奶牛弓形蟲病的診斷及防治要點(diǎn)

田立志

(密山市農(nóng)業(yè)綜合行政執(zhí)法大隊(duì)，黑龍江 密山 158300)

0 引言

弓形蟲屬頂復(fù)門球蟲綱、球蟲目肉孢子蟲科，可進(jìn)行有性繁殖和無性繁殖。其頂端較尖，尾部呈圓形，這種蟲體結(jié)構(gòu)有助于其入侵豬、牛等動(dòng)物的細(xì)胞。由于奶牛弓形蟲病與鉤蟲病、蛔蟲病等具有一定的相似性，因此在奶牛發(fā)病之后，可以綜合弓形蟲病的流行特點(diǎn)、病牛的癥狀表現(xiàn)進(jìn)行鑒別診斷，并在確診后及時(shí)展開科學(xué)用藥治療，可以在提高殺蟲效果的前提下，幫助病牛提高機(jī)體免疫力，提高痊愈速度，從而切實(shí)提高養(yǎng)殖效益。

1 流行特征

弓形蟲病是一種人畜共患病，多數(shù)哺乳動(dòng)物都是弓形蟲病的易感體，其中犬、牛、豬的感染率較高。奶牛弓形蟲病的傳播方式多樣，病牛排出的糞便中含有蟲卵，可對(duì)牛舍地面、槽具等造成污染。健康牛接觸了帶有蟲卵的地面，或者食用了帶有蟲卵的飼料，都會(huì)感染該病。除此之外，蟲體還可通過口、鼻、眼、皮膚等途徑進(jìn)入機(jī)體。蟲卵進(jìn)入到奶牛體內(nèi)后，會(huì)將奶牛當(dāng)作宿主，并在其體內(nèi)進(jìn)行有性生殖，其寄生部位主要是腸壁、卵囊。蟲卵在奶牛體內(nèi)只需要5～7 d即可產(chǎn)出孢子，孢子可隨糞便排出體外。如果是妊娠母牛患病，體內(nèi)的弓形蟲還會(huì)以速殖子的形式穿過胎盤進(jìn)入到犢牛體內(nèi)，造成垂直感染。研究表明，弓形蟲病對(duì)妊娠母牛的感染能力與其懷孕階段有密切關(guān)聯(lián)，妊娠早期母牛弓形蟲病的傳播率較低，而到了妊娠后期傳播率可升高至90%。由于弓形蟲卵表面包裹有一層組織囊，因此可以在酸堿環(huán)境，或者是一定的高溫、低溫環(huán)境下生存較長(zhǎng)時(shí)間[1]。奶牛弓形蟲病在一年四季均可發(fā)生，受弓形蟲生活習(xí)性的影響，該病在夏季的發(fā)生率較高。同時(shí)在秋冬交替、冬春交替時(shí)，因?yàn)榄h(huán)境變化，加上奶牛體質(zhì)較弱，發(fā)病率也會(huì)有小幅度上升。雖然弓形蟲病多為散發(fā)，但是在規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)，只要出現(xiàn)一例患病奶牛，短時(shí)間內(nèi)可感染牛舍內(nèi)其他健康奶牛，表現(xiàn)出較強(qiáng)的傳染性。

2 臨床表現(xiàn)

就奶牛而言，任何品種、年齡的奶牛都有可能發(fā)病。其中，體質(zhì)較好、抵抗力較強(qiáng)成年奶牛發(fā)病之后，癥狀較輕；而體質(zhì)虛弱奶?；驙倥０l(fā)病后會(huì)表現(xiàn)出較為明顯的癥狀，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致奶牛死亡。奶牛發(fā)病后，體溫會(huì)持續(xù)升高，最終維持在41℃左右，并且表現(xiàn)出呼吸急促、精神萎靡的癥狀。進(jìn)食量比健康牛明顯減少，部分病情嚴(yán)重的奶牛可出現(xiàn)飲食廢絕的情況。有時(shí)會(huì)伴隨有咳嗽、鼻鏡干燥，觀察其眼部可發(fā)現(xiàn)眼結(jié)膜潮紅，并且在口鼻處有黏液樣的液體流出。在發(fā)病的中后期，多數(shù)病牛還會(huì)出現(xiàn)腹瀉癥狀，糞便稀薄，且呈灰白色，偶爾可帶有血絲。尿液顏色加深，為橙黃色或橙紅色。由于病牛飲水減少，因此排尿量也比平時(shí)更少。病牛偶爾會(huì)出現(xiàn)嘔吐癥狀或神經(jīng)癥狀，突然倒地不起并伴有四肢抽搐，一些病情嚴(yán)重的甚至?xí)霈F(xiàn)癱瘓癥狀。對(duì)于一些治療不及時(shí)的病牛，隨著病情的加重，在其腹部、鼻鏡、耳后等位置還會(huì)發(fā)現(xiàn)數(shù)量不等的出血點(diǎn)，最終因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)不良導(dǎo)致病牛無法正常站立，行走困難，體溫大幅度降低后衰竭而亡。病牛也可表現(xiàn)出不同程度的乳腺炎，體表淋巴結(jié)有明顯的腫脹情況。

