不同添加劑對阿爾岡金苜蓿青貯品質(zhì)的影響

朱寒冰，王朝陽，孫 維，周海燕，金 璟

（云南農(nóng)業(yè)大學經(jīng)濟管理學院，云南昆明 650201）

苜蓿作為多年生豆科牧草，蛋白質(zhì)含量高、營養(yǎng)價值豐富，是草食家畜最為喜愛的飼料。近年來，隨著國民對牛羊肉、禽蛋和奶制品等畜禽產(chǎn)品消費的持續(xù)增長，保障優(yōu)質(zhì)飼草的穩(wěn)定供給變得尤為重要。目前我國對苜蓿的加工往往以干草為主，導致其營養(yǎng)物質(zhì)流失嚴重，且在晾曬過程中易受天氣影響發(fā)生霉變，損害苜蓿干草品質(zhì)。苜蓿的緩沖能值高、可溶性碳水化合物含量低，不易青貯（王永新，2012）。乳酸菌、纖維素酶添加劑能提高苜蓿青貯的成功率，改善苜蓿青貯品質(zhì)（高海娟，2020）。在苜蓿青貯過程中，添加劑的種類和用量對其營養(yǎng)成分和發(fā)酵品質(zhì)均有很大影響。因此，本研究旨在探討不同添加劑不同用量對苜蓿青貯品質(zhì)的影響，為苜蓿青貯提供理論支持。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 青貯原料：試驗選擇第三茬初花期的阿爾岡金苜蓿，來自黑龍江省大慶市林甸縣某農(nóng)戶種植的苜蓿大田。

試驗藥品及用品：乳酸菌、纖維素酶、蒸餾水、1500 mL 圓柱罐、塑料薄膜、烘箱等。

1.2 試驗設(shè)計 試驗采用完全隨機區(qū)組試驗設(shè)計，在苜蓿DM 為38.35% 的條件下進行青貯，青貯添加劑分別為乳酸菌、纖維素酶、乳酸菌+ 纖維素酶，每種添加劑的用量如表1所示，不同添加劑、不同用量的處理組共計9 個，不含添加劑的對照組1 個，并對各組進行3 次重復試驗，取平均值，以確保試驗結(jié)果準確。

表1 添加劑及添加劑組合用量表

1.3 試驗方法

1.3.1 青貯飼料的制作 取初花期刈割的第三茬苜蓿，晾曬至干燥脫水后粉碎，采用烘干法測定DM 為38.35%。剩余青貯原料切割成3～4 cm的小段。將添加劑按照濃度配置好后溶于蒸餾水中，均勻噴在原料上，并裝入1500 mL 的圓柱罐中，封蓋后再用塑料薄膜封口，室溫下避光保存，青貯60 d 后開蓋測其營養(yǎng)成分和發(fā)酵品質(zhì)。

1.3.2 青貯飼料營養(yǎng)成分的測定 干物質(zhì)測定（DM）：取100 g（M）苜蓿粉放置在稱量瓶中稱重m1，然后在110℃烘箱中烘烤24 h 稱重m2。

干物質(zhì)含量/%=（m1-m2）/M×100；

粗蛋白質(zhì)測定：稱取0.2 g 苜蓿樣品（M0）放入無沾污的消煮管內(nèi)，加入5 mL 濃硫酸后放置在350℃的消煮爐上消煮50 min，滴入雙氧水至液體變?yōu)橥该?，取出后冷卻定容。在濃度分析儀上測定樣品含氮濃度（A）

粗蛋白質(zhì)含量/%=A/10 M0/10×6.25×10；

中性洗滌纖維測定：將耐溶劑濾袋稱重（M1）編號，并設(shè)置空白對照組（B1），將0.05 g（M0）樣品放入濾袋內(nèi)，完全浸泡在盛有中性洗滌試劑的半自動纖維儀中，再加無水亞硫酸鈉和熱穩(wěn)定- 淀粉酶加熱至100℃ 80 min，排除廢液后沖洗冷卻風干，再用丙酮浸泡5 min 后進行烘干，完全烘干后稱重（M2）。

中性洗滌纖維/%=[M2-（M1×B1）]×100/M0/DM×100；

酸性洗滌纖維測定：測定方法同上。

乳酸、乙酸的測定：用高效液相色譜法測定青貯料浸提液中乳酸、乙酸含量（李友元，2002）。

揮發(fā)酸的測定：用氣相色譜法測定青貯料浸提液中丙酸、丁酸含量（黃森，1989）。

pH 的測定：將10 g 樣品加入90 mL 蒸餾水放入150 mL 錐形瓶中封口，在4℃下靜置24 h，過濾后用pH 計測定。

氨態(tài)氮采用苯酚- 次氯酸鈉比色法測定。

1.4 青貯飼料質(zhì)量評定方法 氨態(tài)氮與總氮的比例關(guān)系可以直接反應青貯過程中苜蓿中蛋白質(zhì)和氨基酸的分解狀況，該比值越高證明營養(yǎng)物質(zhì)流失越高，苜蓿青貯品質(zhì)越差。一般情況下，若氨態(tài)氮占總氮的10% 以下，則表明發(fā)酵過程良好，有機酸含量可以反應青貯發(fā)酵程度，成功青貯發(fā)酵過程中，主要是利用乳酸菌繁殖產(chǎn)生乳酸，因此，乳酸含量越高證明發(fā)酵情況越好；反之乙酸和丁酸含量越高則代表發(fā)酵情況越差（張新平，2005）。因此，可以通過評定有機酸和氨態(tài)氮的含量來量化青貯品質(zhì)。評分標準如表2、3 所示。

表2 有機酸評定青貯質(zhì)量標準

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 用excel 2019 和Spss 16.0 軟件對數(shù)據(jù)進行計算和方差分析。

