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    母體日糧中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠生長性能及血清生化指標(biāo)的影響

    2022-12-26 11:12:38白力格扣袁非凡李寒梅陳子賢建曉倩馮蓮英叢日華
    中國飼料 2022年23期
    關(guān)鍵詞:小鼠

    李 勝, 白力格扣, 袁非凡, 李寒梅, 陳子賢, 建曉倩,王 華, 張 眉, 郭 潔, 李 潔, 馮蓮英, 叢日華*

    (1.陜西省畜牧技術(shù)推廣總站,陜西西安 710016;2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院,陜西楊凌 712100;3.陜西省水產(chǎn)研究與技術(shù)推廣總站,陜西西安 710086;4.西安海吉焦生物科技研究院有限公司,陜西西安 710016;5.陜西康大飼料有限公司,陜西咸陽 713700)

    母體妊娠期及泌乳期的營養(yǎng)水平對子代的生長發(fā)育有著非常重要的作用。丁酸梭菌又名酪酸菌,進(jìn)入動(dòng)物機(jī)體后會產(chǎn)生多種有益機(jī)體的營養(yǎng)物質(zhì),能夠調(diào)節(jié)動(dòng)物機(jī)體腸道微生物生態(tài)平衡,可以提高機(jī)體對蛋白、脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)的分解吸收,增強(qiáng)動(dòng)物免疫功能、促進(jìn)生長性能(張自杰等,2021;趙娜等,2018)。β-胡蘿卜素是動(dòng)物體內(nèi)維生素A的重要來源,但是,動(dòng)物體內(nèi)不能合成β-胡蘿卜素,必須由食物攝入,β-胡蘿卜素作為維生素及類維生素類飼料添加劑產(chǎn)品具有抗氧化、著色、提高免疫力和繁殖機(jī)能,促進(jìn)細(xì)胞間的縫隙聯(lián)接等多種生理功能,同時(shí)有研究表明,在飼料中添加β-胡蘿卜素可以提高肉仔雞日增重,提高血清和肝臟中抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶活力(李俊營等,2012;任延利等,2007)。目前,兩者單獨(dú)或與其他生物活性物質(zhì)聯(lián)合研究的報(bào)道較多,但兩者聯(lián)合應(yīng)用對機(jī)體的作用研究報(bào)道較少。因此,本文的目的主要是通過在母體妊娠期及泌乳期日糧中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌,研究母體日糧中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對后代生長性能以及血清生化指標(biāo)的影響,為β-胡蘿卜素和丁酸梭菌在臨床生產(chǎn)中的聯(lián)合應(yīng)用提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)動(dòng)物及試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)選擇20只8周齡KM小鼠,雌雄各半,購自成都達(dá)碩試驗(yàn)動(dòng)物有限公司,于動(dòng)物室驗(yàn)室分籠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,雌雄合籠交配,雌鼠受孕后隨機(jī)分為5組,孕前正常喂養(yǎng),待雌鼠妊娠第11天起,對照組飼喂普通鼠糧,試驗(yàn)組1、2、3分別飼喂日采食0.05‰、0.1‰、0.15‰的β-胡蘿卜素和丁酸梭菌(純度≥20%)自制糧,試驗(yàn)組4只飼喂日采食0.1‰的β-胡蘿卜素自制糧,飼喂至子代鼠21 d時(shí),每組隨機(jī)抽取6只小鼠剖檢、采樣。

    1.2 試驗(yàn)日糧 本試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)日糧配方參考了國標(biāo)GB14924.2-2001試驗(yàn)動(dòng)物飼料標(biāo)準(zhǔn),各原料種類添加量見表1所示。

    表1 基礎(chǔ)日糧配方組成

    1.3 樣品采集 在子代鼠21 d時(shí),對全部小鼠進(jìn)行活體稱重,取眼眶血液,置于4℃冰箱過夜,在室驗(yàn)室將血液樣品通過離心(3500 r/min,10 min)制成血清,送檢進(jìn)行血清生化指標(biāo)檢測。采集血液樣本后,將小鼠斷頸處死,解剖取樣。取肝、脾、胃、小腸和大腸各段,并用生理鹽水對胃腸道內(nèi)容物沖洗后進(jìn)行稱重,計(jì)算器官指數(shù):

