望謨地方茶樹種質(zhì)資源生化成分多樣性分析及優(yōu)異單株初篩

李 燕，徐富林，楊 春，郭 燕，郭 燦，陳正武，劉亞兵

(1.貴州省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，貴陽 550006；2.望謨縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，貴州 望謨 552300)

種質(zhì)資源是選育新品種和發(fā)展農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)的基礎(chǔ)[1-2]。優(yōu)異的茶樹種質(zhì)資源對選育茶樹良種具有重要意義[3]。地方茶樹種質(zhì)資源具有獨(dú)特的適應(yīng)性和巨大的生產(chǎn)潛力，是最具保存和研究價(jià)值的初級(jí)茶樹種質(zhì)資源，對地方茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展和突出地方茶產(chǎn)品特色具有重要意義[4-5]。貴州地處茶樹起源中心，境內(nèi)蘊(yùn)含類型豐富的茶樹種質(zhì)資源[6-7]。望謨地處黔西南，是重點(diǎn)產(chǎn)茶縣，境內(nèi)含大量的野生紫茶資源，素有“中國紫茶之鄉(xiāng)”的稱號(hào)[8]。望謨縣“八步紫茶”野生茶樹種質(zhì)資源，遺傳多樣性較為豐富，具全株紫色和花青素含量高的特性，綜合性狀表現(xiàn)良好，含有許多符合茶產(chǎn)業(yè)需要且具有潛在利用價(jià)值的茶葉功能成分。經(jīng)前期調(diào)查發(fā)現(xiàn)，望謨縣境內(nèi)現(xiàn)有“八步紫茶”野生茶樹種質(zhì)8萬余株[9]?，F(xiàn)望謨縣大力發(fā)展紫茶產(chǎn)業(yè)，將茶產(chǎn)業(yè)作為鄉(xiāng)村振興的重要產(chǎn)業(yè)。從中選育特優(yōu)異種質(zhì)，對特異茶樹品種選育具有重要作用，也將為望謨縣紫茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供品種基礎(chǔ)。目前，針對望謨縣地方“八步紫茶”野生茶樹種質(zhì)資源的收集、鑒定和評價(jià)鮮有報(bào)道，只做了部分調(diào)研工作和生物學(xué)特性調(diào)查初探，對該資源的重要功能性成分缺乏研究[10]。如何篩選優(yōu)異、豐富的茶樹種質(zhì)資源，進(jìn)而快速、準(zhǔn)確地選育出適應(yīng)望謨茶產(chǎn)業(yè)長遠(yuǎn)發(fā)展的茶樹新品種及開發(fā)出望謨縣特色優(yōu)勢古茶新產(chǎn)品是急需解決的問題。因此，開展望謨“八步紫茶”茶樹種質(zhì)資源功能性生化成分多樣性研究，從望謨豐富的地方茶樹種質(zhì)資源中發(fā)掘優(yōu)勢特色茶樹資源，以期為望謨地方茶樹新品種選育提供參考，推動(dòng)望謨茶產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑來源

20份望謨“八步紫茶”茶樹種質(zhì)資源(WM 01～WM 20)試驗(yàn)材料取自望謨縣郊納鎮(zhèn)關(guān)鴨龍村、鐵爐村、八步村、冗巖村?？Х葔A、沒食子酸、兒茶素類(EGC、C、EC、EGCG和ECG)標(biāo)準(zhǔn)品購自北京世紀(jì)奧科生物技術(shù)有限公司，兒茶素類(GCG)和茶氨酸標(biāo)準(zhǔn)品購自合肥博美生物科技有限公司，乙腈、甲醇、冰醋酸等有機(jī)試劑為市售HPLC級(jí)。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1樣品制備

參考曾貞等[11]的方法，于2021年4月，按1芽2葉標(biāo)準(zhǔn)采摘春茶頭輪新梢鮮葉，制備干茶茶樣。

1.2.2茶湯提取

咖啡堿、沒食子酸、兒茶素類(EGC、C、EC、EGCG、GCG和ECG)：參照GB/T 8313-2018《茶葉中茶多酚和兒茶素類含量的檢測方法》，采用70 ℃ 70%甲醇醇提法測定。

