中藥及其單體對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究進(jìn)展

楊 斌，王 楠，譚 睿，王 琴*，顧 健*

·綜 述·

中藥及其單體對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究進(jìn)展

楊 斌1，王 楠1，譚 睿2，王 琴1*，顧 健1*

1. 西南民族大學(xué)藥學(xué)院，四川 成都 610041 2. 西南交通大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院，四川 成都 611756

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）是骨髓內(nèi)的非造血干細(xì)胞，具有自我更新能力和多向分化潛能，在一定條件下可以分化為成骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和肝細(xì)胞，是目前組織工程、基因工程較為理想的種子細(xì)胞。通過(guò)歸納總結(jié)現(xiàn)有文獻(xiàn)，主要從BMSCs的生物學(xué)特性、中藥及其單體誘導(dǎo)BMSCs多向分化進(jìn)行探討，以期為后續(xù)的研究提供一定的理論依據(jù)。

中藥；單體；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞；成骨細(xì)胞；心肌細(xì)胞；神經(jīng)細(xì)胞；肝細(xì)胞

間充質(zhì)干細(xì)胞（mesenchymal stem cells，MSCs）是一種存在于體內(nèi)多種組織和器官間充質(zhì)中的一種成體干細(xì)胞，具有自我更新、高繁殖能力、低免疫原性等特點(diǎn)[1]。MSCs主要來(lái)源于骨髓和脂肪組織，臨床上常用于受損組織的修復(fù)與再生[2-5]。其中，在骨髓中被發(fā)現(xiàn)分離的MSCs稱為骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs）。在一定誘導(dǎo)條件下，BMSCs可分化為成骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和肝細(xì)胞等[6]。BMSCs自Friedenstein等[7]發(fā)現(xiàn)以來(lái)引起了廣泛的關(guān)注。BMSCs具有取材方便、易于分離、在體外易于培養(yǎng)、分化能力強(qiáng)且不存在配型及免疫排斥反應(yīng)、多次傳代甚至50代后仍具有干細(xì)胞的特性等特點(diǎn)，使其持續(xù)成為組織工程和基因工程等領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)[8]。通過(guò)顯微鏡觀察，BMSCs在形態(tài)上呈現(xiàn)出纖維細(xì)胞樣，主要是梭形和彷錘形結(jié)構(gòu)，細(xì)胞體積小，核漿較大，貼壁生長(zhǎng)，增殖可形成群落。在人體內(nèi)，BMSCs的含量很低，僅占有骨髓中單個(gè)核細(xì)胞的0.001%～0.01%[9-10]。為了獲得更多的BMSCs滿足組織工程、基因工程等領(lǐng)域的需求，可通過(guò)建立一種提取、分離、純化和體外擴(kuò)增BMSCs的方法，確保在有限的時(shí)間內(nèi)獲得大量及純度較高的BMSCs。目前，從骨髓中分離BMSCs的方法主要有貼壁分離法、骨組織離心法、密度離心法、流式細(xì)胞儀分選法和磁珠分選法[11-14]。BMSCs不屬于永生細(xì)胞，其增殖能力和分化能力也會(huì)收到其他因素，如來(lái)源患者的年齡、受損部位的程度、體外培養(yǎng)的環(huán)境等的調(diào)控[15-18]。目前尚未發(fā)現(xiàn)BMSCs的特異性表面標(biāo)記分子，國(guó)際細(xì)胞治療協(xié)會(huì)對(duì)BMSCs的鑒定提出以下標(biāo)準(zhǔn)[11,19]：（1）BMSCs能夠在體外貼附于塑料表面，有貼壁生長(zhǎng)的特點(diǎn)；（2）在標(biāo)準(zhǔn)的體外誘導(dǎo)條件下，可以分化為軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞和脂肪細(xì)胞；（3）在流式細(xì)胞術(shù)的檢測(cè)下，BMSCs能夠穩(wěn)定表達(dá)CD73、CD90、CD105等表面標(biāo)志物。BMSCs的提取、分離及鑒定見(jiàn)圖1。

圖1 BMSCs的提取、分離及鑒定

BMSCs具有強(qiáng)大的自我更新能力和多向分化潛能，是研究最早的、最深入的成體干細(xì)胞之一。在特定的刺激和誘導(dǎo)下可以分化為成骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和肝細(xì)胞等。BMSCs的分化受到多種因素的調(diào)控，如生長(zhǎng)因子、化學(xué)物質(zhì)、基因編輯和物理因素等。BMSCs是治療成骨分化相關(guān)疾病、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管疾病和肝臟修復(fù)等疾病的種子細(xì)胞，可為此類疾病的治療提供一種新方法。在體外培養(yǎng)時(shí)，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）[20]、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）[21]和表皮生長(zhǎng)因子（epidermal growth factor，EGF）[22]等能夠促進(jìn)BMSC的成骨分化。在一定條件下，5-氮雜胞苷可誘導(dǎo)BMSCs不同程度的向心肌細(xì)胞分化治療心肌梗死、減輕心肌缺血和心肌損傷等疾病[23-25]。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，5-氮雜胞苷和剪切應(yīng)力、其他機(jī)械力、超重力等聯(lián)合誘導(dǎo)BMSCs心肌分化時(shí)，可以增強(qiáng)心臟基因的表達(dá)并獲得更成熟的心肌細(xì)胞樣細(xì)胞[26-27]。然而，5-氮雜胞苷具有一定的毒性和致癌性[28]，已逐漸被其他誘導(dǎo)方式所取代。微核糖核酸（microRNAs，miRs）是內(nèi)源性短非編碼RNA，廣泛應(yīng)用于生物過(guò)程中，具有調(diào)節(jié)干細(xì)胞的增殖、遷移和分化等作用[29]。miRs對(duì)BMSCs的神經(jīng)分化發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用，一些miRs有助于修復(fù)受損的神經(jīng)組織并參與神經(jīng)細(xì)胞的再生。研究發(fā)現(xiàn)，攜帶miRs的外泌體對(duì)受損的神經(jīng)組織具有關(guān)鍵的修復(fù)作用，如移植miR-133b轉(zhuǎn)染的BMSCs可減輕腦出血大鼠的損傷[30]。此外，物理因素能誘導(dǎo)BMSCs向肝細(xì)胞分化，其操作方法簡(jiǎn)便安全、對(duì)BSMCs的損傷小、具有很強(qiáng)的可控性。Sun等[31]采用超聲靶向微泡破壞技術(shù)誘導(dǎo)BMSCs向肝細(xì)胞分化；在此過(guò)程中聯(lián)合肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（hematopoietic growth factor，HGF），可提高BMSCs的肝歸巢效率，抑制肝細(xì)胞凋亡及促進(jìn)肝細(xì)胞增殖，進(jìn)一步促進(jìn)急性肝損傷和肝纖維化的修復(fù)。研究表明，BMSCs和中藥及其單體的相互作用能夠調(diào)節(jié)干細(xì)胞的分化方向并影響干細(xì)胞的功能，故而在很大程度上影響B(tài)MSCs的分化方向和分化能力。BMSCs具有高度的可塑性，其增殖和分化的特異性是其自身特性和不同體外環(huán)境聯(lián)合作用的結(jié)果，其中體外環(huán)境起主導(dǎo)作用。在不同的體外環(huán)境下，BMSCs可以分化為各種組織細(xì)胞，如可分化為中胚層的成骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞；還可以跨越胚層界限，分化為外胚層的神經(jīng)細(xì)胞和內(nèi)胚層的肝細(xì)胞。BMSCs的分化潛能在組織工程、基因工程等領(lǐng)域應(yīng)用最為廣泛，成為多種疾病治療的種子細(xì)胞。大量研究選用中藥及其單體作為誘導(dǎo)劑與傳統(tǒng)的誘導(dǎo)劑相比，能選擇的作用靶點(diǎn)更廣泛，且價(jià)格更低廉。詳細(xì)了解BMSCs和中藥及其單體相互作用以及定向調(diào)控BMSCs的分化可以顯著提高BMSCs的治療效果。

