臨床新興抗腫瘤治療方法發(fā)展概述

張文慶，吳菁，謝地，史雪聰，胡漢昆

0 引言

惡性腫瘤亦稱癌癥，其顯著特征為體內(nèi)細(xì)胞不受控制地持續(xù)分裂、增殖和轉(zhuǎn)移。2020年全球新增癌癥病例為1 929萬例，其中中國新增癌癥病例為457萬例[1]。傳統(tǒng)腫瘤治療方法包括外科手術(shù)、放射治療、化學(xué)藥物治療等[2]，但這些方法都存在一定的缺陷，如：外科手術(shù)風(fēng)險(xiǎn)高、創(chuàng)傷大、且術(shù)后可能產(chǎn)生一系列并發(fā)癥，影響預(yù)后和后期治療；放射治療過程中，隨著累積劑量的增加，當(dāng)超過正常組織的耐受劑量時(shí)，會(huì)導(dǎo)致機(jī)體功能紊亂失調(diào)，皮膚瘙癢糜爛等放射損傷，影響組織正常功能；傳統(tǒng)的化學(xué)藥物治療，因其對正常細(xì)胞生長增殖的影響會(huì)引起惡心嘔吐、感染、脫發(fā)等不良反應(yīng)，因此開發(fā)出更加精準(zhǔn)、高效、低損傷的診療技術(shù)已成為全球研究人員共同的目標(biāo)。近年來新的抗腫瘤治療方法有小分子靶向抗腫瘤、免疫療法、抗血管生成療法、肽或蛋白質(zhì)療法以及基因療法，它們?yōu)槟[瘤的治療帶來了新突破，提高了患者的生活質(zhì)量，延長了壽命。本文將對上述的抗腫瘤治療方法作一介紹。

1 小分子靶向抗腫瘤藥

此類藥物的作用靶點(diǎn)主要包括蛋白激酶、表觀遺傳調(diào)節(jié)蛋白、DNA損傷修復(fù)酶和蛋白酶體等。

1.1 蛋白激酶

蛋白激酶是一類信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，與蛋白磷酸酶共同調(diào)節(jié)機(jī)體蛋白質(zhì)磷酸化過程，在控制增殖、分化和凋亡等生物過程中發(fā)揮重要作用，是治療多種類型癌癥的理想藥物靶點(diǎn)[3]。2001年諾華公司的伊馬替尼獲得美國食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)，用于治療費(fèi)城染色體陽性的慢性髓性白血病及胃腸道間質(zhì)瘤等疾病，成為第一款小分子靶向抗腫瘤藥。其后20年內(nèi)，該類藥物已取得長足發(fā)展，獲批藥物超過百分之九十，集中在癌癥治療領(lǐng)域。獲批的相應(yīng)靶點(diǎn)與藥物包括[4]：受體酪氨酸激酶類、間變性淋巴瘤激酶ALK（賽睿替尼、恩沙替尼）、細(xì)胞間質(zhì)上皮轉(zhuǎn)換因子c-Met（克唑替尼、卡博替尼）、c-ros肉瘤致癌因子-受體酪氨酸激酶ROS1（克唑替尼、恩曲替尼）、FMS樣的酪氨酸激酶FLT3（吉瑞替尼、奎扎替尼）、表皮生長因子受體（EGFR）（厄洛替尼、奧西替尼）、原癌基因c-Kit（達(dá)沙替尼、伊馬替尼）、間變性淋巴瘤激酶AXL（卡博替尼、吉瑞替尼）、腫瘤血管生成有關(guān)的血管內(nèi)皮生長因子及其受體（VEGF/R）（索拉非尼、阿帕替尼）；非受體酪氨酸激酶類，Bcr-Abl融合基因（伊馬替尼、達(dá)沙替尼）、Bruton酪氨酸激酶BTK（依魯替尼、伊布替尼）等；絲氨酸/茶堿激酶類，癌基因BRAF（維羅非尼、索拉菲尼等）、周期蛋白依賴性激酶CDK4/6（哌柏西利、阿貝西利）和哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白mTOR（依維莫司、替西羅莫司）等。

