壯藥斜葉黃檀的化學(xué)成分研究（I）

何 歡，王維玉，朱 敏，馮 旭，韋建華，盧澄生

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530200）

斜葉黃檀Dalbergia pinnata（Lour.）Prain 為豆科黃檀屬植物，主產(chǎn)于海南、廣西、云南等地［1］?！吨袊?guó)植物志》中記載其“全株可藥用，用于治療風(fēng)濕、跌打、扭挫傷，有消腫止痛之效”［2］。斜葉黃檀是壯族民間的常用藥，壯藥名為Gohaudanz（棵好彈、瀉漢省、謝漢?。?，具有調(diào)龍路、祛風(fēng)毒、除濕毒、消腫痛等功效，多用于治療發(fā)旺（風(fēng)濕骨痛）、林得叮相（跌打損傷）、扭相（扭挫傷）、下肢潰瘍、約亰亂（月經(jīng)不調(diào)）等癥［3］。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)斜葉黃檀的報(bào)道大多是關(guān)于其精油成分的研究，蘇妙鈴等［4］利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)從斜葉黃檀心材精油中鑒定出38個(gè)化合物，其中欖香素為其精油的主要成分。研究表明斜葉黃檀精油還具有較好的抗氧化活性、抑制革蘭氏陽(yáng)性菌和真菌以及抑制酪氨酸酶活性［5］。但對(duì)其化學(xué)成分的研究甚少，為進(jìn)一步闡明斜葉黃檀的藥效化學(xué)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器和材料

1.1 藥材 斜葉黃檀藥材于2019年11月采自南寧市武鳴縣兩江鎮(zhèn)，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)廖月葵高級(jí)實(shí)驗(yàn)師鑒定為豆科黃檀屬植物斜葉黃檀Dalbergia pinnata（Lour.）Prain 的根莖，標(biāo)本（DPP201911）存放于廣西中醫(yī)藥大學(xué)中藥化學(xué)教研室。

1.2 儀器 Waters Autospec Premier 776 質(zhì)譜儀（美國(guó)Waters 公司）；Bruker Drx-600 MHz、Bruker Drx-500 MHz、Bruker AV-400 MHz 核磁共振儀（瑞士Bruker 公司）；TD 電子分析天平（德國(guó)賽多利斯公司）；Agilent 1100高效液相色譜儀（美國(guó)安捷倫公司）；制備型高效液相色譜儀（日本島津LC-20AR）；中低壓制備型液相色譜儀（美國(guó)格雷斯戴維森REVELERIX2）；柱色譜硅膠（100～200目、200～300目，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；YMC 反向填料（日本株式會(huì)社維美希上海代表處）；色譜甲醇、乙腈（中國(guó)Fisher 科技有限公司）；其余試劑均為分析純，為國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供。

2 提取與分離

取斜葉黃檀藥材粗粉30 kg，以10 倍量95%乙醇滲漉提取，減壓回收溶劑，得到乙醇總提取物4 709.14 g，加適量水懸浮，依次用石油醚（60～90 ℃）、乙酸乙酯、正丁醇萃取，減壓回收溶劑，得石油醚萃取部位30.00 g，乙酸乙酯萃取部位911.87 g，正丁醇萃取部位1 384.23 g和水部位296.82 g。

