中藥補充檢驗方法研究及在市場監(jiān)管中的作用

程顯隆

中國食品藥品檢定研究院

李明華

中國食品藥品檢定研究院

郭曉晗

中國食品藥品檢定研究院

楊建波

中國食品藥品檢定研究院

荊文光

中國食品藥品檢定研究院

康榮

中國食品藥品檢定研究院

魏鋒*

中國食品藥品檢定研究院

馬雙成*

中國食品藥品檢定研究院

新修訂《藥品管理法》第一百二十一條規(guī)定[1]：“對假藥、劣藥的處罰決定，應(yīng)當依法載明藥品檢驗機構(gòu)的質(zhì)量檢驗結(jié)論。”藥品檢驗檢測部門出具質(zhì)量檢驗結(jié)論即報告書的技術(shù)依據(jù)是藥品標準。目前，國家藥品標準包括《中國藥典》、部頒標準、局頒標準。對于省級藥品檢驗檢測機構(gòu)，其在檢測中還可能采納地方藥材標準及地方飲片炮制規(guī)范。上述標準，無論是國家標準還是地方標準，都是從正面的角度表征中藥的特征，即中藥應(yīng)當具有的特性。標準針對的問題主要是種植/養(yǎng)殖、采收、加工、炮制、流通、儲藏等生產(chǎn)環(huán)節(jié)不規(guī)范導(dǎo)致的質(zhì)量問題。檢測的指標一般是藥品應(yīng)當含有的化學成份。對于摻偽、摻雜、染色、增重等故意人為因素導(dǎo)致的質(zhì)量問題，往往需要檢測的是藥品不應(yīng)當含有的成份。按藥品標準檢測，有時發(fā)現(xiàn)不了相關(guān)問題，并且以此為目的建立的檢測方法不屬于按《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》生產(chǎn)的藥品標準規(guī)定的范疇。這些用于打擊摻偽造假的檢測方法要成為藥品檢驗檢測機構(gòu)出具檢驗報告書的法定依據(jù)，必須先經(jīng)過國家藥品監(jiān)督管理部門的批準。2002年頒布的《藥品管理法實施條例》第五十八條規(guī)定[2]：“對有摻雜、摻假嫌疑的藥品，在國家藥品標準規(guī)定的檢驗方法和檢驗項目不能檢驗時，藥品檢驗機構(gòu)可以補充檢驗方法和檢驗項目進行藥品檢驗；經(jīng)國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門批準后，使用補充檢驗方法和檢驗項目所得出的檢驗結(jié)果，可以作為藥品監(jiān)督管理部門認定藥品質(zhì)量的依據(jù)?！贝艘?guī)定，明確了藥品補充檢驗方法的法律地位。原國家藥品監(jiān)督管理局于2003年發(fā)布了《關(guān)于報請批準用補充檢驗方法和項目進行藥品檢驗有關(guān)問題的通知》[3]，正式啟動對藥品補充檢驗方法和檢驗項目的審批[4]。自此，補充檢驗方法的研究逐步開展起來，其在藥品監(jiān)管中的作用也越來越突出[5]。

一、補充檢驗方法的研究

補充檢驗方法雖然與藥品標準的作用不同，但在研究工作中，對其要求與標準研究工作一樣。需要進行相關(guān)的方法學研究和復(fù)核工作等。為規(guī)范和指導(dǎo)藥品補充檢驗方法研制工作，在《總局關(guān)于發(fā)布藥品補充檢驗方法研制指南的通告》中，要求藥品檢驗機構(gòu)應(yīng)按照《藥品補充檢驗方法研制技術(shù)要求》開展補充檢驗方法起草和研制工作，明確了補充檢驗方法的研制范圍、主要研制內(nèi)容、方法確立、方法研制、方法復(fù)核、方法申報等，并以附件的形式對方法研制、方法復(fù)核提出了更為詳細的要求。

補充檢驗方法主要研制內(nèi)容包括：藥品中非法添加化學物質(zhì)；化學增重、染色、摻雜摻假；擅自添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑及輔料；未按批準的生產(chǎn)工藝生產(chǎn)從而影響藥品質(zhì)量；存在其他風險物質(zhì)。針對仿冒產(chǎn)品以及未獲得批準文號產(chǎn)品的方法原則上不納入藥品補充檢驗方法范疇。建立補充檢驗方法的原則：確實存在摻假、造假嫌疑的商品流通；現(xiàn)行標準無法控制其質(zhì)量；缺失補充檢驗項目，將無法控制該藥品或該類藥品的藥用安全與有效。