1.2 表觀遺傳調(diào)節(jié)蛋白

表觀遺傳是一種不需要改變DNA序列就能實(shí)現(xiàn)性狀遺傳的現(xiàn)象[5]。這個(gè)過程受到多種化學(xué)修飾酶和識(shí)別蛋白的嚴(yán)格調(diào)控，（1）化學(xué)修飾酶包括：①將化學(xué)基團(tuán)轉(zhuǎn)移到DNA或組蛋白的酶，如DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（DNA methyltransferase,DNMT）、組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶（Histone methyltransferase,HMT）；②去除翻譯后修飾的酶，如組蛋白脫乙酰基酶（histone deacetylase,HDAC）等。（2）能夠識(shí)別修飾組蛋白或DNA的蛋白質(zhì)包括：①甲基-CpG結(jié)合蛋白（Methyl-GpG binding protein,MeCP）；②含溴結(jié)構(gòu)域和額外終端域（bromodomain and extra-terminal domain,BET）等[6]。

目前多種表觀遺傳調(diào)節(jié)蛋白已被確定為潛在的疾病治療靶點(diǎn)，開發(fā)出許多抗腫瘤藥物，如DNMT抑制劑（阿扎胞苷、地西他濱）；HDAC抑制劑（伏立諾他、貝利司他、羅米地辛、帕比司他、西達(dá)本胺）；HMTs抑制劑（他澤司他）。此外還有一種異檸檬酸脫氫酶（isocitrate dehydrogenase,IDH）抑制劑可以誘導(dǎo)組蛋白去甲基化達(dá)到抑制腫瘤的效果，已上市藥物包括恩西地平、艾伏尼布。

1.3 DNA損傷修復(fù)酶

基因組不穩(wěn)定是腫瘤細(xì)胞的典型特征之一，為了維持基因組的完整性，腫瘤細(xì)胞中存在多種DNA損傷修復(fù)機(jī)制，以DNA雙鏈斷裂和單鏈斷裂為例，前者修復(fù)機(jī)制主要包括同源重組和非同源末端連接，后者包括堿基切除修復(fù)、核苷酸切除修復(fù)以及錯(cuò)配修復(fù)等[7]。目前已獲批上市的該類抗腫瘤藥物主要以多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（Poly（ADP-ribose）polymerase,PARP）為作用靶點(diǎn)，這是一組多功能翻譯后修飾酶，參與DNA修復(fù)、轉(zhuǎn)錄、有絲分裂和細(xì)胞周期調(diào)節(jié)等過程，目前已在該蛋白質(zhì)家族中分離出18種不同的PARP作為抗腫瘤藥物的靶點(diǎn)，其中研究比較清楚的是PARP1[8]。目前一共有6款PARP抑制劑先后被FDA審批上市，包括奧拉帕利、魯卡帕利、尼拉帕利、他拉帕利、氟唑帕利和帕米帕利。

1.4 蛋白酶體

蛋白酶體是在所有真核細(xì)胞的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)中都有所表達(dá)的大型多酶復(fù)合體，負(fù)責(zé)真核生物體內(nèi)大多數(shù)蛋白質(zhì)的降解。高度保守的真核生物泛素-蛋白酶體系統(tǒng)（ubiquitin-proteasome system,UPS）通過維持蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)，在調(diào)節(jié)細(xì)胞正常生理功能中起著關(guān)鍵作用。同時(shí)UPS的層次性也為特異性干預(yù)蛋白質(zhì)降解過程提供了豐富的靶點(diǎn)來源，使之成為創(chuàng)新抗癌治療的一種有前途的方法[9]。硼替佐米是全球第一個(gè)被批準(zhǔn)用于癌癥治療的蛋白酶體抑制劑，可逆性的抑制蛋白酶體26S亞基的活性，顯著改善多發(fā)性骨髓瘤患者的長期預(yù)后[10]。目前一共有3款蛋白酶體抑制劑類抗腫瘤藥物被FDA審批上市，包括硼替佐米、卡非佐米以及伊沙佐米。