《素問(wèn)·金匱真言論》中記載：“夫精者，身之本也。故藏于精者，春不病溫。夏暑汗不出者，秋成風(fēng)瘧。此平人脈法也”。中醫(yī)認(rèn)為“夫精者”中的“精”有2層含義：其一為“先天之精”，是生命繁衍最基本的物質(zhì)；其二為“后天之精”，是維持生命體中各個(gè)器官組織所需的基本物質(zhì)并促進(jìn)其生長(zhǎng)繁殖[32]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)表明干細(xì)胞可在不同的誘導(dǎo)條件下分化為各種組織細(xì)胞。因此，中醫(yī)認(rèn)為中醫(yī)學(xué)的“精”與干細(xì)胞有很大的相關(guān)性，將干細(xì)胞歸結(jié)于中醫(yī)所說(shuō)的“人體之精”[33]。目前，一些中藥及其單體成分能有效誘導(dǎo)BMSCs向成骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和肝細(xì)胞分化。中藥誘導(dǎo)BMSCs分化的主要研究方向是復(fù)方中藥、單味中藥和中藥有效成分的提取物等方面。運(yùn)用中藥及其單體研究其對(duì)BMSCs的誘導(dǎo)作用，這為中藥在干細(xì)胞的發(fā)展奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。本文結(jié)合近幾年國(guó)內(nèi)外對(duì)BMSCs的相關(guān)研究，從中藥及其單體誘導(dǎo)BMSCs的分化等方面的研究進(jìn)展進(jìn)行分析和探討，以期為后續(xù)的研究提供一定的理論依據(jù)。

1 中藥及其單體誘導(dǎo)BMSCs分化為成骨細(xì)胞

中藥誘導(dǎo)BMSCs向成骨細(xì)胞分化的研究已有長(zhǎng)足進(jìn)展。中藥及其單體有溫陽(yáng)補(bǔ)腎、強(qiáng)筋健骨等功效，可作為成骨細(xì)胞分化的誘導(dǎo)劑，為中藥治療骨科疾病的臨床應(yīng)用提供新的科學(xué)依據(jù)。淫羊藿苷具有補(bǔ)腎壯陽(yáng)、祛風(fēng)濕、強(qiáng)筋骨等作用。研究發(fā)現(xiàn)，不同濃度的淫羊藿苷可誘導(dǎo)BMSCs增殖分化為成骨細(xì)胞，并能提高堿性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）活性和增加鈣化結(jié)節(jié)數(shù)[34-36]。進(jìn)一步研究表明，淫羊藿苷誘導(dǎo)BMSCs的成骨細(xì)胞分化是通過(guò)激活Wnt/β-連環(huán)蛋白（β-catenin）信號(hào)通路上調(diào)基因［如、Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（Runt-related transcription factor 2，）］、蛋白（如尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1、CBF1、Jagged-1）的表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的[37-38]。更深入的研究表明，氯化鋰與淫羊藿苷聯(lián)合調(diào)控Wnt信號(hào)通路誘導(dǎo)BMSCs向成骨細(xì)胞分化治療骨質(zhì)疏松癥的潛力優(yōu)于單獨(dú)治療骨質(zhì)疏松癥的潛力，其機(jī)制是通過(guò)調(diào)節(jié)Wnt信號(hào)通路糖原合成酶激酶-3β的磷酸化從而抑制胞質(zhì)內(nèi)β-catenin的磷酸化和降解，進(jìn)而增加胞質(zhì)內(nèi)β-catenin聚集并轉(zhuǎn)入細(xì)胞核來(lái)實(shí)現(xiàn)的[39]。除此之外，淫羊藿總黃酮在治療骨科疾病方面具有骨修復(fù)和骨再生的作用，其單體成分如朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿次苷起主要治療作用。研究發(fā)現(xiàn)朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C、淫羊藿次苷在BMSCs的成骨細(xì)胞分化中具有促進(jìn)作用，其中朝藿定C、淫羊藿次苷的作用效果更顯著，作用機(jī)制可能是調(diào)控骨形態(tài)蛋白-2（bone morphogenetic protein-2，BMP-2）/RunX2/成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子（osterix，OSX）信號(hào)通路促進(jìn)BMSCs定向成骨細(xì)胞分化[40-41]。補(bǔ)骨脂是常用的補(bǔ)腎壯陽(yáng)藥，其主要有效成分為香豆素類物質(zhì)。雌激素可以預(yù)防骨吸收和募集成骨細(xì)胞的祖細(xì)胞來(lái)增加骨形成。王振濤等[42]用補(bǔ)骨脂素聯(lián)合17β-雌二醇在體外誘導(dǎo)BMSCs分化為成骨細(xì)胞，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）檢測(cè)結(jié)果表明成骨標(biāo)志物I型膠原、關(guān)鍵因子RunX2的表達(dá)水平均上調(diào)，這說(shuō)明17β-雌二醇和補(bǔ)骨脂素具有促進(jìn)BMSCs增殖和成骨細(xì)胞分化的作業(yè)，并且RunX2參與了該調(diào)控過(guò)程。補(bǔ)腎活血方由鹿角膠、補(bǔ)骨脂、淫羊藿、丹參、黃芪、熟地黃、白芍等中藥組成，利用其誘導(dǎo)BMSCs分化為成骨細(xì)胞，經(jīng)ALP鑒定胞漿呈藍(lán)色，經(jīng)茜素紅染色細(xì)胞呈紅色鈣結(jié)節(jié)，有典型的成骨細(xì)胞表達(dá)，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)BMSCs成骨細(xì)胞分化的促進(jìn)作用[43]。利用補(bǔ)腎類復(fù)方中藥的含藥血清誘導(dǎo)BMSCs，發(fā)現(xiàn)其均表現(xiàn)出成骨細(xì)胞特征[44-47]。李小冬等[48]用活骨灌注液對(duì)激素在體外誘導(dǎo)大鼠BMSCs定向分化為成骨細(xì)胞，結(jié)果表明活骨灌注液不僅能有效促進(jìn)BMSCs增殖分化，還可以提高基質(zhì)金屬蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）的表達(dá)，并促進(jìn)BMSCs向壞死區(qū)遷移，同時(shí)促進(jìn)沉默調(diào)節(jié)蛋白1（recombinant sirtuin 1，Sirt1）核轉(zhuǎn)移和微管相關(guān)蛋白輕鏈3蛋白介導(dǎo)自噬泡形成，使細(xì)胞自噬水平增加，可介導(dǎo)Sirt1激活BMSCs自噬拮抗地塞米松對(duì)成骨細(xì)胞分化的抑制作用。研究發(fā)現(xiàn)，補(bǔ)腎類單味和復(fù)方中藥對(duì)BMSCs向成骨細(xì)胞分化的促進(jìn)作用與中醫(yī)辨證理論相吻合，其中復(fù)方中藥更能體現(xiàn)BMSCs向成骨細(xì)胞分化的中醫(yī)理論。

