蝙蝠葛根莖化學(xué)成分的研究

李 旭， 姚小娟， 吳 昊， 張 瓊

(山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，山西 太原 030001)

蝙蝠葛MenispermumdauricumDC.系防己科蝙蝠葛屬植物，以干燥根莖入藥，又名北豆根[1]，其性苦寒，有小毒，能清熱解毒、祛風(fēng)止痛，常用于咽喉腫痛、熱毒瀉痢、風(fēng)濕痹痛[2]。目前，從蝙蝠葛根莖中分離出生物堿類、酚酸類、醌類、醇類、揮發(fā)油、多糖等多種成分，主要為生物堿，含量約為1.7%～2.5%[3]，包括雙芐基異喹啉、單芐基異喹啉、阿樸菲、嗎啡烷、異喹啉、異喹啉酮、原小檗堿、氧化異阿樸菲等多種類型?；隍鸶鸬膫鹘y(tǒng)功效，越來越多學(xué)者對其所含生物堿的藥理活性進行研究，發(fā)現(xiàn)它們不僅具有抗炎鎮(zhèn)痛和抑菌的作用[3]，還對心血管系統(tǒng)、凝血系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)起到顯著的保護作用，近幾年來更是在抗腫瘤、抗抑郁、抗阿爾茲海默癥等方面有了新進展[4-6]。為進一步探索蝙蝠葛根莖物質(zhì)基礎(chǔ)，課題組從其95%醇提物中分離得到16個化合物，化合物6、16在之前從蝙蝠葛屬所分離的化合物中未見報道，1、5、15為首次從該植物中分離得到。

1 材料

LC-2030型HPLC色譜儀(日本島津公司)；2545-2489型Prep-HPLC色譜儀(美國Waters Alliance公司)；Sephadex LH-20填料(美國GE公司)；LCQ-DECA 液質(zhì)聯(lián)用儀(美國Thermo Fisher公司)；ODS柱層析填料(日本YMC公司)；AV-Ⅲ 400 MHz超導(dǎo)核磁共振波譜儀(德國Burker公司)；ZF-2三用紫外分析儀(上海市安亭電子儀器廠)；AUY120 電子天平(日本島津公司)。實驗試劑(色譜純，北京百靈威科技有限公司；分析純，國藥集團化學(xué)試劑有限公司)。

蝙蝠葛根莖采自黑龍江，經(jīng)山西醫(yī)科大學(xué)白云娥副教授鑒定為蝙蝠葛MenispermumdauricumDC.的根莖(201712-22)，標(biāo)本保存于山西醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院中藥標(biāo)本館。