    1.4 血清生化指標(biāo) 使用深圳雷杜生命科技Chemray 240自動(dòng)生化分析儀檢測血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AST)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GGT)、堿性磷酸酶(ALP)、總膽紅素(TBIL)、直接膽紅素(DBIL)、堿性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、總膽汁酸(TBA)、總膽固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)、高密度膽固醇(HDL-C)、低密度膽固醇(LDL-C)、糖化血清蛋白(GSP)、葡萄糖(GLU)、尿素氮(UREA)、肌酐(CR)、尿素(BUN)含量。

    1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用軟件SPSS 26.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用One-way ANOVA進(jìn)行方差分析,結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。當(dāng)P<0.05時(shí),判定具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的顯著性差異,當(dāng)P<0.01時(shí),判定具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的極顯著性差異。

    2 結(jié)果

    2.1 β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠體重、器官重和器官指數(shù)的影響 由表2可知,與對照組相比,試驗(yàn)組1小鼠體重、肝臟重量、肝臟指數(shù)、回腸重量、盲腸重量和胸腺重量極顯著增加了36.36%、77.5%、19.55%、107.14%、116.67%和44.12%(P<0.01),脾臟重量、盲腸指數(shù)顯著增加52.78%、41.71%(P<0.05);試驗(yàn)組2小鼠體重、肝臟重量、肝臟指數(shù)、回腸重量和盲腸重量極顯著增 加 了27.27%、52.5%、18.83%、171.43%和61.11%(P<0.01),回腸指數(shù)和胸腺重量顯著增加116.48%和29.41%(P<0.05),結(jié)腸指數(shù)顯著降低了37.19%(P<0.05);試驗(yàn)組3小鼠體重、脾臟重量、空腸重量、回腸重量、盲腸重量、胸腺重量、肝臟重量極顯著增加了54.54%、83.33%、50.00%、178.57%、88.89%、61.76%、67.5%(P<0.01),小鼠回腸指數(shù)顯著增加了84.00%(P<0.05);試驗(yàn)組4小鼠肝臟指數(shù)和回腸重量極顯著增加了17.64%和107.14%(P<0.01),肝臟重量、回腸指數(shù)顯著增加22.5%、100.88%(P<0.05)。

    表2 β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠體重、器官重、器官指數(shù)的影響

    與試驗(yàn)組1相比,試驗(yàn)組2小鼠肝臟重量極顯著減少了14.08%(P<0.01),脾臟重量、脾臟指數(shù)、十二指腸重量和盲腸重量顯著減少了32.73%、23.12%、26.47%和25.64%(P<0.05),回腸指數(shù)顯著增加53.84%(P<0.05);試驗(yàn)組3小鼠體重極顯著增加了13.33%(P<0.01),小鼠肝臟指數(shù)顯著減少了9.11%(P<0.05);試驗(yàn)組4小鼠體重、肝臟重量、脾臟重量、盲腸重量和胸腺重量極顯著減少了20.00%、30.99%、47.27%、47.69%和32.65%(P<0.01),小鼠脾臟指數(shù)、十二指腸重量和盲腸指數(shù)減少了24.02%、31.37%和34.35%(P<0.05)。

    與試驗(yàn)組2相比,試驗(yàn)組3小鼠體重、脾臟重量、脾臟指數(shù)、十二指腸重量和空腸重量極顯著升高了21.43%、78.38%、49.61%、53.33%和46.15%(P<0.01),小鼠胸腺重量、結(jié)腸重量顯著升高了25.00%、58.33%(P<0.05),肝臟指數(shù)顯著下降8.56%(P<0.05);試驗(yàn)組4小鼠體重、肝臟重量極顯著降低了14.29%和19.67%(P<0.01),胸腺重量、盲腸重量和盲腸指數(shù)顯著降低了25.00%、29.66%和29.27%(P<0.05),小鼠結(jié)腸指數(shù)顯著升高55.55%(P<0.05)。

