錦鯉皰疹病毒病的流行特點(diǎn)、診斷及防治的研究進(jìn)展

唐子鵬，曲 木，劉 艷，運(yùn)永光，翟勝利

（天津市金水族水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，天津 301800）

水產(chǎn)養(yǎng)殖疫病普遍具有傳染性強(qiáng)、致死率高的特點(diǎn)，給水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失。近幾年我國(guó)對(duì)于水產(chǎn)養(yǎng)殖疫病越來越重視，中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部也出臺(tái)了很多相關(guān)監(jiān)測(cè)及管理辦法，2020年對(duì)我國(guó)29個(gè)省份4 306個(gè)樣本的檢測(cè)結(jié)果表明，我國(guó)水生動(dòng)物疫病陽(yáng)性檢出率為8.8%，與2019 年相比降低了0.9%，錦鯉皰疹病毒?。↘oi herpesvirus diserse，KHVD）便是每年重點(diǎn)監(jiān)測(cè)的疫病之一[1]，2020年河北省檢出錦鯉皰疹病毒病陽(yáng)性樣本9例[2]。

錦鯉皰疹病毒病是一種可感染各個(gè)年齡段鯉科魚類（以錦鯉和鯉魚為主）的全球性疫病，2008年農(nóng)業(yè)部公告第125號(hào)將其列為二類動(dòng)物疫病，其病原為錦鯉皰疹病毒（Koi herpesvirus，KHV）。我國(guó)是漁業(yè)大國(guó)，據(jù)2020 年中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒數(shù)據(jù)顯示，2019 年我國(guó)鯉魚養(yǎng)殖總產(chǎn)量約289 萬t，占2019 年全國(guó)淡水養(yǎng)殖總產(chǎn)量的9.6%，因此對(duì)錦鯉皰疹病毒病的防治研究非常重要，本文對(duì)目前研究者們的觀點(diǎn)進(jìn)行綜述，以期為從業(yè)者提供參考。

1 錦鯉皰疹病毒病的流行特點(diǎn)

錦鯉皰疹病毒病在20 世紀(jì)90 年代被發(fā)現(xiàn)并確定，隨著全球貿(mào)易而擴(kuò)散至多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，2002年傳入我國(guó)[3]。錦鯉皰疹病毒感染性強(qiáng)、傳播速度快、對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力強(qiáng)，其適宜的生存環(huán)境與易感魚類的適宜環(huán)境相似，在春季和秋季易大規(guī)模暴發(fā)，水溫在18~27 ℃范圍內(nèi)的持續(xù)時(shí)間越長(zhǎng)，該病暴發(fā)的可能性越大。該病的潛伏期一般為14 d，魚群在出現(xiàn)患病癥狀后24~48 h便會(huì)出現(xiàn)死亡，發(fā)病后2~4 d 內(nèi)死亡率迅速飆升，可達(dá)80%~100%，并且錦鯉皰疹病毒病會(huì)和其他細(xì)菌病、寄生蟲病混合感染，很多時(shí)候養(yǎng)殖戶會(huì)將其與爛鰓、出血病等疾病混淆，影響疾病的判斷，耽誤救治時(shí)間，對(duì)漁業(yè)生產(chǎn)影響巨大，目前還沒有十分有效的治療方法，只能通過綜合預(yù)防的手段來盡量避免損失。錦鯉皰疹病毒病的傳播方式以水平傳播為主，通過暴露的鰓、腸道或者是破損的皮膚進(jìn)入病魚體內(nèi)[4]，目前尚無直接證據(jù)可以表明存在垂直傳播，除了能感染鯉科魚外，還能通過其他魚類攜帶傳播，如金魚、草魚等[5]，攜帶病毒的金魚無明顯病癥，但如果跟錦鯉混養(yǎng)，便會(huì)導(dǎo)致錦鯉發(fā)病，這進(jìn)一步增加了該病防治的難度。

