中藥黨參藥效活性成分的質(zhì)量控制研究進展

舒娟,王元輝,王海,楊勝斌,袁榮獻（.貴州省銅仁市檢驗檢測院,貴州 銅仁 55400;.貴州省銅仁市科技創(chuàng)新發(fā)展中心,貴州 銅仁 55400;.貴州省銅仁市人民醫(yī)院,貴州 銅仁 55400;4.貴州中醫(yī)藥大學第二附屬醫(yī)院,貴州 貴陽 55000）

黨參屬桔?？贫嗄晟荼局参?，是我國特有植物，在2015年《中國藥典》中記載并收錄的素華黨參C.pilosula Nannf.var.modesta（Nannf.）L.T.Shen或川黨參C.tangshen Oliv.及黨參Codonopsis pilosula（Franch.）Nannf.應用最為廣泛?！侗静菥V目拾遺》記載“黨參，可代人參”?！侗静菡x》記載“黨參與人參不甚相遠……健脾運而不燥，滋胃陰而不濕，潤肺而不犯寒涼，養(yǎng)血而不偏滋膩……”，故黨參藥理作用早有研究指出。隨著醫(yī)療技術的進展，黨參藥理成分逐步被開發(fā)出來，具備諸多現(xiàn)代藥理作用，使其應用日益廣泛，且成為我國外貿(mào)出口的重要藥材之一。因此提高黨參藥理質(zhì)量的開發(fā)及應用，充分發(fā)揮黨參的藥理活性作用，對促進我國中醫(yī)藥的開發(fā)及應用有重要的借鑒作用。目前諸多研究集中于黨參的藥理作用及化學成分開發(fā)研究，但對其藥理活性成分的質(zhì)量控制方法缺乏探討，使其質(zhì)量控制缺乏統(tǒng)一標準。故本研究梳理黨參藥效成分以及相關的質(zhì)量控制方法，以此為黨參質(zhì)量控制提供合理的參考依據(jù)，為黨參的合理開發(fā)利用提供參考，綜述如下。

1 黨參的化學成分

黨參化學成分復雜，現(xiàn)今已分離并鑒定出了230多種化合物，韓樂[1]等指出黨參可干預阿爾茲海默癥。諶勤[2]等認為板橋黨參能上調(diào)PP2A活性，降低Tau蛋白的磷酸化水平，提高突觸相關蛋白表達水平。因此黨參具有保護神經(jīng)系統(tǒng)、修復受損神經(jīng)元等作用，其藥效應用價值高。其中生物堿是其主要活性成分。蘇錦松[3]等從云南高海拔地區(qū)產(chǎn)黨參乙酸乙酯部位分離鑒定出5甲氧基-(+)-異落葉松脂素(8)、trandirin(1)，綠原酸(2)，pilosulyne C(3)等。Du YE[4]等探討黨參根化學成分，即一種新苯丙烷(1)、一種新生物堿(11)、一種新天然聚乙炔(17)，連同九種酚類化合物(2-10)、五種生物堿(12-16)、三種聚乙炔(18-20)。因此生物堿是其主要化學成分，生物堿的藥理是主要作用于神經(jīng)系統(tǒng)，具有抗氧化、增強記憶等作用。多糖是黨參的主要活性成分之一，亦是研究最為廣泛的化學成分。黨參含有大量的糖，包括單糖、多糖、低聚糖，其中多糖、低聚糖是由單糖及其衍生物組成，其中黃芪多糖的藥理作用研究最為廣泛[5]。馬競[6]等研究發(fā)現(xiàn)黨參多糖可顯著改善缺氧缺血性腦損傷大鼠的神經(jīng)功能，減輕腦水腫及細胞凋亡，可能是通過介導Nrf2信號通路而發(fā)揮抗氧化、神經(jīng)保護等作用。王愛青[7]研究發(fā)現(xiàn)黨參多糖可提高腎陰虛大鼠的免疫球蛋白（IG）A、IgM含量，減輕氧化應激反應。故證實黨參多糖藥物成分的作用顯著。蘇洪義[8]等研究指出黨參多糖聯(lián)合沉默調(diào)節(jié)蛋白4可抑制體外人臍靜脈糖尿病血管內(nèi)皮細胞凋亡，降低細胞丙二醛水平。孟靜一[9]等結論指出黨參多糖對番瀉葉所致的脾虛模型小鼠具有改善作用，其作用機制可能與調(diào)節(jié)其胃腸激素分泌、增強免疫以及保護腸黏膜屏障有關。黨參炔類及烯類化合物的化學成分主要有黨參炔醇、黨參炔苷、黨參炔苷寧等。黨參萜類化合物主要為蒲公英萜醇乙酸、蒲公英萜醇、蒲公英萜酮、黑果茜草萜B等。黨參內(nèi)黃酮類化合物主要有柯伊利素、苜蓿素、芹菜素、木犀草素等。同時從黨參可分離鑒定出木質(zhì)素類化合物、甾體類化合物、酚酸和有機酸類；此外黨參含有揮發(fā)油，主要包括脂肪酸、醇類、酸類等，并含有人體所需的多種微量元素（鐵、鋅、錳、硒等）以及17種氨基酸，另外從黨參也可分離出補骨脂內(nèi)酯[10]。