茶氨酸：參照GB/T 8312-2013《茶 咖啡堿測定》方法，用沸水浸提法測定。

1.2.3檢測方法

參照周順珍等[12]的方法測定咖啡堿、沒食子酸、兒茶素類(EGC、C、EC、EGCG、GCG和ECG)含量，參照岳婕等[13]的方法測定茶氨酸含量。每個(gè)材料測定3次，取3次重復(fù)平均值。

1.2.4數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)基本統(tǒng)計(jì)和整理采用Excel 2010軟件進(jìn)行。相關(guān)分析、主成分分析和聚類分析采用SPSS 23.0軟件進(jìn)行。鑒定茶葉品質(zhì)指標(biāo)，參照阮宇成等[14]的方法計(jì)算兒茶素品質(zhì)指數(shù)：

兒茶素品質(zhì)指數(shù)=(EGCG+ECG)×100/EGC；

評價(jià)遺傳多樣性指數(shù)采用香農(nóng)-維納指數(shù)(Shannon-Wiener index)[15]：

H′=-∑Pi×lnPi；

式中，Pi為某性狀第i個(gè)代碼的頻率。

參照張小琴等[16]的方法對各生化成分含量進(jìn)行級(jí)數(shù)分類。按照農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 2031-2011《農(nóng)作物優(yōu)異種質(zhì)資源評價(jià)規(guī)范 茶樹》[17]對望謨20份地方茶樹種質(zhì)資源進(jìn)行鑒定和評價(jià)，從中篩選特異資源和優(yōu)良種質(zhì)資源。

2 結(jié)果與分析

2.1 生化成分含量和多樣性分析

茶葉的生化成分是茶類適制性的重要依據(jù)，可對茶葉品質(zhì)優(yōu)劣進(jìn)行預(yù)判。本試驗(yàn)對20份望謨地方茶樹種質(zhì)資源的18個(gè)常規(guī)生化成分進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析和多樣性分析，由表1和表2可知，生化成分變異系數(shù)為0～89.77%，平均變異系數(shù)為32.73%，變異系數(shù)在50%以上的有可可堿含量、C含量、GCG含量和酚氨比。20份望謨地方茶樹種質(zhì)資源的酯型兒茶素含量遠(yuǎn)大于非酯型兒茶素的含量；兒茶素組分中，EGCG含量遠(yuǎn)高于其他兒茶素組分(ECG、C、EC、GCG和ECG)，平均值(8.02)超其他兒茶素組分(ECG、C、EC、GCG和ECG)平均值之和(7.12)。ECG和EGC居中，C和EC含量較低。而根據(jù)陸錦時(shí)[18]和宛曉春[19]的研究結(jié)果，一般“原始特性”野生型茶樹種質(zhì)資源的ECG含量較高，而EC和C的含量超過EGC的含量。因此，望謨“八步紫茶”野生茶樹種質(zhì)資源在生化成分上，多傾向于栽培型茶樹種質(zhì)資源的特征；具體表現(xiàn)在兒茶素組分中，EGCG的含量較高，酯型兒茶素的含量遠(yuǎn)高于非酯型兒茶素，與楊春等[20]對黎平地方茶樹種質(zhì)資源評價(jià)的結(jié)果一致。

表1 20份望謨地方茶樹種質(zhì)資源常規(guī)生化成分含量Table 1 The conventional biochemical components of 20 tea germplasm resources from Wangmo

2.1.1望謨地方茶樹資源主要生化成分含量分析

20份望謨地方茶樹種質(zhì)資源氨基酸含量變化范圍為1.60%～5.79%，氨基酸含量較高的資源為WM 18，最低的為WM 19；平均值為3.53%，變異系數(shù)為31.44%，高于廣西茶樹資源的3.23%[21]和福鼎大白茶的3.04%[22]。茶氨酸變化范圍為0.55%～3.80%，含量最高為WM 18，最低為WM 14，平均值為1.73%，變異系數(shù)為44.47%。茶多酚變化范圍為16.72%～22.27%，含量最高為WM 16，最低為WM 20，平均值為20.11%，變異系數(shù)為6.45%，分別高于廣西茶樹資源的13.45%[21]和福鼎大白茶的14.05%[22]。主要生化成分(氨基酸、茶多酚、咖啡堿)的平均變異系數(shù)為19.12%。沒食子酸(GA)是茶葉中酚酸類化合物，極易被氧化，是重要的過氧化自由基清除劑之一，具有重要的保健作用[23-24]。其變化范圍為0.01%～0.05%，含量最高為WM 04，平均值為0.02%，變異系數(shù)為47.15%。酚氨比變化范圍也較大，從5.41到39.51，均值為14.74，變異系數(shù)為56.67%，其中有2份資源(WM 15和WM 18)酚氨比小于8；有5份資源(WM 05、WM 12、WM 13、WM 14和WM 19)的酚氨比大于15，剩余13份資源酚氨比介于8～15之間。表明20份望謨“八步紫茶”種質(zhì)資源的生化成分含量有明顯差異。

