復(fù)合亞氯酸鈉泡騰膠囊的制備及質(zhì)量研究

林翠，董靜文，王田田

（河北科技大學(xué)化學(xué)與制藥工程學(xué)院，河北 石家莊 050018）

0 引言

亞氯酸鈉與酸性活化劑作用得到的有效成分二氧化氯，是國際上公認(rèn)的高效、安全、廣譜的強(qiáng)力殺菌劑，可以殺滅一切微生物。奶牛子宮內(nèi)膜炎在奶牛養(yǎng)殖生產(chǎn)期間屬常見多發(fā)病之一，是導(dǎo)致奶牛不孕的主要原因，使奶牛生產(chǎn)性能大幅度降低，造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前出現(xiàn)的治療藥物很多，可通過注射、口服和局部給藥等方式對(duì)患病奶牛進(jìn)行治療，但注射、口服給藥后藥物全身分布，局部藥物濃度不高，療效不理想。

而復(fù)合亞氯酸鈉泡騰膠囊通過局部給藥，有效提高生物利用度，膠囊外殼與奶牛體內(nèi)積液溶解完成后，泡騰顆粒將會(huì)在子宮內(nèi)生成泡沫和二氧化氯氣體，泡騰所產(chǎn)生的泡沫有助于藥物與子宮粘膜褶皺的充分接觸，達(dá)到局部殺菌、抗炎的作用，治療效果顯著。較泡騰片相比，膠囊殼溶解后能夠增加藥物與子宮粘膜的接觸面積，避免局部藥物濃度過高，減少對(duì)子宮粘膜的刺激，具有發(fā)泡迅速、藥物釋放迅速、刺激性小等優(yōu)點(diǎn)。

本實(shí)驗(yàn)對(duì)復(fù)合亞氯酸鈉泡騰膠囊的處方制備和質(zhì)量控制進(jìn)行研究，為其今后的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)儀器及材料

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器

電子天平，AL204 型，瑞士梅特勒托利多公司生產(chǎn)。

膠囊填充板，SD100K 型，義烏市楷旭進(jìn)出口有限公司生產(chǎn)。

干法制粒機(jī)，GL1-25 型，張家港市開創(chuàng)機(jī)械制造有限公司生產(chǎn)。

智能崩解儀，JB-II 型，天津市鑫洲科技有限公司生產(chǎn)。

高壓蒸汽滅菌器，KT-S770 型，廈門科立泰精密儀器有限公司生產(chǎn)。

電熱恒溫培養(yǎng)箱，DNP-9052 型，上海精其儀器有限公司生產(chǎn)。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料

亞氯酸鈉、酒石酸、無水四硼酸鈉、十二烷基硫酸鈉、碳酸氫鈉、甲基纖維素、硬脂酸鎂、無水硫酸鎂，分析純，天津市大茂化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。

大腸桿菌（ATCC 8099）、金黃色葡萄球菌（ACTT 6538），生物試劑，北京保藏生物科技有限公司生產(chǎn)。

健康成年新西蘭兔8 只，雌雄各半，體質(zhì)量1.7～2.5 kg，望都縣彤輝養(yǎng)殖公司提供，動(dòng)物合格證號(hào)：210905。

2 實(shí)驗(yàn)部分

處方確定泡騰膠囊的主要賦形劑為酸源、堿源構(gòu)成的泡騰劑及表面活性劑組成的穩(wěn)泡劑。以ClO2含量、崩解時(shí)限為評(píng)價(jià)指標(biāo)設(shè)計(jì)L9（34） 正交試驗(yàn)。經(jīng)方差分析泡騰膠囊最佳處方為A2B1C3，即復(fù)合亞氯酸鈉泡騰膠囊處方為（每100 粒） 亞氯酸鈉9.0 g、酒石酸20.5 g、無水四硼酸鈉2.5 g、十二烷基硫酸鈉2.5 g、碳酸氫鈉7.0 g、甲基纖維素2.0 g、硬脂酸鎂0.5 g、無水硫酸鎂6.0 g。本試驗(yàn)的應(yīng)用濃度定為100 mg/L，處方量為4 粒。正交試驗(yàn)因素水平表見表1。

表1 正交試驗(yàn)因素水平表Table 1 Factor level of orthogonal test

3 結(jié)果與討論

3.1 質(zhì)量研究

3.1.1 性狀

外觀整潔，無黏連、變形、滲漏、囊殼破裂現(xiàn)象。

3.1.2 發(fā)泡量

取具塞刻度試管，加蒸餾水2.0 mL，于37 ℃水浴中5 min，各管中分別投入泡騰膠囊1 粒，20 min 內(nèi)泡騰過程中最大發(fā)泡體積均在16.0～18.0 mL，符合2020年版中國獸藥典規(guī)定。