2 中藥及其單體誘導(dǎo)BMSCs分化為心肌細(xì)胞

隨著中藥提純技術(shù)的不斷提高和血清藥理學(xué)的不斷發(fā)展，一些復(fù)方中藥、單味中藥和中藥單體成分能有效誘導(dǎo)BMSCs定向分化為心肌細(xì)胞，對(duì)心血管疾病有一定的改善作用，為應(yīng)用中藥及其單體作為心肌分化的誘導(dǎo)劑奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。丹參酚酸B和丹參酮IIA分別是丹參最主要的活性成分[49]。研究發(fā)現(xiàn)，丹參酚酸B和BMP-2可聯(lián)合誘導(dǎo)大鼠BMSCs心肌分化，通過(guò)RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)GATA結(jié)合蛋白4基因和轉(zhuǎn)錄因子基因表達(dá)增強(qiáng)，聯(lián)合誘導(dǎo)14 d后，細(xì)胞開(kāi)始表達(dá)α-心肌肌球蛋白重鏈（myosin heavy chainalph，）基因，證明丹參酚酸B聯(lián)合BMP-2誘導(dǎo)BMSCs可分化為心肌樣細(xì)胞，且聯(lián)合誘導(dǎo)效果明顯優(yōu)于二者單獨(dú)使用[50-51]。近一步研究發(fā)現(xiàn)，丹參酮IIA聯(lián)合5-氮雜胞苷誘導(dǎo)大鼠BMSCs定向分化，5-氮雜胞苷作為對(duì)照組，聯(lián)合組細(xì)胞呈現(xiàn)長(zhǎng)圓柱狀排列更加緊密，免疫細(xì)胞化學(xué)顯示各誘導(dǎo)組心肌肌鈣蛋白T（cardiac troponin T，cTnT）、結(jié)蛋白（desmin）、α-橫紋肌肌動(dòng)蛋白（α-SCA-actin）均為陽(yáng)性表達(dá)，證明5-氮雜胞苷聯(lián)合丹參酮IIA共同誘導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化的陽(yáng)性率明顯高于5-氮雜胞苷和丹參酮IIA單獨(dú)誘導(dǎo)分化的陽(yáng)性率，聯(lián)合誘導(dǎo)的方式更加高效[52]。丹參酮IIA和丹參酚酸B聯(lián)合其他中藥也能促進(jìn)BMSCs向心肌細(xì)胞分化，丹參酮IIA和丹參酚酸B聯(lián)合川芎嗪體外誘導(dǎo)BMSCs向心肌樣細(xì)胞分化也具有相似的效果[53-54]。因此，丹參酮IIA和丹參酚酸B可以聯(lián)合傳統(tǒng)心肌缺血類中藥誘導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化，還可以聯(lián)合化學(xué)藥物誘導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化，對(duì)心肌梗死和心肌缺血具有改善作用，表明丹參酮IIA和丹參酚酸B可在體外誘導(dǎo)大鼠BMSCs定向分化為心肌樣細(xì)胞。除此之外，地黃多糖[55]、黃芪甲苷[56]、葛根素[57]和淫羊藿苷[58]等中藥單體具有預(yù)防心肌缺血再灌注損傷和改善心肌缺血的作用，可誘導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化，為今后中藥單體體外誘導(dǎo)BMSCs提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。柴胡三參膠囊對(duì)心律失常、心肌急性損傷具有保護(hù)作用[59]。柴胡三參膠囊含藥血清誘導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化，結(jié)果顯示柴胡三參膠囊含藥血清能促進(jìn)BMSCs的增殖和心肌分化，其作用機(jī)制是通過(guò)激活p38絲裂原活化蛋白激酶、磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）信號(hào)通路介導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化[60-61]。加味丹參飲是在《時(shí)方歌括》中丹參飲藥方基礎(chǔ)上演化而來(lái)的，對(duì)缺血性心臟病、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌缺血有較好的療效[62]；加味丹參飲及其含藥血清在體內(nèi)和體外均能誘導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化，對(duì)心肌缺血再灌注損傷有保護(hù)作用，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)保護(hù)作用越明顯，可見(jiàn)加味丹參飲誘導(dǎo)BMSCs移植促心肌血管新生具有協(xié)同和促進(jìn)作用[63-65]。秦厲梅[66]用血府逐瘀湯含藥血清體外誘導(dǎo)大鼠BMSCs向心肌細(xì)胞分化，免疫細(xì)胞化學(xué)法顯示desmin、actin和cTnI呈陽(yáng)性，RT-PCR顯示誘導(dǎo)后的細(xì)胞中有心肌細(xì)胞標(biāo)志物、基因的表達(dá)，證實(shí)血府逐瘀湯含藥血清可以體外誘導(dǎo)大鼠BMSCs分化為心肌樣細(xì)胞。黃淼鑫[67]利用丹參通絡(luò)解毒湯聯(lián)合BMSCs移植治療心肌梗死，可發(fā)現(xiàn)丹參通絡(luò)解毒湯聯(lián)合BMSCs移植可以明顯提高心肌組織中血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體、血栓調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)，降低血管性假性血友病因子蛋白表達(dá)，降低血清內(nèi)皮素-1水平，升高一氧化氮水平，從而減少膠原纖維產(chǎn)生，保護(hù)心肌缺血，達(dá)到治療心肌梗死的療效。獨(dú)參湯聯(lián)合BMSCs移植治療心肌梗死也有類似的效果[68-69]。上述中藥復(fù)方和單體都具有抗心肌缺血和預(yù)防心肌再灌注損傷等作用，均能誘導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化，這些研究為BMSCs向心肌細(xì)胞分化的研究提供了依據(jù)。但具體的作用機(jī)制需進(jìn)一步研究，可能與其刺激BMSCs微環(huán)境中分泌各種促進(jìn)心肌分化的細(xì)胞因子有關(guān)，通過(guò)高表達(dá)心肌分化相關(guān)基因，從而影響B(tài)MSCs向心肌細(xì)胞分化蛋白水平的表達(dá)。