    與試驗(yàn)組3相比,試驗(yàn)組4小鼠體重、胸腺重量、肝臟重量、脾臟重量、脾臟指數(shù)、十二指腸重量、空腸重量和盲腸重量極顯著降低了29.41%、40.00%、26.87%、56.06%、33.94%、39.13%、47.37%和40.00%(P<0.01)。新生小鼠其余各器官重和器官指數(shù)均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。

    2.2 β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠血清生化指標(biāo)的影響 由表3可見,與對照組相比,試驗(yàn)組1、2、3小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶極顯著降低(P<0.01);試驗(yàn)組3、4小鼠γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶顯著升高了13.21%、10.29%(P<0.05);試驗(yàn)組1總膽紅素顯著降低了46.80%(P<0.05);試驗(yàn)組1直接膽紅素顯著降低了53.23%(P<0.05);試驗(yàn)組1、2、3、4小鼠白蛋白極顯著升高了14.15%、12.55%、21.28%、16.67%(P<0.01);試驗(yàn)組3總膽汁酸顯著升高了69.80%(P<0.05);試驗(yàn)組3血糖極顯著升高了230.00%(P<0.01);試驗(yàn)組1、2、3、4小鼠尿酸極顯著降低了40.73%、41.53%、32.89%、45.12%(P<0.01);試驗(yàn)組1肌酐顯著降低了32.58%(P<0.05)。

    表3 β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對子代鼠生化指標(biāo)的影響

    與試驗(yàn)組1相比,試驗(yàn)組3小鼠總膽汁酸極顯著升高了113.52%(P<0.01);試驗(yàn)組3肌酐顯著升高了48.08%(P<0.05);與試驗(yàn)組2相比,試驗(yàn)組3總膽汁酸極顯著升高了105.83%(P<0.01);與試驗(yàn)組3相比,試驗(yàn)組4總膽汁酸極顯著降低了55.83%(P<0.01),試驗(yàn)組4糖化血清蛋白顯著降低了34.67%(P<0.05)。

    3 討論

    動(dòng)物體重是檢測動(dòng)物生長最直觀的指標(biāo)。任延利等(2007)和褚千然等(2021)研究表明,添加不同水平的β-胡蘿卜素能夠提高肉仔雞和蛋雛雞的平均日增重。Murano等(2005)試驗(yàn)表明長期口服β-胡蘿卜素可增加幼齡雪貂的體重。武麗達(dá)等(2022)研究表明,飼料中添加丁酸梭菌可有效提高白羽肉雞的日增重。李玉鵬等(2017)研究表明,添加丁酸梭菌的飼糧飼喂斷奶仔豬,可以提高斷奶仔豬的平均增重。在本試驗(yàn)中,與對照組相比,試驗(yàn)組1、2、3小鼠體重極顯著升高;與試驗(yàn)組4相比,試驗(yàn)組1、2、3小鼠體重極顯著升高;而與試驗(yàn)組1和試驗(yàn)組2相比,試驗(yàn)組3小鼠體重極顯著升高,與上述研究結(jié)果相一致。因此在母體飼料中添加1.5‰β-胡蘿卜素和丁酸梭菌可以更好提高新生小鼠生長性能。