2.1.2望謨地方茶樹資源兒茶素組分含量分析

兒茶素類占多酚類的70%～80%，是茶多酚類主體成分，對茶湯滋味有重要作用，是茶葉重要的保健成分，是茶樹進(jìn)化的重要指標(biāo)之一[25]。20份望謨地方茶樹種質(zhì)資源兒茶素組分ECG、C、EC、EGCG、GCG和ECG變化幅度分別為1.06%～2.90%，0.11%～0.51%，0.66%～2.89%，5.13%～9.86%，0.24%～1.88%，1.46%～4.54%；平均含量分別為2.02%，0.21%，1.41%，8.02%，0.58%，2.90%；變異系數(shù)分別為22.59%、56.16%、40.24%、16.83%、58.53%和28.38%，其中C和GCG的變異系數(shù)超50%，平均變異系數(shù)為37.12%。兒茶素總量、酯型兒茶素總量、非酯型兒茶素總量變化幅度分別為11.38%～17.33%，6.92%～13.09%，2.10%～5.01%，平均含量分別為15.13%，10.91%，3.64%，變異系數(shù)分別為10.57%、13.39%和20.89%。陸錦時(shí)[18]研究表明，兒茶素品質(zhì)指數(shù)對茶葉品質(zhì)評價(jià)有一定意義，并認(rèn)為，兒茶素指數(shù)越大，其品質(zhì)越好。本試驗(yàn)供試種質(zhì)的兒茶素品質(zhì)指數(shù)變化范圍為300.43～890.57，平均為571.05，變異系數(shù)為26.90%，總計(jì)有13份資源兒茶素品質(zhì)指數(shù)大于500，占總數(shù)的65%。兒茶素組分和兒茶素品質(zhì)指數(shù)的平均變異系數(shù)為31.67%。20份望謨“八步紫茶”種質(zhì)資源的兒茶素組分差異較為明顯，進(jìn)一步說明其生化成分多樣性較高。

2.1.3望謨地方茶樹資源生物堿含量分析

茶葉中的生物堿主要為咖啡堿、可可堿和茶葉堿，也是茶湯的主要呈味物質(zhì)[19]，雖在茶葉干物重中占比不大(3%～5%)，但對評價(jià)茶葉品質(zhì)有重要意義?？煽蓧A變化范圍為0.50%～5.99%，含量最高的為WM 07，最低為WM 18，平均值為1.26%，變異系數(shù)為89.77%?？Х葔A變化范圍為2.32%～4.56%，含量最高的為WM 03，最低的為WM 11，平均值為3.21%，變異系數(shù)為19.49%，遠(yuǎn)高于廣西茶樹資源的0.50%[21]和福鼎大白茶的0.16%[22]。20份供試種質(zhì)的生物堿變異幅度為0～89.77%，平均變異系數(shù)為36.42%，變異幅度較大，說明20份望謨“八步紫茶”種質(zhì)資源生化成分多樣性較高。