3 中藥及其單體誘導(dǎo)BMSCs分化為神經(jīng)細(xì)胞

中藥及其單體對(duì)機(jī)體的作用是緊密地與神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)相聯(lián)系的，通過(guò)免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡及影響神經(jīng)遞質(zhì)而發(fā)揮治療自身免疫病的作用[70]。一些復(fù)方、單味中藥及中藥單體對(duì)神經(jīng)元具有一定的保護(hù)作用，可以誘導(dǎo)BMSCs分化為神經(jīng)細(xì)胞促進(jìn)神經(jīng)元的修復(fù)和神經(jīng)元再生，為神經(jīng)系統(tǒng)性疾病的臨床治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。黃芪多糖是黃芪的主要活性成分，可促進(jìn)BMSCs的增殖和分化。劉永琦等[71]利用黃芪多糖誘導(dǎo)BMSCs 48 h后，BMSCs增殖明顯，甲苯胺藍(lán)染色為陽(yáng)性，Western blotting法檢測(cè)神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron-specific-enolase，NSE）為陽(yáng)性表達(dá)，證明黃芪多糖可誘導(dǎo)大鼠BMSCs定向分化為神經(jīng)細(xì)胞。更深入的研究發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖對(duì)電離輻射后BMSCs向神經(jīng)分化具有保護(hù)作用，表明電離輻射可以影響B(tài)MSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化的能力，同時(shí)也減輕了電離輻射對(duì)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響，從而為BMSCs移植治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但其保護(hù)機(jī)制尚不明確[72]。黃芪甲苷IV和三七總皂苷分別是我國(guó)傳統(tǒng)中藥黃芪和三七的主要成分，是心腦血管疾病保護(hù)效應(yīng)的有效組分，并能誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化、修復(fù)神經(jīng)、促進(jìn)神經(jīng)功能缺損的修復(fù)[73-75]。李艷玲等[76]和劉曉丹等[77]用黃芪甲苷IV配伍三七總皂苷對(duì)缺血性腦損傷大鼠進(jìn)行BMSCs移植，結(jié)果表明移植后的BMSCs可以對(duì)受損的神經(jīng)元進(jìn)行修復(fù)，促進(jìn)神經(jīng)元再生，改善腦缺血后腦內(nèi)局部微環(huán)境，且聯(lián)合用藥效應(yīng)優(yōu)于單用藥物和單用BMSCs移植。地黃多糖是傳統(tǒng)中藥地黃的有效成分之一，具有補(bǔ)血滋陰、益精填髓之功效，傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)認(rèn)為腎藏精主生殖、腎主骨生髓化血通于腦，同中醫(yī)界理論相符合，中醫(yī)學(xué)的“精”與干細(xì)胞有很大的相關(guān)性，而且許多補(bǔ)腎益精中藥可以促進(jìn)干細(xì)胞的增殖分化[78]。Western blotting法和免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)表明地黃多糖誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化中巢蛋白（nestin）、NSE等蛋白表達(dá)均為陽(yáng)性，且地黃多糖誘導(dǎo)分化nestin、NSE的陽(yáng)性細(xì)胞率高于化學(xué)誘導(dǎo)和神經(jīng)生長(zhǎng)因子（nerve growth factor，NGF）誘導(dǎo)，說(shuō)明地黃多糖是神經(jīng)分化的強(qiáng)誘導(dǎo)劑[79-81]。此外，沙苑子總黃酮[82]、木香烴內(nèi)酯[83]、隱丹參酮[84]、黃豆苷[85]、人參皂苷Rg1[86]均能誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化。川芎嗪可以保護(hù)缺血性腦損傷、減少神經(jīng)元凋亡、對(duì)神經(jīng)細(xì)胞具有保護(hù)作用。研究表明川芎嗪聯(lián)合BMSCs移植均可促進(jìn)腦缺血大鼠腦組織中nestin和NSE蛋白表達(dá)，這表明川芎嗪促進(jìn)BMSCs定向分化時(shí)主要形成神經(jīng)元樣細(xì)胞，且誘導(dǎo)分化后的細(xì)胞可以更穩(wěn)定地維持神經(jīng)元樣細(xì)胞形態(tài)[87]。另外研究可知，川芎嗪聯(lián)合腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）誘導(dǎo)BMSCs神經(jīng)分化，通過(guò)PCR技術(shù)和免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒定誘導(dǎo)后細(xì)胞內(nèi)nestin、NSE表達(dá)均為陽(yáng)性，證明川芎嗪聯(lián)合BDNF可明顯提高BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化的效率和存活率，且川芎嗪早期誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化的效果最佳[88-89]。紅景天苷是中國(guó)傳統(tǒng)藏藥紅景天的主要活性成分，具有強(qiáng)抗氧化性和保護(hù)神經(jīng)功能的作用，已有研究證明紅景天苷對(duì)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化有促進(jìn)作用[90]，但其機(jī)制尚不清楚。最近研究發(fā)現(xiàn)紅景天苷能誘導(dǎo)BMSCs分化為具有多巴胺功能的神經(jīng)細(xì)胞，其作用機(jī)制通過(guò)激活細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase 1/2，ERK1/2）和PI3K/Akt/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）信號(hào)通路促進(jìn)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化[91-92]。右歸丸含藥血清[93]、熟地含藥血清[94]和左歸丸含藥血清[95]等誘導(dǎo)BMSCs分化也能得到類似效果。通過(guò)中藥復(fù)方及其單體誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化可以更好地促進(jìn)神經(jīng)元的修復(fù)和神經(jīng)元再生、促進(jìn)缺血性腦卒中神經(jīng)功能的恢復(fù)，但對(duì)其作用機(jī)制的研究并不夠深入，中藥聯(lián)合BMSCs移植在神經(jīng)系統(tǒng)性疾病中的防治及提高BMSCs移植效率方面仍面臨巨大挑戰(zhàn)。

4 中藥及其單體誘導(dǎo)BMSCs分化為肝細(xì)胞

隨著中醫(yī)藥研究的不斷發(fā)展，其被廣泛應(yīng)用于肝病的臨床治療，特別是對(duì)中晚期各種肝病的治療。研究發(fā)現(xiàn)中藥及其單體可誘導(dǎo)BMSCs分化為肝細(xì)胞治療終末期肝病，明顯改善患者的臨床癥狀。柔肝化纖顆粒是根據(jù)肝硬化的病因、病機(jī)以及治療法則，在壯肝逐瘀煎和的基礎(chǔ)上組方而成的，具有補(bǔ)腎柔肝、活血化瘀的功效。呂艷杭等[96]通過(guò)柔肝化纖顆粒對(duì)大鼠BMSCs歸巢于肝臟治療肝纖維化進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)柔肝化纖顆粒處理的BMSCs能使甲胎蛋白、白蛋白、細(xì)胞角蛋白18（cytokeratin18，CK18）的表達(dá)上調(diào)，并能降低肝纖維化程度，修復(fù)受損肝組織。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，柔肝化纖顆粒是通過(guò)上調(diào)基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α（stromal cell-derived factor-1α，SDF-1α）/趨化因子受體4（chemokine receptor 4，CXCR4）信號(hào)通路誘導(dǎo)BMSCs分化為肝樣細(xì)胞，修復(fù)受損的肝臟組織并治療肝纖維化等疾病[97]。中醫(yī)理論認(rèn)為冬蟲(chóng)夏草具有滋補(bǔ)強(qiáng)身、補(bǔ)肺益腎的功效，現(xiàn)代藥理研究顯示其具有保肝、抗肝纖維化等作用，對(duì)肝臟有多重保護(hù)作用。蟲(chóng)草多糖是從冬蟲(chóng)夏草中提取的一種多糖，是冬蟲(chóng)夏草的主要活性成分。劉江凱等[98]通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)蟲(chóng)草多糖單獨(dú)誘導(dǎo)BMSCs可分化為類肝細(xì)胞樣細(xì)胞，且具有安全性和長(zhǎng)期有效性，有可能與細(xì)胞移植相結(jié)合用于治療急性肝衰竭、肝硬化失代償期等肝臟疾病。人參皂苷有抑制炎癥反應(yīng)、組織鈣離子內(nèi)流和改善微循環(huán)等作用，可以通過(guò)人參皂苷誘導(dǎo)BMSCs顯著改善急性肝功能衰竭大鼠的肝功能，其作用機(jī)制是通過(guò)激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路加速肝細(xì)胞再生[99]。大黃素是大黃的一種主要有效成分，具有抑制腫瘤、抗炎、保肝等作用，研究發(fā)現(xiàn)大黃素聯(lián)合BMSCs能治療急性肝衰竭大鼠肝功能并促進(jìn)肝細(xì)胞再生[100]。白藜蘆醇[101]、大麻素受體[102]誘導(dǎo)BMSCs也有類似效果?！端貑?wèn)·陰陽(yáng)應(yīng)象大論》中“腎生骨髓，髓生肝”的精辟論斷與現(xiàn)代藥理研究中的補(bǔ)益類中藥和補(bǔ)腎益精相關(guān)的方劑可促進(jìn)BMSCs向肝樣細(xì)胞分化相符合。左歸丸和一貫煎具有補(bǔ)腎益精、滋陰疏肝等功效，是臨床上治療肝硬化的首選方劑。李瀚旻等[103]對(duì)左歸丸誘導(dǎo)BMSCs分化為肝細(xì)胞進(jìn)行研究，通過(guò)左歸丸在體內(nèi)可誘導(dǎo)移植小鼠BMSCs表達(dá)白蛋白，表明左歸丸能夠促進(jìn)BMSCs分化為肝細(xì)胞。平鍵等[104]用一貫煎含藥血清誘導(dǎo)BMSCs向肝細(xì)胞分化，經(jīng)糖原染色、高碘酸-希夫染色、甲胎蛋白、白蛋白和CK18陽(yáng)性表達(dá)均顯著提高，初步證明一貫煎含藥血清聯(lián)合HGF能夠促進(jìn)BMSCs向肝細(xì)胞分化，其機(jī)制是通過(guò)下調(diào)Wnt/β-catenin信號(hào)通路和SDF-1/CXCR4信號(hào)通路誘導(dǎo)BMSCs分化。此研究證明了“補(bǔ)腎生髓成肝”理論為中醫(yī)理論的認(rèn)識(shí)提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)，為BMSCs在肝病中的臨床應(yīng)用奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。

