分析保護(hù)劑在農(nóng)藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

鶴壁市農(nóng)產(chǎn)品檢驗(yàn)檢測(cè)中心 劉小麗 王風(fēng)英 王麗娟 張艷麗 劉尚偉

水果、蔬菜中的農(nóng)藥殘留量是衡量食品安全的一項(xiàng)重要指標(biāo)，因此，研究水果、蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)尤為重要。氣相色譜法檢測(cè)水果、蔬菜中農(nóng)藥殘留具有快速、準(zhǔn)確、靈敏度高，重現(xiàn)性好的優(yōu)勢(shì)，是農(nóng)藥殘留分析應(yīng)用中最普遍的技術(shù)。農(nóng)藥殘留氣相色譜法分析過程中通常存在很強(qiáng)的基質(zhì)效應(yīng)，從而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。在純?nèi)軇?biāo)樣溶液和待測(cè)樣品溶液中加入相同數(shù)量的保護(hù)劑時(shí)，保護(hù)劑能同等程度地補(bǔ)償標(biāo)樣溶液和樣品溶液的基質(zhì)效應(yīng)。同一種保護(hù)劑在不同基質(zhì)中，對(duì)不同類型農(nóng)藥的保護(hù)作用不同。在白菜、茄子、蘋果、梨、橘子等5 種蔬菜水果用的有機(jī)磷農(nóng)藥的試驗(yàn)分析中加入L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯和D-山梨糖醇，基質(zhì)補(bǔ)償效應(yīng)明顯。

一、材料與方法

（一）試驗(yàn)儀器、試劑

試驗(yàn)器材有Agilent GC 7890B 氣相色譜儀（配有FPD 檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器、分流/不分流進(jìn)樣口），高速分散均質(zhì)機(jī)，氮吹儀，快速混勻器，電子天平，均漿機(jī)，氮吹儀。試劑有乙腈（色譜純）、丙酮（色譜純）、氯化鈉（分析純）。

（二）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)溶液由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所提供，試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度均為100μg·mL-1。有機(jī)磷標(biāo)液用丙酮稀釋10μg·mL-1。

（三）分析保護(hù)劑的配制

1.配制L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯儲(chǔ)備液：稱取L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯500 mg，加入水4 mL，用乙腈定容至10 mL，冷凍保存。

2.配制D-山梨糖醇儲(chǔ)備液：稱取 D-山梨糖醇500 mg，加入水5 mL，用乙腈定容至10 mL，冷凍保存。

3.配制分析物保護(hù)劑溶液：吸取L-古洛糖酸-γ-內(nèi)酯儲(chǔ)備液4 mL 和D-山梨糖醇儲(chǔ)備液2 mL，用乙腈定容至10 mL，冷凍保存。

（四）實(shí)驗(yàn)方法

根據(jù)《蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥多殘留檢測(cè)方法》（NY/T 761-2008）進(jìn)行檢測(cè)。

二、試驗(yàn)條件和過程

（一）氣相條件

氣相檢測(cè)條件。色譜柱VF-5MS（30 m×0.25 mm×0.25μm）；溫度80 ℃保持1 min，以20 ℃·min-1的速度上升到130 ℃，再以5 ℃·min-1的速度上升到200 ℃，再以15 ℃·min-1的速度上升到250 ℃，保持11 min。進(jìn)樣體積1μL；進(jìn)樣口溫度250℃，不分流進(jìn)樣；檢測(cè)器溫度300℃；進(jìn)樣口溫度250℃；氮?dú)饬魉?0 mL·min-1；柱流速2 mL·min-1；空氣流速17 mL·min-1；氫氣流速14 mL·min-1。

（二）凈化提取，加標(biāo)

1.凈化提取。試驗(yàn)樣品破碎混勻后裝入塑料盒內(nèi)（樣品中不含有加標(biāo)農(nóng)藥），準(zhǔn)確稱取25.0 g,加入50 mL 乙腈,在勻漿機(jī)中高速勻漿2 min 后用濾紙過濾。過濾前用純水濕潤(rùn)濾紙，過濾結(jié)束時(shí)用玻璃棒壓濾紙擠凈濾液。濾液收集到裝有5～7 g 氯化鈉的100 mL 具塞量筒中，蓋上蓋子，劇烈震蕩1 min，在室溫下靜置30 min,使乙腈相和水相分層；用大肚管從100 mL 具塞量筒中分別吸取10.00 mL 乙腈溶液裝入2 個(gè)小燒杯中,將燒杯放在溫度80℃水浴鍋上加熱,氮吹近干；用丙酮定容至5 mL,在旋渦混合器上混勻,用一次性針管吸液，過濾膜后留用。