2.1.4望謨地方茶樹資源生化成分多樣性分析

遺傳多樣性指數(shù)(H′)反映了茶樹群體種質(zhì)的豐富性，其值越大，表明各資源分布越均勻，育種潛力越大，對研究茶樹群體意義重大[26]。20份望謨地方茶樹種質(zhì)資源的生化成分多樣性指數(shù)范圍為0.693～2.016，平均為1.663，其中多樣性最大的為氨基酸(2.016)，最小的為茶堿(0.693)。影響茶葉品質(zhì)的主要生化成分氨基酸、茶多酚、咖啡堿的多樣性指數(shù)分別為2.016、1.917和1.630，平均為1.850；兒茶素組分(ECG、C、EC、EGCG、GCG和ECG)的平均多樣性指數(shù)為1.695，其中C的多樣性最小，為1.414，EGC的多樣性最大，為1.921。生物堿組分(咖啡堿、可可堿和茶葉堿)的平均多樣性指數(shù)為1.180，其中茶葉堿的最小，僅為0.693，咖啡堿的最大，為1.630。酚氨比的遺傳多樣性指數(shù)為1.527，兒茶素品質(zhì)指數(shù)的多樣性指數(shù)為1.921。這些種質(zhì)資源生化成分差異較為明顯，尤其在氨基酸含量上，表現(xiàn)出豐富的遺傳多樣性。

2.2 望謨地方茶樹資源生化成分的主成分分析和相關(guān)分析

對16個(gè)主要生化成分進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果(表3)表明，氨基酸與茶氨酸呈極顯著正相關(guān)，與酚氨比極顯著負(fù)相關(guān)。茶氨酸與EGC呈顯著負(fù)相關(guān)，與酚氨比呈極顯著負(fù)相關(guān)。茶多酚與ECG、兒茶素總量和酯型兒茶素呈極顯著正相關(guān)，與酚氨比呈顯著正相關(guān)。咖啡堿與EGC呈顯著負(fù)相關(guān)，與EC和非酯型兒茶素呈極顯著負(fù)相關(guān)，與C呈極顯著正相關(guān)。EGC與氨基酸、茶氨酸、咖啡堿和C呈顯著負(fù)相關(guān)，與非酯型兒茶素呈極顯著正相關(guān)，與酚氨比呈顯著正相關(guān)。EC與EGCG呈顯著負(fù)相關(guān)，與ECG和非酯型兒茶素呈極顯著正相關(guān)。EGCG與兒茶素總量和酯型兒茶素呈極顯著正相關(guān)。GCG與非酯型兒茶素呈顯著負(fù)相關(guān)。ECG與兒茶素總量和非酯型兒茶素呈顯著正相關(guān)。兒茶素總量和非酯型兒茶素、酚氨比呈顯著正相關(guān)。

表2 20份望謨地方茶樹資源生化成分基本統(tǒng)計(jì)參數(shù)及多樣性指數(shù)Table 2 The basic statistical parameters and diversity index of biochemical components in 20 tea resources from Wangmo

表3 20份望謨地方茶樹資源生化成分的相關(guān)分析Table 3 The correlation analysis of biochemical components of 20 local resources from Wangmo

表5 各類群中的主要生化成分Table 5 The major biochemical components in each group

主成分分析可以很好地簡化研究性狀，更好地研究和評價(jià)群體[27]。用SPSS軟件對20份望謨地方茶樹種質(zhì)資源的13個(gè)主要生化成分(除茶堿含量)進(jìn)行主成分分析，以特征值大于1為標(biāo)準(zhǔn)提取主成分，結(jié)果(表4)顯示，這4個(gè)主成分的累積貢獻(xiàn)率為77.901%，第1主成分的貢獻(xiàn)率為31.113%，對應(yīng)特征向量中作用較大的幾個(gè)性狀為：氨基酸、茶氨酸、茶多酚、咖啡堿、EGC、兒茶素總量，特征向量值均在0.6以上，其中氨基酸、茶氨酸和咖啡堿的影響為負(fù)值。第2主成分的貢獻(xiàn)率為20.446%，對應(yīng)特征向量中作用較大的幾個(gè)性狀為：EC和EGCG，其中EC為負(fù)值，且特征向量值均在0.8以上。第3主成分的貢獻(xiàn)率為16.569%，對應(yīng)特征向量中以茶多酚、ECG和兒茶素總量作用最大，特征值均在0.5以上。第4主成分的貢獻(xiàn)率為9.773%，對應(yīng)特征向量中以C最大，為負(fù)值，其次是GA，特征值均在0.5以上。根據(jù)這4個(gè)主成分可以反映望謨地方茶樹種質(zhì)資源的大部分信息。