綜上可知，具有“補(bǔ)腎”“益精”“壯陽(yáng)”“補(bǔ)氣”“補(bǔ)血”等作用的中藥可作為誘導(dǎo)劑促進(jìn)BMSCs向成骨細(xì)胞、心肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞和肝細(xì)胞分化，并取得顯著的效果，見(jiàn)圖2。但其作用機(jī)制尚不完全清楚，目前認(rèn)為中藥及其單體作為誘導(dǎo)劑的機(jī)制主要與抗氧化的作用相關(guān)。總之，中藥誘導(dǎo)BMSCs分化的機(jī)制報(bào)道較少，還需要進(jìn)一步的研究。

圖2 中藥誘導(dǎo)BMSCs的多向分化

5 結(jié)語(yǔ)與展望

BMSCs自身具有免疫調(diào)節(jié)能力、分泌多種細(xì)胞因子能力、抗氧化性、自我增殖以及分化為各種組織細(xì)胞的潛能，其是改善并治療骨質(zhì)疏松癥、心肌梗死、阿爾茨海默病和肝纖維化等疾病最具有廣闊前景的成體干細(xì)胞之一。除單獨(dú)使用治療各種疾病外，BMSCs分化能力也會(huì)受到其他因素的調(diào)控，如化學(xué)藥物、物理刺激、基因編輯、細(xì)胞因子、復(fù)方中藥及其單體等因素均可誘導(dǎo)BMSCs分化為不同的組織細(xì)胞，為臨床運(yùn)用BMSCs移植治療終末期疾病提供了重要的理論依據(jù)，并為重癥患者帶來(lái)希望。

中藥誘導(dǎo)BMSCs多向分化相較于單純誘導(dǎo)BMSCs分化或單純使用中藥治療各種疾病具有更好的療效，作用機(jī)制可能包括促進(jìn)BMSCs的歸巢、增殖和多向分化等。Wnt信號(hào)通路和PI3K/Akt信號(hào)通路分別是成骨細(xì)胞分化、肝細(xì)胞分化、心肌細(xì)胞分化和神經(jīng)細(xì)胞分化的重要信號(hào)通路，相關(guān)基因是Wnt信號(hào)通路和PI3K/Akt信號(hào)通路的重要轉(zhuǎn)錄因子。進(jìn)一步通過(guò)Wnt信號(hào)通路和PI3K/Akt信號(hào)通路深化開(kāi)展具有“補(bǔ)腎”“益精”“壯陽(yáng)”“補(bǔ)氣”“補(bǔ)血”等作用的中藥干預(yù)BMSCs分化為目標(biāo)細(xì)胞的相關(guān)研究，從而為中藥干預(yù)BMSCs更好地運(yùn)用于臨床提供新的理論依據(jù)。

中藥聯(lián)合細(xì)胞因子促進(jìn)BMSCs多向分化的研究重點(diǎn)，除了促進(jìn)BMSCs的多向分化，還可以調(diào)控分化過(guò)程中相關(guān)基因的表達(dá)。這體現(xiàn)了中藥誘導(dǎo)BMSCs多向分化的多途徑和多靶點(diǎn)的優(yōu)勢(shì)，但目前只涉及了少量信號(hào)通路，對(duì)中藥誘導(dǎo)BMSCs多向分化的研究不夠深入，未來(lái)需要進(jìn)一步探索中藥與細(xì)胞因子之間的聯(lián)系和通路的研究。外泌體是目前干細(xì)胞研究的熱點(diǎn)問(wèn)題，中藥聯(lián)合BMSCs的外泌體相較于單純使用BMSCs的外泌體治療更具優(yōu)勢(shì)[105-107]。但目前相關(guān)研究較少，需要進(jìn)一步深入研究。

中藥是我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的瑰寶，具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，其內(nèi)涵博大精深。大部分中藥具有補(bǔ)腎健脾、益精填髓之功效。中醫(yī)認(rèn)為腎藏精主生殖、腎主骨生髓化血通于腦，同中醫(yī)理論相符合，中醫(yī)學(xué)的“精”與干細(xì)胞有很大的相關(guān)性，可將現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的BMSCs與中醫(yī)“髓”的概念相呼應(yīng)，如許多補(bǔ)腎益精類中藥可以促進(jìn)BMSCs增殖分化。中藥及其單體在誘導(dǎo)BMSCs分化的研究中取得了很大的進(jìn)展，包括對(duì)通路機(jī)制的探討。但仍存在一些不足之處：其一，部分同種中藥及其單體能有效誘導(dǎo)BMSCs多向分化，但其分子機(jī)制尚未研究清楚，亟需進(jìn)一步闡明。其二，中藥復(fù)方、單體是通過(guò)藥物的何種有效成分起到誘導(dǎo)BMSCs向各種組織細(xì)胞分化，其分化效率以及機(jī)制仍需進(jìn)一步探索。其三，體外實(shí)驗(yàn)證明能誘導(dǎo)BMSCs多向分化的中藥及其單體是否在動(dòng)物體內(nèi)具有多向分化能力，其分化效率是否提高等問(wèn)題仍需深入研究。應(yīng)將傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)理論結(jié)合起來(lái)，在總結(jié)前人研究的基礎(chǔ)上，尋找誘導(dǎo)作用效果更好、不良反應(yīng)更小、價(jià)格更低廉的中藥及其單體誘導(dǎo)BMSCs多向分化，使中醫(yī)藥誘導(dǎo)干細(xì)胞分化邁上更高的臺(tái)階，為中藥及其單體誘導(dǎo)BMSCs多向分化提供更多、更可靠的理論依據(jù)。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] Friedenstein A J, Chailakhjan R K, Lalykina K S. The development of fibroblast colonies in monolayer cultures of Guinea-pig bone marrow and spleen cells [J]., 1970, 3(4): 393-403.

[2] Zhou W Y, Lin J X, Zhao K,. Single-cell profiles and clinically useful properties of human mesenchymal stem cells of adipose and bone marrow origin [J]., 2019, 47(7): 1722-1733.

[3] Kern S, Eichler H, Stoeve J,. Comparative analysis of mesenchymal stem cells from bone marrow, umbilical cord blood, or adipose tissue [J]., 2006, 24(5): 1294-1301.

[4] Augello A, de Bari C. The regulation of differentiation in mesenchymal stem cells [J]., 2010, 21(10): 1226-1238.

[5] Arabpour M, Saghazadeh A, Rezaei N. Anti-inflammatory and M2 macrophage polarization-promoting effect of mesenchymal stem cell-derived exosomes [J]., 2021, 97: 107823.

[6] Lin Z Y, He H B, Wang M,. microRNA-130a controls bone marrow mesenchymal stem cell differentiation towards the osteoblastic and adipogenic fate [J]., 2019, 52(6): e12688.

[7] Friedenstein A J, Gorskaja J F, Kulagina N N. Fibroblast precursors in normal and irradiated mouse hematopoietic organs [J]., 1976, 4(5): 267-274.

[8] Sreejit P, Dilip K B, Verma R S. Generation of mesenchymal stem cell lines from murine bone marrow [J]., 2012, 350(1): 55-68.

[9] Danet G H, Luongo J L, Butler G,. C1qRp defines a new human stem cell population with hematopoietic and hepatic potential [J]., 2002, 99(16): 10441-10445.