此外以UPS為核心還發(fā)展出一種抗腫瘤療法Protacs，通過設(shè)計(jì)合成一種由Linker連接起來的一端結(jié)合靶蛋白，一端結(jié)合E3泛素連接酶的雙功能分子，使靶蛋白和泛素連接起來，然后靶蛋白在機(jī)體自身蛋白清除機(jī)制的作用下被當(dāng)作受損或者有缺陷的蛋白進(jìn)行清除，從而達(dá)到治療疾病的目的[11]。這種方法可以快速有效地清除目標(biāo)蛋白而非簡單抑制，用藥量僅為催化劑量，總體而言安全有效。但是該類藥物的分子量略大，對Linker的改造還需繼續(xù)進(jìn)行。Arvinas公司的兩個(gè)Protac藥物ARV-110和ARV-471已最先進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。

與傳統(tǒng)的化療藥物相比，小分子靶向抗腫瘤藥物的非特異性毒性以及循環(huán)系統(tǒng)毒性要小很多，但一些患者使用后仍會(huì)出現(xiàn)不同程度的不良反應(yīng)。靶向作用于表皮生長因子（EGFR）的藥物通常會(huì)出現(xiàn)皮膚毒性，靶向血管內(nèi)皮生長因子的藥物會(huì)出現(xiàn)高血壓現(xiàn)象，此外胃腸道毒性、水腫現(xiàn)象更為多見。因此在使用該類藥物之前應(yīng)深入了解藥物的作用機(jī)制，精準(zhǔn)用藥，減少不良反應(yīng)的發(fā)生。

2 免疫療法

免疫療法直接靶向機(jī)體的免疫系統(tǒng)而非腫瘤細(xì)胞，通過增強(qiáng)機(jī)體自身免疫，重塑機(jī)體免疫微環(huán)境而發(fā)揮抗腫瘤作用。目前臨床上常見的腫瘤免疫療法主要包括單克隆抗體療法、免疫檢查點(diǎn)阻斷療法、過繼細(xì)胞免疫療法、治療性抗腫瘤疫苗等。

2.1 單克隆抗體療法

通?？贵w在整個(gè)機(jī)體中不斷循環(huán)，直到發(fā)現(xiàn)并附著于抗原之上，一旦附著上就可以招募免疫系統(tǒng)的其他部分來破壞含有抗原的細(xì)胞。因此設(shè)計(jì)出可以直接靶向癌細(xì)胞上特定抗原的抗體，就可以精準(zhǔn)地將癌細(xì)胞清除，達(dá)到治療的目的[12]。單克隆抗體的抗腫瘤機(jī)制主要為免疫介導(dǎo)的效應(yīng)功能，包括抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒反應(yīng)以及補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性反應(yīng)來殺死腫瘤細(xì)胞。利妥昔單抗用于治療非霍奇金淋巴瘤，曲妥珠單抗用于治療HER2陽性乳腺癌，以及貝伐珠單抗用于治療多種實(shí)體瘤，目前上述三種藥物已經(jīng)成為單抗類抗腫瘤藥物的三大巨頭。

此外，由單克隆抗體通過特定的連接子與一些細(xì)胞毒性藥物或放射性物質(zhì)進(jìn)行偶聯(lián)，可以形成抗體偶聯(lián)藥物（antibody-drug conjugate，ADC）。在該類藥物中抗體分子主要發(fā)揮靶向投遞的作用，與之偶聯(lián)的藥物具有殺傷癌細(xì)胞的作用[13]。目前全球一共有12款A(yù)DC藥物審批上市，按照時(shí)間先后順序?yàn)镸ylotarg、Adcetris、Kadcyla、Besponsa、Lumoxiti、Polivy、Padcev、Enhertu、Trodelvy、Blenrep、Akalux、Zynlonta。

除傳統(tǒng)的單抗外，以雙特異性抗體（Bispecific antibodies,BsAb）為代表的第二代單抗藥也已逐步獲批上市。BsAb的兩個(gè)抗原結(jié)合臂可以結(jié)合不同抗原，形成功能性復(fù)合體，減少機(jī)體內(nèi)排斥反應(yīng)提高臨床治療效果。同時(shí)該類藥物在雙重阻斷信號(hào)通路和誘導(dǎo)T細(xì)胞腫瘤殺傷作用方面優(yōu)勢顯著，是很有前景的抗腫瘤藥物[14]。目前一共有3款BsAb類抗腫瘤藥被FDA審批上市，包括卡妥索單抗、艾美賽珠單抗、貝林妥歐單抗。