2.3 聚類分析

對13個(gè)生化成分(除茶葉堿含量)進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析。如圖1所示，在歐氏距離為15時(shí)，可將該20份種質(zhì)資源分成三大類，第1類包括9份資源，為WM 02、WM 06、WM 03、WM 01、WM 08、WM 17、WM 20、WM 15和WM 18；第2類包括10份資源，為WM 05、WM 12、WM 19、WM 04、WM 10、WM 09、WM 13、WM 16、WM 07和WM 11；第3類包括1份資源，為WM 14。

以主要的6個(gè)生化成分(氨基酸含量、茶氨酸含量、茶多酚含量、酚氨比、咖啡堿含量和兒茶素總量)在不同類群中的表現(xiàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析(如表5)，結(jié)果表明，第1類群的氨基酸含量、茶氨酸含量、咖啡堿含量平均較高，第2類群平均值居中，第3類群平均值較低；第3類的茶多酚含量、酚氨比和兒茶素總量最高，第2類群的居中，第1類群的最低。

表4 20份望謨地方茶樹資源生化成分的主成分分析Table 4 The principal component analysis of biochemical components of 20 local resources in Wangmo

表6 茶樹資源優(yōu)異生化成分含量Table 6 Tea resources with high biochemical components

圖1 20份望謨地方茶樹種質(zhì)資源基于主要生化成分的聚類分析Fig.1 Twenty tea germplasm resources in Wangmo based on cluster analysis of main biochemical components

2.4 優(yōu)異資源鑒選

生化成分含量對篩選茶樹種質(zhì)資源具有重要意義，生化成分含量優(yōu)異的種質(zhì)資源，是選育優(yōu)良茶樹品種的潛在資源[28]。根據(jù)NY/T 2031-2011《農(nóng)作物優(yōu)異種質(zhì)資源評價(jià)規(guī)范 茶樹》和已有的相關(guān)文獻(xiàn)對優(yōu)異茶樹種質(zhì)資源的各生化成分的定義標(biāo)準(zhǔn)[29-31]。由表6可知，從20份望謨地方茶樹種質(zhì)資源中鑒選出特異資源7份，其中高茶氨酸資源1份，為WM 18；高GCG資源1份，為WM 15；高氨基酸資源5份，分別為WM 01、WM 02、WM 06、WM 15和WM 18。茶多酚含量≥20%的潛在優(yōu)良資源14份，分別為WM 01、WM 03、WM 04、WM 05、WM 06、WM 07、WM 09、WM 10、WM 12、WM 13、WM 14、WM 16、WM 18和WM 19。EGCG(≥9.0%)的潛在資源4份，分別為WM 04、WM 07、WM 12、WM 14和WM 16。兒茶素總量>17.0%的種質(zhì)資源3份，分別為WM 07、WM 14、WM 16。酯型兒茶素>12.0%的種質(zhì)資源5份，分別為WM 04、WM 07、WM 10、WM 16。這些資源均可作為茶樹品種選育的潛在重要資源。

2.5 適制性預(yù)判

酚氨比對評價(jià)茶樹種質(zhì)資源適制性有重要作用，可以作為茶樹資源適制性的初篩指標(biāo)[32]。一般適制綠茶的酚氨比小于8，適制紅茶的酚氨比大于15，紅綠兼制的酚氨比為8～15[33]。本研究中的望謨“八步紫茶”種質(zhì)資源中適制綠茶的有3份，分別是WM 02、WM 15和WM 18；紅綠兼制的有11份，分別為WM 01、WM 03、WM 04、WM 06、WM 08、WM 09、WM 10、WM 11、WM 16、WM 17和WM 20；適制紅茶的有6份，分別為WM 05、WM 07、WM 12、WM 13、WM 14和WM 19，其中酚氨比最大的為WM 14(39.51)。