    胸腺是機(jī)體重要的免疫器官,通常胸腺指數(shù)也作為評估免疫功能的基礎(chǔ)指標(biāo)。袁慧坤等(2018)研究發(fā)現(xiàn),在北京鴨中添加丁酸梭菌可以顯著提高胸腺指數(shù)。在本試驗(yàn)中,與對照組相比,試驗(yàn)組1、3小鼠胸腺重量極顯著升高,試驗(yàn)組2小鼠胸腺重量顯著升高,與上述研究結(jié)果相一致;與試驗(yàn)組4相比,試驗(yàn)組1、3小鼠胸腺重量極顯著升高,試驗(yàn)組2小鼠胸腺重量顯著升高;與試驗(yàn)組2相比,試驗(yàn)組3小鼠胸腺重量顯著升高。脾是一個(gè)關(guān)鍵的外周淋巴器官,在產(chǎn)生免疫反應(yīng)中起主導(dǎo)作用,脾臟指數(shù)是評價(jià)動(dòng)物免疫功能直接、簡單、有效的重要指標(biāo)(李玉鵬等,2017;Mast等,1999)。 Garcia等(2003)研究表明,飼喂含β-胡蘿卜素的日糧可以增強(qiáng)小鼠的免疫功能。李可等(2015)研究表明,在飼料中添加丁酸梭菌,可以顯著提高脾臟指數(shù)和法氏囊指數(shù)。劉海艷等(2016)研究表明,在日糧中添加β-胡蘿卜素能明顯增強(qiáng)早期雛雞的免疫器官指數(shù)。在本試驗(yàn)中,與對照組相比,試驗(yàn)組1小鼠脾臟重量顯著升高,試驗(yàn)組3小鼠脾臟重量極顯著升高;與試驗(yàn)組2相比,試驗(yàn)組1小鼠脾臟重量、脾臟指數(shù)顯著升高,試驗(yàn)組3小鼠脾臟重量、脾臟指數(shù)極顯著升高;與試驗(yàn)組4相比,試驗(yàn)組3脾臟重量、脾臟指數(shù)極顯著升高,與上述研究結(jié)果相一致。

    肝臟作為關(guān)鍵的代謝器官,可調(diào)控動(dòng)物機(jī)體的能量代謝和脂代謝。與對照組相比,試驗(yàn)組1、2、3小鼠肝臟重量極顯著升高,試驗(yàn)組1、2肝臟指數(shù)極顯著升高,試驗(yàn)組3肝臟指數(shù)顯著升高;與試驗(yàn)組4相比,試驗(yàn)組1、2、3小鼠肝臟重量極顯著升高;與試驗(yàn)組2相比,試驗(yàn)組1肝臟重量極顯著升高;與試驗(yàn)組3相比,試驗(yàn)組1、2小鼠肝臟指數(shù)顯著升高;因此試驗(yàn)組1可以更好提高新生小鼠肝臟代謝生長能力。

    胃腸道是動(dòng)物消化、吸收養(yǎng)分的主要器官,常以消化器官的重量和指數(shù)來衡量動(dòng)物的消化吸收功能。丁酸梭菌可以促進(jìn)畜禽腸道發(fā)育,有利于改善腸道的消化吸收功能 (趙敏孟等,2018)。與對照組相比,試驗(yàn)組2小鼠十二指腸指數(shù)極顯著降低,試驗(yàn)組4小鼠十二指腸指數(shù)顯著降低;與試驗(yàn)組2相比,試驗(yàn)組1、3小鼠十二指腸重量顯著升高;與試驗(yàn)組4相比,試驗(yàn)組1、3十二指腸重量升高。與對照組相比,試驗(yàn)組3空腸重量極顯著升高,與試驗(yàn)組4相比,試驗(yàn)組1、3小鼠空腸重量極顯著升高;與對照組相比,試驗(yàn)組1、2、3、4小鼠回腸重量極顯著升高,試驗(yàn)組2、3、4小鼠回腸指數(shù)顯著升高。與對照組相比,試驗(yàn)組1、2、3盲腸重量極顯著升高,試驗(yàn)組1盲腸指數(shù)顯著升高;與試驗(yàn)組2、4相比,試驗(yàn)組1盲腸重量顯著升高;與試驗(yàn)組4相比,試驗(yàn)組3盲腸重量顯著升高。與對照組相比,試驗(yàn)組2結(jié)腸指數(shù)顯著降低;與試驗(yàn)組2相比,試驗(yàn)組3結(jié)腸重量顯著升高。這與蔣一秀等(2021)研究發(fā)現(xiàn)飼料中添加丁酸梭菌可以提高仔鵝空腸和回腸重量研究結(jié)果相一致。因此試驗(yàn)組1、3可以提高小鼠腸道消化吸收能力,提高營養(yǎng)物質(zhì)與腸道的接觸面積,改善腸道對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收效率。

