(lái)了不同的臨床效果,同時(shí)也受到了外科醫(yī)生的廣泛關(guān)注。
良好的淋巴結(jié)示蹤劑需具備的共性是:淋巴結(jié)組織吸收快并能清楚顯示淋巴結(jié)及淋巴結(jié)管;最好僅在淋巴結(jié)中聚集并能停留較長(zhǎng)時(shí)間;成本低,無(wú)毒性。目前臨床上淋巴結(jié)示蹤劑種類繁多,對(duì)淋巴導(dǎo)航技術(shù)中常用的示蹤劑進(jìn)行綜述,以期待臨床醫(yī)生能更好了解各種技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn)。
墨汁是由6%碳黑+89%水和一些穩(wěn)定劑制成的,具有固有的黑色、良好的水穩(wěn)定性和理想的流動(dòng)性[2],碳懸浮顆粒的平均直徑為254 nm,可以使染料顆粒通過(guò)毛細(xì)淋巴管壁的內(nèi)皮細(xì)胞間隙約500 nm進(jìn)入淋巴系統(tǒng)。但墨汁以大顆粒為主,局部注射有時(shí)可堵塞淋巴管,擴(kuò)散速度較慢,同時(shí)造成局部黑染嚴(yán)重。
亞甲藍(lán)是臨床上較為常用的一種藍(lán)染料示蹤劑,其分子量為373.9 kD,由于其分子量相對(duì)較小,注射后很快擴(kuò)散到周圍組織,部分可以進(jìn)入血液系統(tǒng),少量進(jìn)入淋巴管。亞甲藍(lán)的優(yōu)點(diǎn)在于其為水溶性色素,滲透性強(qiáng);價(jià)格便宜,藥品來(lái)源廣泛;缺點(diǎn)是染色快,消失也快,不適用術(shù)前注射或較長(zhǎng)時(shí)間手術(shù)。
放射性核素標(biāo)志物可以提供高質(zhì)量的淋巴顯像及術(shù)中淋巴示蹤。臨床上常用的核素載體包括99mTc-硫膠體、99mTc-蛋白膠體和單克隆抗體。其優(yōu)點(diǎn)在于核素所標(biāo)記的膠體顆粒直徑較大,可在淋巴組織中停留較長(zhǎng)時(shí)間,便于術(shù)中及術(shù)后的檢測(cè)。核素示蹤在乳腺癌等疾病中應(yīng)用廣泛且取得良好的臨床效果[3-4]。但放射性核素標(biāo)志物同樣存在局限性:鄰近腫瘤組織的淋巴結(jié)易出現(xiàn)放射重疊,影響檢測(cè)效果,同時(shí)檢測(cè)核素必須要依靠γ探測(cè)儀,使得在當(dāng)今胃癌微創(chuàng)手術(shù)中受到一定限制。
吲哚菁綠(indocyanine green,ICG)是一種特殊的熒光染料,其說(shuō)明書中的主要應(yīng)用為診斷各種肝臟疾病、了解肝臟的損害程度及其儲(chǔ)備功能。淋巴導(dǎo)航技術(shù)的應(yīng)用并未寫進(jìn)說(shuō)明書,但I(xiàn)CG可通過(guò)熒光脈管成像系統(tǒng)的波長(zhǎng)范圍在750~810 nm的外來(lái)光激發(fā)而產(chǎn)生波長(zhǎng)約840 nm的近紅外光[5]。ICG注射在胃黏膜下或漿膜下后與淋巴系統(tǒng)中的白蛋白結(jié)合引流至淋巴結(jié),然后通過(guò)特殊的顯像系統(tǒng)對(duì)淋巴管及淋巴結(jié)進(jìn)行熒光導(dǎo)航示蹤。
ICG的優(yōu)勢(shì)在于對(duì)胃腫瘤的精確定位;早期胃癌前哨淋巴結(jié)的標(biāo)記、進(jìn)展期胃癌的淋巴引流導(dǎo)航;術(shù)中吻合口血供的評(píng)估。缺點(diǎn)是需借助特定設(shè)備(熒光腹腔鏡或Ⅺ系統(tǒng)以上的達(dá)芬奇機(jī)器人),應(yīng)用范圍大大受限,開(kāi)放手術(shù)無(wú)法使用;淋巴結(jié)分揀仍需使用特定設(shè)備,增加設(shè)備損耗;代謝時(shí)間較短,新輔助治療前注射效果差。
納米炭混懸注射液(carbon nanoparticle suspension injection,CNSI)為活性炭顆粒,具有淋巴系統(tǒng)趨向性,注射到惡性腫瘤周緣組織中,被巨噬細(xì)胞吞噬,迅速進(jìn)入淋巴管,聚集滯留到淋巴結(jié),使淋巴結(jié)染成黑色,實(shí)現(xiàn)腫瘤區(qū)域引流淋巴結(jié)的活體染色。CNSI的平均直徑大于血管內(nèi)皮細(xì)胞間隙卻小于淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞間隙,注射后被引流至淋巴結(jié),不進(jìn)入血液,可在體內(nèi)滯留3~4個(gè)月[6]。其優(yōu)勢(shì)在于可以通過(guò)色差進(jìn)行腫瘤定位且在體內(nèi)滯留時(shí)間較長(zhǎng),新輔助治療前注射既不影響治療也同時(shí)會(huì)在手術(shù)中保證淋巴導(dǎo)航效果,術(shù)中淋巴結(jié)示蹤及術(shù)后淋巴結(jié)分揀無(wú)需借助其他設(shè)備即可達(dá)到效果。缺點(diǎn)是其價(jià)格較為昂貴且不能判斷吻合口血運(yùn),注射失誤容易造成手術(shù)野污染。