3 剖檢變化

對(duì)患有弓形蟲病的病死牛進(jìn)行剖檢，可以發(fā)現(xiàn)其腹部、四肢、背部等多處皮膚均有彌漫性紫紅色。肝臟有明顯腫大現(xiàn)象，用手觸之發(fā)現(xiàn)肝臟變硬，并且表面密集分布有若干針尖狀的出血點(diǎn)。使用工具刀將其縱向切開，可以發(fā)現(xiàn)肝臟內(nèi)部有壞死灶。膽囊黏膜有粘連、脫落情況，刮去黏膜后，可以在膽囊壁上發(fā)現(xiàn)有局部的黑褐色斑點(diǎn)，并伴隨有輕度出血。肺臟有輕微腫脹情況，表面呈暗紅色、有光澤。間質(zhì)加寬，在肺葉邊緣處有少量較小的壞死組織，為灰白色。將肺臟切開后，流出一些泡沫狀、淡黃色的液體，聞之有惡臭味[2]。心肌未見腫脹情況，但是有脂肪變性現(xiàn)象，剖開后也可發(fā)現(xiàn)粟粒大小的壞死灶。腎臟外觀顏色發(fā)生改變，為黃褐色，有不均勻分布的出血點(diǎn)，部分出血點(diǎn)密集分布區(qū)域會(huì)觀察到暗紅色的淤血。腸黏膜有充血、腫脹現(xiàn)象，表面有血斑，小腸部分情況加重。膀胱內(nèi)有少量咖啡色尿液。

4 實(shí)驗(yàn)室診斷

4.1 涂片鏡檢

在無菌環(huán)境下從病死奶牛的肝臟、肺臟、淋巴結(jié)上提取少量組織，晾置10 min，待組織物干燥后使用甲醇固定。然后用姬姆薩進(jìn)行染色，將制作完成的涂片放到電子顯微鏡下觀察。鏡頭下可以看到若干數(shù)量的蟲體，一頭尖，另一頭鈍圓，整體呈弓形或香蕉形。蟲體中間部分為淡藍(lán)色，尾部為紫紅色。根據(jù)上述形體特征可判斷該蟲體為弓形蟲。

4.2 動(dòng)物試驗(yàn)

在無菌環(huán)境下從病死奶牛的肝臟、肺臟、淋巴結(jié)上各取少量組織，混合后進(jìn)行研磨處理，充分研碎后加入100 mL的生理鹽水，做雙抗處理(青霉素1 000 IU/mL，鏈霉素1 000 μg/ mL)，然后室溫下靜置90 min。進(jìn)行試驗(yàn)前要充分振蕩、搖勻，等到溶液中顆粒沉淀后，使用膠頭滴管吸取少量的上清液，置于另一個(gè)干凈的燒杯中，待用。選取10只實(shí)驗(yàn)小白鼠，將其隨機(jī)分成A、B兩組，其中A組作為對(duì)照，在腹腔處注射1 mL的生理鹽水；B組在腹腔處注入1 mL病料上清液[3]。兩組實(shí)驗(yàn)小鼠接種后在同樣環(huán)境下飼養(yǎng)1周。A組的5只實(shí)驗(yàn)小鼠無異常，B組的5只實(shí)驗(yàn)小鼠在第2天有2只發(fā)病，在第4天全部發(fā)病。采集發(fā)病小鼠的腹水，進(jìn)行鏡檢可以發(fā)現(xiàn)內(nèi)部有弓形蟲體。對(duì)病死小鼠進(jìn)行剖檢，病變部位與上文剖檢現(xiàn)象高度相似，可診斷為弓形蟲病。