3.1.3 崩解時(shí)限

抽取泡騰膠囊6 粒，于裝有200 mL 加熱至20 ℃蒸餾水的燒杯中進(jìn)行崩解時(shí)限檢測，泡騰膠囊均在15 min 內(nèi)崩解完成，符合2020年版中國獸藥典規(guī)定。

3.1.4 水分

稱取泡騰顆粒5 g，平鋪于干燥恒重的扁形稱量瓶中，在105 ℃下干燥5 h 后移置干燥器中，冷卻后精密稱定，再在上述溫度下干燥1 h，放冷，稱重，直至連續(xù)2 次稱重差異不超過5 mg 為止。三批泡騰膠囊的含水量均小于4.0%，符合要求。

3.1.5 流動(dòng)性

測量泡騰顆粒休止角以確定其流動(dòng)性。試驗(yàn)重復(fù)3 次，取其平均值，測定結(jié)果均＜40 ℃，該泡騰顆粒流動(dòng)性良好。

3.1.6 含量測定

隨機(jī)抽取泡騰膠囊4 粒，分別放于裝有37 ℃蒸餾水的棕色廣口瓶中，待溶解完成后，按照五步碘量法對(duì)溶液中二氧化氯含量進(jìn)行測定。樣品溶液中二氧化氯含量均在（100±2） mg/L 范圍內(nèi)，二氧化氯含量準(zhǔn)確，符合要求。

3.2 體外殺菌性能研究

本試驗(yàn)選用革蘭氏陰性代表菌大腸桿菌和陽性代表菌金黃色葡萄球菌進(jìn)行體外殺菌性能研究。

隨機(jī)抽三批取樣品膠囊，使用無菌硬水配制試驗(yàn)所需濃度的樣品溶液，置20 ℃水浴保溫備用。移取試驗(yàn)用菌懸液和有機(jī)干擾物各0.5 mL 于無菌試管中，再加入4.0 mL 樣品溶液，待兩者作用至預(yù)定時(shí)間，吸取0.5 mL 混合液于裝有4.5 mL 中和劑的無菌試管中，計(jì)時(shí)10 min，取1.0 mL 樣液接種于平皿上，同時(shí)用稀釋液代替樣品溶液進(jìn)行平行試驗(yàn)，作為陽性對(duì)照。由表2可以看出，當(dāng)樣品溶液濃度為100 mg/L 時(shí)，對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌作用3 min 后殺滅對(duì)數(shù)值均大于5.00，殺菌性能良好。懸液定量殺菌試驗(yàn)結(jié)果見表2。

表2 懸液定量殺菌試驗(yàn)結(jié)果Table 2 Suspension quantitative germicidal test results

3.3 安全性能研究

3.3.1 完整皮膚刺激試驗(yàn)

準(zhǔn)備4 只健康的新西蘭兔，在試驗(yàn)前24 h，對(duì)其背部兩側(cè)進(jìn)行脫毛，去毛范圍約3 cm ×3 cm。24 h 后將泡騰膠囊溶解為實(shí)際應(yīng)用濃度5 倍的溶液，直接滴于兔子一側(cè)的去毛皮膚上，另一側(cè)滴加生理鹽水作為空白對(duì)照。4 h 后，用溫水對(duì)兔子皮膚進(jìn)行沖洗，于1、24 和48 h 觀察皮膚局部反應(yīng)。結(jié)果表明，兔子背部兩側(cè)皮膚均未出現(xiàn)紅斑和水腫現(xiàn)象，該泡騰膠囊對(duì)兔子皮膚無刺激性，安全性能良好，完整皮膚刺激試驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。

圖1 完整皮膚刺激試驗(yàn)結(jié)果Fig.1 Results of a complete skin irritation test

3.3.2 破損皮膚刺激試驗(yàn)

