結(jié)直腸腺瘤合并Hp陽(yáng)性者血清GAS、炎癥因子和腸道菌群分析

馮娟，王晶，陳安

1.西安鳳城醫(yī)院消化內(nèi)科，陜西 西安 710018；2.空軍軍醫(yī)大學(xué)第二附屬醫(yī)院普通外科，陜西 西安 710038

結(jié)直腸腺瘤是指在結(jié)直腸表面向腸腔內(nèi)突出的各類隆起性病變，屬于良性病變。結(jié)直腸腺瘤被公認(rèn)為癌前病變，對(duì)于其發(fā)生發(fā)展過(guò)程及機(jī)制的研究是預(yù)防結(jié)直腸癌的重要途徑。近年來(lái)，多項(xiàng)研究顯示幽門螺桿菌(Hp)感染與結(jié)直腸腺瘤有較為密切的關(guān)系[1-2]。此外，相關(guān)研究指出腸道菌群與免疫反應(yīng)參與了結(jié)直腸腫瘤的發(fā)生與發(fā)展[3-4]。因此，對(duì)Hp感染及炎癥因子水平和腸道菌群狀況進(jìn)行分析，進(jìn)而探討結(jié)直腸腺瘤發(fā)展成為結(jié)直腸癌的機(jī)制，成為臨床研究的重點(diǎn)[5]。本研究主要分析結(jié)直腸腺瘤合并Hp陽(yáng)性者的血清胃泌素(GAS)、炎癥因子水平[白細(xì)胞介素-1(IL-1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-10(IL-10)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)]和腸道菌群的變化情況，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2019年6月至2021年12月西安鳳城醫(yī)院消化內(nèi)科收治的125例結(jié)直腸腺瘤患者作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)臨床有完整的資料；(2)病理學(xué)診斷資料與檢測(cè)結(jié)果明確者；(3)通過(guò)胃鏡檢查確診為慢性胃炎者；(4)腫瘤部位在升結(jié)腸的高分化結(jié)腸癌Ⅱ期者；(5)手術(shù)前后均沒(méi)有使用過(guò)腸道微生態(tài)制劑與抗生素者；(6)無(wú)嚴(yán)重疾病者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)年齡＜18歲者；(2)妊娠期或哺乳期的婦女；(3)存在自身免疫疾病者；(4)曾接受過(guò)Hp根除治療者；(5)克羅恩病癌變者；(6)近4周服用過(guò)H2受體拮抗劑等會(huì)對(duì)檢查結(jié)果產(chǎn)生影響者；(7)有胃腸道手術(shù)史者。按照是否伴有Hp感染分組，其中50例合并Hp陽(yáng)性者納入研究組，75例未合并Hp陽(yáng)性患者納入對(duì)照組。

1.2 檢測(cè)方法(1)Hp檢測(cè)：以14C尿素呼氣試驗(yàn)結(jié)果為標(biāo)準(zhǔn)，其中結(jié)果為陽(yáng)性時(shí)即為Hp感染。具體標(biāo)準(zhǔn)為：測(cè)量結(jié)果≥100 dpm/mmol為陽(yáng)性，＜100 dpm/mmol為陰性。(2)各炎性細(xì)胞因子水平檢測(cè)：抽取患者5 mL外周靜脈血，不做抗凝處理，在3 h內(nèi)在室溫下進(jìn)行10 min的離心處理，收集血清，-80℃溫度設(shè)置下保存在冰箱中。采用ELISA法，以3 000 r/min的離心速度進(jìn)行20 min，收集上清液，保存待測(cè)。選擇ELISA試劑盒進(jìn)行操作，計(jì)算血清IL-6、IL-1、IL-10和TNF-α水平。(3)血清GAS水平檢測(cè)：CUSABIO的ELISA試劑盒檢測(cè)血清GAS水平。(4)糞便中菌群含量檢測(cè)：收集3～5 g糞便標(biāo)本，保存在-80℃超低溫冰箱中。按照TIANampStool DNA Kit說(shuō)明書通過(guò)Real-time PCR法檢測(cè)，提取菌株基因組DNA，結(jié)合乳酸桿菌、雙歧桿菌、大腸埃希菌基因序列對(duì)特異性PCR引物序列進(jìn)行設(shè)定，通過(guò)Real-time PCR反應(yīng)定量檢測(cè)乳酸桿菌等細(xì)菌水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS20.00統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的一般資料比較兩組患者的性別、體質(zhì)量指數(shù)、糖尿病病史、年齡、飲酒率、高血壓病史、吸煙率等一般資料比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者的一般資料比較[±s，例(%)]

表1 兩組患者的一般資料比較[±s，例(%)]

組別研究組對(duì)照組χ2/t值P值例數(shù)50 75男/女21(42.00)/29(58.00)32(42.67)/43(57.33)0.301 0.614年齡(歲)60.12±13.75 59.64±14.15 0.625 0.243吸煙17(34.00)26(34.67)3.412 0.078飲酒15(30.00)23(30.67)3.605 0.056體質(zhì)量指數(shù)(kg/m2)24.13±5.72 53.98±6.11 2.971 0.735高血壓22(44.00)30(40.00)3.537 0.068糖尿病12(24.00)15(20.00)3.659 0.061高血脂14(28.00)15(20.00)1.078 0.299結(jié)腸癌家族史9(18.00)8(10.67)1.373 0.241