4.3 血清學(xué)診斷

適用于弓形蟲病的血清學(xué)診斷方法有多種，例如染色試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)(IHA)、免疫熒光診斷等。染色試驗(yàn)中，取奶牛血清并按照1:8比例，加入去離子水進(jìn)行稀釋。然后從稀釋液中吸取少量液體滴加到載玻片上，置于電鏡下觀察。如果鏡頭下的蟲體有超過50%未被染成藍(lán)色，則為陰性，反之則為陽性。免疫熒光試驗(yàn)中，分別從病牛的肝臟、肺臟、淋巴結(jié)等處取少量組織然后制作成觸片，使用甲醇固定后進(jìn)行熒光染色。放置于電子顯微鏡下觀察，如果視野內(nèi)發(fā)現(xiàn)有大量特異性熒光弓形蟲，并且胞漿為黃綠色、蟲體為月牙形，則可以確診為弓形蟲病。

4.4 免疫學(xué)診斷

適用于弓形蟲病的免疫學(xué)診斷方法有凝集試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等多種。以凝集試驗(yàn)為例，診斷原理是抗原與抗體的特異性結(jié)合。從病死奶牛的肝臟、肺臟、淋巴結(jié)上各取少量組織，研磨并濾除殘?jiān)蟮玫綉覞嵋?。然后向懸濁液中加入甲醛，起到固定抗原的作用。再將液體與待檢測(cè)血清直接反應(yīng)10 min后，取少量上層清液滴到載玻片上，置于顯微鏡下觀察。如果發(fā)生凝集，則為陽性，即可判斷該病死奶?；加泄蜗x病。

5 防治措施

5.1 預(yù)防措施

5.1.1 定期保健

定期保健的目的是幫助奶牛驅(qū)蟲，達(dá)到未病先治的效果。由于弓形蟲進(jìn)入到奶牛體內(nèi)后，需要經(jīng)過一段時(shí)間才能生長(zhǎng)為成蟲，因此堅(jiān)持定期驅(qū)蟲可以殺滅奶牛體內(nèi)未發(fā)育成熟的蟲體，對(duì)保證奶牛健康有積極幫助。目前常用的驅(qū)蟲藥為磺胺-6-甲氧嘧啶，用法為口服，用量通常為60 g/(kg體重)，首次使用劑量加倍，每次驅(qū)蟲需要連續(xù)用藥5～7 d。有研究表明，使用磺胺-6-甲氧嘧啶對(duì)10周齡以下弓形蟲的殺滅率可以達(dá)到90%，發(fā)揮良好的弓形蟲病預(yù)防效果。需要注意的是，為了避免弓形蟲病產(chǎn)生耐藥性，養(yǎng)殖戶應(yīng)堅(jiān)持做到科學(xué)用藥，在定期保健工作中把握好兩個(gè)原則：一是頻率不能太高,注意結(jié)合往年本地區(qū)奶牛弓形蟲病的發(fā)生規(guī)律、流行特點(diǎn)，在春、秋兩季進(jìn)行驅(qū)蟲保健，每年1～2次即可；二是用藥需要適量，養(yǎng)殖戶應(yīng)嚴(yán)格按照驅(qū)蟲藥物的使用說明書進(jìn)行給藥，才能達(dá)到長(zhǎng)效驅(qū)蟲的效果[4]。

5.1.2 隔離與消毒

奶?；加泄蜗x病后，體內(nèi)成蟲產(chǎn)生的蟲卵可以隨著病牛的糞便排出，進(jìn)而有可能對(duì)牛舍內(nèi)的地面、槽具、飼料等造成污染，其他同舍飼養(yǎng)的奶牛也有較大概率患病。因此，養(yǎng)殖戶在發(fā)現(xiàn)病牛弓形蟲病后，應(yīng)當(dāng)采取應(yīng)急處理，立即將病牛從牛群中隔離。在對(duì)病牛進(jìn)行對(duì)癥用藥治療的同時(shí)，也要密切觀察其他同舍奶牛是否出現(xiàn)與弓形蟲病相符的癥狀表現(xiàn)，如果有也要用藥治療，避免該病的擴(kuò)散、傳播。出現(xiàn)病牛的牛舍應(yīng)當(dāng)立即騰空，使用殺蟲劑進(jìn)行噴霧滅蟲。重點(diǎn)對(duì)牛舍的地面、墻角處消毒，槽具內(nèi)剩余的飼料也要清理、銷毀，然后使用0.8%的福爾馬林熏蒸槽具，對(duì)其進(jìn)行消毒。消毒之后更換衛(wèi)生潔凈的飲水和飼料。對(duì)于病死奶牛的尸體，或者妊娠奶牛產(chǎn)出的死胎等，也要嚴(yán)格做無害化處理，切斷奶牛弓形蟲病在養(yǎng)牛場(chǎng)內(nèi)的傳播。另外，如果周邊有其他的養(yǎng)殖場(chǎng)出現(xiàn)了弓形蟲病，也應(yīng)增加消毒頻率，防止該病跨地域傳播。