準(zhǔn)備4 只健康的新西蘭兔，同上述操作方式進(jìn)行去毛處理，24 h 后，使用75%酒精對(duì)兔子皮膚進(jìn)行消毒，并用滅菌刀片在去皮區(qū)內(nèi)劃一個(gè)“井”形破損傷口，在該破損皮膚區(qū)內(nèi)滴加相同濃度的樣品溶液。另一側(cè)滴加生理鹽水作為空白對(duì)照。4 h后用溫水對(duì)兔子皮膚進(jìn)行沖洗，于1、24 和48 h觀察皮膚局部反應(yīng)。結(jié)果表明，兔子背部兩側(cè)傷口均未出現(xiàn)紅斑和水腫現(xiàn)象，該泡騰膠囊對(duì)兔子皮膚無刺激性，安全性能良好，破損皮膚刺激試驗(yàn)結(jié)果如圖2所示。

圖2 破損皮膚刺激試驗(yàn)結(jié)果Fig.2 Results of a damaged skin irritation test

3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

3.4.1 影響因素試驗(yàn)

取除去外包裝的樣品膠囊若干粒，置于開口棕色廣口瓶內(nèi)，在高溫（60 ℃）、高濕（25 ℃、RH 75%）、強(qiáng)光（4 500 lx） 環(huán)境中放置10 d，分別于第0 d、第5 d、第10 d 進(jìn)行取樣，對(duì)穩(wěn)定性考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測。影響因素試驗(yàn)結(jié)果見表3。

表3 影響因素試驗(yàn)結(jié)果Table 3 Test results of influencing factors

由表3可以看出，在高溫、強(qiáng)光照射環(huán)境下各項(xiàng)試驗(yàn)指標(biāo)基本不變，在高濕環(huán)境下膠囊外殼發(fā)生破裂現(xiàn)象，泡騰顆粒吸濕增重較大，二氧化氯含量下降率為31.23%。因此說明高濕環(huán)境對(duì)樣品膠囊影響較大，應(yīng)使用密封防潮包裝。

3.4.2 加速試驗(yàn)

取3 批市售包裝的樣品膠囊，置于溫度40 ℃、RH 75%的恒溫恒濕箱中6 個(gè)月，分別于第1、2、3 和6 個(gè)月取樣對(duì)穩(wěn)定性考察項(xiàng)目進(jìn)行檢測。加速試驗(yàn)結(jié)果見表4。

表4 加速試驗(yàn)結(jié)果Table 4 Accelerated test results

由表4可以看出，其外觀、pH 值、發(fā)泡量、崩解時(shí)限和二氧化氯含量均發(fā)生了變化，但各項(xiàng)試驗(yàn)指標(biāo)均在2020年版中國獸藥典規(guī)定的范圍內(nèi)，因此說明該樣品膠囊在加速條件下性質(zhì)穩(wěn)定。

3.4.3 長期試驗(yàn)

取3 批市售包裝的樣品膠囊，置于溫度25 ℃、RH 60%的恒溫恒濕箱中12 個(gè)月，分別于第0 個(gè)月、3 個(gè)月、6 個(gè)月、9 個(gè)月、12 個(gè)月取樣檢測。由表5可以看出，其外觀、pH、發(fā)泡量、崩解時(shí)限等試驗(yàn)指標(biāo)均無明顯變化，二氧化氯含量下降率均小于4.00%，由此可知，各項(xiàng)試驗(yàn)指標(biāo)均在2020年版中國獸藥典規(guī)定的范圍內(nèi)，因此說明該樣品膠囊在12 個(gè)月內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定。長期試驗(yàn)結(jié)果見表5。

表5 長期試驗(yàn)結(jié)果Table 5 Long-term test results

4 結(jié)語

（1） 本實(shí)驗(yàn)的處方設(shè)計(jì)安全合理，制備工藝簡單、穩(wěn)定、成本低廉，泡騰膠囊質(zhì)量研究結(jié)果表明，各項(xiàng)指標(biāo)均符合2020年版中國獸藥典規(guī)定。

（2） 體外殺菌性能研究結(jié)果表明，復(fù)合亞氯酸鈉泡騰膠囊溶液濃度為100 mg/L 時(shí)，對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌作用3 min 后殺滅對(duì)數(shù)值均大于5.00，該樣品膠囊的體外殺菌性能良好。

（3） 安全性能研究結(jié)果表明，在給藥48 h內(nèi)，新西蘭兔背部兩側(cè)皮膚均未出現(xiàn)紅斑和水腫現(xiàn)象，該樣品膠囊的安全性能性能良好。

（4） 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明，溫度和光照對(duì)樣品膠囊穩(wěn)定性考察指標(biāo)基本無影響，濕度影響較大；樣品膠囊在12 個(gè)月內(nèi)質(zhì)量穩(wěn)定，市售包裝對(duì)藥品質(zhì)量無影響。