探討HPV聯(lián)合TCT檢測在宮頸疾病篩查中的應(yīng)用價(jià)值

張熙淵

（甘肅省白銀市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院，甘肅 白銀 730900）

宮頸系統(tǒng)疾病是婦科臨床最常見、多發(fā)病之一，而宮頸癌是婦科系統(tǒng)疾病中最典型的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率僅次于乳腺癌，嚴(yán)重影響患者的生存質(zhì)量。宮頸癌早期基本無癥狀，病程發(fā)展又非常緩慢，發(fā)展為癌前病變一般需要數(shù)年乃至數(shù)十年的漸變過程。但是一旦發(fā)現(xiàn)陰道有經(jīng)常性不規(guī)律流血、不明液體排出，且檢查身體貧血嚴(yán)重以及腎盂有積水時(shí)已發(fā)展為后期階段[1]，為完全治愈造成了難以克服的困難。研究表明[2]，HPV與宮頸上皮瘤變、生殖道尖銳濕疣、宮頸癌變等具有高度的相關(guān)性。近年來隨著對宮頸癌病理機(jī)制的深入研究，其引發(fā)原因得以明確，通常認(rèn)為，高危型人乳頭瘤病毒（HRHPV）是宮頸癌的主要致病原因。因此，早期或定期進(jìn)行婦科疾病檢查是有效篩查和預(yù)防因HPV持續(xù)感染致宮頸癌變的有效措施[3]。只有早做篩查及早發(fā)現(xiàn)癌前病變因素，采取有效措施控制病情發(fā)展，才能切實(shí)降低宮頸癌的發(fā)病率。目前篩查宮頸癌應(yīng)用比較的方法主要有：薄層液基細(xì)胞學(xué)（Thinprep Cytology Test,TCT）檢查、高危型人乳頭瘤病毒（Human Papilloma Viruses,HPV）檢測、宮頸刮片和陰道鏡等。TCT檢查是利用宮頸癌細(xì)胞學(xué)分類檢查的一種先進(jìn)技術(shù)，其與傳統(tǒng)的宮頸刮片、陰道鏡檢查相比，宮頸病變細(xì)胞檢出率更高，而HPV檢測具有針對性且準(zhǔn)確率很高。因此，選擇合理而高效的篩查方法對早期診斷并確診，以及降低宮頸癌發(fā)生率具有十分重要的意義。故本文選取73例宮頸癌病變患者的病歷資料做回顧性分析，就HPV聯(lián)合TCT檢測在宮頸疾病篩查方面的有效性及應(yīng)用價(jià)值進(jìn)行探究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 樣本資料

選取2020年1月—2021年10月在甘肅省白銀市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院婦科門診就診的宮頸系統(tǒng)疾病患者124例，均接受HPV、TCT單一檢查及HPV+TCT聯(lián)合檢查，并結(jié)合陰道鏡活檢及組織病理學(xué)結(jié)果，最終確診為宮頸癌前病變者73例作為本次研究的樣本資料。患者年齡最小的23歲，最大的71歲，平均年齡35.76±5.13歲，其中23～30歲22例，31～35歲28例，36～45歲16例，46歲以上7例。

選入原則：①均經(jīng)行HPV聯(lián)合TCT檢查；②均已婚且性生活史3年以上；③子宮及宮頸無切除、腫瘤史，且宮體完好，盆腔無放射性治療史；④無妊娠或產(chǎn)后恢復(fù)6個(gè)月以上；⑤所有入選者病歷資料完整，符合本次研究要求。排除原則：①同時(shí)患有其他婦科腫瘤疾病者；②伴有急性陰道炎癥者；③中途放棄者，隨訪或病歷資料不全者。在臨床基礎(chǔ)資料方面，比如年齡、受教育程度、家庭環(huán)境等，個(gè)體之間的差別等兩組患者數(shù)據(jù)比較無意義（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 采集標(biāo)本

所有入選患者標(biāo)本取樣時(shí)必須滿足以下3點(diǎn)要求：①3 d內(nèi)陰道不能放置藥物、常規(guī)沖洗、物理理療等任何處理；②24 h內(nèi)不能有性生活；③不在月經(jīng)期。滿足以上條件患者，由經(jīng)驗(yàn)豐富的?？漆t(yī)生用窺器使宮頸張開，將宮口不需要采集的分泌物和血液黏稠物清除干凈后，用專用取樣毛刷于宮口及宮頸鱗柱交界處，以順時(shí)針方向旋刷3～5圈，用時(shí)10 s左右，準(zhǔn)確采取脫落此處的上皮細(xì)胞組織或分泌物，然后將采集的標(biāo)本物放入裝有保存液且標(biāo)注姓名或編碼的小瓶中保存，切記擰緊瓶蓋，豎直放置或立即送檢；一次取樣2～3份，一份做HPV用，一份做TCT用，剩余一份聯(lián)合檢測備用。