中藥補充檢驗方法中常用的檢測方法包括顯微鑒別法、沉淀反應(yīng)、薄層色譜法、高效液相色譜法、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等[6-10]。顯微鑒別法多用于中藥中異性有機物的檢查，沉淀反應(yīng)多用于增重的無機鹽的檢查，薄層色譜法、高效液相色譜法多用于非法添加、染色中的待測成份的檢查，高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法多用于待測成份的檢查和驗證。選擇檢測方法的原則是專屬性強、重現(xiàn)性好、靈敏度高、快速簡便、經(jīng)濟適用。

補充檢驗的方法學研究內(nèi)容主要依據(jù)《中國藥典》2020年版四部通則“9101 分析方法驗證指導(dǎo)原則”。根據(jù)檢測項目的不同，分析方法驗證的指標也有所不同。補充檢驗方法的申報資料一般要求包括起草背景及依據(jù)、擬定的方法草案、方法學驗證數(shù)據(jù)、按擬定方法草案檢驗的結(jié)果、復(fù)核情況等。截至2022年2月15日，國家藥品監(jiān)督管理部門共批準了237 個中藥補充檢驗方法。

二、補充檢驗方法在市場監(jiān)管中的作用

1.打擊中藥材摻偽造假

隨著中藥產(chǎn)業(yè)的大力發(fā)展，部分中藥材及飲片品種的資源呈短缺狀態(tài)，中藥材摻偽造假獲取經(jīng)濟利益的現(xiàn)象時有發(fā)生。以膠類藥材為例，常見的膠類藥材包括阿膠、鹿角膠、龜甲膠、黃明膠和新阿膠等。其中，阿膠、鹿角膠、龜甲膠收載于歷版《中國藥典》中，原料分別來源于驢皮、鹿角、龜甲；黃明膠、新阿膠收載于部頒標準中，原料分別來源于牛皮、豬皮。市場上，以低價格膠類冒充高價格膠類、以雜皮熬膠冒充膠類，甚至以工業(yè)上生產(chǎn)的皮革下腳料冒充膠類藥材的情況時有發(fā)生。膠類摻偽造假行為已經(jīng)延伸到中成藥生產(chǎn)中。國家藥監(jiān)局為了打擊亂象，組織藥品檢測機構(gòu)開展監(jiān)測方法研究工作[11-14]，先后批準了多項補充檢驗方法。其中，涉及膠類藥材方面的包括：阿膠中牛皮源成份檢查補充檢驗方法，鹿角膠中牛、驢皮源成份檢查補充檢驗方法，龜甲膠中牛、驢皮源成份檢查補充檢驗方法，阿膠中豬皮源成份檢查補充檢驗方法，鹿角膠中豬皮源成份檢查補充檢驗方法，龜甲膠中豬皮源成份檢查補充檢驗方法[15]。涉及含膠類中成藥的補充檢驗方法主要是針對牛皮源成份的檢測，已經(jīng)發(fā)布的品種有阿膠補血膏、阿膠補血口服液、驢膠補血顆粒、婦舒丸、女金丸、阿膠顆粒、阿膠黃芪口服液、婦科止帶片等。

再如，半夏為天南星科半夏屬植物半夏Pinellia ternate（Thunb.） Breit. 的塊莖， 是常用的化痰中藥。半夏的市場用量較大，市場上以虎掌南星冒充半夏的問題較為突出[16]。虎掌南星為天南星科半夏屬植物掌葉半夏Pinellia pedatisectaSchott 的 塊莖，收載于《山東省中藥材標準》2012年版[17]、《湖北省中藥材質(zhì)量標準》2018年版[18]、《江蘇省中藥材標準》2016年版[19]、《河南省中藥飲片炮制規(guī)范》2005年版[20]等地方標準中。《中國藥典》2020年版中半夏標準的檢測項目包括性狀、鑒別、檢查、浸出物等。沒有專屬性強的質(zhì)量控制指標。針對這種現(xiàn)象，國家藥監(jiān)局于2019年發(fā)布了《半夏藥材及飲片生半夏、法半夏、姜半夏、清半夏中水麥冬酸檢查項補充檢驗方法》（BJY 201920），有效地打擊了半夏摻偽的行為。