5.1.3 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

實(shí)行科學(xué)的飼養(yǎng)管理也是預(yù)防奶牛弓形蟲病的一種有效措施。結(jié)合弓形蟲流行病學(xué)可知，貓是弓形蟲的最終宿主，因此奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)應(yīng)當(dāng)杜絕貓的出現(xiàn)，避免貓的排泄物中攜帶有弓形蟲而造成飼料污染和奶牛感染。同時(shí)，結(jié)合奶牛弓形蟲病的發(fā)生規(guī)律，在秋冬換季、冬春換季時(shí)，奶牛因?yàn)轶w質(zhì)較弱容易發(fā)病。因此牛舍內(nèi)應(yīng)做好環(huán)境管理，通過為奶牛提供舒適環(huán)境，減少環(huán)境突然變化帶來的應(yīng)激，對(duì)保證奶牛健康也有一定幫助。冬季天氣晴朗時(shí)可適當(dāng)進(jìn)行晾曬、通風(fēng)，夏季則要重點(diǎn)加強(qiáng)牛舍內(nèi)部衛(wèi)生管理，除了做到糞污每日一清外，還應(yīng)當(dāng)定期使用清水沖刷地面，并配合做好消毒工作?？茖W(xué)調(diào)配飼料，在奶牛弓形蟲病發(fā)生率較高的時(shí)節(jié)，可在奶牛飼料中添加適量的蛋白質(zhì)、VA或VE，對(duì)提高奶牛的抵抗力，減少弓形蟲病的發(fā)生有顯著效果。合理確定每日投喂飼料的量，當(dāng)日剩余的少量飼料應(yīng)當(dāng)清理，次日更換新的飼料和清水，既能減少飼料的浪費(fèi)，降低養(yǎng)殖成本，又能有效預(yù)防因?yàn)轱暳衔廴緦?dǎo)致的奶牛弓形蟲病。

5.1.4 做好安全引種工作

奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)應(yīng)盡量減少從外地引種，避免引種奶牛自身攜帶寄生蟲而造成傳染；對(duì)于確實(shí)需要奶牛引種的養(yǎng)殖場(chǎng)，要遵循安全優(yōu)先的原則，重點(diǎn)做好以下兩個(gè)方面的工作：一方面是要從具有相關(guān)資質(zhì)的正規(guī)繁育基地引種，并謹(jǐn)慎選擇個(gè)體，挑選優(yōu)良品種，并保證引種奶牛的體質(zhì)和外形健康、生長(zhǎng)發(fā)育情況良好，如有必要，還要對(duì)奶牛的系譜進(jìn)行審查，以確保沒有遺傳性疾病或其他有害基因；另一方面還必須嚴(yán)格執(zhí)行隔離制度，養(yǎng)殖場(chǎng)引種奶牛的隔離時(shí)間至少為2個(gè)月。隔離期間密切觀察、定期檢測(cè)，確保無弓形蟲病以及其他病相關(guān)癥狀后，方可與其他奶?；祓B(yǎng)。