1.2.2 HPV檢查法

取之前所采集的標(biāo)本一份，通過HPV分型檢測試劑盒進(jìn)行分析檢測，并確認(rèn)最常見的23種HPV基因型號。包括17種高危亞型：HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82 和6 種 低危亞型：HPV6、11、42、43、81、83型。HPV陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)：結(jié)果≥1.0 pg/mL為陽性診斷。

1.2.3 TCT檢查法

將另一份采集的標(biāo)本送至病理科，按照液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測儀說明書，通過震蕩將標(biāo)本細(xì)胞分散并混合均勻，用專用制片機(jī)制成基液薄層涂片，再用95%的乙醇加以固定約0.5 h，然后進(jìn)行巴氏染色，在顯微鏡下閱片和診斷。陽性診斷標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)TBS檢測系統(tǒng)將檢查結(jié)果劃分為：①鱗狀細(xì)胞癌（SCC）；②高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）；③低度鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）；④意義不明確的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（ASLUS）等幾種。其中前3種可作為宮頸癌陽性診斷。

1.2.4 病理組織檢查

對HPV、TCT檢查陽性及HPV+TCT聯(lián)合檢查雙陽性病例再進(jìn)行病理組織檢查。病變組織檢測結(jié)果可分為：①鱗狀細(xì)胞癌；②高度鱗狀上皮內(nèi)病變；③低度鱗狀上皮內(nèi)病變；④正?；蜓装Y。以此分辨和確認(rèn)真假陽性或陰性結(jié)果，使檢測結(jié)果更準(zhǔn)確。

1.2.5 儀器與試劑

本次篩查所用PCR擴(kuò)增儀、HPV-DNA提取試劑盒、人乳頭瘤病毒基因分型檢測試劑盒，均由香港凱普公司生產(chǎn)并提供技術(shù)支持。液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測儀則由南寧松景天倫生物科技有限公司生產(chǎn)。

1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

本次研究數(shù)據(jù)用SPSS 21.0軟件統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以χ2檢驗(yàn)，P＜0.05時(shí)差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病理活檢與檢出情況

HPV、TCT及HPV聯(lián)合TCT三種方式檢查結(jié)果對比。病理活檢結(jié)果顯示，陽性73例，陰性51例。124例受檢者中HPV檢測顯示陽性79例，陽性檢出率為63.71%，陽性患者中病理活檢顯示，17例正常或炎癥、陽性62例。TCT檢測結(jié)果顯示，陽性72例，陽性檢出率為58.06%，陽性患者病理活檢顯示，2例正?；蜓装Y，陽性70例。HPV+TCT聯(lián)合檢查結(jié)果顯示，陽性73例，陽性檢出率為58.87%，陽性病理活檢顯示，正?；蜓装Y0例，陽性73例。具體數(shù)據(jù)詳見表1。

表1 病理活檢與三種檢測方法陽性檢出情況對比（例）

2.2 HPV檢查、TCT檢測、HPV聯(lián)合TCT檢測效果對比

經(jīng)過數(shù)據(jù)處理，分析對比可以看出：HPV聯(lián)合TCT檢測的靈敏度、診斷準(zhǔn)確性均優(yōu)于HPV或TCT單一檢查結(jié)果，對比差異明顯（P＜0.05）。而陽性預(yù)測值和陰性預(yù)測值差異不明顯，比較無意義（P＞0.05），見表2。