2 提取與分離

將蝙蝠葛干燥根莖陰干，稱定質(zhì)量(30 kg)，全部粉碎置于95%乙醇中，回流提取3次，合并蒸干乙醇，得總浸膏1.2 kg?！八崛?2%酒石酸)堿(氨水)沉”后氯仿萃取3次，蒸干得700 g總生物堿浸膏，經(jīng)硅膠柱[CH2Cl2-CH3OH(9∶1、8∶2、7∶ 3、6∶ 4、1∶ 1)]得Fr.A～Fr.F。Fr.A(6 g)經(jīng)ODS柱[CH3OH-H2O(3∶ 7、5∶ 5、7∶ 3、10∶ 0)]得Fr.A-1～ Fr.A-4，F(xiàn)r.A-1經(jīng)Prep-HPLC[CH3OH-H2O(48∶ 52)]得化合物11(8 mg)、12(5 mg)；Fr.A-4經(jīng)Prep-HPLC CH3OH-H2O(40∶ 60)得化合物13(4.5 mg)、14(2.5 mg)。Fr.C(269 g)經(jīng)硅膠柱[CH2Cl2-CH3OH(9∶ 1、8∶ 2、7∶ 3、6∶ 4、1∶ 1)]得Fr.C-1～Fr.C-6，F(xiàn)r.C-1經(jīng)ODS柱[CH3OH-H2O(3∶ 7、5∶ 5、7∶ 3、10∶ 0)]、Prep-HPLC[CH3OH-H2O(52∶ 48)]得化合物4(11 mg)、5(20 mg)；Fr.C-2經(jīng)Prep-HPLC[CH3OH-H2O(50∶ 50)]得化合物9(8.3 mg)、10(9.8 mg)；Fr.C-4經(jīng)硅膠柱[CH2Cl2-CH3OH(20∶ 1、15∶ 1、10∶ 1、5∶ 1、1∶ 1)]得Fr.C-4-1～ Fr.C-4-4，F(xiàn)r.C-4-1經(jīng)Prep-TLCCH2Cl2-CH3OH(10∶ 1)得化合物6(60 mg)，F(xiàn)r.C-4-2經(jīng)Prep-HPLC[CH3OH-H2O(37∶ 63)]得化合物7(12 mg)。Fr.E(8 g)經(jīng)Sephadex LH-20柱(CH3OH)得化合物15(5 mg)、16(6.1 mg)。Fr.D(118 g)經(jīng)硅膠柱[CH2Cl2-CH3OH(9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、1∶1)]得Fr.D-1～ Fr.D-5，F(xiàn)r.D-1經(jīng)硅膠柱[CH3CH2OAc-CH3OH(20∶1、15∶1、10∶1、5∶1、1∶1)]、Prep-TLC[CH2Cl2-CH3OH(15∶1)]得化合物2(1.2 g)；Fr.D-2經(jīng)ODS柱[CH3OH-H2O(5∶5、10∶0)]得化合物1(9.2 g)；Fr.D-3經(jīng)Prep-HPLC[AcOH-H2O(40∶60)]得化合物3(20 mg)、8(7.6 mg)。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色針晶，ESI-MSm/z：314.2[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.91(2H，d，J=8.2 Hz，H-11，13)，6.68(2H，d，J=8.2 Hz，H-10，14)，6.55(1H，s，H-8)，6.01(1H，s，H-5)，3.83(3H，s，6-OCH3)，3.69(1H，t，J=7.5 Hz，H-1)，3.56(3H，s，7-OCH3)，3.22，3.12(each 1H，m，H-3)，2.86(2H，m，H-4)，2.75(2H，m，H-9a)，2.52(3H，s，N-CH3)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：65.0(C-1)，46.5(C-3)，25.1(C-4)，125.6(C-4a)，111.3(C-5)，146.4(C-6)，147.4(C-7)，111.2(C-8)，129.0(C-8a)，131.3(C-9)，40.6(C-9a)，130.9(C-10)，115.4(C-11))，154.7(C-12)，115.4(C-13)，130.9(C-14)，55.9(6-OCH3)，55.6(7-OCH3)，42.5(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[7]報道基本一致，故鑒定為杏黃罌粟堿。

化合物2：無色針狀結(jié)晶，ESI-MSm/z：208.1[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：6.65(1H，s，H-8)，6.60(1H，s，H-5)，3.69(3H，s，7-OCH3)，3.68(3H，s，6-OCH3)，3.36(2H，s，H-1)，2.70(2H，t，J=5.8 Hz，H-3)，2.52(2H，t，J=5.8 Hz，H-4)，2.30(3H，s，N-CH3)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：57.1(C-1)，52.5(C-3)，28.4(C-4)，126.6(C-4a)，111.7(C-5)，147.1(C-6)，146.8(C-7)，109.8(C-8)，125.5(C-8a)，55.5(6-OCH3)，55.4(7-OCH3)，45.8(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[8]報道基本一致，故鑒定為O-methylcorypalline。