2 臨床診斷方法

魚眼凹陷、全身出血、內(nèi)臟壞死及神經(jīng)性癥狀是錦鯉皰疹病毒病的典型癥狀，養(yǎng)殖戶在看到魚有這種情況時(shí)，需要及時(shí)取樣送至專門檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行確診。錦鯉皰疹病毒的確診方法包括電鏡觀察、病原分離鑒定、免疫熒光檢測(cè)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、環(huán)介導(dǎo)的恒溫PCR（LAMP）等，其中病原分離鑒定是最為精準(zhǔn)的檢測(cè)方法，但在分離細(xì)胞系范圍方面存在一定的局限性。目前PCR 技術(shù)以其高準(zhǔn)確性、操作簡(jiǎn)便、單次檢測(cè)樣本多等優(yōu)勢(shì)備受青睞[6]，該技術(shù)也在實(shí)踐中被一步步優(yōu)化，安偉等[7]對(duì)PCR反應(yīng)過程中退火溫度進(jìn)行了優(yōu)化，所建立的鯉皰疹病毒Ⅱ型（Cy?HV-2）嵌套式PCR 檢測(cè)方法比常規(guī)的PCR 檢測(cè)方法靈敏100~1 000 倍；張文等[8]建立了一種可同時(shí)檢測(cè)鯉浮腫病毒和錦鯉皰疹病毒的三重PCR 檢測(cè)方法，相信隨著檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步，可以更快速、更便捷地對(duì)該疫病進(jìn)行確診。

3 錦鯉皰疹病毒病的預(yù)防

3.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

從養(yǎng)殖全流程入手，一方面要保持穩(wěn)定、良好的水環(huán)境，另一方面要保證在魚類引進(jìn)和售出時(shí)進(jìn)行嚴(yán)格檢疫，切斷傳染源，做到生態(tài)養(yǎng)殖和規(guī)范養(yǎng)殖。日常養(yǎng)殖應(yīng)以防控為主，做好生產(chǎn)中各個(gè)環(huán)節(jié)的管理。

3.1.1 使用健康苗種

引進(jìn)苗種時(shí)盡量挑選資質(zhì)齊全的育種公司，應(yīng)向供種方索要檢疫證明[9]，引入后單獨(dú)飼養(yǎng)，經(jīng)充分隔離觀察（一般小規(guī)格魚30 d，大規(guī)格魚45 d）確定無疫后才可與其他魚混養(yǎng)，養(yǎng)殖戶要注意在未確定購(gòu)置的魚是否染疫前，隔離觀察池的水不能隨意排放。盡量不從疫區(qū)購(gòu)買，尤其是進(jìn)口，口岸應(yīng)加強(qiáng)檢疫管理，并嚴(yán)防走私苗種[10]。王慶等[5]對(duì)錦鯉皰疹病毒病的傳入風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行了評(píng)估，闡述了在全球貿(mào)易的背景下，錦鯉進(jìn)口屬于高風(fēng)險(xiǎn)因素，必須嚴(yán)格管控，避免在我國(guó)發(fā)生大范圍的疫病傳播。近兩年，我國(guó)各地區(qū)推進(jìn)建設(shè)產(chǎn)地苗種檢疫上報(bào)制度和農(nóng)產(chǎn)品可追溯制度，力求從源頭控制重大疫病傳播[2]。

3.1.2 定期監(jiān)測(cè)，科學(xué)管理

養(yǎng)殖場(chǎng)和相關(guān)部門應(yīng)定期進(jìn)行抽樣檢查[11]，早發(fā)現(xiàn)早處理，尤其是在春秋兩季錦鯉皰疹病毒病的高發(fā)期，應(yīng)適當(dāng)降低養(yǎng)殖密度[12]，要時(shí)刻關(guān)注錦鯉的進(jìn)食和游動(dòng)狀態(tài)，如果錦鯉有進(jìn)食量突減、長(zhǎng)時(shí)間不動(dòng)、刺激無反應(yīng)的癥狀，表明其有可能已患病，具體病癥需要進(jìn)一步檢測(cè)確定。養(yǎng)殖工具要專池專用，避免交叉感染，用完的工具要及時(shí)消毒。

