5種殺蟲(chóng)劑對(duì)黑糞蚊的毒力及對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)的影響

廖金英，李 灐，蔡立君，金文松，包 薇，張綺佳，王馨儀

1福建農(nóng)林大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，福建 福州 350002；2福建農(nóng)林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，福建 福州 350002

食用菌是藥用、食用價(jià)值都頗高的農(nóng)產(chǎn)品，受到蟲(chóng)災(zāi)時(shí)的損失頗大(羅俊等，2019)。一旦食用菌菌房中沒(méi)有做好相應(yīng)的害蟲(chóng)預(yù)防措施，導(dǎo)致害蟲(chóng)在菌房中繁殖，其數(shù)量將會(huì)以R型曲線規(guī)律極快繁殖(Zhangeral.，2016)。國(guó)內(nèi)食用菌生產(chǎn)對(duì)各類蟲(chóng)害防治仍以預(yù)防為主、治理為輔。食用菌的蟲(chóng)害類型較多，其中以雙翅目害蟲(chóng)對(duì)食用菌的危害最大，雙翅目幼蟲(chóng)通常蛀食菌絲，造成菌袋腐爛發(fā)黑、菌絲衰退、有孔洞等，嚴(yán)重阻礙食用菌生產(chǎn)產(chǎn)業(yè)的發(fā)展(陳龍佳，2014)。食用菌因?yàn)樯L(zhǎng)周期較短，子實(shí)體未得到有效的保護(hù)，且為了防止害蟲(chóng)的入侵，需頻繁、大量地使用化學(xué)殺蟲(chóng)劑，菌絲由此受到嚴(yán)重危害，如子實(shí)體畸形、菌絲無(wú)法生長(zhǎng)等。另外，殺蟲(chóng)劑殘留量超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)限度也是比較嚴(yán)重的問(wèn)題。因此，必須要謹(jǐn)慎選取低毒、高效、低殘留的化學(xué)殺蟲(chóng)劑(孫立娟，2008)。目前,國(guó)內(nèi)已登記的可用于食用菌生產(chǎn)的農(nóng)藥僅13種(秦文韜等，2020)，

目前，我國(guó)的食用菌栽培仍以個(gè)體散戶為主，在生產(chǎn)栽培過(guò)程中僅靠農(nóng)業(yè)防治難以控制蟲(chóng)源的侵入，多數(shù)菇農(nóng)仍會(huì)定期于菇場(chǎng)周邊噴灑殺蟲(chóng)劑以防止黑糞蚊Scatopsesp.在內(nèi)的各種蟲(chóng)害暴發(fā)(魏鵬，2010)。黑糞蚊在我國(guó)全年均可為害(包雪冰和陳家翔，2020)，幼蟲(chóng)大量取食實(shí)用菌且傷害植質(zhì)。黑糞蚊一旦暴發(fā)將難以控制，若使用化學(xué)藥劑無(wú)法及時(shí)殺滅，其重疊多代后容易產(chǎn)生抗性。由于食用菌對(duì)許多殺蟲(chóng)劑極為敏感,藥害現(xiàn)象也時(shí)有發(fā)生(李紅玉等，2015；劉天學(xué)等，2003；陸曉民等，1998；汪鐘信和羅才紅，1994；王元興，2000)。鑒于此，筆者選用5種殺蟲(chóng)劑，研究其對(duì)黑糞蚊的毒力和對(duì)平菇Pleurotusostreatus(Jacq.) P.Kumm菌絲生長(zhǎng)的影響，以期對(duì)國(guó)內(nèi)食用菌的栽培和黑糞蚊的治理提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試蟲(chóng)源

黑糞蚊采集自福建省羅源縣秀珍菇Pleurotuspulmonarius(Fr.) Quél菇房，使用山藥DioscoreaoppositaThunb.代替菌料，參考王梓清等(2008)的方法室內(nèi)飼養(yǎng)試驗(yàn)用黑糞蚊幼蟲(chóng)。

1.2 供試藥劑

20%甲氰菊酯乳油(浙江威爾達(dá)化工有限公司)，20%甲維·吡丙醚懸浮劑(上海生農(nóng)生化制品股份有限公司)，14%阿維·蟲(chóng)螨腈懸浮劑(河北成悅化工有限公司)，5%高氯·甲維鹽微乳劑(河北博嘉農(nóng)業(yè)有限公司)，蘇云金芽孢桿菌懸浮劑(山東魯抗生物農(nóng)藥有限責(zé)任公司，有效成分濃度為8000 IU·μL-1)。