2.2 免疫檢查點(diǎn)阻斷療法

免疫檢查點(diǎn)（immune checkpoint）是機(jī)體免疫系統(tǒng)的“調(diào)節(jié)器”，在正常情況下可以抑制T細(xì)胞的功能。但一些腫瘤可以通過調(diào)節(jié)免疫檢查點(diǎn)，以保護(hù)自身免受宿主免疫系統(tǒng)的攻擊，形成免疫逃逸[15]。在過去的數(shù)十年里，通過抑制免疫檢查點(diǎn)恢復(fù)T細(xì)胞的功能，已成為癌癥免疫療法中比較多的一種應(yīng)用。

目前已經(jīng)上市的免疫檢查點(diǎn)抑制劑主要包括細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen-4,CTLA-4）抑制劑、程序性死亡受體1（programmed cell death protein 1,PD-1）及其配體（programmed cell death 1 ligand 1,PD-L1）抑制劑。2011年第一款免疫檢查點(diǎn)抑制劑伊匹單抗，即CTLA-4抑制劑，被FDA批準(zhǔn)用于無法切除或轉(zhuǎn)移的黑色素瘤及皮膚黑色素瘤術(shù)后輔助治療。在隨后的幾年里PD-1抑制劑、帕母單抗、納武單抗及其受體PD-L1抑制劑，阿特珠單抗、德瓦魯單抗相繼獲批。除上述免疫檢查點(diǎn)外，還有很多新的靶點(diǎn)抗體仍在研發(fā)中，相關(guān)臨床試驗(yàn)也在不斷推進(jìn)[15]。

2.3 過繼細(xì)胞免疫療法

該種療法先從患者體內(nèi)取出免疫細(xì)胞，在體外進(jìn)行基因工程改造或者篩選激活，經(jīng)過大量擴(kuò)增之后將經(jīng)過處理的免疫細(xì)胞重新輸入患者體內(nèi)，使新輸入的細(xì)胞能夠發(fā)揮更強(qiáng)的免疫殺傷功能。

過繼細(xì)胞免疫療法的種類繁多，目前僅有嵌合抗原受體T細(xì)胞免疫療法（chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy,CAR-T）處于商業(yè)化階段。在臨床治療中，醫(yī)護(hù)人員首先抽取患者血液，分離提取免疫T細(xì)胞，然后利用無害病毒或者規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序列（clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR/Cas9）技術(shù)向T細(xì)胞中注入基因，再將這些改造后的T細(xì)胞在體外擴(kuò)增至所需的數(shù)量，最后輸回到患者體內(nèi)，此時(shí)的CAR-T細(xì)胞能精準(zhǔn)靶向捕獲癌細(xì)胞，并發(fā)揮極大的特異殺傷作用，徹底清除腫瘤細(xì)胞[16]。CAR-T作為最新一代的細(xì)胞免疫療法已有5款藥物被FDA審批上市：Kymriah、Yescarta、Tecartus、Breyanzi和Abecma。

2.4 治療性抗腫瘤疫苗

與傳統(tǒng)預(yù)防傳染病的疫苗不同，治療性抗腫瘤疫苗側(cè)重于刺激免疫系統(tǒng)，特別是針對癌癥的CD8+T細(xì)胞反應(yīng)，主要包括樹突狀細(xì)胞疫苗、肽疫苗以及基因疫苗等。2021年FDA批準(zhǔn)的Provenge是首個(gè)上市的樹突狀細(xì)胞疫苗，主要用于抵抗性前列腺癌的治療。據(jù)2020年美國臨床腫瘤學(xué)會(huì)泌尿生殖系統(tǒng)癌癥研討會(huì)上公布的數(shù)據(jù)顯示，將Provenge添加至治療方案中，患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)可降低45%。目前已有數(shù)千項(xiàng)腫瘤疫苗療法臨床試驗(yàn)在進(jìn)行中，涉及多種癌癥，包括黑色素瘤、肺癌、乳腺癌等[17]。

由于不同個(gè)體的免疫系統(tǒng)差異較大，免疫應(yīng)答有可能只發(fā)生在小部分患者身上，腫瘤免疫療法在不同個(gè)體的療效以及不良反應(yīng)的發(fā)生都存在很大的不確定性。所以在進(jìn)行抗腫瘤的免疫治療時(shí)應(yīng)采用多種療法聯(lián)合應(yīng)用，同時(shí)注意篩選合適的患者進(jìn)行個(gè)體化精準(zhǔn)免疫治療。