在錦鯉皰疹病毒病的預(yù)防過程中，要更加注意水體消毒。養(yǎng)殖用水主要包括源水、養(yǎng)殖水和養(yǎng)殖尾水，消毒自然也是針對(duì)這三部分。在引入外部水時(shí)要做好檢疫、殺菌處理[13]，有條件的漁場(chǎng)可以引入砂濾罐、紫外線消毒器等設(shè)備，降低源水的帶毒概率。池塘有養(yǎng)殖動(dòng)物時(shí)，可以用氯制劑（二氧化氯、三氯異氰尿酸等）對(duì)水體進(jìn)行消毒，可有效殺滅水中細(xì)菌及病毒[14]。

3.1.3 合理使用藥餌

在春秋兩季使用的餌料中加入免疫增強(qiáng)劑，連續(xù)投喂25 d左右，同時(shí)注意不可濫用凈水劑、消毒劑[9]，以免因水環(huán)境劇變?cè)斐婶~類應(yīng)激反應(yīng)而增加患病風(fēng)險(xiǎn)。有條件的單位可以購(gòu)買多種消毒、抗菌、殺蟲藥物，通過藥敏試驗(yàn)來選擇效果良好的藥物[9]。為降低魚體的抗藥性和應(yīng)激反應(yīng)，應(yīng)盡量選用微生態(tài)制劑和中草藥提取物進(jìn)行水質(zhì)調(diào)控和日常治療。

3.1.4 選用優(yōu)質(zhì)飼料，提高魚體免疫力

即使是發(fā)病池塘，有的魚也不會(huì)死亡，這與魚體自身的免疫力有關(guān)。沈兆媛等[15]以異育銀鯽為研究對(duì)象，分別飼喂添加不同中草藥的飼料，并注射皰疹病毒做暴露試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)投喂添加1%穿心蓮的飼料的異育銀鯽死亡率僅為15%；何杰[16]在異育銀鯽飼料中添加膽汁酸，用鯉皰疹Ⅱ型病毒進(jìn)行攻毒，發(fā)現(xiàn)膽汁酸不僅能促進(jìn)其生長(zhǎng)，還能提高異育銀鯽的抗病能力。隨著研究的逐漸深入，相信在不久的將來會(huì)有針對(duì)皰疹病毒病的抗毒飼料問世。

3.2 加強(qiáng)養(yǎng)殖人員培訓(xùn)

目前，我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)多以家庭作坊式小規(guī)模飼養(yǎng)為主，存在文化水平不高、飼養(yǎng)隨意、對(duì)設(shè)施設(shè)備的投入較低等特點(diǎn)，很多養(yǎng)殖戶在養(yǎng)殖過程中換水方式仍是傳統(tǒng)的大排大灌，不注重池塘間的交互傳染和尾水處理，這些因素在很大程度上增加了疫病發(fā)生的可能性和防治難度。對(duì)此，漁業(yè)龍頭企業(yè)應(yīng)積極發(fā)揮示范帶動(dòng)作用，定期組織技術(shù)人員開展培訓(xùn)、觀摩活動(dòng)，提高漁民的技術(shù)水平和健康養(yǎng)殖意識(shí)。

3.3 抗病苗種的選育

目前沒有針對(duì)錦鯉皰疹病毒病的特效藥，因此引進(jìn)或培育抗病力強(qiáng)的苗種也是預(yù)防此病的重要方向。呂大成[17]和王慶等[5]均指出已經(jīng)有學(xué)者通過雜交馴養(yǎng)鯉魚與野生鯉魚的育種試驗(yàn)獲得了抗病力較高的品種；白珊珊等[18]致力于抗皰疹病毒鏡鯉新品種的選育工作，發(fā)現(xiàn)通過選育出來的F2、F3的成活率要顯著高于F1，且F3 的抗病力已趨于穩(wěn)定，這都表明通過選育抗病品種來降低患病率是可行的，并且該方法可以從根源上杜絕疾病的發(fā)生[19]。

3.4 疫苗的研發(fā)