化合物3：無色針狀結(jié)晶，ESI-MSm/z：330.2[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.60(1H，d，J=8.3 Hz，H-2)，6.51(1H，d，J=8.2 Hz，H-1)，5.45(1H，d，J=1.9 Hz，H-8)，4.33(1H，d，J=15.6 Hz，H-5e)，3.77(3H，s，3-OCH3)，3.46(3H，s，7-OCH3)，3.19(1H，t，J=4.0 Hz，H-9)，2.99(2H，m，J=4.6，18.4 Hz，H-14，H-10e)，2.70(1H，dd，J=5.4，18.1 Hz，H-10a)，2.54(1H，m，H-5a)，2.45(1H，m，H-16)，2.41(3H，s，N-CH3)，2.06(1H，m，H-16)，1.88(2H，m，H-15)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：118.3(C-1)，109.1(C-2)，145.1(C-3)，144.8(C-4)，49.2(C-5)，194.1(C-6)，152.4(C-7)，115.1(C-8)，54.8(C-9)，24.3(C-10)，130.2(C-11)，122.6(C-12)，40.5(C-13)，45.7(C-14)，35.9(C-15)，47.2(C-16)，56.7(3-OCH3)，56.1(7-OCH3)，42.7(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[9]報道基本一致，故鑒定為青藤堿。

化合物4：白色粉末，ESI-MSm/z：611.3[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.03(2H，d，J=8.5 Hz，H-10′，14′)，6.86(1H，s，H-13)，6.82(1H，s，H-14)，6.82(2H，d，J=8.4 Hz，H-11′，13′)，6.56(1H，s，H-5)，6.53(1H，s，H-10)，6.46(1H，s，H-5′)，6.33(1H，s，H-8)，6.14(1H，s，H-8′)，3.84(3H，s，7′- OCH3)，3.80(3H，s，6′- OCH3)，3.72(1H，t，J=6.4 Hz，H-1′)，3.62(3H，s，6- OCH3)，3.60(1H，t，J=5.3 Hz，H-1)，2.50(3H，s，N2′-CH3)，2.44(3H，s，N2-CH3)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：64.9(C-1)，64.7(C-1′)，47.9(C-3)，46.5(C-3′)，25.9(C-4)，24.8(C-4′)，125.9(C-4a)，125.8(C-4a′)，111.3(C-5)，111.1(C-5′)，145.2(C-6)，147.5(C-6′)，143.5(C-7)，146.7(C-7′)，110.6(C-8)，113.8(C-8′)，129.9(C-8a)，129.2(C-8a′)，134.8(C-9)，132.1(C-9′)，40.9(C-9a)，40.3(C-9a′)，120.4(C-10)，130.9(C-10′)，142.9(C-11)，115.8(C-11′)，145.7(C-12)，155.3(C-12′)，117.6(C-13)，117.6(C-13′)，130.9(C-14)，130.9(C-14′)，55.9(6-OCH3)，55.8(6′-OCH3)，55.8(7′-OCH3)，42.9(N2-CH3)，42.5(N2′-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[3,10]報道基本一致，故鑒定為蝙蝠葛蘇林堿。

化合物5：白色結(jié)晶，ESI-MSm/z：314.2[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.93(2H，d，J=8.4 Hz，H-2′，H-6′)，6.66(2H，d，J=8.4 Hz，H-3′，H-5′)，6.56(1H，s，H-5)，6.03(1H，s，H-8)，3.84(3H，s，6-OCH3)，3.57(3H，s，4′-OCH3)，3.71, 3.12(each 1H，dd，J=5.0，13.0 Hz，α-H)，3.24，2.61(each 1H，m，H-3)，2.86(2H，m，H-4)，2.76(1H，m，H-1)，2.53(3H，s，N-CH3)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：65.1(C-1)，46.6(C-3)，25.1(C-4)，125.7(C-4a)，111.4(C-5)，147.6(C-6)，146.5(C-7)，111.4(C-8)，129.0(C-8a)，131.4(C-1′)，130.9(C-2′)，115.4(C-3′)，154.6(C-4′)，115.4(C-5′)，130.1(C-6′)，40.6(α-C)，55.9(6-OCH3)，55.7(4′-OCH3)，42.4(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[11]報道基本一致，故鑒定為(R)-6-methoxy-1-(4-methoxybenzyl)-2-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-7-ol。