關(guān)于ICG術(shù)前黏膜下注射與術(shù)中漿膜下注射的臨床效果對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)[7]黏膜下組和漿膜下組總淋巴結(jié)檢出數(shù)無(wú)差異(49.8vs.49.2,P=0.713),黏膜下組的淋巴結(jié)不符合率與漿膜下組相當(dāng)(32.3%vs.33.3%,P=0.860)。黏膜下組和漿膜下組在術(shù)后并發(fā)癥發(fā)生率或嚴(yán)重程度方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(17.7%vs.16.3%,P=0.762)。黏膜下組的平均熒光成本高于漿膜下組($335.3vs.$182.4,P<0.001)。黏膜下組的總體治療滿意度評(píng)分低于漿膜下組(70.5%vs.76.1%,P=0.048)。故推薦術(shù)中漿膜下注射ICG,與黏膜下注射效果相當(dāng),且給患者帶來(lái)較低的經(jīng)濟(jì)和精神負(fù)擔(dān)。
然而在CNSI的不同注射方法對(duì)術(shù)后淋巴結(jié)檢出的影響研究中發(fā)現(xiàn)了與ICG不同的結(jié)果[8],術(shù)前內(nèi)鏡下黏膜注射CNSI和術(shù)中漿膜下注射CNSI均為安全、有效的淋巴結(jié)示蹤劑注射方法。術(shù)前內(nèi)鏡下黏膜注射CNSI較術(shù)中漿膜下注射CNSI能提高胃癌淋巴結(jié)清掃數(shù)目,尤其是第二站淋巴結(jié)清掃數(shù)目。
淋巴導(dǎo)航技術(shù)的出現(xiàn),對(duì)胃癌微創(chuàng)手術(shù)的質(zhì)量控制提供了幫助。規(guī)范化的D2淋巴結(jié)清掃借助淋巴導(dǎo)航技術(shù),不僅可以清晰地指引清掃區(qū)域淋巴結(jié),更重要的是可以有效避免清掃區(qū)域淋巴結(jié)的遺漏和超范圍的過(guò)度淋巴結(jié)清掃,減少了術(shù)后局部復(fù)發(fā),從而有效地提高了遠(yuǎn)期生存。除此之外,ICG還可用于評(píng)估食管下端、十二指腸殘端及殘胃切線與吻合口之間的血供[9-10],保證手術(shù)中消化道吻合質(zhì)量,有效減少了術(shù)后吻合口瘺的發(fā)生率。
2.3.1 在早期胃癌中的應(yīng)用 一項(xiàng)北美的前瞻性臨床研究顯示[11],亞甲藍(lán)聯(lián)合放射性核素的雙淋巴導(dǎo)航技術(shù)在術(shù)中前哨淋巴結(jié)檢出方面優(yōu)于單亞甲藍(lán)淋巴導(dǎo)航技術(shù)。但該研究目前納入患者相對(duì)較少,結(jié)論仍需更多的臨床數(shù)據(jù)進(jìn)一步驗(yàn)證。
ICG淋巴導(dǎo)航技術(shù)在國(guó)外臨床開(kāi)展相對(duì)較早,2001年日本學(xué)者Hiratsuka等[12]報(bào)道了ICG在早期胃癌前哨淋巴結(jié)檢出中的應(yīng)用研究,隨后的幾項(xiàng)研究也同樣證實(shí)ICG在腫瘤周圍注射對(duì)早期胃癌患者術(shù)中清掃前哨淋巴結(jié)有幫助,提高了前哨淋巴結(jié)的檢出率。在微創(chuàng)外科發(fā)展的今天,ICG聯(lián)合腹腔鏡或機(jī)器人手術(shù)的臨床研究逐年增加,韓國(guó)學(xué)者Kim等[13]研究發(fā)現(xiàn),術(shù)中黏膜下注射胃竇4~5個(gè)部位,在熒光腹腔鏡的導(dǎo)航下可以獲得更多的淋巴結(jié)檢出數(shù),尤其是幽門下區(qū)淋巴結(jié)。Kwon等[14]開(kāi)展了一項(xiàng)前瞻性ICG淋巴導(dǎo)航技術(shù)在機(jī)器人遠(yuǎn)端胃切除術(shù)中應(yīng)用的單臂臨床研究,熒光淋巴結(jié)站的檢出淋巴結(jié)數(shù)目明顯多于非熒光淋巴結(jié)站(5.5vs.2.5,P<0.001)。