長沙市地方品種雞主要疫病監(jiān)測與分析

劉增再，羅湘，奉佳*，張韜，唐愛明，鄭姣妹，李妍芬，譚丹，黃甜

（1.長沙市動植物疫病預(yù)防控制中心 長沙 410007；2.瀏陽市佳和養(yǎng)殖專業(yè)合作社 長沙 410300）

長沙屬于山區(qū)丘陵平原地帶地域，呈東西向長條形狀，北、西、南緣為山地，東南丘陵為主，東北以崗地為主。山地、丘陵、崗地、平原大體各占四分之一，具有生態(tài)養(yǎng)雞的良好條件。近年來，長沙市引入了湘黃雞、桃源雞、東安雞等外來地方品種家禽，在利用地方品種獨特的優(yōu)良性狀的基礎(chǔ)上，經(jīng)長期的生產(chǎn)實踐中培育出瀏黃雞、香黃雞等優(yōu)良地方品種家禽，對長沙市養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展起到了很大作用。長沙市瀏陽和寧鄉(xiāng)將生態(tài)家禽養(yǎng)殖作為脫貧致富、鄉(xiāng)村振興的重要產(chǎn)業(yè)之一，生態(tài)養(yǎng)雞產(chǎn)業(yè)得到了蓬勃發(fā)展。

隨著養(yǎng)禽產(chǎn)業(yè)工廠化、商品化，高致病性禽流感（highly pathogenic avian influenza，HPAI）、新城疫（newcastle disease，ND）、禽白血?。╝vian leukemia，AL）和雞白?。╬ullorum disease，PD）是嚴(yán)重危害我國及世界養(yǎng)禽業(yè)健康發(fā)展的重要疫病，也是我國家禽列為優(yōu)先防治的病種[1]。目前，在我國大部分地方家禽品種中普遍發(fā)生，且發(fā)病種類和發(fā)病數(shù)量也長期居高不下，給家禽養(yǎng)殖場（戶）造成嚴(yán)重經(jīng)濟損失，嚴(yán)重影響地方家禽品種的健康發(fā)展。為掌握長沙市地方品種規(guī)模雞場主要動物疫病的流行情況，2021 年1 月—12月，筆者對長沙市的16 家地方品種規(guī)模雞場進行上述4 種疫病摸底監(jiān)測，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法

1.1 樣品來源

根據(jù)各縣（區(qū)、市）地方品種家禽2,000 羽以上規(guī)模雞場養(yǎng)殖情況，結(jié)合本轄區(qū)實際，采用兩階段抽樣法隨機抽取養(yǎng)殖場。第一階段：結(jié)合以往禽白血病陽性情況，對全市摸底的112 家地方品種規(guī)模雞場按照估計流行率（10%預(yù)定流行率、95%置信水平、10%可接受誤差）隨機抽樣，抽取16 個場戶。第二階段：從養(yǎng)殖場平行采集咽-泄殖腔拭子、血清樣品和種蛋樣品，每個場點按照估計流行率（5%預(yù)定流行率、95%置信水平、5%可接受誤差）計算實際需要抽樣數(shù)量，共采集1,163 份血清樣品、1,163 份咽-泄殖腔棉拭子樣品和1,163 份種蛋樣品。

1.2 檢測及結(jié)果判定

1）血清抗體檢測。檢測方法參照國家或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，按照試劑配套說明書進行操作和結(jié)果判定[2]。

2）病毒核酸提取。取采集的咽-泄殖腔棉拭子浸出上清液200μ L。使用西安天隆科技有限公司的核酸提取儀以及配套核酸提取試劑盒（磁珠法）提取病毒核酸，按試劑盒說明書進行操作[3]。

3）實時熒光定量PCR 檢測。按照相應(yīng)疫病的病毒核酸檢測試劑盒說明書進行操作及結(jié)果判定。

1.3 統(tǒng)計分析

統(tǒng)計規(guī)模雞場檢測數(shù)據(jù)，采用Excel 2010 進行資料整理，用SPSS 25.0 軟件對監(jiān)測數(shù)據(jù)進行相關(guān)性和差異性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 總體情況

2021 年，長沙市共檢測地方品種規(guī)模雞場16 家，分布在4 個區(qū)縣（市）、14 個鄉(xiāng)鎮(zhèn)，涵蓋全市12.3%的鄉(xiāng)鎮(zhèn)（街道）。禽流感H5 亞型（Re-11）個體免疫合格率93.55%、禽流感H5 亞型（Re-12）個體免疫合格率93.72%、禽流感H7 亞型（Re-3）個體免疫合格率93.21%和新城疫個體免疫合格率93.90%，禽白血病感染率7.48%，雞白痢感染率4.99%，禽白血病與雞白痢不存在統(tǒng)計學(xué)差異（P=1.000＞0.05）。

2.2 血清學(xué)抗體檢測結(jié)果

本次共采集16 家規(guī)模雞場的1,163 份血清學(xué)樣品，分別進行禽流感H5 亞型（Re-11 和Re-12）、禽流感H7 亞型（Re-3）、新城疫抗體檢測。從表1 可知，規(guī)模雞場禽流感H5 亞型（Re-11）、禽流感H5 亞型（Re-12）、禽流感H7 亞型（Re-3）和新城疫個體合格率分別為93.55%（95%CI：92.13%～94.96%，P＜0.001）、93.72%（95%CI：92.71%～94.72%，P＜0.001）、93.21%（95%CI：92.08%～94.32%，P＜0.001）、93.90%（95%CI：93.03%～94.74%，P＜0.001）均大于90%；所有場的群體合格率為100%。