3 抗血管生成療法

1971年福克曼[18]指出腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移與血管的生成有很大關(guān)系，首次提出了“通過抑制腫瘤血管生成來治療實(shí)體瘤的新策略”。經(jīng)過多年的研究，現(xiàn)已確定了許多與血管生成有關(guān)的因子，并開發(fā)出相應(yīng)的抗腫瘤藥物，廣泛應(yīng)用于腫瘤的臨床治療中。

目前研究最為透徹的腫瘤源性因子是血管內(nèi)皮生長因子（VEGF），通過靶向VEGF-VEGFR信號(hào)通路研發(fā)的抑制血管生成的抗腫瘤藥物也最多[19-20]。目前批準(zhǔn)上市的抗VEGF/VEGFR抑制劑包括貝伐珠單抗、雷莫蘆單抗、雷珠單抗等生物單抗，阿柏西普、康柏西普等融合蛋白，以及一些小分子激酶抑制劑。由于腫瘤可以通過多種血管生長因子誘導(dǎo)血管生長，除VEGF外還有血小板源性生長因子（platelet derived growth factor,PDGF）和血管生成素（angiogenin,Ang）等等，因此小分子藥物多以多靶點(diǎn)激酶抑制劑為主，包括：索拉菲尼、瑞戈非尼、侖戈替尼、卡博替尼等等。

內(nèi)源性血管生成抑制劑，如血管抑素和內(nèi)皮抑素，是天然存在生物體內(nèi)的一類防止血管過度生成的物質(zhì)，也可以產(chǎn)生抗腫瘤的效果，恩度就是一種內(nèi)皮抑制素變體，已被中國批準(zhǔn)用于非小細(xì)胞肺癌患者的治療。

4 肽或蛋白質(zhì)療法

4.1 治療性蛋白質(zhì)

治療性蛋白質(zhì)是一類非常重要的藥物，根據(jù)其分子類型可以分為激素、細(xì)胞因子、酶、抗體、融合蛋白等?？捎糜谔娲谔囟膊≈挟惓；蛉狈Φ牡鞍踪|(zhì)，還可以增加機(jī)體內(nèi)的有益蛋白以幫助減少疾病或化療的影響。除了上文第2節(jié)提到的抗體類藥物外，臨床上常用的抗腫瘤治療性蛋白質(zhì)為干擾素和白介素。

另外蛋白質(zhì)也可以作為載體保持藥物分子的穩(wěn)定性，使藥物分子產(chǎn)生靶向性。例如abraxane是由人白蛋白和紫杉醇通過共價(jià)非疏水作用連接而成的，人白蛋白發(fā)揮載體和穩(wěn)定劑的作用，該種藥物已被FDA批準(zhǔn)用于乳腺癌的治療。

4.2 肽

肽是氨基酸通過肽鏈連接在一起形成的化合物，廣泛存在于生物體中，其作用涉及機(jī)體的激素、神經(jīng)、細(xì)胞生長和生殖等各領(lǐng)域，可以調(diào)節(jié)體內(nèi)各個(gè)系統(tǒng)的功能[21]。肽在抗腫瘤藥物的開發(fā)中也受到廣泛關(guān)注，有學(xué)者將治療癌癥的肽分為三大類[22]：（1）抗菌肽（AMPs），通過壞死或凋亡誘導(dǎo)細(xì)胞死亡。目前AMPs剛開始應(yīng)用于腫瘤治療領(lǐng)域，有一些藥物正處于臨床試驗(yàn)階段，如LL37、LTX315和SGX942；（2）細(xì)胞穿透性肽（CPP），它們能夠穿過細(xì)胞膜在細(xì)胞內(nèi)運(yùn)輸各種生物活性物質(zhì)，包括核酸、蛋白質(zhì)和其他化合物。迄今為止，F(xiàn)DA尚未批準(zhǔn)任何CPP結(jié)合藥物，并且一些臨床試驗(yàn)也已經(jīng)停止。但細(xì)胞滲透肽p28已被列入兩項(xiàng)Ⅰ期試驗(yàn)，用于治療實(shí)體p53腫瘤[23]；（3）腫瘤靶向肽，可以特異性識(shí)別腫瘤及腫瘤血管上的相關(guān)受體，既可以作為激動(dòng)劑或拮抗劑直接用于腫瘤的治療，又可以作為抗腫瘤藥物的靶向傳輸載體。已上市的該類藥物較多，占肽類抗腫瘤藥物的絕大多數(shù)。目前多肽藥物Aplidin已被批準(zhǔn)用于復(fù)發(fā)或難治性多發(fā)骨髓瘤、實(shí)體瘤以及淋巴瘤的治療，Mifamurtide已被批準(zhǔn)用于骨肉瘤的治療。除此之外還有數(shù)款抗腫瘤多肽藥物及多肽疫苗正處于臨床研究階段[24]。與傳統(tǒng)抗腫瘤藥物相比，多肽類藥物靶向性高、不良反應(yīng)小且具有良好耐受性，但是多肽類藥物也存在易降解、細(xì)胞穿透性低等問題，有待進(jìn)一步研究解決。