另外，樹脂類藥材中添加松香酸的問題也比較突出。例如，含有乳香、沒藥的中成藥以松香摻假乳香、沒藥投料，甚至出現(xiàn)完全以松香代替投料的情況[21-22]。針對此問題，國家藥品監(jiān)督管理部門先后批準了乳香、沒藥、血竭、沉香、楓香脂、沉香化氣丸、接骨七厘散（丸）、小金丸（膠囊、片）、腰痛片、小兒化毒散（膠囊）、礞石滾痰丸、女金丸、潔白膠囊（丸）、沉香化滯丸、風濕二十五味丸、珍寶丸等品種的松香酸檢查項補充檢驗方法。

2.打擊中藥材及飲片染色

染色問題是中藥材及飲片常見的質(zhì)量問題之一[23]。常見的易被染色品種包括紅花、蒲黃、丹參、延胡索、黃柏、五味子等。常用的染色劑有檸檬黃、胭脂紅、酸性紅73、日落黃、金橙Ⅱ、金胺O、酸性黃36 等。近幾年，染色問題已經(jīng)延伸到中成藥，國家藥品監(jiān)督管理部門先后發(fā)布了針對牛黃清心丸、朱砂安神丸、胃康靈膠囊、柏子養(yǎng)心丸、精制冠心片、跌打丸、接骨七厘散（丸）、少腹逐瘀丸、宮炎康顆粒、心可寧膠囊、婦科止帶片、女金丸、綠袍散、三七傷藥膠囊（片）等品種的染色補充檢驗方法。

3.打擊中藥非法添加化學藥品

自2003年，國家藥品監(jiān)督管理部門批準了135 個關(guān)于中成藥和中藥材非法添加化學藥品的補充檢驗方法[24]。涉及對降糖類、補腎壯陽類、鎮(zhèn)靜安神類、止咳平喘類、降壓類、抗風濕類、減肥類、活血止痛類、清熱解毒類等類別化學藥品的檢測。此后，由于已有批準文號的中藥中非法添加化學藥品很少出現(xiàn)，此類涉及非法添加化學藥品的補充檢驗也發(fā)布較少。

4.打擊中藥材增重

在中藥材及飲片商品流通過程中，不法分子為了追求利潤，對中藥材及飲片進行增重處理。比如，在穿山甲中添加硫酸鎂、食鹽、芒硝、明礬等，在通草中添加明礬、硫酸鎂、芒硝等，桔梗（飲片）中添加鎂鹽和鋁鹽，蒲黃中添加鎂鹽和鈣鹽等。上述問題在補充檢驗方法的嚴厲打擊下，已逐漸減少。但近幾年，又出現(xiàn)了新的增重方式。比如，紅參摻糖的現(xiàn)象[25]。國家藥監(jiān)局批準了《紅參藥材及飲片中總還原糖檢查項補充檢驗方法》，有效打擊了紅參摻糖的行為。

5.打擊改變成方制劑工藝

2015年5 月，監(jiān)管部門在飛行檢查中發(fā)現(xiàn)，部分企業(yè)擅自改變提取工藝，使用3%鹽酸代替國家生產(chǎn)標準中規(guī)定的使用稀乙醇制備銀杏葉提取物。《中國藥典》2015年版中，銀杏葉測定的是水解成份的含量，因此，無法檢查出上述改變提取工藝的行為。這種擅自改變提取工藝的行為，存在“分解藥品有效成份，影響藥品療效”的風險?！秶沂称匪幤繁O(jiān)督管理總局關(guān)于發(fā)布銀杏葉軟膠囊等藥品補充檢驗方法的公告》中公布了《銀杏葉軟膠囊中游離槲皮素、山柰素、異鼠李素檢查項補充檢驗方法》《銀杏葉滴丸中游離槲皮素、山柰素、異鼠李素檢查項補充檢驗方法》《舒血寧注射液、銀杏葉提取物注射液中游離槲皮素、山柰素、異鼠李素檢查項補充檢驗方法》《銀杏達莫注射液中游離槲皮素、山柰素、異鼠李素檢查項補充檢驗方法》《銀杏葉滴劑中游離槲皮素、山柰素、異鼠李素檢查項補充檢驗方法》《銀杏葉提取物、銀杏葉片及銀杏葉膠囊中槐角苷檢查項補充檢驗方法》6 個方法[26]。在《總局關(guān)于發(fā)布銀杏葉滴丸和銀杏葉軟膠囊中槐角苷檢查項補充檢驗方法的公告》中公布了《銀杏葉滴丸中槐角苷檢查項補充檢驗方法》《銀杏葉軟膠囊中槐角苷檢查項補充檢驗方法》。這些方法的發(fā)布，為藥品檢驗執(zhí)法提供了有效的技術(shù)依據(jù)[27]。