    血清生化指標(biāo)可以反映動(dòng)物機(jī)體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收以及營養(yǎng)代謝和機(jī)體的健康狀態(tài),通過動(dòng)物血清生化指標(biāo)可以評估動(dòng)物的健康狀況和生理代謝水平(趙晨等,2022)。血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)主要分布在肝細(xì)胞內(nèi),當(dāng)機(jī)體處于健康狀態(tài)時(shí)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性較低,如果肝臟受損或損傷,會使血液中ALT的活性升高,所以ALT常作為檢測肝臟損傷的敏感指標(biāo)之一;ALT在本試驗(yàn)中與對照組相比,試驗(yàn)組1、2、3小鼠ALT極顯著下降,因此試驗(yàn)組1、2、3對小鼠肝臟損傷較?。沪?谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)是一種非特異的肝功能指標(biāo),與對照組相比,試驗(yàn)組3、4顯著升高;血清中白蛋白(ALB)含量可以反映動(dòng)物機(jī)體對飼料中蛋白質(zhì)的消化吸收程度,通過對ALB的測定可以間接反映出動(dòng)物機(jī)體的代謝功能(陳永華等,2012),當(dāng)體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成作用增強(qiáng)時(shí),血清中ALB含量較高。盧連強(qiáng)等(2022)研究結(jié)果表明,在飼料中添加β-胡蘿卜素和胡蘿卜渣可以提升白蛋白、總蛋白的含量。任延利(2008)研究發(fā)現(xiàn),在飼料中添加β-胡蘿卜素可以顯著提升血清總蛋白和白蛋白的含量。本試驗(yàn)中,與對照組相比,試驗(yàn)組1、2、3、4血清ALB含量極顯著升高,與上述研究結(jié)果相一致,可能為試驗(yàn)組飼料蛋白質(zhì)攝入量高且合成作用強(qiáng),同樣在生長性能上也表現(xiàn)為試驗(yàn)組1、2、3體重極顯著高于對照組,表明在飼料中同時(shí)添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌可提高小鼠生長性能。葡萄糖(GLU)的含量是動(dòng)物機(jī)體重要的能量來源,GLU在正常范圍內(nèi)的高低能反映機(jī)體能量代謝和糖代謝情況(代二朋等,2022;李巖等,2022),本試驗(yàn)中與對照組相比,試驗(yàn)組3小鼠GLU極顯著升高、試驗(yàn)組1、4小鼠血糖顯著升高,結(jié)果表明在飼料中添加1.5‰胡蘿卜素和丁酸梭菌可提高新生小鼠對糖類物質(zhì)的代謝。尿酸(UREA)可以衡量動(dòng)物機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝水平和飼料氨基酸平衡狀況的直觀指標(biāo),UREA含量與體內(nèi)氮沉積有密切的關(guān)系(盧連強(qiáng)等,2022)。在本試驗(yàn)中與對照組相比,試驗(yàn)組1、2、3、4血清UREA含量均極顯著下降,可能是由于新生小鼠生長需要大量蛋白質(zhì),因此機(jī)體會減少UREA的產(chǎn)生增加氮的保留,從而更有利于機(jī)體生長的發(fā)育。膽紅素是肝臟代謝的重要物質(zhì),肝細(xì)胞對血液中的膽紅素?cái)z取、結(jié)合,當(dāng)肝細(xì)胞受損時(shí)血液中膽紅素含量會升高,本試驗(yàn)中與對照組相比,試驗(yàn)組1小鼠血清總膽紅素,直接膽紅素顯著下降,與試驗(yàn)組3、4相比,試驗(yàn)組1小鼠血清總膽紅素極顯著降低,結(jié)果可說明在飼料中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌不會對肝臟造成影響。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,各組小鼠血清生化指標(biāo)均在正常范圍內(nèi),說明在飼料中添加β-胡蘿卜素和丁酸梭菌不會對新生小鼠產(chǎn)生不良反應(yīng),并且可以提高子代鼠生長性能、免疫功能,促進(jìn)體內(nèi)蛋白質(zhì)的合成、利用。

    4 小結(jié)

    本試驗(yàn)結(jié)果表明,在飼料中同時(shí)添加0.15‰β-胡蘿卜素和丁酸梭菌對于提高子代鼠生長性能、免疫功能、促進(jìn)蛋白質(zhì)的代謝合成更為有效。

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