◎ 王湘竹,姚天臻,馬克清
(1.臨夏州燎原乳業(yè)有限公司,甘肅 臨夏 731800;2.燎原乳業(yè)股份有限公司,甘肅 合作 747000)
干酪生產(chǎn)中所用發(fā)酵劑以乳酸菌為主,可分為嗜熱型、嗜溫型和混合型。許多學(xué)者證實(shí)嗜溫型和混合型在感官鑒定上優(yōu)于嗜熱型發(fā)酵劑[1-2]。影響干酪品質(zhì)的因素主要有原料乳的質(zhì)量、發(fā)揮作用的發(fā)酵劑的種類及其加入量、凝乳酶的種類、該類型干酪主要成分和所選擇工藝等。尤其是發(fā)酵劑的使用對(duì)干酪理化和感觀及產(chǎn)率有很大影響[3]。REHMAN等[4]研究表明,發(fā)酵劑的類型比工藝更能影響干酪風(fēng)味的形成。GONZáLEZ等[5]認(rèn)為,篩選發(fā)酵劑生產(chǎn)的干酪具有芳香氣味,并且感官評(píng)價(jià)高于商業(yè)發(fā)酵劑,但對(duì)干酪理化特性和蛋白質(zhì)降解作用影響不大。
干酪成熟過程緩慢且復(fù)雜,在其成熟過程中伴隨著由酶催化引起的變化,如蛋白質(zhì)降解、脂肪水解、乳糖代謝等。酶主要有原料乳中胞漿素和酸性蛋白酶,殘留凝乳酶及來自發(fā)酵劑和非發(fā)酵劑細(xì)菌的蛋白酶、肽酶和脂酶等。其中,胞漿素和酸性蛋白酶是pH敏感性酶,而大部分凝乳酶則隨乳清的析出而排出。因此,在干酪成熟過程中發(fā)揮主要作用的酶應(yīng)該是發(fā)酵劑和非發(fā)酵劑自溶產(chǎn)生的酶。
蛋白質(zhì)水解在干酪成熟過程中對(duì)干酪的品質(zhì)有重要的影響,該反應(yīng)主要是由酶催化引起。在干酪成熟過程中,酪蛋白在乳酸菌胞內(nèi)酶和胞外酶的作用下降解。研究表明凝乳酶只能將乳蛋白分解至多肽,而乳酸菌蛋白分解酶可將乳蛋白和肽類分解為氨基酸,氨基酸降解可生成多種風(fēng)味化合物,因此對(duì)干酪的風(fēng)味和硬度的形成至關(guān)重要。
干酪風(fēng)味主要來自蛋白質(zhì)的降解,其降解過程主要為蛋白質(zhì)水解為肽,肽再水解為氨基酸,氨基酸進(jìn)一步降解為風(fēng)味物質(zhì)。其中,氨基酸降解是干酪中風(fēng)味物質(zhì)形成的關(guān)鍵。干酪成熟期間,如果蛋白質(zhì)降解適中,制成的干酪口味及質(zhì)地均較佳;如果降解速度過慢,不易形成干酪質(zhì)地和特有的風(fēng)味;如降解過快,則易產(chǎn)生小分子的苦味肽,使其品質(zhì)下降[1]。這個(gè)過程的快慢主要取決于發(fā)酵劑中微生物自溶速度及釋放出的酶的類型,且在干酪成熟過程中,發(fā)酵劑自溶速率和自溶度與蛋白水解呈正相關(guān)。
干酪成熟期間發(fā)酵劑控制不當(dāng)也會(huì)使干酪產(chǎn)生苦味、青草味等異常風(fēng)味,尤其是苦味,它是影響干酪品質(zhì)的重要因素??辔吨饕抢业鞍走^度降解或中間產(chǎn)物未被充分降解,從而導(dǎo)致大量苦味肽累積造成的,從本質(zhì)上說,是成熟過程中酶的活性受到抑制或促進(jìn)而導(dǎo)致的[6]。此外,發(fā)酵劑添加量不當(dāng),也會(huì)影響干酪品質(zhì)。研究證實(shí),若添加量太多,易使干酪產(chǎn)生苦味、酸味,且凝塊組織松散、易碎,影響其品質(zhì),產(chǎn)率也會(huì)降低;若添加量太少,凝塊較軟,不易碎,乳清析出較慢,凝乳時(shí)間也會(huì)變長(zhǎng)[7]。提高發(fā)酵劑的含量,酸化加快,as-酪蛋白的水解速度也加快??傮w來說,發(fā)酵劑的添加量主要視菌種活力和形態(tài)而定。
質(zhì)地是反映干酪成熟期間生化及理化變化的重要指標(biāo)之一,受發(fā)酵劑類型的影響,即使成熟時(shí)間相同,干酪所表現(xiàn)的質(zhì)構(gòu)特征也有所不同。B?RSTING等[8]分別用德氏乳桿菌乳酸亞種、乳酸乳球菌乳酸亞種及乳酸乳球菌乳脂亞種混合物制作低脂切達(dá)干酪,研究表明用混合發(fā)酵劑加工的產(chǎn)品中游離氨基酸含量較高,干酪的斷裂應(yīng)力也較高,單菌種發(fā)酵劑正好相反。若用單菌菌種發(fā)酵劑替代混合發(fā)酵劑可降低干酪的苦味,但卻導(dǎo)致了干酪質(zhì)地變脆。