3 討 論

3.1 望謨地方茶樹種質(zhì)資源生化成分多樣性分析

本研究通過對20份望謨“八步紫茶”種質(zhì)資源的生化成分多樣性進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)望謨“八步紫茶”資源的生化成分變異系數(shù)差異較大，變異幅度為0～89.77%，與莫嵐等[34]對廣東連南的茶樹種質(zhì)的研究結(jié)果相似，均是可可堿的變異系數(shù)最大(146.39%)，但又遠(yuǎn)遠(yuǎn)小于連南可可堿的變異系數(shù)。平均變異系數(shù)為32.73%，小于黎平縣地方茶樹種質(zhì)資源[20]，小于重慶30份種質(zhì)資源[35]；大于貴州貴定鳥王種茶樹等眾多貴州種質(zhì)資源[15-16,29-30]，大于武夷名叢茶樹資源[36]。遺傳多樣性指數(shù)范圍為0.693～2.016，平均為1.663，與貴定鳥王種(1.69)[16]和貴州野生茶樹種質(zhì)(1.82)[15]相近，高于貴州鎮(zhèn)寧(0.87)[29]，低于杭州(1.99)[28]；常規(guī)的3種生化成分(氨基酸、茶多酚和咖啡堿)，以氨基酸變異系數(shù)最大(31.44%)，茶多酚變異系數(shù)最小(6.45%)，咖啡堿居中(19.49%)，這一結(jié)果與張小琴等[16]對貴定鳥王種的生化成分多樣性分析的研究結(jié)果(氨基酸最大、咖啡堿最小、茶多酚居中)有所不同，與劉聲傳等[15]、王新超等[21]、曹雨等[29]的研究結(jié)果一致，且氨基酸的變異系數(shù)大于廣西地方茶樹種質(zhì)資源(25.6%)[21]和貴州鎮(zhèn)寧野生茶樹種質(zhì)資源(24.87%)[29]，低于貴定鳥王種(35.97%)[16]、云南(50.30%)[36]和廣東連南(34.73%)[33]的種質(zhì)資源。茶多酚的變異系數(shù)均小于貴州鎮(zhèn)寧、廣西、廣東連南和貴州貴定鳥王種的。說明望謨“八步紫茶”地方種質(zhì)資源的變異較為豐富，且供試各種質(zhì)的茶多酚含量變化較其他地方穩(wěn)定，氨基酸含量變化居中，較廣西地方和貴州鎮(zhèn)寧的變異大，較云南、廣東連南和貴定鳥王種穩(wěn)定；主要生化成分的變異較黎平和重慶的穩(wěn)定。

3.2 望謨地方茶樹種質(zhì)資源生化成分演化分析

研究表明，生化成分含量與茶樹進(jìn)化層次有關(guān)。一般隨著茶樹從野生型進(jìn)化到栽培型，生化成分更為豐富，氨基酸含量增加，兒茶素總量增加，非酯型兒茶素減少，酯型兒茶素增加等[37]。在本研究中，氨基酸含量平均值為3.53%、比廣西茶樹資源(3.23%)[21]和廣東連南資源(3.04%)[33]、貴州鎮(zhèn)寧野生茶樹資源(1.8%)[29]、貴州野生茶樹資源(2.21%)[15]，低于貴定鳥王種(4.05%)[16]，福鼎大白茶(4.0%)[22]，與陳正武等[30]對28份貴州茶樹資源(野生、半野生、地方品種)研究結(jié)果(3.66%)相近，小于武夷名叢資源(3.82%)[35]，大于貴州地方茶樹資源(群體品種資源)的3.3%[39]。由此說明望謨地方茶樹種質(zhì)資源按照氨基酸的變化，其更接近栽培型。兒茶素總含量平均為15.13%，與陳正武等[30]的研究結(jié)果(15.14%)相近，小于貴州鎮(zhèn)寧野生茶樹種質(zhì)的16.70%[29]，略大于廣東連南茶樹種質(zhì)資源(15.03%)和貴州黎平地方茶樹種質(zhì)資源(14.43%)[20]。說明望謨茶樹種質(zhì)資源介于栽培型和野生型之間，較黎平茶樹資源更傾向于野生型，較貴州鎮(zhèn)寧野生茶樹種質(zhì)資源更傾向于栽培型。望謨地方茶樹種質(zhì)資源的酯型兒茶素總量平均含量為10.91%，高于廣東連南茶樹種質(zhì)資源(11.87%)[33]，高于貴州野生茶樹種質(zhì)(10.67%)[15]，低于陳正武等[30]研究的28份貴州茶樹資源(野生、半野生、地方品種)(11.70%)。非酯型兒茶素總量平均含量為3.64%，低于廣東連南茶樹種質(zhì)資源(3.16%)[33]，高于貴州野生茶樹種質(zhì)(2.65%)[15]，高于陳正武等[30]研究的28份貴州茶樹資源(野生、半野生、地方品種)(3.45%)。從酯型兒茶素和非酯型兒茶素含量變化也進(jìn)一步說明望謨地方茶樹種質(zhì)資源介于栽培型和野生型之間。根據(jù)上述討論結(jié)果可認(rèn)為，望謨“八步紫茶”地方茶樹種質(zhì)資源的結(jié)果介于栽培型和野生型之間。