取乙酸乙酯萃取部位300.00 g，以硅膠柱色譜（石油醚-丙酮50∶1→石油醚-丙酮1∶1→三氯甲烷-甲醇8∶1→三氯甲烷-甲醇0∶100）分離得到9個(gè)組分Fr.A～Fr.I。Fr.A 經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜分離得化合物6（白色針狀結(jié)晶11.00 mg）、化合物7（白色粉末16.00 mg）。Fr.B經(jīng)硅膠柱色譜（石油醚-乙酸乙酯100∶0→石油醚-乙酸乙酯 0∶100）分離得到6 個(gè)亞組分 B1～B6。B3 經(jīng)硅膠柱色譜（石油醚-乙酸乙酯30∶1）洗脫得白色粉末，經(jīng)反復(fù)甲醇重結(jié)晶得化合物11（白色粉末1.20 mg）。B4經(jīng)硅膠柱色譜和反復(fù)重結(jié)晶得化合物3（白色粉末5.10 mg）、化合物4（白色粉末1.10 mg）、化合物5（白色粉末4.80 mg）。Fr.C 析出白色粉末，經(jīng)甲醇反復(fù)重結(jié)晶得到化合物10（白色粉末3.17 mg）、化合物12（白色粉末30.22 mg）。Fr.D析出白色粉末，經(jīng)硅膠柱色譜分離和氯仿-甲醇反復(fù)重結(jié)晶得化合物8（白色片狀結(jié)晶10.21 mg）、化合物9（白色粉末8.90 mg）；母液經(jīng)反復(fù)硅膠柱色譜、ODS 中低壓柱色譜及半制備高效液相色譜（甲醇-水40∶60）得化合物1（白色粉末12.00 mg）、化合物2（白色粉末12.77 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末（氯仿，甲醇）。ESI-MS m/z：417［M-1］+，分子量為418，分子式為C22H26O8。1H-NMR（500 MHz，C3D6O）δ：6.68（4H，d，J=0.61 Hz，H-2，2'，6，6'），4.67（2H，d，J=4.20 Hz，H-7，7'），4.23（2H，m，H-9a，9a'），3.84（2H，m，H-9b，9b'），3.82（12H，s，3，3'，5，5'-OCH3），3.09（2H，m，H-8，8'）；13C-NMR（125 MHz，C3D6O）δ：132.6（C-1，1'），103.8（C-2，2'），148.1（C-3，3'），135.5（C-4，4'），148.1（C-5，5'），103.8（C-6，6'），86.2（C-7，7'），54.7（C-8，8'），71.7（C-9，9'），56.0（3，3'，5，5'-OCH3）。以上1H-NMR 和13C-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［6］報(bào)道基本一致，故鑒定化合物1為（-）-丁香樹(shù)脂酚。

化合物2：白色粉末（氯仿，甲醇）。ESI-MS m/z：357［M-1］+，分子量為358，分子式為C20H22O6。1H-NMR（500 MHz，C3D6O）δ：6.99（2H，d，J=1.90 Hz，H-2，2'），6.84（2H，dd，J=8.1，1.9，0.7 Hz，H-5，5'），6.79（2H，d，J=8.1 Hz，H-6，6'），4.67（2H，d，J=4.30 Hz，H-7，7'），4.20（2H，m，H-9a，9a'），3.85（6H，s，3，3'-OCH3），3.81（2H，m，H-9b，9b'），3.09（2H，m，H-8，8'）；13C-NMR（125 MHz，C3D6O）δ：134.2（C-1，1'），110.6（C-2，2'），148.4（C-3，3'），146.9（C-4，4'），115.6（C-5，5'），119.7（C-6，6'），86.7（C-7，7'），56.3（C-8，8'），72.3（C-9，9'），55.3（3，3'-OCH3）。以上1H-NMR 和13C-NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［7］報(bào)道基本一致，故鑒定化合物2為松脂素。

化合物3：白色粉末（甲醇）。ESI-MS m/z：457［M+H］+，分子量為456，分子式為C30H48O3。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ：5.18（1H，t，J=3.70 Hz，H-12），3.25（1H，m，H-3），1.12（3H，s，H-27），0.92（3H，s，H-30），0.88（3H，s，H-29），0.85（3H，s，H-26），0.83（3H，s，H-25），0.82（3H，s，H-24），0.72（3H，s，H-23）；13C-NMR（125 MHz，CD3OD）δ：38.1（C-1），28.0（C-2），80.5（C-3），39.2（C-4），56.7（C-5），19.3（C-6），33.8（C-7），39.2（C-8），47.6（C-9），38.1（C-10），23.9（C-11），123.5（C-12），145.2（C-13），42.7（C-14），28.5（C-15），24.0（C-16），47.2（C-17），40.5（C-18），42.8（C-19），31.6（C-20），34.8（C-21），33.8（C-22），28.8（C-23），17.1（C-24），15.9（C-25），17.7（C-26），26.3（C-27），181.9（C-28），33.5（C-29），24.5（C-30）。以上1H-NMR 和13C-NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8-9］報(bào)道基本一致，故鑒定化合物3為齊墩果酸。