2.加標(biāo)。未加入保護(hù)劑的加標(biāo)樣品：甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、毒死蜱、馬拉硫磷、甲拌磷亞砜、水胺硫磷、三唑磷、亞胺硫磷、伏殺磷、對(duì)硫磷、二嗪磷、樂果標(biāo)液質(zhì)量濃度均為10μg·mL-1。分別吸500μL到25.0 g 樣品中，加標(biāo)濃度為0.2μg·mL-1，分別吸1000μL 到25.0 g 樣品中，加標(biāo)濃度為0.4μg·mL-1，分別吸2000μL 到25.0 g 樣品中，加標(biāo)濃度為0.8μg·mL-1。凈化提取后上機(jī)測(cè)定峰面積和保留時(shí)間。加入保護(hù)劑的加標(biāo)樣品：甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、毒死蜱、馬拉硫磷、甲拌磷亞砜、水胺硫磷、三唑磷、亞胺硫磷、伏殺磷、對(duì)硫磷、二嗪磷、樂果標(biāo)液質(zhì)量濃度均為10μg·mL-1。分別吸500μL 到25.0 g 樣品中，加標(biāo)濃度為0.2μg·mL-1，分別吸1000μL 到25.0 g 樣品中，加標(biāo)濃度為0.4μg·mL-1，分別吸2000μL 到25.0 g 樣品中，加標(biāo)濃度為0.8μg·mL-1。凈化提取后后，加入80μL 分析物保護(hù)劑溶液，用丙酮定容至5 mL，上機(jī)測(cè)定峰面積和保留時(shí)間。

三、結(jié)果分析

（一）標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)性

下頁表1 中的13 種有機(jī)磷農(nóng)藥溶劑標(biāo)準(zhǔn)工作曲線和基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線的相關(guān)系數(shù)在0.999 以上，線性關(guān)系非常好，符合《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)》(GB/T 27404-2008)標(biāo)準(zhǔn)要求。這就為樣品加標(biāo)色譜中比較農(nóng)藥殘留量提供了較好的依據(jù)。溶劑為丙酮，基質(zhì)溶液為混合基質(zhì)丙酮溶液(為使基質(zhì)具有一定的代表性,基質(zhì)種類選擇白菜、茄子、蘋果、梨、橘子的等量混合基質(zhì))。

表1 檢測(cè)結(jié)果比較（加標(biāo)濃度0.20μg·mL-1）

(二)檢測(cè)結(jié)果比較

從表1 中可以看出，添加保護(hù)劑后對(duì)于基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)有很大程度的補(bǔ)償作用,峰形及靈敏度都有極大改善。其中甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化樂果、甲拌磷亞砜、亞胺硫磷、伏殺磷、甲基對(duì)硫磷等得到了很好的補(bǔ)償。但添加保護(hù)劑對(duì)于顯示有基質(zhì)減弱效應(yīng)的毒死蜱、馬拉硫磷、水胺硫磷等并沒有顯示出補(bǔ)償作用。同時(shí)從表中還可以看出，添加保護(hù)劑的溶劑標(biāo)與基質(zhì)配標(biāo)響應(yīng)一致，可以有效消除基質(zhì)效應(yīng)。

（三）回收試驗(yàn)的準(zhǔn)確度與精密度

不加保護(hù)劑的13 種有機(jī)磷農(nóng)藥用溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算時(shí)，回收率為76%～139%。其中乙酰甲胺磷樣品平行測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性差。用溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算加保護(hù)劑的13 種有機(jī)磷農(nóng)藥時(shí)，回收率為88%～115%，回收率比不加保護(hù)劑計(jì)時(shí)好。其中乙酰甲胺磷樣品平行測(cè)定結(jié)果的重復(fù)性不好。在6 次平行測(cè)定中，其峰面積隨著測(cè)定次數(shù)的增加而增加，6 次測(cè)定值的RSD 達(dá)到14%。更換進(jìn)樣墊及襯管、老化色譜柱后再次測(cè)定，6 次測(cè)定值的RSD 為5%。用基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算不加保護(hù)劑的13 種有機(jī)磷農(nóng)藥時(shí)，回收率在89%～124%，與用溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算加保護(hù)劑的13 種有機(jī)磷農(nóng)藥時(shí)接近。

四、結(jié)果討論

蔬菜、水果中的13 種有機(jī)磷農(nóng)藥的試驗(yàn)分析過程中添加分析保護(hù)劑對(duì)大多數(shù)農(nóng)藥能顯著補(bǔ)償由基質(zhì)增強(qiáng)效應(yīng)造成的定量誤差，同時(shí)降低了檢出限,改善了峰形，提高了靈敏度。相比利用空白基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線、頻繁維護(hù)進(jìn)樣口等方法，添加分析保護(hù)劑這種方法的人工消耗少、經(jīng)濟(jì)成本低，效果顯著。