化合物6：白色針晶，ESI-MSm/z：434.2[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDC13)δ：9.75(1H，s，CHO)，7.54(1H，dd，J=1.8，8.2 Hz，H-6′)，7.31(1H，d，J=1.8 Hz，H-2′)，7.12(2H，d，J=8.5 Hz，H-11，H-13)，7.09(1H，d，J=8.5 Hz，H-5′)，6.93(2H，d，J=8.5 Hz，H-10，H-14)，6.57(1H，s，H-5)，6.16(1H，s，H-8)，3.84(3H，s，6-OCH3)，3.72(1H，t，J=6.3 Hz，H-1)，3.66(3H，s，4′-OCH3)，3.18(2H，m，H-3)，2.84(2H，m，H-4)，2.77，2.00(each 1H，m，H-9a)，2.53(3H，s，N-CH3)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：64.8(C-1)，46.9(C-3)，25.3(C-4)，126.2(C-4a)，110.9(C-5)，147.5(C-6)，145.6(C-7)，111.4(C-8)，128.9(C-8a)，129.9(C-9)，40.8(C-9a)，130.1(C-10)，118.8(C-11)，146.7(C-12)，117.0(C-13)，131.6(C-14)，136.5(C-1′)，116.4(C-2′)，153.5(C-3′)，153.9(C-4′)，118.7(C-5′)，128.3(C-6′)，190.4(C-7′)，55.9(6-OCH3)，55.8(4′-OCH3)，42.7(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[12]報道基本一致，故鑒定為pecrassipine B。

化合物7：白色粉末，ESI-MSm/z：625.3[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.03(2H，d，J=8.5 Hz，H-11′，13′)，6.92(1H，d，J=8.0 Hz，H-13)，6.82(2H，d，J=8.5 Hz，H-10′，14′)，6.80(1H，dd，J=2.0，8.0 Hz，H-14)，6.57(1H，d，J=2.0 Hz，H-10)，6.55(1H，s，H-5)，6.50(1H，s，H-5′)，6.09(1H，s，H-8)，6.03(1H，s，H-8′)，3.83(3H，s，6-OCH3)，3.80(3H，s，6′-OCH3)，3.69(1H，m，H-1)，3.64(1H，m，H-1′)，3.60(6H，s，7，7′-OCH3)，3.19，2.69(each 1H，m，H-4)，3.13(2H，m，H-3)，3.03，2.74(each 1H，m，H-4′)，2.84(2H，m，H-9)，2.77，2.69(each 1H，m，H-3′)，2.57(2H，m，H-9′)，2.51(3H，s，N-CH3)，2.48(3H，s，N′-CH3)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：64.9(C-1)，64.8(C-1′)，46.9(C-3)，46.9(C-3′)，25.6(C-4)，25.4(C-4′)，126.2 C-4a)，126.0(C-4a′)，111.1(C-5)，111.0(C-5′)，147.5(C-6)，147.4(C-6′)，146.6(C-7)，146.4(C-7′)，111.3(C-8，C-8′)，129.2(C-8a)，C-8a′)，135.1(C-9)，132.4(C-9′)，40.7(C-9a)，40.5(C-9a′)，117.4(C-10)，131.1(C-10′)，142.9(C-11)，115.9(C-11′)，145.9(C-12)，155.3(C-12′)，120.6(C-13)，117.4(C-13′)，131.1(C-14，C-14′)，55.9(6-OCH3)，55.8(6′-OCH3)，55.7(7-OCH3)，55.7(7′-OCH3)，42.8(N-CH3)，42.7(N′-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[13]報道基本一致，故鑒定為蝙蝠葛堿。