1.3 室內(nèi)毒力測(cè)定方法

采用毒餌法，用純水將各殺蟲(chóng)劑分別配成6個(gè)濃度系列。選取新鮮的山藥，切成直徑3 cm、厚3～5 mm的薄片，置于塑料盒(體積35 mL，高×寬為31 mm×59 mm)中，每盒放置一片，按濃度從低到高用移液器吸取各濃度藥液均勻滴加在山藥表面，每面滴加200 μL，以滴加純水為對(duì)照，每個(gè)處理3次重復(fù)。將滴加了殺蟲(chóng)劑的山藥晾置1～2 h，挑取15頭3～4齡黑糞蚊幼蟲(chóng)放置于山藥上，然后置于人工氣候箱(25±1)℃下培養(yǎng),5 d后觀察試蟲(chóng)死亡情況，用毛筆輕觸幼蟲(chóng)，并在顯微鏡下觀察20 s,若無(wú)任何反應(yīng)則視為死亡。

1.4 數(shù)據(jù)處理

參考劉霞等(2009)的方法，使用Excel 2016和SPSS 19.0軟件計(jì)算毒力回歸方程、半致死濃度(LC50)、相關(guān)系數(shù)r和LC50的95%置信區(qū)間，并以校正死亡率值為縱坐標(biāo)，以供試殺蟲(chóng)劑的濃度對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)作出毒力回歸曲線圖。

校正死亡率/%=[(平均死亡率-對(duì)照死亡率)/(100-對(duì)照死亡率)]×100

1.5 殺蟲(chóng)劑對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)的影響

將平菇菌種轉(zhuǎn)接到PDA培養(yǎng)基上，放入23～25 ℃、相對(duì)濕度50%～80%的生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待菌絲長(zhǎng)滿平皿,備用。將已毒力測(cè)定的各農(nóng)藥選擇高、中、低3個(gè)濃度配制藥劑，取各供試藥劑10 mL，加入190 mL消毒滅菌的培養(yǎng)基中，搖勻后倒入直徑9 cm的培養(yǎng)皿中,每皿15 mL，冷卻、凝固。每處理重復(fù)10次,以加等量無(wú)菌水的為空白對(duì)照。用內(nèi)徑6 mm打孔器取生長(zhǎng)均勻的菌塊，接到培養(yǎng)皿中部，菌絲面接觸培養(yǎng)基，置生化培養(yǎng)箱中23～25 ℃、相對(duì)濕度50%～80%培養(yǎng)。每天觀察一次菌絲生長(zhǎng)狀況。以7 d后的菌絲生長(zhǎng)量評(píng)價(jià)殺蟲(chóng)劑對(duì)菌絲生長(zhǎng)的影響。

菌絲抑制率/%=[(對(duì)照菌絲生長(zhǎng)量-處理菌絲生長(zhǎng)量)/對(duì)照菌絲生長(zhǎng)量]×100

2 結(jié)果與分析

2.1 殺蟲(chóng)劑對(duì)黑糞蚊的毒力

黑糞蚊幼蟲(chóng)經(jīng)各殺蟲(chóng)劑6個(gè)不同濃度梯度飼喂處理5 d后，根據(jù)黑糞蚊的存活情況，并對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，得到20%甲氰菊酯乳油、14% 阿維·蟲(chóng)螨腈懸浮劑、20%甲維·吡丙醚懸浮劑、5%高氯·甲維鹽微乳劑等4種殺蟲(chóng)劑對(duì)黑糞蚊幼蟲(chóng)的毒力測(cè)定結(jié)果(表1)，并制作出4種殺蟲(chóng)劑對(duì)黑糞蚊幼蟲(chóng)的毒力回歸曲線(圖1)。從表1和圖1可知，20%甲氰菊酯乳油、14%阿維·蟲(chóng)螨腈懸浮劑、20%甲維·吡丙醚懸浮劑和5%高氯·甲維鹽微乳劑對(duì)黑糞蚊幼蟲(chóng)的LC50分別為221.14、9.80、970.91和1753.50 mg·L-1。其中,20%甲氰菊酯乳油、14%阿維·蟲(chóng)螨腈懸浮劑、20%甲維·吡丙醚懸浮劑較高濃度對(duì)黑糞蚊的校正死亡率達(dá)80%以上，表明這3種殺蟲(chóng)劑對(duì)黑糞蚊幼蟲(chóng)殺蟲(chóng)效果較好，5%高氯·甲維鹽微乳劑防效較差，最高濃度達(dá)3200 mg·L-1時(shí)，校正死亡率只達(dá)到61.5%。由此可知，黑糞蚊幼蟲(chóng)對(duì)20%甲氰菊酯乳油的濃度變化較為敏感。