4.3 Anticalin?蛋白質(zhì)（Anticalin?protein）

Anticalin?蛋白質(zhì)是一類新興的生物藥物，具有作為抗體替代品的巨大潛力。它來源于人類的載脂蛋白，通過基因工程改造后可以與各類靶標(biāo)相結(jié)合，包括小分子、肽、蛋白質(zhì)信號(hào)分子以及細(xì)胞表面受體[25]。Anticalin?蛋白質(zhì)比傳統(tǒng)的蛋白質(zhì)和抗體分子小，滲透性更大，進(jìn)入目標(biāo)組織主要是通過非注射的方式，可以提高患者用藥的便利性以及耐受性。此外Anticalin?蛋白質(zhì)主要來源于血漿或其他體液豐富的可溶性人脂蛋白，與天然對應(yīng)物僅有少量氨基酸的差別，所以具有較低的免疫原性。該技術(shù)平臺(tái)由德國的制藥公司Pieris Pharmaceutical獨(dú)家持有，阿斯利康與其已展開深度合作，Angiocal是研究進(jìn)展最快的Anticalin?蛋白藥物，主要對抗人血管內(nèi)皮生長因子VEGF-A，與腫瘤血管生長有著密切關(guān)系[26]，現(xiàn)已完成Ⅰ期臨床試驗(yàn)。

5 基因療法

5.1 寡核苷酸療法

寡核苷酸療法以高效特異性的方式調(diào)節(jié)基因表達(dá)，是繼小分子藥物和蛋白質(zhì)藥物之后的一個(gè)新的藥物開發(fā)熱點(diǎn)方向。目前處于研究之中的寡核苷酸類藥物的種類很多，其中反義寡核苷酸（antisense oligonucleotide,ASO）和小干擾核糖核酸（small interfering RNA,siRNA）藥物是非常重要的兩種。

ASO是一種由15～25個(gè)核苷酸組成的單鏈核苷酸，通過堿基互補(bǔ)配對原則與靶基因DNA或mRNA特異性結(jié)合，精準(zhǔn)地抑制某些基因，使編碼異常的基因沉默[27]。目前已被FDA審批上市的8款A(yù)SO藥物尚未涉及抗腫瘤治療，Inois作為反義寡核苷酸藥物領(lǐng)域的龍頭，已有兩款藥物處于Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段。

siRNA是長度為20～25個(gè)核苷酸的雙股RNA，主要參與RNA干擾現(xiàn)象（RNA interference,RNAi），即造成目的mRNA特異性降解，從而使基因轉(zhuǎn)錄后沉默的一種現(xiàn)象。RNAi技術(shù)可以針對信號(hào)通路的基因或基因簇的共同序列來同時(shí)抑制多個(gè)基因的表達(dá)，達(dá)到抑制腫瘤生長的目的[28]。目前抗腫瘤的siRNA藥物尚處于臨床試驗(yàn)階段如藥物ATU027、TKMPLK1等。

寡核苷酸類藥物可以直接作用于致病基因本身，比傳統(tǒng)的抗腫瘤藥物要更加具有選擇性，且高效低毒、穩(wěn)定有效、不易產(chǎn)生耐藥性，是一種理想的抗癌藥物。但是該種技術(shù)也存在一些有待進(jìn)一步解決的問題比如癌癥非單一基因突變、藥物相互作用以及在體內(nèi)無法有效遞送等[29]。