化合物8：無色針狀結(jié)晶，ESI-MSm/z：194.1[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ：6.70(1H，s，H-5)，6.64(1H，s，H-8)，3.78(3H，s，6-OCH3)，3.53(2H，s，H-1), 2.86(2H，t，J=5.9 Hz，H-3)，2.71(2H，t，J=5.9 Hz，H-4)，2.44(3H，s，N-CH3)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：58.2(C-1)，53.9(C-3)，29.2(C-4)，127.2(C-4a)，112.9(C-5)，148.9(C-6)，149.3(C-7)，110.9(C-8)，126.7(C-8a)，56.5(6-OCH3)，45.9(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[14]報道基本一致，故鑒定為黃堇堿。

化合物9：無色油狀物，ESI-MSm/z：384.1[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：5.36(1H，s，H-13)，4.52(1H，dd，J=7.0，11.8 Hz，H-9)，3.98(3H，s，7-OCH3)，3.84(3H，s，12-OCH3)，3.53(3H，s，6-OCH3)，2.78(2H，m，H-2)，2.65(2H，m，H-8)，2.58(1H，d，J=12.0 Hz，H-4)，2.17(1H，dd，J=5.4，12.0 Hz，H-4)，2.20(2H，m，H-3)，1.58(1H，dd，J=3.8，11.7 Hz，H-1)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：43.4(C-2)，41.9(C-3)，43.8(C-4)，190.9(C-5)，135.3(C-6)，161.8(C-7)，46.2(C-8)，59.1(C-9)，64.3(C-10)，69.7(C-11)，189.8 C-12))，105.3(C-13)，202.7(C-14)，52.2(C-15)，69.7(C-16)，60.7(6-OCH3)，60.9(7-OCH3)，59.6(12-OCH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[15]報道基本一致，故鑒定為蝙蝠葛米定。

化合物10：白色粉末，ESI-MSm/z：639.3[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.10(1H，d，J=8.2 Hz，H-13)，7.00(2H，d，J=8.4 Hz，H-11′，H-13′)，6.83(1H，dd，J=2.0，8.2 Hz，H-14)，6.78(2H，d，J=8.5 Hz，H-10′，H-14′)，6.72(1H，d，J=2.0 Hz，H-10)，6.54(1H，s，H-5)，6.52(1H，s，H-5′)，6.06(1H，s，H-8)，6.06(1H，s，H-8′)，3.83(3H，s，6-OCH3)，3.81(3H，s，6′-OCH3)，3.60(3H，s，7-OCH3)，3.59(3H，s，7′-OCH3)，3.41(3H，s，12-OCH3)，3.17(2H，m，H-4)，3.08(2H，m，H-4′)，2.83(2H，m，H-3)，2.77(2H，m，H-3′)，2.73(2H，m，H-9a)，2.57(2H，m，H-9a′)，2.51(3H，s，N-CH3)，2.49(3H，s，N′-CH3)，2.22(1H，m，H-1)，2.01(1H，m，H-1′)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：65.0(C-1)，64.8(C-1′)，46.8(C-3), 45.7(C-3′)，29.5(C-4), 27.3(C-4′)，127.5(C-4a)，127.9(C-4a′)，111.2(C-5，C-5′)，149.4(C-6)，147.3(C-6′)，147.7(C-7)，144.7(C-7′)，111.1(C-8，C-8′)，128.6(C-8a)，129.3(C-8a′)，133.6(C-9)，135.0(C-9′)，40.7(C-9a)，40.6(C-9a′)，122.4(C-10)，131.2(C-10′)，142.9(C-11)，116.1(C-11′)，155.4(C-12)，156.7(C-12′)，121.7(C-13)，115.9(C-13′))，130.0(C-14)，130.8(C-14′)，55.9(6-OCH3)，55.8(6′-OCH3)，55.9(7-OCH3)，55.8(7′-OCH3)，55.6(12-OCH3)，42.8(N-CH3)，42.7(N′-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[16]報道基本一致，故鑒定為O-甲基蝙蝠葛堿。