化合物4：白色針狀結(jié)晶（石油醚，氯仿）。EI-MS m/z：427［M+H］+，分子量為426，分子式為C30H50O。1HNMR（500 MHz，CDCl3）δ：4.68（1H，s，H-29b），4.56（1H，s，H-29a），1.67（3H，s，H-30），1.02（3H，s，H-26），0.97（3H，s，H-23），0.83（3H，s，H-25），0.79（3H，s，H-28），0.76（3H，s，H-24）；13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：38.9（C-1），28.0（C-2），79.0（C-3），40.0（C-4），55.3（C-5），18.3（C-6），34.3（C-7），40.8（C-8），50.4（C-9），37.2（C-10），19.3（C-11），25.2（C-12），38.1（C-13），43.0（C-14），27.5（C-15），35.6（C-16），42.8（C-17），48.3（C-18），48.0（C-19），151.0（C-20），29.9（C-21），40.0（C-22），28.0（C-23），15.9（C-24），17.0（C-25），16.1（C-26），14.5（C-27），18.0（C-28），109.3（C-29），20.9（C-30）。以上1H-NMR 和13C-NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］報(bào)道基本一致，故鑒定化合物4為羽扇豆醇。

化合物5：白色粉末（氯仿）。ESI-MS m/z：457［M+H］+，分子量為456，分子式為C30H48O3。1H-NMR（500 MHz，C5D5N）δ：4.97（1H，d，J=2.5 Hz，H-29α），4.79（1H，dd，J=2.6，1.5 Hz，H-29β），3.52（1H，m，H-3），1.81（3H，s，H-30），1.25（3H，s，H-23），1.09（3H，s，H-27），1.08（3H，s，H-26），1.03（3H，s，H-24），0.84（3H，s，H-25）；13C-NMR（125 MHz，C5D5N）δ：39.8（C-1），28.8（C-2），78.6（C-3），40.0（C-4），56.4（C-5），19.3（C-6），35.3（C-7），41.6（C-8），51.4（C-9），38.0（C-10），21.7（C-11），26.6（C-12），39.1（C-13），43.3（C-14），31.7（C-15），33.4（C-16），57.1（C-17），50.3（C-18），48.3（C-19），151.8（C-20），30.8（C-21），38.1（C-22），29.2（C-23），16.9（C-24），16.9（C-25），16.8（C-26），15.4（C-27），179.5（C-28），110.5（C-29），19.9（C-30）。以上1H-NMR 和13C-NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］報(bào)道基本一致，故鑒定化合物5為白樺脂酸。

化合物6：白色針狀結(jié)晶。mp：135～137 ℃，易溶于氯仿。與濃硫酸-醋酐試劑作用呈藍(lán)綠色。與β-谷甾醇對(duì)照品共薄層色譜，在同一硅膠板上點(diǎn)樣，分別在石油醚-乙酸乙酯（7∶1）、石油醚-丙酮（10∶1）、氯仿3種不同展開(kāi)系統(tǒng)檢識(shí)，二者的Rf值均相同，且混合熔點(diǎn)不下降。故鑒定化合物6為β-谷甾醇。

化合物7：白色粉末。mp：165～167 ℃，溶于氯仿、石油醚。與濃硫酸-醋酐試劑作用呈藍(lán)綠色。與豆甾醇對(duì)照品共薄層色譜，在同一硅膠板上點(diǎn)樣，分別在石油醚-乙酸乙酯（10∶1）、石油醚-丙酮（20∶1），環(huán)己烷-丙酮-甲酸（5∶1∶2）3種不同的展開(kāi)系統(tǒng)檢識(shí)，二者的Rf 值均相同，且混合熔點(diǎn)不下降。故鑒定化合物7為豆甾醇。

化合物8：白色片狀結(jié)晶。mp：263～265 ℃，微溶于丙酮、氯仿。與濃硫酸-醋酐試劑作用呈藍(lán)綠色。與豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷對(duì)照品共薄層色譜，在同一硅膠板上點(diǎn)樣，分別在石油醚-丙酮（1∶1）、氯仿-丙酮（5∶1）、氯仿-甲醇（10∶1）3 種不同的展開(kāi)系統(tǒng)檢識(shí)，二者的Rf 值均相同，且混合熔點(diǎn)不下降。故鑒定化合物8為豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物9：白色粉末。mp：286～287 ℃，溶于乙醇、甲醇，難溶于氯仿。與濃硫酸-醋酐試劑作用呈藍(lán)綠色。與β-胡蘿卜苷對(duì)照品對(duì)照品共薄層色譜，在同一硅膠板上點(diǎn)樣，分別在石油醚-丙酮（1∶1）、氯仿-丙酮（5∶1）、氯仿-甲醇（10∶1）3種不同的展開(kāi)系統(tǒng)檢識(shí)，二者的Rf 值均相同，且混合熔點(diǎn)不下降。確定化合物9為β-胡蘿卜苷（β-daucosterol）。

