山羊傳染性胸膜肺炎研究進展

孟令楠，冀紅芹，范俊娟，張文晶，王利新，賈富勃*

（1.遼寧農業(yè)職業(yè)技術學院，遼寧 營口 115009；2.大石橋市農業(yè)農村事務中心，遼寧 營口 115100）

山羊傳染性胸膜肺炎（CCPP）是一種具有高度傳染性的急性或慢性呼吸系統(tǒng)疾病，以傳播迅速、高發(fā)病率與病死率為主要特點。CCPP可對全球山羊的養(yǎng)殖與經濟效益產生不良影響。因此，各國均積極采取相應措施研究診斷防治CCPP 的方法。1996 年，Thiaucourt 等[1]開發(fā)了1 種特異性競爭酶聯(lián)免疫吸附測定法，對診斷CCPP 具有很高的特異性和靈敏性。2012 年，Nicholas 等[2]采用基于基因分子的PCR 檢測法，提高了CCPP 的檢測水平；同時也可采用快速乳膠凝集試驗進行抗體檢測。2019 年，Yatoo 等[3]對比了不同抗生素對CCPP的治療效果，結果顯示，與土霉素和恩諾沙星相比，泰樂菌素效果更好、更安全。本文針對在不同時期提出的診斷方法和治療措施進行了梳理和總結，以期CCPP的防控和治療提供一些新的思路。

1 流行病學

1.1 病原

CCPP 由山羊支原體山羊肺炎亞種（Mycoplasma capricolumsubsp.Capripneumoniae，Mccp）引起，又稱爛肺病。1873 年，阿爾及利亞首次報道CCPP[4]；1976 年，肯尼亞首次分離得到CCPP，命名為F38 株[5]。CCPP 的病原菌Mccp屬柔膜細菌類，無細胞壁，但具有半乳聚糖和小基因組（0.58～1.35 Mb）。

1.2 宿主

Thiaucourt 等[6]提出，CCPP 只感染山羊。McMartin等[7]研究提出，無論自然或試驗條件下，Mccp 均不會引起綿羊患病。但也有研究表明，在野生動物中有CCPP 病例出現(xiàn)，如野生綿羊、野生山羊、瞪羚、藏羚羊、阿拉伯大羚羊[8]。2002 年，Houshaymi 等[9]在與患CCPP 的山羊接觸的健康綿羊體內分離得到Mccp。在埃塞俄比亞北部一項關于CCPP的血清學調查顯示，137只試驗綿羊中有25只（占18.3%）血清呈陽性[10]。綿羊是Mccp 的家養(yǎng)宿主，野生反芻動物類是Mccp 的野生宿主[11]；Mccp 不僅能夠感染山羊，同時對綿羊和野生動物也具有一定威脅。

1.3 傳播途徑

CCPP經常在患病動物引入易感畜群后暴發(fā)。傳播途徑主要為與患病動物密切接觸，通過咳嗽釋放的飛沫或吸入空氣中的病原菌傳染[12]。Mccp在外界環(huán)境中存活的時間較短（3～14 d），受到污染的物體、污染物、動物產品不能成為疾病的間接傳播媒介。一些動物有可能成為Mccp潛在的慢性攜帶者，在疾病的傳播中起重要作用[13]。

1.4 季節(jié)性因素

季節(jié)因素通常與CCPP疫情的暴發(fā)具有密切關系。在北非，CCPP 多發(fā)生于冬季；在阿曼，CCPP 疫情在溫度最低、降雨量最高的1月份暴發(fā)更頻繁[14]。此外，在中國西藏的拉達克，冬季期間可觀察到CCPP在山羊中頻繁暴發(fā)，特別是11月至第二年4月（當地冬季較長，自10月至第二年5月止）[15]。盡管寒冷的天氣被認為是誘發(fā)CCPP的主要因素，但無論來自任何種類應激，如交通、營養(yǎng)或氣候改變等，均可誘使動物感染Mccp并導致疾病暴發(fā)。

1.5 公共衛(wèi)生

CCPP 不是人畜共患病，目前尚無任何證據表明人類能夠感染Mccp或有感染Mccp的風險。

2 臨床癥狀及病理變化

CCPP 的潛伏期通常為10 d 左右，感染后表現(xiàn)為精神沉郁、高熱（41 °C），懷孕母羊可能出現(xiàn)流產。隨著病情發(fā)展，呼吸系統(tǒng)癥狀逐漸明顯，呼吸加快且表現(xiàn)疼痛，此時視診可發(fā)現(xiàn)病羊呈明顯腹式呼吸，伴有劇烈咳嗽及濕性啰音[16]。疾病晚期時，動物不能移動，站立時兩腿叉開，頸部僵硬且伸展，唾液不斷從口中滴落，鼻腔被黏液、膿性分泌物阻塞。急性病例的病變通常發(fā)生于單個肺中，病變肺呈葡萄酒色，可完全肝化，通常伴隨纖維素性胸膜炎，胸腔積聚大量積液[17]。