[10] Bhatia M, Bonnet D, Murdoch B,. A newly discovered class of human hematopoietic cells with SCID-repopulating activity [J]., 1998, 4(9): 1038-1045.

[11] Pittenger M F. Mesenchymal stem cells from adult bone marrow [J]., 2008, 449: 27-44.

[12] 石云, 張曉英. 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs) 的體外分離擴(kuò)增及鑒定 [J]. 長(zhǎng)治醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2012, 26(3): 164-166.

[13] Zohar R, Sodek J, McCulloch C A. Characterization of stromal progenitor cells enriched by flow cytometry [J]., 1997, 90(9): 3471-3481.

[14] Chu D T, Phuong T N T, Tien N,. An update on the progress of isolation, culture, storage, and clinical application of human bone marrow mesenchymal stem/ stromal cells [J]., 2020, 21(3): 708.

[15] 唐杰, 周賢梅. 不同血清微環(huán)境對(duì)C57BL/6小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)的影響 [J]. 江蘇醫(yī)藥, 2017, 43(22): 1589-1593.

[16] Ren J Q, Ward D, Chen S,. Comparison of human bone marrow stromal cells cultured in human platelet growth factors and fetal bovine serum [J]., 2018, 16(1): 65.

[17] 王 慧, 劉佳星, 周 燕, 等. 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖的影響[J/OL]. [2021-12-17].華東理工大學(xué)學(xué)報(bào): 自然科學(xué)版, https://kns.cnki. net/kcms/detail/31.1691.TQ.20211216.1033.001.html.

[18] Ballard V L T, Edelberg J M. Stem cells for cardiovascular repair-the challenges of the aging heart [J]., 2008, 45(4): 582-592.

[19] Dominici M, le Blanc K, Mueller I,. Minimal criteria for defining multipotent mesenchymal stromal cells. The International Society for Cellular Therapy position statement [J]., 2006, 8(4): 315-317.

[20] Zimmermann G, Henle P, Küsswetter M,. TGF-beta1 as a marker of delayed fracture healing [J]., 2005, 36(5): 779-785.

[21] Zhao L M, Jiang S, Hantash B M. Transforming growth factor beta1 induces osteogenic differentiation of murine bone marrow stromal cells [J]., 2010, 16(2): 725-733.

[22] Della Bella E, Pagani S, Giavaresi G,. Uremic serum impairs osteogenic differentiation of human bone marrow mesenchymal stromal cells [J]., 2017, 232(8): 2201-2209.

[23] 宋忠陽(yáng), 張志明, 雍文興, 等. 誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化研究進(jìn)展 [J]. 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志, 2019, 28(5): 456-461.

[24] 王婷婷, 周雪穎, 劉黎青, 等. 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為心肌細(xì)胞的研究進(jìn)展 [J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 2014, 34(4): 1144-1145.

[25] 王文華, 劉洋, 呂洋, 等. 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化的研究進(jìn)展 [J]. 華中科技大學(xué)學(xué)報(bào): 醫(yī)學(xué)版, 2021, 50(6): 811-816.

[26] Ling S K, Wang R, Dai Z Q,. Pretreatment of rat bone marrow mesenchymal stem cells with a combination of hypergravity and 5-azacytidine enhances therapeutic efficacy for myocardial infarction [J]., 2011, 27(2): 473-482.

[27] Izadpanah P, Golchin A, Firuzyar T,. The effect of shear stress on cardiac differentiation of mesenchymal stem cells [J]., 2022, 49(4): 3167-3175.

[28] Alagesan S, Griffin M D. Autologous and allogeneic mesenchymal stem cells in organ transplantation: What do we know about their safety and efficacy? [J]., 2014, 19(1): 65-72.

[29] Francis N, Moore M, Asan S G,. Changes in microRNA expression during differentiation of embryonic and induced pluripotent stem cells to definitive endoderm [J]., 2015, 19(1/2): 70-82.

[30] Shen H T, Yao X Y, Li H Y,. Role of exosomes derived from miR-133b modified MSCs in an experimental rat model of intracerebral hemorrhage [J]., 2018, 64(3): 421-430.

[31] Sun T, Gao F, Li X,. A combination of ultrasound-targeted microbubble destruction with transplantation of bone marrow mesenchymal stem cells promotes recovery of acute liver injury [J]., 2018, 9(1): 356.

[32] 張悅, 江夏薇, 葉衛(wèi)江, 等. 中藥誘導(dǎo)干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化的研究進(jìn)展 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2020, 35(4): 1934-1936.

[33] 李利清, 張新光, 虞堅(jiān)爾. 中醫(yī)藏象精氣與干細(xì)胞關(guān)系研究 [J]. 環(huán)球中醫(yī)藥, 2010, 3(1): 39-41.

[34] 李磊, 鄭懷亮, 寇玉, 等. 淫羊藿苷誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化的研究 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2018, 33(6): 2599-2601.

[35] 蔣紹艷, 宋丹妮, 史玉朋, 等. 淫羊藿苷對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的影響 [J]. 海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào), 2009, 15(10): 1198-1200.

[36] 傅淑平, 楊麗, 洪浩, 等. 淫羊藿苷促SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞骨向分化作用的實(shí)驗(yàn)研究 [J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2015, 35(7): 839-846.

[37] 鄧宇, 陳廖斌. 淫羊藿苷通過(guò)激活Notch信號(hào)通路促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究 [J]. 中醫(yī)學(xué)報(bào), 2017, 32(12): 2393-2398.

[38] 涂艷, 熊莉娜, 柳湘潔, 等. 淫羊藿苷對(duì)成骨細(xì)胞成骨分化的影響及Wnt/-catenin信號(hào)系統(tǒng)的關(guān)系研究 [J]. 中國(guó)中醫(yī)急癥, 2017, 26(3): 448-450.

[39] 付殷, 孫貴才, 歐陽(yáng)玉龍, 等. 氯化鋰聯(lián)合淫羊藿苷對(duì)成骨細(xì)胞增殖分化的影響 [J]. 中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志, 2019, 25(9): 1221-1225.

[40] 梁廣勝, 陳偉才, 殷嫦嫦, 等. 淫羊藿總黃酮對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化過(guò)程BMP-2/RunX2/OSX通路的影響 [J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2016, 36(5): 614-618.

[41] 許靜, 張晶晶, 郭非非, 等. 淫羊藿黃酮類主要成分促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞增殖分化作用及機(jī)制的影響 [J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2017, 23(14): 113-120.

[42] 王振濤, 劉金釗. 17β-雌二醇及補(bǔ)骨脂素對(duì)骨髓間充質(zhì)細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的誘導(dǎo)作用 [J]. 世界中醫(yī)藥, 2021, 16(13): 1972-1976.

[43] 衛(wèi)榮, 魏琴, 孟慶才. 補(bǔ)腎活血方誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的實(shí)驗(yàn)研究 [J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2018, 29(8): 1807-1810.

[44] 宋永周, 童九輝, 劉會(huì)玲, 等. 含抗骨增生膠囊血清預(yù)處理骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的增殖和成骨分化 [J]. 中國(guó)組織工程研究, 2017, 21(9): 1439-1443.

[45] 鄧悅寧, 周達(dá)岸, 馬賢德. 中西醫(yī)聯(lián)合誘導(dǎo)大鼠BMSCs增殖、骨向分化能力的研究 [J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2015, 33(8): 1965-1968.

[46] 陳德喜, 萬(wàn)修陽(yáng), 李沂紅, 等. 壯骨顆粒含藥血清對(duì)兔骨髓基質(zhì)干細(xì)胞體外增殖及分化的影響 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2010, 25(4): 575-577.

[47] 張文賢, 周紅, 劉濤, 等. 健骨益痹方含藥血清對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外增殖及成骨分化的影響 [J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2019, 30(7): 1584-1586.