化合物10：白色粉末（氯仿-丙酮）。EI-MS m/z：680［M-H］+，分子量為681，分子式為C42H83NO5。1HNMR（500 MHz，CDCl3）δ：8.58（1H，d，J= 9.0 Hz，NH），5.53（1H，dt，J=15.2，6.0 Hz，H-10），5.47（1H，dt，J=15.2，6.0 Hz，H-11），5.11（1H，dd，J=9.0，4.6 Hz，H-2），4.62（1H，m，H -2'），4.50 and 4.41（each 1H，dd，J= 10.7，4.9 Hz，H-1），4.33（1H，m，H-3），4.27（1H，m，H-3）；13CNMR（125 MHz，CDCl3）δ：62.0（C-1），53.0（C-2），76.9（C-3），73.0（C-4），33.8（C-5），26.8（C-6），29.6（C-7），30.1（C-8），33.0（C-9），130.7（C-10），130.8（C-11），33.3（C-12），29.6～30.1（C-13～16），23.0（C-17），14.3（C-18），175.3（C-1'），72.5（C-2'），35.7（C-3'），25.8（C-4'），29.6～30.1（C-5'～22'），23.0（C-23'），14.3（C-24'）。以上1H-NMR 和13C-NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］報(bào)道基本一致，故鑒定化合物10為（2S，3S，4R，10E）-2-［（2R）-2-hydroxyl-tetracosanoylamino］-10-octadecene-1，3，4-triol。

化合物11：白色粉末（氯仿）。ESI-MS m/z：229［M+H］+，分子量為228，分子式為C14H28O2。1H-NMR（500 MHz，CDCl3）δ：2.35（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），1.63（2H，m，H-3），1.25（20H，s，H-4～H-13），0.88（3H，t，J=6.9 Hz，H-14）；13C-NMR（125 MHz，CDCl3）δ：177.9（C-1），33.7（C-2），24.7（C-3），29.1（C-4），29.4（C-5），29.6（C-6），29.7（C-7），29.7（C-8），29.7（C-9），29.5（C-10），29.5（C-11），31.9（C-12），22.7（C-13），14.1（C-14）。以上1H-NMR 和13C-NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］報(bào)道基本一致，確定化合物11為肉豆蔻酸。

化合物12：白色粉末（氯仿）。ESI-MS m/z：317［M+H］+，分子量為316，分子式為C18H36O4。1H-NMR（500 MHz，C5D5N）δ：4.75（1H，dd，J=11.0，4.4 Hz，H-1'a），4.67（1H，dd，J=11.0，6.3 Hz，H-1'b），4.47（1H，q，J=5.5 Hz，H-2'），4.15（2H，t，J=5.6 Hz，H-3'），2.38（2H，t，J=7.5 Hz，H-2），1.66（2H，m，H-3），1.33～1.27（22H，m，H-4～H-14），0.88（3H，t，J=6.7 Hz，H-15）；13C-NMR 譜（125 MHz，C5D5N）δ：174.5（C-1），35.1（C-2），32.8（C-3），30.7（C-4），30.6（C-5），30.4（C-6），30.3（C-7），30.3（C-8），30.3（C-9），30.3（C-10），30.2（C-11），30.1（C-12），26.0（C-13），23.6（C-14），14.9（C-15），67.5（C-1'），71.6（C-2'），65.0（C-3'）。以上1H-NMR 和13C-NMR 數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14］報(bào)道基本一致，確定化合物12為甘油酸十五酯。

本研究從斜葉黃檀中分離鑒定得到12個(gè)化合物，包括2 個(gè)木脂素類化合物：（-）-丁香樹(shù)脂酚（1）、松脂素（2）；3 個(gè)三萜類化合物：齊墩果酸（3）、羽扇豆醇（4）、白樺脂酸（5）；4 個(gè)甾醇類化合物：β-谷甾醇（6）、豆甾醇（7）、豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷（8）、β-胡蘿卜苷（9）；3 個(gè)其他類化合物：（2S，3S，4R，10E）-2-［（2R）-2-hydroxyl-tetracosanoylamino］-10-octadecene-1，3，4-triol（10）、肉豆蔻酸（11）、甘油酸十五酯（12）。所有化合物均為首次從該植物中分離得到。