2.2 兩組患者的血清GAS及炎性細(xì)胞因子水平比較研究組患者的血清IL-1、IL-6和TNF-α水平明顯低于對(duì)照組，GAS、IL-10水平明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)有意義(P＜0.05)，見(jiàn)表2。

表2 兩組患者的血清GAS及各炎性細(xì)胞因子水平比較(±s)

表2 兩組患者的血清GAS及各炎性細(xì)胞因子水平比較(±s)

組別研究組對(duì)照組t值P值例數(shù)50 75 GAS(pg/mL)65.87±9.32 51.05±4.94-11.432 0.014 IL-1(ng/L)206.17±54.98 315.09±87.24-2.597 0.012 IL-6(ng/L)40.56±11.94 101.72±31.84-2.701 0.004 IL-10(ng/L)110.93±25.78 86.74±18.51-2.931 0.005 TNF-α(pg/mL)403.65±104.96 527.59±139.87-2.804 0.006

2.3 兩組患者的腸道菌群含量比較兩組患者糞便中大腸埃希菌、嗜酸乳桿菌含量比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；研究組患者糞便中長(zhǎng)雙歧桿菌的含量明顯高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見(jiàn)表3。

表3 兩組患者的腸道菌群含量比較(±s，個(gè)/100 g)

表3 兩組患者的腸道菌群含量比較(±s，個(gè)/100 g)

組別研究組對(duì)照組t值P值例數(shù)50 75嗜酸乳桿菌11.72±2.96 9.24±0.73-2.107 0.054大腸埃希菌9.31±2.59 10.42±1.02-0.174 0.865長(zhǎng)雙歧桿菌11.67±1.16 10.43±0.54-2.075 0.037

3 討論

近年來(lái)，隨著人民生活方式的變化、微生物的傳播、飲食方式的改變，我國(guó)結(jié)直腸癌發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)[6]。目前，腺瘤學(xué)說(shuō)在臨床上廣為流傳，有部分學(xué)者的研究發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸腺瘤可能與結(jié)直腸癌的發(fā)生有較為密切的聯(lián)系[7-9]。因此，研究結(jié)直腸腺瘤發(fā)生、發(fā)展的危險(xiǎn)因素，對(duì)結(jié)直腸癌的早期預(yù)防與治療具有重要意義。

相關(guān)研究表明，腺瘤患者的Hp感染率明顯高于健康者，HP感染會(huì)不同程度上對(duì)患者腺瘤的大小與數(shù)量產(chǎn)生影響[10-11]。HP感染的發(fā)病率在很大程度上提高了結(jié)直腸腺瘤的發(fā)生率[12-13]。相關(guān)研究表明，結(jié)直腸腫瘤與血清高GAS水平有關(guān)，感染HP后患者的血清GAS水平會(huì)出現(xiàn)不同程度的升高，從而對(duì)結(jié)直腸腺瘤的發(fā)生發(fā)展產(chǎn)生影響[14]。此外，研究還發(fā)現(xiàn)腸道微生物與免疫反應(yīng)在結(jié)直腸腺瘤的發(fā)生與發(fā)展中扮演著至關(guān)重要的角色[15]。本次通過(guò)對(duì)研究對(duì)象血清中炎性細(xì)胞因子、糞便中的腸道菌群含量進(jìn)行測(cè)量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸腺瘤合并Hp陽(yáng)性患者的IL-10、嗜酸乳桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌水平明顯偏低，IL-1、IL-6、TNF-α和大腸埃希菌的水平明顯升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，與以往相關(guān)研究的結(jié)果一致。表明Hp感染對(duì)結(jié)直腸腺瘤患者長(zhǎng)雙歧桿菌、嗜酸乳桿菌、大腸埃希菌等糞便中腸道菌群和血清中IL-1、IL-6、IL-10及TNF-α等炎性細(xì)胞因子影響明顯。但本研究病例較少，病例來(lái)源單一，仍存在一定的局限性。因此，后期可通過(guò)擴(kuò)大檢測(cè)細(xì)胞因子、增加樣本量、提高菌群的種類進(jìn)一步探討Hp感染對(duì)結(jié)直腸腺瘤患者腸道菌群含量以及炎性細(xì)胞因子水平的影響，以進(jìn)一步研究Hp感染在結(jié)直腸腺瘤發(fā)病機(jī)制中的作用。

綜上所述，結(jié)直腸腺瘤合并Hp陽(yáng)性的血清GAS水平升高，IL-10、嗜酸乳桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌水平明顯降低，IL-1、IL-6、TNF-α和大腸埃希菌的水平明顯升高，可為結(jié)直腸癌的早期預(yù)防和治療提供指導(dǎo)。