3 診斷方法

3.1 微生物學法鑒定

采集病羊鼻液拭子、胸腔積液或者肺組織作分離培養(yǎng)樣本，一旦分離得到Mccp 純培養(yǎng)物，可通過以下方法鑒定：（1）基于Mccp的代謝特點，如可分解葡萄糖、消化利用酪蛋白和血清、氯化四唑還原等[18]；（2）根據Mccp 遺傳組成、特定基因片段進行PCR 鑒定，如，16S rRNA 保守基因片段548 bp酶切鑒定[19]；（3）核酸擴增技術（NAATs），設計特異性引物MCCP-spec-F/R（擴增片段大小為318 bp），從Mccp基因組中擴增目的片段[20]；（4）使用Cap-21基因探針雜交從絲狀支原體簇成員中鑒別Mccp 或Mcc，采用F38-12基因探針從Mccp 或Mcc 中鑒定Mccp[21]；（5）通過常規(guī)（革蘭氏染色）和特異性染色（二烯氏染色）或生長沉淀試驗（GPT）、生長抑制試驗（GIT）和生化試驗鑒定；（6）更復雜的表征方法，如多位點序列分型（MLST）、質譜分析（MALDI-TOF MS）等[22]。

對于上述鑒定方法，標準化條件下的特定樣品收集、無菌培養(yǎng)、分離等操作對診斷的準確性至關重要。

3.2 分子生物學及血清學診斷

Mccp體外生長性能差、培養(yǎng)成本昂貴、分離率低。傳統(tǒng)的分離鑒定是OIE指定的標準檢測方法，但分子生物學檢測已成為CCPP診斷的新措施，如凝集試驗（非特異性和特異性）、競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗（c-ELISA）、熒光抗體測定（FAT）、補體結合測定（CFT）、間接血凝試驗（IHT）、擴增試驗（PCR、雜交、測序）是目前常采用的診斷試驗，其中乳膠凝集、c-ELISA 和PCR 最為常用。但在大多數國家，高昂的檢測成本以及設備缺乏等情況制約了檢測方法的使用[22]。因此，需要重點開發(fā)一種新型、靈敏、特異性強、現(xiàn)場適用、成本低、效益高的診斷方法。目前已經開發(fā)了非特異性凝集試驗，但這種方法無法區(qū)分支原體的其他種和亞種，尤其是絲狀支原體亞種[23]。特異性乳膠凝集試驗（LAT）利用全血或血清對CCPP 進行快速診斷，更適用于現(xiàn)場的實時診斷試驗，比CFT法更靈敏[24]，但與Mccp多糖相似的其他支原體或是某些細菌都可能發(fā)生交叉反應[25]。ELISA 應用于診斷CCPP 已有一段時間，其中c-ELISA 是具有高特異性（99.8%～100.0%)的新檢測方法[26]，但因成本問題并未得到廣泛引用。

3.3 影像學診斷

超聲檢查是應用于診斷CCPP所引起的肺、胸膜、胸腔和相關結構的病變的一種方法，可顯示內臟胸膜表面的不規(guī)則性。Tharwat 等[27]以超聲波作為診斷工具，研究了受CCPP 影響的山羊的超聲圖像變化，發(fā)現(xiàn)X 射線片能夠顯示肺的實變區(qū)域為致密的白色區(qū)域以及胸膜腔積液、肺葉實變或間質混濁等，從而進行診斷。

4 治療

目前，CCPP主要采用抗生素藥物治療，大環(huán)內酯類藥物尤其是泰樂菌素被認為是首選藥物[28]。此外，使用土霉素治療CCPP 被證明有效[29]，但因土霉素在大部分CCPP流行地區(qū)長期使用產生了耐藥性及一些副作用，如土霉素對山羊胎兒存在致畸性。此外，預防性使用土霉素引發(fā)額外風險，即在極小劑量下也可使支原體對抗生素產生耐藥。其他抗生素如氟喹諾酮類（恩諾沙星、達氟沙星）、氨基糖苷類（鏈霉素）和截短側耳素（泰妙菌素）也被應用于CCPP 的治療。目前，Mccp 菌株對多種抗生素敏感，包括大環(huán)內酯類、林可酰胺類和四環(huán)素類。有研究表明，已鑒定得到一些對四環(huán)素類、紅霉素和鏈霉素具有耐藥性的菌株[30]。因此，合理使用抗生素是亟須面對解決的問題。

基于抗生素的治療使CCPP 得到暫時緩解，但為更好地防止抗生素耐藥性產生，應盡量減少使用抗生素，使用前建議先進行抗生素敏感性試驗或采用交替使用抗生素的方法。更好的防控方法是通過接種疫苗預防，避免頻繁、大規(guī)模使用抗生素產生的耐藥性問題以及產生的巨額治療費用。

5 展望

診斷及治療CCPP的方法仍待研究探索，Mccp的分離鑒定方法也仍需改進，研究成本更低、更適用于現(xiàn)場使用的新診斷技術。應合理使用抗生素，包括常規(guī)大環(huán)內酯類和四環(huán)素類、新型抗生素（氟喹諾酮類），要定期評估Mccp對抗生素的敏感性，有效治療疾病并最大限度地降低抗生素產生耐藥性的風險。注射疫苗進行預防可更好地防控CCPP。從常規(guī)滅活疫苗發(fā)展至亞單位和重組疫苗，為獲得更好的免疫應答反應，應堅持探索發(fā)現(xiàn)免疫原性更好的抗原。因此，制定適當的診斷、預防和治療制度是非常重要的，也是今后努力的方向。