化合物11：白色結(jié)晶，ESI-MSm/z：398.1[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：6.20(1H，1-OH)，5.43(1H，s，H-3)，4.59(1H，s，H-1)，4.47(1H，dd，J=12.0，6.8 Hz，H-10)，3.98(3H，s，8-OCH3)，3.86(3H，s，7-OCH3)，3.55(3H，s，2-OCH3)，2.69～2.58(1H，m，H-15)，2.48～2.33(2H，m，H-14，H-15)，2.29(1H，d,J=7.0 Hz，H-9)，2.26(3H，s，N-CH3)，2.22(1H，m，H-5)，2.11(1H，m，H-5)，1.49(1H，m，H-14)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：69.4(C-1)，188.6(C-2)，104.9(C-3)，200.7(C-4)，45.8(C-5)，192.2(C-6)，137.9(C-7)，159.4(C-8)，40.5(C-9)，56.9(C-10)，67.1(C-11)，52.4(C-12)，71.9(C-13)，37.6(C-14)，51.0(C-15)，59.1(2-OCH3)，59.8(7-OCH3)，60.3(8-OCH3)，36.1(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[17]報道基本一致，故鑒定為尖防己堿。

化合物12：黃色粉末，ESI-MSm/z：434.2[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：9.64(1H，s，H-7′)，7.44(1H，dd，J=8.0，1.5 Hz，H-4′)，7.23(1H，d，J=1.5 Hz，H-6′)，6.95(1H，d，J=8.0 Hz，H-3′)，6.89(2H，d，J=8.5 Hz，H-10，14)，6.80(2H，d，J=8.5 Hz，H-11，13)，6.49(1H，s，H-5)，5.89(1H，s，H-8)，3.75(3H，s，6-OCH3)，3.75(1H，t，H-1)，3.50(3H，s，7-OCH3)，3.38(1H，m，H-3)，3.18，3.09(each 1H，m，H-9a)，2.81(2H，m，H-3, 4)，2.55(1H，m，H-4)，2.46(3H，s，N-CH3)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：64.7(C-1)，46.1(C-3)，24.3(C-4)，124.8(C-4a)，111.3(C-5)，147.8(C-6)，146.6(C-7)，111.1(C-8)，127.5(C-8a)，134.7(C-9)，131.4(C-10)，118.2(C-11)，155.0(C-12)，118.2(C-13)，131.4(C-14)，145.8(C-1′)，156.0(C-2′)，117.5(C-3′)，128.8(C-4′，C-5′)，118.7(C-6′)，190.3(C-7′)，55.9(6-OCH3)，55.7(7-OCH3)，41.8(N-CH3)，40.5(α-C)。以上數(shù)據(jù)與文獻[18]報道基本一致，故鑒定為menidaurine A。

化合物13：無色棱晶，ESI-MSm/z：208.1[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：7.45(1H，s，H-8)，6.64(1H，s，H-5)，3.91(3H，s，6-OCH3)，3.56(2H，t，J=6.8 Hz，H-3)，3.12(3H，s，N-CH3)，2.92(2H，t，J=6.8 Hz，H-4)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：165.0(C-1)，48.6(C-3)，27.8(C-4)，130.9(C-4a)，108.9(C-5)，149.6(C-6)，144.8(C-7)，114.5(C-8),122.7(C-8a)，56.1(6-OCH3)，35.3(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[19]報道基本一致，故鑒定為thalifoline。