表2 三種檢查方式檢測效果指標(biāo)對比（%）

3 討論

在婦科常見病癥中，炎癥性疾病更為多見，給患者的生活質(zhì)量造成了諸多痛苦等不良影響，但惡性腫瘤造成的危害和影響最大，他涉及到患者的生存及生活質(zhì)量等多方面，宮頸癌便是其中之一，應(yīng)引起廣大已婚女性及全社會的重視。盡管該病癥高危且對患者影響巨大，但是宮頸癌"漫長"的潛伏期卻給了人們控制甚至遏制其早期癌變和發(fā)展的時(shí)機(jī)。有研究顯示，早期宮頸癌患者治愈率高達(dá)89.5%，因此早期發(fā)現(xiàn)和治療就顯得尤為重要，而篩查方法的科學(xué)與有效對早發(fā)現(xiàn)早治療以及提高治愈率、降低病死率意義重大[4]，需加強(qiáng)這方面的研究和探討。臨床大量病例及相關(guān)學(xué)術(shù)研究證實(shí)，HPV感染是導(dǎo)致宮頸癌變的主要因素，尤其是高危型HPV持續(xù)發(fā)展。統(tǒng)計(jì)顯示，90%以上的宮頸癌患者都伴有高危型HPV感染[5-6]。傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在臨床上對于宮頸疾病篩查的主要方式多采用巴氏五級診斷法，但實(shí)踐證明其檢出率低、假陰性高達(dá)10%～20%。近年來，隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，高危HPV檢測、陰道鏡活檢及組織病理學(xué)檢查等準(zhǔn)確性更高的方式方法不斷涌現(xiàn)，特別是TCT液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測，因其先進(jìn)性和準(zhǔn)確性被廣泛應(yīng)用在宮頸疾病篩查，取得了積極成效。盡管如此，但這些技術(shù)均屬于有創(chuàng)性和侵入性檢查，很難作為普適性方法進(jìn)行篩查，同時(shí)這些手段均不能百分之百單一篩查出宮頸癌變，因?yàn)榛蚨嗷蛏偈苤朴诟鞣N不確定因素，比如TCT很先進(jìn)，但人為操作環(huán)節(jié)多，容易受主觀因素影響；HPV檢測雖然速度快、特異度和靈敏度高，但易受所采標(biāo)本中脫落細(xì)胞樣量及宮頸疾病大小等因素影響[7]，等等。因此還需加強(qiáng)對其他篩查方法的探究[8]。比如將多種檢測手段結(jié)合起來，取各自所長以彌補(bǔ)不足，就能有效提升檢查結(jié)果的準(zhǔn)確度，降低誤診和漏診率。

文章選取124例宮頸疾病患者中的73例癌前病變患者，分別研究采用HPV、TCT和HPV聯(lián)合TCT檢測法篩查宮頸癌的有效性及使用價(jià)值。結(jié)果顯示，HPV和TCT檢測，在敏感性方面HPV（90.87%）高于TCT（85.55%），但特異度不如TCT，兩者特異度存在很大差異，分別是36.29%、45.79%，比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。HPV檢測結(jié)果陽性79例，經(jīng)行病理活檢確診62例為陽性；TCT 檢測出陽性72例，結(jié)合病理活檢最終確定70例為陽性；TCT聯(lián)合HPV檢查結(jié)果陽性為73例，經(jīng)組織病理學(xué)檢測兩者結(jié)果幾乎一致，由此可見，聯(lián)合檢查能夠顯著減少非研究需要因素的影響，其診斷結(jié)果的準(zhǔn)確度（98.4%）、靈敏度（95.16%）均明顯高于單一檢查診斷結(jié)果（P＜0.05），大大提高了篩查的有效性，減少了誤診率，聯(lián)合檢測的誤診率為（5.81%），顯著低于HPV檢查（32.47%）和TCT 檢測（18.35%）結(jié)果。說明HPV聯(lián)合TCT檢查在宮頸疾病篩查中具有很高的應(yīng)用價(jià)值，對于宮頸癌癥病變在早期及時(shí)發(fā)現(xiàn)、篩查、診斷、治療有現(xiàn)實(shí)意義。因此，臨床效果好，使用價(jià)值高。據(jù)周慶云[9]等研究發(fā)現(xiàn)，甘肅地區(qū)女性感染人乳頭瘤病毒占有相當(dāng)比例，尤其是高危型和亞型分布具有一定的地域性，應(yīng)有針對性進(jìn)行篩查。對于像白銀市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院這樣的基層醫(yī)院更應(yīng)大力推廣，因?yàn)?，這些地方地處偏遠(yuǎn)，衛(wèi)生資源匱乏，人們的經(jīng)濟(jì)文化水平比較落后，限制了對宮頸系統(tǒng)疾病的認(rèn)知，患病后能扛則扛，等到診療發(fā)現(xiàn)時(shí)已經(jīng)造成了不可挽回的傷害，所以經(jīng)濟(jì)高效的聯(lián)合篩查方法更適合在農(nóng)村應(yīng)用。

綜上所述，經(jīng)過對比分析研究，HPV分型檢測聯(lián)合TCT技術(shù)檢查，在宮頸疾病癌前病變各種篩查方法中，其有效性、準(zhǔn)確率及應(yīng)用價(jià)值更高，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠無創(chuàng)傷，易于患者接受，適合在城市和農(nóng)村地區(qū)廣泛應(yīng)用。