相同淋巴結(jié)站,4sb和6組熒光淋巴結(jié)站檢出淋巴結(jié)數(shù)目與非熒光淋巴結(jié)站檢出淋巴結(jié)數(shù)目有差異。相比于傾向性匹配分析后的對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組可以提高早期胃癌患者淋巴結(jié)檢出數(shù)目(48.9枚vs.35.2枚,P<0.01)。本中心開(kāi)展的CNSI淋巴導(dǎo)航技術(shù)應(yīng)用于早期胃癌根治術(shù)淋巴結(jié)清掃的研究已招募結(jié)束,研究結(jié)果即將揭曉。
2.3.2 在進(jìn)展期胃癌中的應(yīng)用 多名國(guó)外學(xué)者通過(guò)前瞻、隨機(jī)、對(duì)照研究[15-17]發(fā)現(xiàn)亞甲藍(lán)淋巴導(dǎo)航技術(shù)相比于常規(guī)手術(shù)可有效提高進(jìn)展期胃癌患者術(shù)后淋巴結(jié)檢出數(shù)目及每分鐘檢出淋巴結(jié)數(shù)目。但隨著近年來(lái)新型淋巴導(dǎo)航技術(shù)的發(fā)展,胃癌微創(chuàng)手術(shù)中應(yīng)用墨汁或亞甲藍(lán)的研究已較為少見(jiàn)。
國(guó)內(nèi)近些年來(lái)對(duì)ICG的研究應(yīng)用逐漸增多。黃昌明等對(duì)ICG在胃癌微創(chuàng)手術(shù)中的應(yīng)用做了一些類似國(guó)外的研究,結(jié)果顯示,術(shù)前內(nèi)鏡下注射ICG行腹腔鏡胃癌根治術(shù)患者術(shù)后檢出淋巴結(jié)總數(shù)多于非ICG組(50.5枚vs.42.0枚,P<0.01),降低了淋巴結(jié)不符合率,更好的進(jìn)行了手術(shù)質(zhì)量控制,且術(shù)后未增加并發(fā)癥發(fā)生概率[18]。
CNSI是我國(guó)自主研發(fā)產(chǎn)品,在此之前日本學(xué)者研發(fā)了類似的CH40活性炭微粒子,對(duì)其在胃癌中的應(yīng)用進(jìn)行了相關(guān)研究,Kitamura等[19]報(bào)道術(shù)前內(nèi)鏡下注射CH40可以提高胃癌患者淋巴結(jié)清掃數(shù)及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)清掃數(shù)。在國(guó)內(nèi),本中心開(kāi)展了多項(xiàng)關(guān)于CNSI淋巴導(dǎo)航技術(shù)在胃癌外科手術(shù)中的應(yīng)用的隨機(jī)對(duì)照臨床研究及回顧性分析,在與當(dāng)今先進(jìn)的微創(chuàng)技術(shù)機(jī)器人相結(jié)合的研究中顯示[20],CNSI聯(lián)合機(jī)器人對(duì)比單純機(jī)器人手術(shù)增加了術(shù)后淋巴結(jié)及微小淋巴結(jié)檢出數(shù),同時(shí)縮短了手術(shù)時(shí)間。
2.3.3 在新輔助治療中的研究 黃昌明團(tuán)隊(duì)在一項(xiàng)回顧性分析中發(fā)現(xiàn)[21],在局部進(jìn)展期胃癌新輔助治療后行腹腔鏡手術(shù)時(shí)漿膜下注射ICG可以獲撿更多的淋巴結(jié)數(shù)目,降低淋巴結(jié)不符合率。亞組分析顯示,在新輔助治療后腫瘤未縮小的患者中,ICG組的淋巴結(jié)檢出數(shù)顯著增加,淋巴結(jié)不符合率低于非ICG組。ICG組的術(shù)中失血量明顯少于非ICG組,而兩組的恢復(fù)情況和并發(fā)癥相似。
本中心一項(xiàng)局部進(jìn)展期胃癌新輔助治療后淋巴結(jié)分期準(zhǔn)確性的研究顯示[22],新輔助治療前內(nèi)鏡下注射CNSI相比于新輔助治療后注射可以提高術(shù)后淋巴結(jié)檢出總數(shù)、染色淋巴結(jié)數(shù)及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)數(shù),從而減少了淋巴結(jié)病理分期的偏倚,提高了準(zhǔn)確性。