干酪質(zhì)地受流變學(xué)影響比較大,二者關(guān)系密切。通過蠕變?cè)囼?yàn)對(duì)mozzarella干酪的流變學(xué)特性進(jìn)行定量分析,結(jié)果表明,混合菌種發(fā)酵劑(嗜熱鏈球菌和瑞士乳桿菌)制作干酪的熔融性要高于單一菌種發(fā)酵劑(嗜熱鏈球菌)制作的干酪[9]。
脂肪的分解在大多數(shù)干酪產(chǎn)品中具有一定的局限性,但這個(gè)過程對(duì)干酪品質(zhì)的影響卻很重要。干酪微生物群落中的乳酸菌、丙酸菌、非乳酸菌發(fā)酵劑(NSLAB)、表面微生物、酵母菌和霉菌均可產(chǎn)生脂酶。在干酪成熟過程中,酯酶可分解和氧化其中的脂肪,形成游離脂肪酸、醛類、醇類等一系列具有特殊氣味的化合物,從而形成干酪特有的發(fā)酵風(fēng)味,尤其是短鏈脂肪酸有強(qiáng)烈的特征性風(fēng)味。
干酪成熟時(shí)的糖酵解主要是在發(fā)酵劑的作用下,將原料中的乳糖,經(jīng)糖酵解或異戊二糖途徑轉(zhuǎn)化為乳酸的過程。這個(gè)過程產(chǎn)生的乳酸直接影響干酪的風(fēng)味。若生產(chǎn)程中的發(fā)酵劑可以迅速耗盡凝乳中殘留的乳糖,就可以避免糖酵解過程的發(fā)生,避免產(chǎn)生異味,維持干酪的品質(zhì)。
乳糖代謝的主要作用是決定干酪的pH值和調(diào)節(jié)其他的生化反應(yīng)。在干酪生產(chǎn)中乳酸菌發(fā)酵劑代謝產(chǎn)生乳酸,形成低酸性環(huán)境,具有以下作用。①影響凝乳酶的活性,為凝乳創(chuàng)造良好條件。②抑制雜菌生長(zhǎng),有利于形成品質(zhì)良好的干酪,同時(shí)也有利于保藏。③通過影響酪蛋白的持水性影響干酪的硬度,促進(jìn)乳清排出和干酪凝塊的收縮。④乳酸不僅可以直接影響干酪的風(fēng)味,其代謝產(chǎn)物也可影響干酪的風(fēng)味。⑤控制成熟酶的效果。
干酪中的微生物可分為發(fā)酵菌群和次級(jí)菌群兩大類。發(fā)酵劑菌群大部分是生產(chǎn)過程中額外添加的發(fā)酵劑菌種,還有一部分是原料奶中本身存在的發(fā)酵劑菌種。次級(jí)菌群即NSLAB,存在于大多數(shù)干酪中,主要是通過環(huán)境及制作干酪的材料(包括發(fā)酵劑)帶到干酪中,種類繁多,且大多是未知菌群,通常異型發(fā)酵乳酸桿菌占主導(dǎo)地位。在干酪成熟過程中,干酪中微生物數(shù)處于動(dòng)態(tài)變化之中,成熟前期發(fā)揮作用的主要是起發(fā)酵劑作用的乳酸菌,成熟后期發(fā)揮作用的則是一些NSLAB,整個(gè)成熟過程的變化速率取決于發(fā)酵劑乳酸菌起始數(shù)量和非發(fā)酵劑微生物類型。
干酪中活菌數(shù)受pH值、乳糖含量、鹽濃度及脂肪含量的影響。在干酪成熟過程中,鹽含量從外到內(nèi)逐漸減小。在高的滲透壓環(huán)境下,細(xì)菌細(xì)胞收縮,細(xì)菌的形態(tài)改變,影響活菌數(shù)。脂肪含量的改變會(huì)導(dǎo)致不同種類的細(xì)菌數(shù)發(fā)生變化,但不會(huì)改變干酪中起主導(dǎo)作用的細(xì)菌類型。劉會(huì)平等[10]通過對(duì)比Mozzarella干酪和模擬干酪成熟過程中菌群的變化規(guī)律,結(jié)果表明發(fā)酵劑乳酸菌是Mozzarella干酪成熟過程中的主要菌群,而非發(fā)酵劑乳酸菌的作用不大。此外發(fā)酵劑對(duì)干酪水分、乳糖含量影響很大,且在干酪成熟過程中占有相對(duì)優(yōu)勢(shì)的菌株在其繁殖過程中可產(chǎn)生較多的胞外多糖,該物質(zhì)不僅可以改善干酪黏性,還可以產(chǎn)生較多的香味物質(zhì)。
NSLAB在干酪的制作過程中不能產(chǎn)酸或產(chǎn)生很少量的酸,但在成熟過程中,這些菌群與干酪獨(dú)特的風(fēng)味和質(zhì)構(gòu)有關(guān),存在非發(fā)酵劑微生物的干酪風(fēng)味物質(zhì)濃度更高。
發(fā)酵劑對(duì)干酪的品質(zhì)有重要的影響。由于干酪品種較多,且不同發(fā)酵劑在干酪成熟過程中的作用不完全相同,因此有必要深入研究乳酸菌細(xì)胞中各種酶發(fā)揮作用的確切機(jī)理。同時(shí),研究者可通過改良、優(yōu)化干酪的生產(chǎn)工藝和成熟過程,選擇適宜該種產(chǎn)品特點(diǎn)及工藝的發(fā)酵劑,確保干酪品質(zhì)良好且穩(wěn)定。