[48] 李小冬, 劉旭卓, 任天琦, 等. 活骨灌注液對(duì)激素誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化及Sirt1/LC3基因表達(dá)的影響 [J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2022, 24(6): 29-33.

[49] 王怡, 高秀梅, 邢永發(fā), 等. 丹參酚酸B、丹參酮治療心血管疾病的藥理學(xué)研究進(jìn)展 [J]. 上海中醫(yī)藥雜志, 2010, 44(7): 82-87.

[50] 高辰瑋. 骨形態(tài)蛋白2聯(lián)合丹酚酸B誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的研究 [D]. 張家口: 河北北方學(xué)院, 2012.

[51] Lv Y, Gao C W, Liu B,. BMP-2 combined with salvianolic acid B promotes cardiomyocyte differentiation of rat bone marrow mesenchymal stem cells [J]., 2017, 33(10): 477-485.

[52] 宋明官. 5-氮胞苷聯(lián)合丹參酮IIA誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞定向分化的研究 [D]. 張家口: 河北北方學(xué)院, 2015.

[53] 李旭. 丹酚酸B、丹參酮IIA聯(lián)合體外誘導(dǎo)BMSCs分化為心肌樣細(xì)胞的研究 [D]. 張家口: 河北北方學(xué)院, 2013.

[54] 李玉冰. 丹參酮IIA、川芎嗪聯(lián)合體外誘導(dǎo)BMSCs分化為心肌樣細(xì)胞的研究 [D]. 長(zhǎng)沙: 湖南中醫(yī)藥大學(xué), 2011.

[55] 杜紅陽(yáng). 地黃多糖通過(guò)Notch信號(hào)通路誘導(dǎo)BMSCs分化為神經(jīng)樣細(xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究 [D]. 沈陽(yáng): 遼寧中醫(yī)藥大學(xué), 2012.

[56] 趙靜苗, 胡繼宏, 王秋萍. 黃芪甲苷誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的研究 [J]. 中國(guó)全科醫(yī)學(xué), 2017, 20(21): 2635-2639.

[57] 王雪姣. 葛根素誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的研究 [D]. 張家口: 河北北方學(xué)院, 2020.

[58] 劉韶英. 淫羊藿苷對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖及向心肌細(xì)胞分化的影響 [D]. 北京: 北京中醫(yī)藥大學(xué), 2008.

[59] 劉建和, 趙吉銳, 雷婁芳, 等. 柴胡三參膠囊含藥血清對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌細(xì)胞過(guò)程中PI3K/Akt信號(hào)通路干預(yù) [J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2018, 20(8): 15-18.

[60] 雷婁芳. 柴胡三參膠囊含藥血清對(duì)P38MAPK通路介導(dǎo)BMSCs向心肌細(xì)胞分化的干預(yù)研究 [D]. 長(zhǎng)沙: 湖南中醫(yī)藥大學(xué), 2017.

[61] 趙吉銳. 柴胡三參膠囊對(duì)BMSCs分化為心肌細(xì)胞過(guò)程中PI3K/Akt信號(hào)通路的干預(yù) [D]. 長(zhǎng)沙: 湖南中醫(yī)藥大學(xué), 2017.

[62] 韓析言. 加味丹參飲體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究 [J]. 中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志, 2016, 26(11): 43-48.

[63] 謝靜. 加味丹參飲聯(lián)合BMSCs移植對(duì)IRI大鼠心肌細(xì)胞的保護(hù)作用及機(jī)制研究 [D]. 長(zhǎng)沙: 湖南中醫(yī)藥大學(xué), 2012.

[64] 趙鴻. 加味丹參飲含藥血清體外誘導(dǎo)的BMSCs移植對(duì)心肌IRI模型大鼠血管新生影響的研究 [D]. 長(zhǎng)沙: 湖南中醫(yī)藥大學(xué), 2012.

[65] 譚琦. 加味丹參飲誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為心肌樣細(xì)胞的研究 [D]. 長(zhǎng)沙: 湖南中醫(yī)藥大學(xué), 2011.

[66] 秦厲梅. 血府逐瘀湯含藥血清體外誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞成心肌樣細(xì)胞的研究 [D]. 濟(jì)南: 山東中醫(yī)藥大學(xué), 2012.

[67] 黃淼鑫. 丹參通絡(luò)解毒湯聯(lián)合骨髓干細(xì)胞移植對(duì)急性心肌梗死大鼠內(nèi)皮保護(hù)作用研究 [D]. 長(zhǎng)沙: 湖南中醫(yī)藥大學(xué), 2017.

[68] 王祺. 獨(dú)參湯聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性心肌梗死大鼠的相關(guān)研究 [D]. 沈陽(yáng): 遼寧中醫(yī)藥大學(xué), 2011.

[69] 王艷春. 獨(dú)參湯強(qiáng)化骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞心肌移植治療心肌梗死的實(shí)驗(yàn)研究 [D]. 沈陽(yáng): 遼寧中醫(yī)藥大學(xué), 2011.

[70] 胡軍祥, 申屠垠, 殷舒, 等. 中藥對(duì)間質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞的影響 [J]. 中草藥, 2006, 37(5): 783-785.

[71] 劉永琦, 李靜雅, 蔡玲, 等. 黃芪多糖誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化的特性 [J]. 中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志, 2014, 21(6): 60-64.

[72] 盧志偉, 王磊, 張利英, 等. 黃芪多糖對(duì)電離輻射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)分化潛能的影響 [J]. 中國(guó)藥理學(xué)通報(bào), 2017, 33(7): 950-955.

[73] 高志紅, 左亞奇, 李鵬濤, 等. 黃芪甲苷IV誘導(dǎo)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化機(jī)制的研究 [J]. 中藥材, 2019, 42(7): 1640-1645.

[74] 李鵬濤, 高志紅, 段曉亮, 等. 黃芪甲苷IV誘導(dǎo)SAMR1小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究 [J]. 河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2018, 39(11): 1338-1343.

[75] 張震宇, 章春紅, 李學(xué)東, 等. 三七總皂苷對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞分化為神經(jīng)樣細(xì)胞中NGF表達(dá)的影響 [J]. 醫(yī)學(xué)研究雜志, 2009, 38(7): 41-43.

[76] 李艷玲, 丁煌, 傅馨瑩, 等. 黃芪甲苷配伍三七總皂苷對(duì)腦缺血大鼠BMSCs移植后神經(jīng)修復(fù)的影響 [J]. 中草藥, 2021, 52(21): 6537-6544.

[77] 劉曉丹, 丁煌, 鄧常清. 黃芪甲苷配伍三七總皂苷對(duì)OGD/R大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及神經(jīng)分化的影響 [J]. 中草藥, 2019, 50(23): 5795-5801.

[78] 童曉云, 楊忠奇, 冼紹祥, 等. 補(bǔ)腎益精中藥在干細(xì)胞研究中的應(yīng)用進(jìn)展 [J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2009, 20(5): 1216-1219.

[79] 杜紅陽(yáng), 付海燕, 包翠芬, 等. 地黃多糖對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞誘導(dǎo)分化作用的研究 [J]. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志, 2012, 18(6): 133-137.

[80] 杜紅陽(yáng), 付海燕, 馬剛, 等. 地黃多糖在誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化過(guò)程中對(duì)Notch1蛋白表達(dá)的影響 [J]. 廣東醫(yī)學(xué), 2012, 33(9): 1202-1206.

[81] 付海燕, 杜紅陽(yáng), 包翠芬. 地黃多糖誘導(dǎo)大鼠BMSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化及對(duì)Notch1和Jagged1蛋白表達(dá)的影響 [J]. 解放軍醫(yī)學(xué)雜志, 2014, 39(6): 448-453.