由表2可以看出，蘇云金桿菌(以色列亞種)懸浮液在40～1280 IU·μL-1試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)對(duì)黑糞蚊幼蟲(chóng)的防治效果較差，在最高濃度1280 IU·μL-1時(shí)，校正死亡率也只達(dá)到35.55 %，且各不同濃度的殺蟲(chóng)效果差異不顯著。該結(jié)果表明，蘇云金桿菌(以色列亞種)懸浮液在40～1280 IU·μL-1試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)對(duì)黑糞蚊幼蟲(chóng)無(wú)明顯殺滅作用。

表1 4種殺蟲(chóng)劑對(duì)黑糞蚊幼蟲(chóng)的毒力Table 1 Virulences of four insecticides against Scatopse sp.

圖1 4種殺蟲(chóng)劑對(duì)黑糞蚊毒力回歸曲線Fig.1 Regression curves of virulence of four insecticides against Scatopse sp.

表2 蘇云金芽孢桿菌懸浮劑對(duì)黑糞蚊的毒力Table 2 Virulence of the suspensions of Bt (subspecies Israel) against Scatopse sp.

2.2 殺蟲(chóng)劑對(duì)食用菌菌絲生長(zhǎng)的影響

研究結(jié)果顯示，供試殺蟲(chóng)劑對(duì)平菇的菌絲生長(zhǎng)的抑制率差異較大。多數(shù)殺蟲(chóng)劑對(duì)菌絲的抑制率隨使用濃度增大而增強(qiáng)(表3)。14%阿維·蟲(chóng)螨腈對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)抑制不明顯，在最低濃度4.375 mg·L-1作用下，抑制作用微弱，平均抑制率僅為3.62%。即使在最高濃度140 mg·L-1時(shí)，平均抑制率也僅達(dá)到5.83%；而20%甲氰菊酯乳油和20%甲維·吡丙醚懸浮劑對(duì)菇菌絲生長(zhǎng)抑制較明顯，尤其是在高濃度作用下，平均抑制率分別達(dá)到16.85%和14.32%。

表3 5種殺蟲(chóng)劑對(duì)平菇菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用Table 3 Inhibition of hyphal growth of P. ostreatus by five insecticides

3 討論與小結(jié)

本研究測(cè)定了5種殺蟲(chóng)劑對(duì)黑糞蚊幼蟲(chóng)的毒力，結(jié)果表明，對(duì)黑糞蚊的LC50值為14%阿維·蟲(chóng)螨腈懸浮劑<20%甲氰菊酯乳油<20%甲維·吡丙醚懸浮劑<5%高氯·甲維鹽微乳劑。14%阿維·蟲(chóng)螨腈懸浮劑、20%甲氰菊酯乳油和20%甲維·吡丙醚懸浮劑對(duì)黑糞蚊的防效較好，校正死亡率都達(dá)80%以上。測(cè)定了5種殺蟲(chóng)劑對(duì)平菇菌絲的生長(zhǎng)抑制率，發(fā)現(xiàn)5種殺蟲(chóng)劑對(duì)菌絲皆有一定抑制作用，不同農(nóng)藥品種和使用濃度與抑制率存在相關(guān)性。本研究中，甲維鹽的復(fù)配制劑20%甲維·吡丙醚懸浮劑和5%高氯·甲維鹽微乳劑對(duì)黑糞蚊的LC50值均較高，分別為970.91和1753.50 mg·L-1。而Parkeral.(2006)研究發(fā)現(xiàn)，2.5%甲維鹽乳油對(duì)厲眼蕈蚊LycoriellapleurotiYang et Zhang的LD50為59.5197 mg·L-1，二者差異較大，可能與厲眼蕈蚊和黑糞蚊品種差異有關(guān)。