使用疫苗是應(yīng)對(duì)病毒性疫病較為有效的措施，包括滅活疫苗、弱（減）毒疫苗和核酸疫苗等，但目前市面上并無針對(duì)錦鯉皰疹病毒病的高效商品化疫苗，如以色列研制的皰疹病毒病減毒疫苗因使用效果存在爭(zhēng)議而未實(shí)現(xiàn)大范圍應(yīng)用[9]，胡峰[20]以錦鯉為研究對(duì)象，將研制的皰疹病毒病重組核酸疫苗經(jīng)肌肉注射進(jìn)魚體，發(fā)現(xiàn)該疫苗可有效提高錦鯉的成活率，對(duì)皰疹病毒有較高的免疫保護(hù)力，但該疫苗目前仍處于試驗(yàn)階段，只能為疫苗市場(chǎng)化做理論依據(jù)，現(xiàn)有疫苗產(chǎn)品在保護(hù)率、可靠性、穩(wěn)定性等方面還有待進(jìn)一步研究完善。

4 錦鯉皰疹病毒病的控制

4.1 及時(shí)上報(bào)

如果發(fā)現(xiàn)疑似錦鯉皰疹病毒病而無法確定或已確定為錦鯉皰疹病毒病時(shí)，則應(yīng)在第一時(shí)間上報(bào)至當(dāng)?shù)貏?dòng)物疫病防控部門，并積極配合進(jìn)行檢驗(yàn)及消殺處理，不可擅自用藥[21]或轉(zhuǎn)移運(yùn)輸。對(duì)病魚的來源和銷售情況進(jìn)行溯源跟蹤，開展流行病學(xué)調(diào)查，及早發(fā)現(xiàn)并切斷傳播路徑，降低損失。

4.2 無害化處理

撈出死魚和病危魚，用生石灰處理后深埋。

4.3 隔離消毒

錦鯉皰疹病毒還可存在于病魚的分泌物中在水中傳播[22]，應(yīng)注意對(duì)染病魚池的隔離，不得將水外排。使用二氧化氯消毒劑對(duì)池邊環(huán)境和養(yǎng)殖工具進(jìn)行消毒[5]。此外，紫外線、水溫50 ℃以上1 min、2.0×10-4有機(jī)碘溶液浸泡20 min、2.0×10-4的漂白粉浸泡30 s等都是殺滅此病毒的有效方法。

4.4 增氧停食，控制水溫

為減小損失，可對(duì)發(fā)病魚池采取增氧、停食措施。加大水體溶氧，可促進(jìn)有機(jī)物分解，抑制有害微生物的增殖，陳暢等[23]提出在投料臺(tái)底部安置網(wǎng)格型水管，水管鉆孔，向管中通入臭氧，可快速氧化投料臺(tái)附近的有機(jī)質(zhì)，并且氧化產(chǎn)生的氧氣恰好可以緩解由于進(jìn)食導(dǎo)致局部密度增加造成的氧供應(yīng)不足等問題。在小型養(yǎng)殖池可通過升溫至30~32 ℃并維持7 d 來控制病毒的增殖[24]，但此法并不能殺滅病毒，此時(shí)錦鯉是攜帶病毒狀態(tài)，只是病毒的增殖速度受到溫度的影響而減緩不會(huì)致命，這種處理方式可以為控制疾病爭(zhēng)取時(shí)間。

5 結(jié) 語(yǔ)

錦鯉皰疹病毒病是一種能夠引起鯉科魚類高病發(fā)率、高傳染性、高死亡率的魚類疫病，應(yīng)引起廣大養(yǎng)殖者的高度重視。目前市面上沒有藥物或疫苗能夠有效治療，只能通過綜合防治和科學(xué)管理的手段加強(qiáng)預(yù)防，在發(fā)現(xiàn)后及時(shí)上報(bào)并進(jìn)行無害化處理和病原溯源、切斷傳播途徑。

目前漁業(yè)綠色生態(tài)養(yǎng)殖理念已被業(yè)界廣泛認(rèn)可，各地區(qū)陸續(xù)建立起無規(guī)定疫病養(yǎng)殖示范場(chǎng)，同時(shí)相關(guān)的疫苗也通過多種技術(shù)在進(jìn)行研發(fā)試驗(yàn)。相信隨著漁業(yè)提質(zhì)增效和疫病防控工作的推進(jìn)，錦鯉皰疹病毒病將得到進(jìn)一步的控制和治療。