2.3.4 淋巴導(dǎo)航技術(shù)的臨床診斷價(jià)值 國(guó)內(nèi)傅熙博等[23]對(duì)38例胃癌患者按腫瘤浸潤(rùn)深度分組,術(shù)中漿膜下注射亞甲藍(lán)定位前哨淋巴結(jié),根據(jù)術(shù)后病理判斷轉(zhuǎn)移情況,發(fā)現(xiàn)預(yù)測(cè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的敏感度、假陰性率和準(zhǔn)確率分別為83.3%、16.7%和92.1%。
ICG導(dǎo)航淋巴結(jié)切除術(shù)有助于提高術(shù)后淋巴結(jié)檢出數(shù),然而,ICG淋巴導(dǎo)航技術(shù)是否能檢測(cè)到所有潛在轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)尚不清楚,故Jung等[24]評(píng)價(jià)了術(shù)前1天腫瘤周圍注射ICG熒光淋巴顯像在胃癌手術(shù)中檢測(cè)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)和淋巴結(jié)站點(diǎn)的診斷價(jià)值,并分析其敏感度。研究發(fā)現(xiàn)592例患者中,150例出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。熒光淋巴造影檢測(cè)所有轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)組別的敏感度為 95.3%(143/150),假陰性率為4.7%(7/150),檢測(cè)所有轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的敏感度為81.3%(122/150)。非熒光站的陰性預(yù)測(cè)值為99.3%,非熒光淋巴結(jié)的陰性預(yù)測(cè)值為99.2%。對(duì)于檢測(cè)所有轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)組別,亞組分析顯示pT1a的敏感度為100%,pT1b為96.8%,pT2為100%,pT3為 91.3%,pT4a為93.6%。提示ICG引導(dǎo)的淋巴導(dǎo)航技術(shù)可促進(jìn)所有潛在的陽(yáng)性LN組完全切除,可以作為根治性清掃術(shù)的一種有用方法,有望替代傳統(tǒng)胃癌淋巴結(jié)清掃術(shù)。
國(guó)內(nèi)ICG在腹腔鏡胃癌根治術(shù)中臨床價(jià)值的研究中顯示[25],熒光成像檢測(cè)所有轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)組別的敏感度為86.8%。非熒光組別的陰性預(yù)測(cè)值為92.2%。亞組分析顯示對(duì)pT1、pT2、pT3和pT4a轉(zhuǎn)移組腫瘤的敏感度分別為97.7%、91.7%、86.2%和84.3%。無(wú)論胃切除術(shù)類型如何,檢測(cè)D1+和D2站中所有轉(zhuǎn)移組別對(duì)cT1-cT2疾病的診斷準(zhǔn)確率均達(dá)到100%。
同時(shí),本中心對(duì)CNSI淋巴導(dǎo)航技術(shù)在腹腔鏡或機(jī)器人遠(yuǎn)端胃癌根治術(shù)中染色規(guī)律及診斷價(jià)值進(jìn)行了分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)CNSI組檢出的淋巴結(jié)數(shù)顯著高于常規(guī)組(59.6vs.30.0,P<0.001)。在CNSI組中,在黑染淋巴結(jié)組檢出的淋巴結(jié)數(shù)量顯著高于未染色淋巴結(jié)組(9.2vs.3.5,P<0.001)。轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)在黑染的淋巴結(jié)組的檢出敏感度為97.8%,特異性為38.1%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為20.1%,陰性預(yù)測(cè)值為99.1%;轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)在黑染淋巴結(jié)的敏感度為97.6%,特異性為 35.4%,陽(yáng)性預(yù)測(cè)值為 11.6%,陰性預(yù)測(cè)值為99.4%[26]。表明CNSI在遠(yuǎn)端胃切除術(shù)中具有較高的診斷價(jià)值。