另外，對于工藝中存在未提取投料的問題，采用顯微鑒別植物組織的方法即可解決。目前，批準的檢查植物組織補充檢驗方法的中成藥品種包括珍黃膠囊、藿香正氣丸（加味藿香正氣丸）、心寧片、歸脾丸（濃縮丸）、膽香鼻炎片、炎可寧片等。

三、建議

中藥補充檢驗方法在中藥監(jiān)管中發(fā)揮著重要作用，有效地打擊了摻偽造假、染色、增重、非法添加等不法行為[27-28]。其在質(zhì)量監(jiān)管中，仍然有改進的空間。主要體現(xiàn)在以下3 個方面。

1.進一步完善藥品標準，提高專屬性

補充檢驗方法是對藥品中不應(yīng)當具有的成份進行檢測，這也說明了藥品標準中設(shè)定的指標成份相對于摻偽造假的成份不具有專屬性。因此，提高藥品標準的專屬性對于加強藥品監(jiān)管是十分必要的。在前幾年，淡豆豉藥材中以黑蕓豆冒充黑豆投料的情況比較多見?！吨袊幍洹?020年版中，對其標準進行了提升，建立了黑豆專屬性黃酮類成份——大豆苷元和染料木素的薄層色譜鑒別和高效液相色譜含量控制方法[29]。有效地控制了黑蕓豆冒充黑豆投料的情況。通過提高標準中指標成份或檢測項目的專屬性，有效地控制摻偽造假，避免了出現(xiàn)質(zhì)量問題后，再研究建立補充檢驗方法，更能提高監(jiān)管的效率。

2.加強技術(shù)儲備，提高監(jiān)管的可預(yù)期性

采用已經(jīng)發(fā)布的補充檢驗方法進行藥品監(jiān)管時，往往存在一定的局限性和滯后性[30]。比如，采用補充檢驗方法對非法添加中藥材及飲片樣品進行檢測，往往只檢測其中一種或幾種色素成份。而對于染色行為，自某個藥材品種的補充檢驗方法批準后，造假行為已經(jīng)開始避免使用法定方法中檢查的目標色素，重新尋找游離于標準之外的染色劑進行違法活動。這樣就致使補充檢驗方法在藥品監(jiān)管中的作用大打折扣，捕捉不到違法行為。并且在建立涉及染色劑的補充檢驗方法時，要確定未知目標的結(jié)構(gòu)，并進一步通過對照品比對，耗費時間較長，降低了監(jiān)管效率。建議對摻偽造假行為，進行一些前瞻性的研究工作。對于染色行為，可將目前市場上可能存在的非法添加化學品和染色劑進行匯總，建立篩查數(shù)據(jù)庫，做好技術(shù)儲備。經(jīng)過建立通用的樣品處理和檢測方法，可以全面地對摻偽造假進行篩查，快速鎖定目標，縮短新的補充檢驗方法研究周期，具有較強的可預(yù)知性，大大提高了監(jiān)管效率。

3.加強已有補充檢驗方法的整合，提高檢測效率

中藥材摻偽造假行為頻發(fā)和不斷變化，造成了同一中藥品種在不同時期內(nèi)產(chǎn)生了多個補充檢驗方法的現(xiàn)象，這些補充檢驗方法往往是有不同的研制單位提出的，致使樣品前處理和檢測條件存在差別。檢驗檢測機構(gòu)在對同一中藥品種按多個補充檢驗方法檢測時，需要進行多次檢測，提高了檢測成本，浪費了大量的人力和物力。建議相關(guān)部門對已有的補充檢驗方法進行匯總研究，形成統(tǒng)一的方法，以降低檢驗檢測成本。