[82] 沈驊睿, 張旗, 王立勝, 等. 沙苑子總黃酮對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化潛能的影響 [J]. 中國(guó)中醫(yī)急癥, 2019, 28(10): 1726-1729.

[83] 江羽, 王葉葉, 梁晨, 等. 經(jīng)木香烴內(nèi)酯誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞用于治療腦缺血再灌注損傷的研究 [J]. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2019, 21(4): 573-579.

[84] 倪廣曉, 韓曉勇, 周宏斌, 等. 隱丹參酮體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的實(shí)驗(yàn)研究 [J]. 河北中醫(yī)藥學(xué)報(bào), 2018, 33(6): 47-51.

[85] Zhan J, Li X, Luo D,. Polydatin promotes the neuronal differentiation of bone marrow mesenchymal stem cellsand: Involvement of Nrf2 signalling pathway [J]., 2020, 24(9): 5317-5329.

[86] Bao C F, Wang Y, Min H M,. Combination of ginsenoside Rg1 and bone marrow mesenchymal stem cell transplantation in the treatment of cerebral ischemia reperfusion injury in rats [J]., 2015, 37(3): 901-910.

[87] 劉云云, 趙興緒, 趙紅斌, 等. 川芎嗪體外誘導(dǎo)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的研究 [J]. 生物學(xué)雜志, 2010, 27(6): 21-24.

[88] 蘇立寧, 宋小青, 朱登祥, 等. 川芎嗪聯(lián)合腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化 [J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 2018, 38(1): 28-31.

[89] 杜曉鳴, 魏會(huì)平, 張愛(ài)蘭, 等. 川芎嗪對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞長(zhǎng)期誘導(dǎo)效應(yīng)的研究 [J]. 中國(guó)中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育, 2012, 10(13): 157-158.

[90] 裴晶晶, 吳潤(rùn), 趙紅斌, 等. Ca2+信號(hào)介導(dǎo)紅景天苷促進(jìn)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞的定向分化 [J]. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù), 2010, 14(10): 1808-1812.

[91] 張明, 荔志云, 趙紅斌, 等. 紅景天苷誘導(dǎo)間充質(zhì)干細(xì)胞向多巴胺神經(jīng)分化 [J]. 中華神經(jīng)外科疾病研究雜志, 2012, 11(6): 503-507.

[92] 陳亞男, 劉輝, 趙紅斌, 等. 紅景天苷誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞定向分化的機(jī)制研究 [J]. 藥學(xué)學(xué)報(bào), 2013, 48(8): 1247-1252.

[93] 劉黎青, 李娟, 王媛, 等. 右歸丸含藥血清誘導(dǎo)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞分化的最佳濃度探索 [J]. 遼寧中醫(yī)雜志, 2013, 40(9): 1884-1886.

[94] 黃勇, 吳建軍, 劉凱, 等. 熟地含藥血清對(duì)骨髓間質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響 [J]. 中國(guó)老年學(xué)雜志, 2011, 31(20): 3979-3981.

[95] 康湘萍, 梁超, 蔣嘉燁, 等. 左歸丸對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化的影響 [J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2017, 28(12): 2837-2840.

[96] 呂艷杭, 吳姍姍, 溫智稀, 等. 柔肝化纖顆粒動(dòng)員骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞歸巢治療肝纖維化大鼠的機(jī)制研究 [J]. 中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2021, 39(10): 146-149.

[97] 呂艷杭, 吳姍姍, 王振常, 等. 柔肝化纖顆粒誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為肝細(xì)胞的作用 [J]. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2021, 32(12): 2856-2861.

[98] 劉江凱, 宋雅芳, 劉友章, 等. 蟲(chóng)草多糖體外誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為類肝細(xì)胞樣細(xì)胞 [J]. 中國(guó)組織工程研究, 2012, 16(49): 9221-9225.

[99] 毛云, 張兆瑞. 人參皂苷誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)急性肝功能衰竭大鼠肝組織再生及Wnt/β-catenin信號(hào)表達(dá)的影響 [J]. 中國(guó)臨床藥理學(xué)與治療學(xué), 2019, 24(5): 503-510.

[100] 王鳳玲, 金茜, 于盈, 等. 大黃素聯(lián)合骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠急性肝衰竭 [J]. 中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)生, 2016, 54(14): 23-26.

[101] Hajinejad M, Pasbakhsh P, Omidi A,. Resveratrol pretreatment enhanced homing of SDF-1α-preconditioned bone marrow-derived mesenchymal stem cells in a rat model of liver cirrhosis [J]., 2018, 119(3): 2939-2950.

[102] Wang L, Yang L, Tian L,. Cannabinoid receptor 1 mediates homing of bone marrow-derived mesenchymal stem cells triggered by chronic liver injury [J]., 2017, 232(1): 110-121.

[103] 李瀚旻, 高翔, 晏雪生, 等. 左歸丸促進(jìn)骨髓形成肝細(xì)胞的研究 [J]. 世界華人消化雜志, 2005, 13(24): 2818-2822.

[104] 平鍵, 陳紅云, 周揚(yáng), 等. 一貫煎誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化為肝細(xì)胞樣細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究 [J]. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2014, 34(3): 348-354.

[105] Yang J H, Gao F, Zhang Y K,. Buyang Huanwu Decoction (BYHWD) enhances angiogenic effect of mesenchymal stem cell by upregulating VEGF expression after focal cerebral ischemia [J]., 2015, 56(4): 898-906.

[106] 王劍, 李想, 張宇, 等. 異補(bǔ)骨脂素干預(yù)后BMSCs源性外泌體調(diào)控MC3T3-E1成骨分化的研究 [J]. 內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)雜志, 2021, 53(4): 397-399.

[107] 白曉丹. 芎歸方協(xié)同BMSCs-exosomes干預(yù)缺血性腦損傷神經(jīng)重塑的作用研究 [D]. 天津: 天津中醫(yī)藥大學(xué), 2020.

Research progress on induction and differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells by traditional Chinese medicine and its monomers

YANG Bin1, WANG Nan1, TAN Rui2, WANG Qin1, GU Jian1

1. College of Pharmacy, Southwest Minzu University, Chengdu 610041, China 2. College of Life Science and Engineering, Southwest Jiaotong University, Chengdu 611756, China

Bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) are non-hematopoietic stem cells in bone marrow with self-renewal ability and multidirectional differentiation potential, which can differentiate into osteoblast, myocardial cells, nerve cells, and hepatic cells under certain conditions. It is an ideal seed cell for tissue engineering and genetic engineering. By summarizing the existing literature, biological characteristics of BMSCs, traditional Chinese medicine and its monomers to induce BMSCs multidirectional differentiation were mainly discussed in this review, in order to provide a certain theoretical basis for the follow-up research.

traditional Chinese medicine; monomer; bone marrow mesenchymal stem cells; osteoblast; myocardial cells; nerve cells; hepatic cells

R282.71

A

0253 - 2670(2022)24 - 7915 - 10

10.7501/j.issn.0253-2670.2022.24.029

2022-06-07

國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目（82174083）；四川省重點(diǎn)研發(fā)項(xiàng)目（20ZDYF3291）；四川省科技廳項(xiàng)目（2019YFS0157）；教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放課題（KF2020009）

楊 斌，碩士研究生，主要從事中藥藥理學(xué)研究。E-mail: 1633039945@qq.com

王 琴，講師，博士，主要從事DNA的表觀遺傳修飾及相關(guān)分子生物學(xué)技術(shù)研究。Tel: (028)85752465 E-mail: 1058081409@qq.com

顧 健，教授，博士生導(dǎo)師，主要從事中藥及民族藥創(chuàng)新藥物研究與開(kāi)發(fā)。Tel: (028)85523968 E-mail: gujiancd@163.com

[責(zé)任編輯 崔艷麗]