ICG與CNSI引導(dǎo)的淋巴導(dǎo)航技術(shù)廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)踐,本中心率先分析了兩者在機(jī)器人遠(yuǎn)端胃癌根治術(shù)中的有效性及安全性[27],CNSI組、ICG組和對(duì)照組患者對(duì)于1、4sb、7組的淋巴結(jié)檢出數(shù)并沒(méi)有明顯差異(P>0.05);CNSI組在3、5、6、8a、9、12a組淋巴結(jié)的檢出均優(yōu)于對(duì)照組(P<0.001、P=0.037、P<0.001、P=0.007、P=0.022、P=0.006),ICG組在3、6、11p組淋巴結(jié)的檢出均優(yōu)于對(duì)照組(P=0.001、P=0.011、P=0.023),此外CNSI組在3、4d、6、12a組淋巴結(jié)的檢出也均優(yōu)于ICG組(P=0.049、P=0.019、P=0.002、P=0.005),結(jié)果表明CNSI或ICG淋巴導(dǎo)航技術(shù)均在機(jī)器人遠(yuǎn)端胃癌根治術(shù)中具有較高的應(yīng)用價(jià)值,尤其是CNSI對(duì)于術(shù)中淋巴結(jié)清掃及術(shù)后淋巴結(jié)分檢較ICG效果更好,可更大程度提高手術(shù)質(zhì)量,同時(shí)糾正淋巴結(jié)分期偏倚,此外,CNSI在提升微小淋巴結(jié)檢出數(shù)方面明顯優(yōu)于ICG。二者不會(huì)增加患者在圍手術(shù)期的相關(guān)風(fēng)險(xiǎn),安全可行。在此之后本中心正在開(kāi)展CNSI對(duì)比ICG在胃癌微創(chuàng)手術(shù)中應(yīng)用的隨機(jī)對(duì)照臨床研究(FUTURE-01)。本中心及國(guó)內(nèi)其他學(xué)者也對(duì)CNSI應(yīng)用于胃癌開(kāi)放術(shù)的臨床效果進(jìn)行了研究[28-30],結(jié)果顯示與微創(chuàng)手術(shù)研究結(jié)論相似,可有效提高淋巴結(jié)檢出數(shù)。
目前已有相關(guān)的臨床研究分析不同淋巴導(dǎo)航技術(shù)對(duì)胃癌微創(chuàng)手術(shù)淋巴結(jié)清掃與檢出的影響,結(jié)果僅提示有助于檢出更多的淋巴結(jié)及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié),但缺乏長(zhǎng)期生存的結(jié)果。淋巴導(dǎo)航技術(shù)的應(yīng)用是否能改善患者的預(yù)后仍需要前瞻性研究的長(zhǎng)期隨訪結(jié)果來(lái)進(jìn)行評(píng)估。從既往的臨床研究來(lái)看,各種淋巴導(dǎo)航技術(shù)仍存在一定的局限性,ICG和CNSI的廣泛應(yīng)用雖然顯示出了很高的敏感度,但特異性不高,存在一定假陰性的可能,從而可能導(dǎo)致一部分轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)在清掃時(shí)被遺漏,這可能與轉(zhuǎn)移淋巴管被癌細(xì)胞阻塞、淋巴示蹤劑不能進(jìn)入轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)有關(guān)。另一方面淋巴導(dǎo)航技術(shù)提示了腫瘤周圍組織淋巴引流方向,但并不完全針對(duì)轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。臨床實(shí)踐過(guò)程中,在D2淋巴結(jié)清掃范圍外常見(jiàn)到染色淋巴結(jié),還應(yīng)酌情清掃,仍需臨床研究進(jìn)行驗(yàn)證。
綜上所述,淋巴導(dǎo)航技術(shù)在胃癌微創(chuàng)手術(shù)中的發(fā)展前景廣闊,進(jìn)展期胃癌新輔助治療后精準(zhǔn)淋巴結(jié)分期、不同淋巴導(dǎo)航技術(shù)之間前瞻性對(duì)比分析等都是未來(lái)淋巴導(dǎo)航技術(shù)在胃癌中的研究方向。期待更加精準(zhǔn)化淋巴導(dǎo)航技術(shù)應(yīng)用于臨床,使更多的患者獲益。