化合物14：無色棱晶，ESI-MSm/z：222.1[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ：7.59(1H，s，H-8)，6.62(1H，s，H-5)，3.91(6H，s，6，7-OCH3)，3.54(2H，t，J=6.8，H-3)，3.13(3H，s，N-CH3)，2.93(2H，t，J=6.8，H-4)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ：165.0(C-1)，48.5(C-3)，27.7(C-4)，131.7(C-4a)，109.4(C-5)，151.8(C-6)，148.1(C-7)，110.6(C-8)，122.1(C-8a)，56.2(6-OCH3，7-OCH3)，35.3(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻報道[19]基本一致，故鑒定為N-methylcorydaldine。

化合物15：黃色結(jié)晶，ESI-MSm/z：192.1[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz, CD3OD)δ：8.82(1H，s，H-1)，7.17(1H，s，H-5)，7.08(1H，s，H-8)，4.01(3H，s，6-OCH3)，3.72(3H，s，N-CH3)；13C-NMR(101 MHz，CD3OD)δ：157.8(C-1)，50.8(C-3)，26.0(C-4)，132.0(C-4a)，118.7(C-5)，157.8(C-6)，147.7(C-7)，112.2(C-8)，119.9(C-8a)，57.2(6-OCH3)，47.4(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[20]報道基本一致,故鑒定為 pycnarrhine。

化合物16：無色針晶，ESI-MSm/z：316.2[M+H]+，Dragendorff顯色反應(yīng)陽性，為生物堿類成分。1H-NMR(400 MHz，CDCl3)δ：6.47(1H，s，H-3)，5.82(1H，m，H-9)，5.58(1H，m，H-8)，4.30(1H，m，H-10)，3.78(3H，s，2-OCH3)，3.34(3H，s，1-OCH3)，3.20(1H，m，H-6a)，3.07(1H，m，H-5b)，2.90(1H，m，H-4b)，2.80(1H，m，H-12b)，2.64(1H，m，H-4a)，2.57(1H，m，H-5a)，2.36(1H，m，H-7a)，2.31(3H，s，N-CH3)，2.06(1H，m，H-11a)，1.84(1H，m，H-11b)，1.58(1H，m，H-7b)，1.56(1H，m，H-12a)；13C-NMR(100 MHz，CDCl3)δ: 147.3(C-1)，140.8(C-2)，108.6(C-3)，121.9(C-3a)，27.1(C-4)，50.4(C-5)，67.0(C-6)，50.2(C-7)，48.1(C-7a)，134.2(C-7b)，130.8(C-7c)，134.0(C-8)，129.7(C-9)，65.3(C-10)，32.1(C-11)，30.5(C-12)，55.1(1-OCH3)，56.5(2-OCH3)，43.5(N-CH3)。以上數(shù)據(jù)與文獻[21]報道基本一致,故鑒定為 amurolin。

4 討論

本研究從蝙蝠葛根莖中分離得到了7種結(jié)構(gòu)類型的生物堿，化合物1、5～6、12為單芐基異喹啉類、4、7、10為雙芐基異喹啉類，3、9、11為嗎啡烷類，13～14為異喹啉酮類，2、8為四氫異喹啉類，15為簡單異喹啉類，16為原阿樸菲型類；6、16在之前從蝙蝠葛屬所分離的化合物中未見報道，1、5、15為首次從該植物中分離得到。課題組前期發(fā)現(xiàn)，蝙蝠葛中總生物堿部位可雙靶點抑制乙酰膽堿酯酶(AChE)和Aβ聚集，從而可能對阿爾茨海默癥有較好的療效。課題組下一步將富集這些化合物，繼續(xù)研究其抑制AChE、Aβ聚集的活性。另外，蝙蝠葛歸肺、胃、大腸經(jīng)，主治咽喉腫痛、熱毒泄痢、風(fēng)濕痹痛等病癥，與潰瘍性結(jié)腸炎高度吻合，故課題組今后將選取含量最高的2種生物堿——蝙蝠葛蘇林堿、蝙蝠葛堿，在動物水平上評價兩者抗?jié)冃越Y(jié)腸炎活性。