5.2 mRNA藥物

mRNA藥物可以被認(rèn)為是一組指令，指導(dǎo)機(jī)體生成特定蛋白質(zhì)來預(yù)防或?qū)辜膊?。理論上說mRNA具有合成任何一種蛋白質(zhì)的潛力，與DNA藥物相比無需進(jìn)入細(xì)胞核，避免了基因插入的風(fēng)險(xiǎn)，與蛋白類藥物相比可以作用于細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)，目前臨床上主要應(yīng)用領(lǐng)域是癌癥的免疫療法、預(yù)防傳染病、蛋白質(zhì)替代療法等[30]。2019年冠狀病毒?。–OVID-19）的全球爆發(fā)，激發(fā)了全球科學(xué)家對mRNA藥物研究的興趣，mRNA制藥行業(yè)日漸成熟，治療腫瘤的mRNA藥物已有多款進(jìn)入Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段，例如BNT-112、BNT-113、RG-6180等。

5.3 基因編輯

基因編輯技術(shù)是指對基因組進(jìn)行精準(zhǔn)改造的遺傳操作技術(shù)，可以插入、替換和敲除特定基因片段。以鋅指核酸酶（zinc-finger nuclease,ZFN）、轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶（transcription activator-like effectors nuclease,TALEN）和成簇的、規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序列（CRISPR/Cas9）為代表的基因編輯技術(shù)層出不窮[31]。CRISPR/Cas9技術(shù)憑借其精準(zhǔn)高效、脫靶率低的優(yōu)點(diǎn)逐漸成為當(dāng)今分子生物學(xué)領(lǐng)域最炙手可熱的技術(shù)之一?；蚓庉嫾夹g(shù)被研究人員廣泛運(yùn)用于癌癥治療的過程中，主要通過直接攻擊癌細(xì)胞中的關(guān)鍵基因以及編輯免疫細(xì)胞兩種方法來達(dá)到癌癥治療的目的。據(jù)英國媒體報(bào)道，2015年大奧蒙德街醫(yī)院利用TALEN技術(shù)對異體 T 細(xì)胞進(jìn)行基因編輯，首次實(shí)現(xiàn)利用基因編輯技術(shù)治愈白血病。近些年CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)也已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于腫瘤研究和治療中[32]，四川大學(xué)華西醫(yī)學(xué)院的盧鈾教授團(tuán)隊(duì)已開展了全球第一例應(yīng)用CRISPR/Cas9技術(shù)治療肺癌的人體臨床試驗(yàn)[33]。

5.4 DNA疫苗

DNA疫苗是一種質(zhì)粒，可以傳遞編碼腫瘤抗原（tumor antigen,TA）的基因，引發(fā)或增強(qiáng)對攜帶TA的腫瘤細(xì)胞的適應(yīng)性免疫反應(yīng)。DNA疫苗一般采用物理方法來進(jìn)行遞送，包括聲穿孔、基因槍、電穿孔等，采用此類方法可以直接將DNA運(yùn)送到細(xì)胞核中[34]。一旦進(jìn)入細(xì)胞核，DNA疫苗編碼的抗原在腫瘤細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行表達(dá)和呈遞，激活T細(xì)胞引發(fā)一系列免疫反應(yīng)。DNA疫苗可促進(jìn)全身免疫反應(yīng)，因此對不易通過手術(shù)干預(yù)去除的轉(zhuǎn)移瘤也有顯著療效。Inoviog公司的VGX-3100有望成為第一個(gè)上市的DNA藥物，用于治療由HPV引起的宮頸非典型增生或癌前病變[35]。

6 結(jié)語與展望

在抗腫瘤治療研發(fā)領(lǐng)域異常活躍的今天，隨著對腫瘤發(fā)生發(fā)展過程認(rèn)識(shí)的深入，分子靶向治療、基因療法、免疫療法等新興的腫瘤治療方法不斷涌現(xiàn)，癌癥患者的生存質(zhì)量顯著提高。在不久的將來腫瘤也能夠像糖尿病、高血壓一樣成為可以控制的慢性疾病。