表1 16家規(guī)模雞場主要疫病抗體檢測結(jié)果統(tǒng)計（%）

2.3 病原學(xué)檢測結(jié)果

本次共采集16 家規(guī)模雞場的1,163 份咽-泄殖腔棉拭子樣品，分別進行禽流感H5 亞型病毒核酸、禽流感H7 亞型病毒核酸、新城疫病毒核酸檢測。從表2 可知，禽流感H5 亞型、H7 亞型和新城疫病毒核酸檢測全部為陰性。采集16 家規(guī)模雞場的1,163 份種蛋樣品進行禽白血病P27 抗原檢測。從表2 可知，禽白血病檢測感染率為7.48%（95%CI：2.66%～12.25%，P=0.005）。

表2 16家規(guī)模雞場主要疫病病原學(xué)檢測結(jié)果統(tǒng)計（%）

2.4 雞白痢檢測結(jié)果

本次共采集16 家規(guī)模雞場的1,163 份血清樣品進行雞白痢抗體檢測。從表3 可知，檢出陽性場10 個，檢測陽性樣品58 份，規(guī)模雞場中雞白痢感染率為4.99%（95%CI：2.28%～8.35%，P=0.002）。

表3 16家規(guī)模雞場雞白痢檢測結(jié)果統(tǒng)計

2.5 禽白血病和雞白痢相關(guān)性

本次共采集16 家規(guī)模雞場，同時檢出禽白血病和雞白痢陽性場有7 個，從表4 的卡方檢驗結(jié)果可以看出，禽白血病與雞白痢不存在統(tǒng)計學(xué)差異（P=1.000＞0.05）。

表4 16家規(guī)模雞場禽白血病與雞白痢相關(guān)性分析

3 討論

1）根據(jù)各縣（區(qū)、市）地方品種家禽養(yǎng)殖情況，采用兩階段抽樣法隨機抽取養(yǎng)殖場和樣品數(shù)量，隨機抽取養(yǎng)殖場提高了樣品的代表性，總體上反映了全市地方品種家禽HPAI 和ND 總體情況。16家規(guī)模雞場的禽流感H5 亞型、H7 亞型和新城疫免疫抗體個體合格率超過90%，群體合格率達到100%，均超過農(nóng)業(yè)農(nóng)村部和湖南省相關(guān)要求（≥70%）；病原學(xué)檢測未發(fā)現(xiàn)陽性樣品。規(guī)模場戶防疫意識較強，管理規(guī)范，免疫程序合理，HPAI 和ND 基礎(chǔ)免疫工作扎實，免疫抗體合格率和整齊度更高，發(fā)生疫情的風(fēng)險較低。

2）病原學(xué)檢測發(fā)現(xiàn)，個別雞場存在雞白痢、禽白血病陽性情況，但由于未進行禽白血病A/B 和J亞群病毒的抗體檢測，雞群禽白血病真實感染率還需作進一步檢測來確定。不同類型雞泄殖腔棉拭子ALV p27 抗原檢測法存在很高的假陽性率和漏檢率[4]。雞白痢臨床沒有商品化疫苗，控制雞白痢主要依靠藥物。禽白血病和雞白痢作為一種垂直傳播的疫病，最有效的防控辦法是以“檢測-淘汰陽性雞”為主的凈化措施[5]。

3）個別養(yǎng)雞場存在禽白血病和沙門氏菌病的混合感染，且禽白血病感染較為嚴(yán)重。分析其原因主要是：①地方品種家禽主要是放養(yǎng)為主，兼顧籠養(yǎng)，放養(yǎng)環(huán)境較為潮濕，空氣流通不暢，容易導(dǎo)致疫病的發(fā)生與流行；②養(yǎng)殖雞品種主要是湖南本地雞品種，而本地雞品種原種雞場很少開展禽白血病的凈化工作，導(dǎo)致商品雞群禽白血病隱性感染率較高[6]；③個別養(yǎng)殖場戶主要疫病防控意識較差，認為放養(yǎng)雞群活動強度大，疫病抵抗力強，可以不免疫或少免疫疫苗，導(dǎo)致養(yǎng)殖場免疫程序欠合理。

4 結(jié)論

通過對長沙市16 家地方品種規(guī)模雞場分別采集血清、泄殖腔棉拭子和種蛋樣品進行了4 種主要動物疫病免疫抗體和病原學(xué)監(jiān)測，發(fā)現(xiàn)禽流感、新城疫免疫抗體水平高，雞群未攜帶相應(yīng)病原，禽白血病和雞白痢存在帶毒情況，且有一定的混合感染。因此，首先要加強雞種引種管理，堅持從疫病凈化較好的種雞場引進商品雞；其次要制訂科學(xué)合理的免疫程序，實施有效的免疫注射措施，保證雞群獲得有效的免疫抵抗力；然后要加強養(yǎng)殖環(huán)節(jié)雞白痢和禽白血病防控，有條件的規(guī)模雞場可探索開展“兩白”的凈化。