表3 氨態(tài)氮評定青貯質(zhì)量標準

2 結(jié)果與分析

2.1 苜蓿青貯飼料營養(yǎng)成分 由表4可知，添加劑處理組的pH 值均低于對照組（P＜0.05）；添加乳酸菌后的青貯飼料，除了乳酸菌（106CFU/g）處理組外，其他組的粗蛋白質(zhì)含量均高于對照組，乳酸菌處理組中酸性洗滌纖維和中性洗滌纖維含量略低于對照組；纖維素酶處理組中，隨著纖維素酶用量的增加，青貯飼料的粗蛋白質(zhì)含量也隨之降低，纖維素酶處理組間的酸性洗滌纖維和中性洗滌纖維并無顯著差異（P＞0.05）；混合添加劑處理組中，粗蛋白質(zhì)含量均顯著高于對照組（P＜0.05）。

表4 苜蓿在不同添加劑用量下的營養(yǎng)成分含量

2.2 苜蓿青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì) 由表5可知，添加劑處理組乳酸和乙酸含量均顯著高于對照組（P＜0.05）；添加劑處理組中，除乳酸菌（106CFU g/g）處理組、纖維素酶（0.025 g/kg）處理組和纖維素酶（0.1 g/kg）處理組外，其他處理組均未檢測到丁酸，說明青貯飼料發(fā)酵均以乳酸發(fā)酵為主；在乳酸菌處理組中，隨著用量的增加，氨態(tài)也隨之上升；在纖維素酶處理組中，用量最多的纖維素酶氨態(tài)氮占總氮比率最低，評分最好；混合添加劑處理組的氨態(tài)氮占總氮比率低于單一添加劑處理組，這表明使用混合添加劑能促進發(fā)酵罐內(nèi)乳酸菌發(fā)酵，在減少氨基酸及蛋白質(zhì)分解這一過程上優(yōu)于單一添加劑；混合添加劑處理組的質(zhì)量評定得分顯著高于單一添加劑，發(fā)酵品質(zhì)最好；纖維素酶處理組得分與乳酸菌處理組的質(zhì)量評分不相上下，說明在使用纖維素酶作為添加劑時，青貯效果與使用乳酸菌為添加劑時類似；添加劑處理組的質(zhì)量評定得分均高于對照組，說明使用添加劑能提高苜蓿青貯品質(zhì)，且添加劑處理組青貯飼料品質(zhì)均為好。

表5 苜蓿在不同添加劑用量下的質(zhì)量評定得分

3 討論

苜蓿具有緩沖能值高、可溶性碳水化合物含量低、兼具水分高和有害菌比例大等特點，直接對其進行青貯難以獲得優(yōu)良品質(zhì)（李光耀，2013）。在苜蓿青貯過程中，添加乳酸菌能擴大菌群數(shù)量，使其迅速進入乳酸發(fā)酵過程；添加纖維素酶能將苜蓿原料的結(jié)構(gòu)性碳水化合物轉(zhuǎn)化為單糖或雙糖，從而為乳酸發(fā)酵提供更多的可利用物。

青貯初期，苜蓿青貯飼料的pH 處于較高水平，乳酸含量和氨態(tài)氮占比均處于較低水平。青貯剛開始時，苜蓿青貯料仍可進行呼吸作用，罐中細菌進行耗氧活動，青貯料的糖類在酶和好氧細菌作用下轉(zhuǎn)化成氨基酸、乙酸等；1 周后，植物呼吸期結(jié)束，青貯罐中的氧氣含量極低，乳酸菌和其他厭氧細菌迅速繁殖，乳酸菌利用苜蓿原料和添加劑中的糖及水溶性碳水化合物產(chǎn)生乳酸，乳酸含量的增加使苜蓿青貯料的pH 降低，而由于蛋白質(zhì)在青貯過程中被分解，會導致氨態(tài)氮含量上升，直到發(fā)酵期結(jié)束，青貯罐內(nèi)環(huán)境逐漸處于介穩(wěn)狀態(tài)，苜蓿青貯料的pH、乳酸含量、NH3-N 含量變化趨勢趨于平緩。

青貯飼料中氨態(tài)氮占氮比率越高，評分越低，青貯料發(fā)酵品質(zhì)越差；反之越高。采用添加劑處理的苜蓿青貯料，在發(fā)酵過程中由于添加劑的作用，使苜蓿青貯料pH、氨態(tài)氮占氮比率處于相對較低的水平，乳酸含量處于較高水平，品質(zhì)高于非添加劑處理組。

4 結(jié)論

從試驗結(jié)果可以看出，添加劑能改變苜蓿青貯料的發(fā)酵環(huán)境，即降低苜蓿青貯料的pH 和氨態(tài)氮含量，提高苜蓿青貯飼料的乳酸和乙酸含量，進而提升苜蓿青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)。其中，添加乳酸菌對苜蓿進行青貯處理能使粗蛋白質(zhì)含量得到顯著提高；添加纖維素酶對苜蓿進行青貯處理能使粗蛋白質(zhì)的含量隨其用量增加而減少；混合添加乳酸菌和纖維素酶對苜蓿進行青貯處理，粗蛋白質(zhì)含量增加最為明顯，其中添加乳酸菌（106CFU/g）+ 纖維素酶（0.05 g/kg）處理中的效果最好。另外，以氨態(tài)氮占氮比率作為評判苜蓿青貯效果的主要指標，并結(jié)合乳酸、乙酸、丁酸指標可以得出評分結(jié)果，各處理組的總體效果是DM 為38.35%的苜蓿青貯飼料在乳酸菌+纖維素酶（106CFU/g+0.05 g/kg）的條件下發(fā)酵品質(zhì)最佳。