2 質(zhì)量控制

中藥活性組分的定量分析是質(zhì)量控制的最重要方法，目前質(zhì)量控制方法較多，包括紫外-可見光度法（UVd-Vis）、高效液相色譜法（HPLC/UP-LC）、液質(zhì)聯(lián)用法（LCMS)、氣相-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）等方法。劉國秀[11]等采用原子吸收分光光度法、氣相色譜法檢測黨參飲片的重金屬及有害元素、農(nóng)藥殘留量，利用HPLC測定黨參炔苷的含量，結果發(fā)現(xiàn)硫黨參飲片的二氧化硫殘留不超過10mg/kg，重金屬和農(nóng)藥殘留標準符合藥典的限量標準，黨參炔苷含量測定平均加樣回收率為97.71%，有效性指標含量測定方法可靠。侯嘉[12]等對將黨參在密封容器、密閉干燥、密閉潮濕、充氮、真空、硫磺熏蒸條件下儲存1年，采用HPLC法結合近紅外光譜測定黨參炔苷含量，結論證實密封或充氮、真空儲存是獲得優(yōu)質(zhì)黨參藥材的儲存方法，近紅外光譜結合聚類分析可快速鑒別不同儲存條件下黨參藥材的優(yōu)劣。因此對于黨參炔苷含量的測定及質(zhì)量控制，可采用HPLC、近紅外光譜手段，同時將黨參儲存在密封或充氮、真空儲存條件下，可獲得更好的藥材質(zhì)量。

吳發(fā)明[13]等研究采用紫外分光光度法測定黨參多糖含量，采用高效液相色譜法測定黨參炔苷和蒼術內(nèi)酯Ⅲ的含量，在自然條件下，隨著貯藏延長，黨參多糖、黨參炔苷和蒼術內(nèi)酯Ⅲ的含量降低一半以上，而熏硫黨參降低幅度顯著低于未熏硫樣品，適度熏硫可保障黨參品質(zhì)。王清浩[14]等研究采用HPLC指紋圖譜評價米炒黨參炮制過程中化學成分動態(tài)變化，指出峰1、2、3、4、6和15是米炒黨參炮制過程中與表觀顏色變化顯著相關，可作為米炒黨參炮制過程監(jiān)控及質(zhì)量控制的標志物。因此黨參質(zhì)量控制中，不同儲存時間、儲存方法均會影響黨參藥效，而利用高效液相色譜法質(zhì)量控制評價結果較好。劉薇[15]采用分光光度法測定潞黨參總黃酮提取物的含量，潞黨參中總黃酮含量水平為0.98%，分光光度法總體測定結果準確可靠，有較高的穩(wěn)定性與靈敏度。呂行[16]等采用PMP衍生化法測定黨參殘渣酸性多糖的單糖組成，利用高效凝膠色譜、紅外光譜和核磁共振波譜檢測相對分子質(zhì)量和糖苷鍵連接方法，結果表明黨參殘渣多糖是由甘露糖、鼠李、半乳糖醛酸等酸性多糖組成，其相對分子質(zhì)量為1.81×106，具有一定的抗氧化能力。因此利用高效凝膠色譜、紅外光譜等質(zhì)量控制方法，質(zhì)量控制較好，并能為探索黨參殘渣地再利用提供新思路。陳天朝[17]等采用HPLC測定黨參炔苷含量，紫外分光光度法檢測黨參總皂苷含量，清炒炮制后的黨參丸隨著炮制程度加深，過氧化升高明顯，吸水率和相對密度逐漸降低，其中黨參炔苷和黨參總皂苷溶出度逐漸減少。因此采用HPLC、紫外分光光度法可有效測定不同炮制法黨參物性參數(shù)，為黨參制備工藝優(yōu)化提供參考。水煎法是黨參的主要煎煮方法，黨參水煎液內(nèi)含有較多的活性成分，藥理作用較明顯。郭丁禹[18]等研究對黨參標準湯劑采用HPLC法測定藥效，結果顯示黨參配方顆粒中10個指紋峰在標準湯劑均有顯示，相似度超過90%，相關性較好。于玲[19]等利用HPLC法檢測黨參水煎煮液共有19個共有峰，峰5為紫丁香苷，峰17為黨參炔苷。于小紅[20]等利用UPLC、液質(zhì)聯(lián)用測定黨參標準湯劑，結果顯示UPLC指紋圖譜共有22個峰，相似度超過90%。因此黨參水煎液質(zhì)量控制較好，通過HPLC、UPLC等方法可獲得理想的整體質(zhì)量評價。

3 總結

黨參所含有的豐富化學成分及藥理作用，是我國極具開發(fā)潛力的補益類中藥。而藥物的有效性、安全性是確保我國中醫(yī)學發(fā)展的前提條件，因此選擇科學的質(zhì)量控制方法，加強質(zhì)量標準研究，可相應提高中藥應用的有效性及安全性。目前黨參藥材、飲片、水煎液等質(zhì)量控制方法較多，也存在嚴重滯后的情況。比色法操作簡單、成本較低，可定量分析黨參多糖、黨參總皂苷等藥效成分。與比色法相比，色譜法分離純化、定量分析更具專一性以及準確性，但主要是進行單一成分檢測。光譜法能實時、快速進行中藥定性、定量分析，對中藥各部分化合物分析的靈敏度、準確性高。但在臨床實踐中，采用一種質(zhì)量方法無法達到理想的評價結果，多需要聯(lián)合多種評價方法進行質(zhì)量評價與檢驗，以此提高中藥整體質(zhì)量控制評價水平。因此在以后的研究分析質(zhì)量控制工作中，需要制定出一種能精準、科學地反映出黨參功效質(zhì)量標準與評價體系，在實現(xiàn)藥效成分、藥理活性徹底研究上也能分析出藥物毒理學，以此為黨參藥食兩用提供合理的參考，確保黨參應用的安全性、有效性。