20%甲氰菊酯乳油對(duì)黑糞蚊的毒力也較強(qiáng)，最大校正死亡率達(dá)97.30%，但對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)有較大影響，平均抑制率達(dá)16.85%。韓文賀(2016)研究發(fā)現(xiàn)，高效氯氰菊酯1000和1500倍對(duì)秀珍菇蟲(chóng)害黑糞蚊防治效果，防效超過(guò)80%，并且對(duì)秀珍菇子實(shí)體生長(zhǎng)無(wú)不良影響。陸曉民等(1998)研究認(rèn)為，4.5%高效氯氰菊酯EC對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)影響較小。李怡萍等(2009)也發(fā)現(xiàn)，4.5%高效氯氰菊酯對(duì)黑糞蚊成、幼蟲(chóng)防治效果良好，使用后對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)的影響較小，且使用5 d后均未檢測(cè)到殘留。而高效氯氰菊酯煙劑，其殘留低、毒性小，非常適用于食用菌中的害蟲(chóng)防治(高會(huì)東，2003)，可見(jiàn)菊酯類農(nóng)藥對(duì)黑糞蚊的防治具有重要實(shí)踐意義，但還需關(guān)注不同菊酯種類對(duì)食用菌生長(zhǎng)的影響。

本研究中蘇云金桿菌懸浮劑對(duì)黑糞蚊的殺蟲(chóng)效果不理想。Keileral.(1991)用蘇云金芽孢桿菌防治食用菌中的蠅蚊類害蟲(chóng)，效果較好。近年來(lái)，我國(guó)有關(guān)研究人員也對(duì)蘇云金芽孢桿菌對(duì)食用菌中害蟲(chóng)的室內(nèi)毒力和防治效果等方面進(jìn)行了研究，各研究證明，蘇云金芽孢桿菌對(duì)食用菌中害蟲(chóng)具有較強(qiáng)的活性，可用于食用菌中害蟲(chóng)的防治(馬林等，2015；師迎春等，2014;宋金俤等，2011)。本試驗(yàn)用的蘇云金桿菌懸浮劑為以色列亞種制劑，其主要防治對(duì)象為黑斑蚊、瘧蚊、庫(kù)蚊、莫氏藍(lán)帶蚊、麥蠅蚊、曼蚊、黑蚊以及蚋科黑蠅等，可能由于黑糞蚊與這些防治對(duì)象的種類差異，所以防效不夠理想。今后可嘗試多種蘇云金桿菌殺蟲(chóng)劑，探尋對(duì)黑糞蚊具有較好殺蟲(chóng)效果的蘇云金桿菌種類。

14%阿維·蟲(chóng)螨腈懸浮劑在本試驗(yàn)中展現(xiàn)出較為理想的滅蟲(chóng)效果，并且通過(guò)對(duì)平菇菌菌絲抑制試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，14%阿維·蟲(chóng)螨腈懸浮劑對(duì)平菇菌絲生長(zhǎng)的抑制作用很微弱。有研究表明，阿維菌素和蟲(chóng)螨腈是目前殺蟲(chóng)劑中田間使用量極低的2類超高效殺蟲(chóng)劑(Bloom &Matheson，1993)。蟲(chóng)螨腈屬仿生農(nóng)藥，毒性低，作用機(jī)理獨(dú)特，無(wú)交互抗性，特別對(duì)有機(jī)磷、氨基甲酸酯、幾丁質(zhì)合成抑制劑、菊酯類殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生抗性的害蟲(chóng)有很好的防效，且由于其用量極低，對(duì)環(huán)境敏感、生長(zhǎng)期短的食用菌施用較為理想。

本次試驗(yàn)僅針對(duì)5種殺蟲(chóng)劑對(duì)黑糞蚊的毒力和菌絲生長(zhǎng)影響展開(kāi)研究，要深入探究可否投入使用于我國(guó)食用菌產(chǎn)業(yè)的實(shí)際生產(chǎn)種植當(dāng)中，仍需要進(jìn)一步考察5種殺蟲(chóng)劑對(duì)食用菌子實(shí)體生長(zhǎng)的影響和在各類食用菌上的殘留情況，結(jié)合黑糞蚊世代重疊產(chǎn)生的抗性調(diào)查以及進(jìn)一步的田間試驗(yàn)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。