5.2 治療措施

5.2.1 西藥治療

奶?；加泄蜗x病后，飲食減少，產(chǎn)奶量與產(chǎn)奶質(zhì)量都會(huì)有明顯下降，會(huì)給養(yǎng)殖戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。鑒于此，在確診奶牛弓形蟲病后，應(yīng)當(dāng)盡快使用藥物治療。西藥治療具有滅蟲效果好、療效快的特點(diǎn)，是治療奶牛弓形蟲病的首選方案?，F(xiàn)階段經(jīng)實(shí)踐證明治療弓形蟲病的特效藥物有多種，養(yǎng)殖戶可以根據(jù)實(shí)際情況靈活選擇?？墒褂?0%磺胺-5-甲氧嘧啶和2%甲氧芐氨嘧啶的1:1混合液進(jìn)行肌肉注射，用量根據(jù)奶牛體重確定，每10 kg給藥2 mL，1次/d，首次劑量加倍，連續(xù)使用7 d后可以取得理想驅(qū)蟲效果。如果養(yǎng)牛場(chǎng)內(nèi)同時(shí)出現(xiàn)多頭患病奶牛，為避免相互之間交叉感染，還可以使用抗病毒1號(hào)(有效成分為黃芪多糖)，用法為肌肉注射，用量為0.3 mL/(kg體重)，1次/d，連續(xù)給藥4～5 d，可有效避免交叉感染情況。除了直接使用藥物進(jìn)行滅蟲治療外，還可采用肌內(nèi)注射的方式，為病牛注射適量的VA、VC、VE，對(duì)增強(qiáng)免疫力和促進(jìn)機(jī)體恢復(fù)有一定效果。如果病牛同時(shí)伴隨有神經(jīng)癥狀，則在使用上述藥物滅蟲的基礎(chǔ)上，還應(yīng)額外使用賽特(主要成分為抗病因子、銀環(huán)蛇素、青蒿素)，用法為肌肉注射，用量為0.05 mL/(kg體重)，每2 d注射1次，連續(xù)1周能夠緩解神經(jīng)癥狀[5]。

5.2.2 中藥治療

在使用西藥治療快速滅蟲的前提下，還需要配合使用中藥治療，幫助病牛加快機(jī)體恢復(fù)。另外，奶?；加泄蜗x病后，還會(huì)表現(xiàn)出腹瀉、食欲減退癥狀，使用中藥調(diào)理可以幫助其恢復(fù)食欲，通過增加進(jìn)食補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，對(duì)增加產(chǎn)奶量和提高產(chǎn)奶質(zhì)量也會(huì)有顯著的效果。特別是一些代謝能力較弱的犢牛，多次注射西藥治療可能會(huì)因?yàn)樗幬锎x能力不足而出現(xiàn)明顯的副作用，因此對(duì)于病癥較重的犢牛，優(yōu)先考慮使用中藥治療。通常是在西藥治療3 d后，配合使用中成藥開胃補(bǔ)血促長(zhǎng)靈，主要成分包括黨參、白術(shù)、黃芪、當(dāng)歸、益母草等。該藥物為肌肉注射，用量為0.2 mL/(kg體重)，每天早晚各用藥1次，連續(xù)給藥5～7 d可以幫助病牛加速痊愈。另外，也可以使用中藥組方：黃花蒿120 g、常山100 g、柴胡、80 g、檳榔80 g、蒲公英50 g、連翹50 g、山楂50 g、甘草40 g、麻黃20 g。首先將常山、檳榔兩味中藥材加水用文火煎煮30 min，然后再加入柴胡、黃花蒿、甘草、山楂，繼續(xù)煎煮15 min，最后將剩余其他中藥材加入再煎煮5 min。所得湯劑分別于上午、傍晚給病牛灌服。連續(xù)用藥4～5 d，病牛腹瀉癥狀得以緩解，兼有驅(qū)蟲效果和提高機(jī)體免疫力的效果。

6 結(jié)語

在奶牛養(yǎng)殖規(guī)模擴(kuò)大的背景下，因?yàn)槿粘Ｐl(wèi)生管理不善、未執(zhí)行引種隔離措施等原因，導(dǎo)致奶牛弓形蟲病頻發(fā)。奶牛發(fā)病后會(huì)出現(xiàn)食欲不振、產(chǎn)奶減少等癥狀，嚴(yán)重時(shí)還會(huì)因?yàn)闋I(yíng)養(yǎng)不良而衰竭死亡，給養(yǎng)殖戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。在了解弓形蟲病的傳播途徑后，養(yǎng)殖戶需要重點(diǎn)從科學(xué)飼養(yǎng)管理、定期進(jìn)行牛群驅(qū)蟲保健、對(duì)病牛及時(shí)隔離和做好牛舍消毒等方面做好該病的預(yù)防。對(duì)于患病的奶牛，一方面要使用西藥進(jìn)行驅(qū)蟲，另一方面在滅蟲之后還要使用中藥或者維生素等幫助病牛恢復(fù)體能，改善機(jī)體免疫力。只有做到了防治結(jié)合，才能將奶牛弓形蟲病帶來的損失降至最低，從長(zhǎng)遠(yuǎn)來看對(duì)促進(jìn)奶牛養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展也有積極幫助。