3.3 望謨地方茶樹種質(zhì)資源的挖掘利用

目前，因產(chǎn)業(yè)發(fā)展的實(shí)際需要，望謨“八步紫茶”地方茶樹種質(zhì)資源大多利用茶樹群體進(jìn)行扦插繁育，沒有經(jīng)過提純和相關(guān)單株鑒定和選育，導(dǎo)致種質(zhì)性狀混雜極其嚴(yán)重，不利于加工和品質(zhì)提升，優(yōu)異資源未得到充分利用。本研究經(jīng)聚類分析將20份望謨“八步紫茶”地方茶樹種質(zhì)資源分為3類，且初步篩選出特異資源7份，其中高茶氨酸(≥3.0%)資源1份，高GCG(>1.5%)資源1份，高氨基酸(≥4.5%)資源5份。此為第一次在望謨“八步紫茶”茶樹種質(zhì)資源中篩選出優(yōu)異和潛在利用資源。茶氨酸既是茶樹重要的次代謝產(chǎn)物，又是呈味物質(zhì)，同時(shí)還兼具保健功效[40]。高茶氨酸資源的鑒選對選育高茶氨酸品種具有積極作用，也是開發(fā)高茶氨酸茶和高GABA茶的重要資源。楊春等[20]、趙洋等[41]、方開星等[42]分別從貴州黎平地方茶樹種質(zhì)資源、保靖黃金茶資源和廣東種質(zhì)資源庫中的218份茶樹種質(zhì)資源中鑒選出總共16份高茶氨酸資源。這些高茶氨酸資源均可為生產(chǎn)高品質(zhì)綠茶提供資源基礎(chǔ)。氨基酸對茶葉綠茶品質(zhì)提高具有積極作用，具鮮甜味，對綠茶鮮爽度提高具有積極作用。一般認(rèn)為，氨基酸含量越高，綠茶滋味鮮爽度越好[19,43]。本試驗(yàn)初篩的高氨基酸資源可為高品質(zhì)貴州綠茶提供基礎(chǔ)，也為深加工和功能性茶產(chǎn)品開發(fā)利用提供品種原料。GCG為EGCG的空間異構(gòu)體，較EGCG穩(wěn)定，具有較強(qiáng)的自由基清除活性，且具有較強(qiáng)的抑制黑色素形成的能力[44-45]。本試驗(yàn)篩選的高GCG資源將為自由基清除、黑色素抑制和相關(guān)保健品開發(fā)與研究提供依據(jù)。

望謨茶樹種質(zhì)資源豐富，本試驗(yàn)隨機(jī)檢測了其中20份資源，進(jìn)行了初步的篩選、收集和保存，但尚未進(jìn)行系統(tǒng)的選育研究。需更進(jìn)一步擴(kuò)大資源量進(jìn)行篩選和對初步篩選的種質(zhì)進(jìn)行系統(tǒng)評價(jià)和品種選育，以滿足望謨縣紫茶產(chǎn)業(yè)的需要，進(jìn)而推進(jìn)貴州特色茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

4 結(jié) 論

望謨地方茶樹資源生化成分上具豐富的遺傳多樣性，該資源表現(xiàn)出栽培型茶樹的特點(diǎn)，從中初步篩選出適制綠茶茶樹資源3份，紅綠兼制的有11份，適制紅茶的有6份。生化成分含量特異的資源7份(高茶氨酸資源1份、高氨基酸資源5份、高GCG資源1份)；潛在優(yōu)良資源21份，其中茶多酚含量大于等于20%的14份，兒茶素總量大于17.0%的種質(zhì)資源3份，酯型兒茶素大于12.0%的種質(zhì)資源4份。這些資源可為貴州茶產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供品種來源。也可為茶樹功能性成分提取提供材料來源，為茶葉深加工提供材料基礎(chǔ)，具有重要的科研和生產(chǎn)價(jià)值。