山羊口瘡病毒和支原體混合感染的診治與凈化效果

宋德榮 王中貴 彭 華 周大榮 郭振剛 程振濤 劉 江張 平 吳蕊汝 吳 瑛 吳 萍

1.貴州省畢節(jié)市畜牧獸醫(yī)科學(xué)研究所，貴州 畢節(jié) 551700；2.貴州省畢節(jié)市牧墾場(chǎng)，貴州 大方 551600；3.貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，貴州 花溪 552200；4.貴州省畢節(jié)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 畢節(jié) 551700

山羊傳染性胸膜肺炎（CCPP），由山羊支原體山羊肺炎亞種（Mccp）引起，是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（OIE）法定報(bào)告動(dòng)物傳染病之一。山羊傳染性胸膜肺炎和支原體肺炎同屬絲狀支原體簇，病原體具有較高的親緣關(guān)系，但前者只有胸膜肺炎一種癥狀，而后者還有關(guān)節(jié)炎、結(jié)膜炎、乳腺炎和流產(chǎn)等癥狀[1]。2016年12 月至2017 年3 月，發(fā)現(xiàn)畢節(jié)市某山羊場(chǎng)1～3月齡羔羊、育成羊、成年羊不同程度感染了羊口瘡，懷孕母羊有流產(chǎn)和產(chǎn)死胎的現(xiàn)象，3 月齡內(nèi)的羔羊死亡率較高等。2017 年5 月活體送檢后，實(shí)驗(yàn)室診斷為羊口瘡與支原體混合感染。通過2017-2020 年的疫病凈化，羔羊死亡率已下降到8.14%。

1 材料與方法

1.1 送檢動(dòng)物

來源于海拔2 000 m 左右的畢節(jié)市某羊場(chǎng)的貴州黑山羊，此地雨季潮濕，冬季濕冷。

1.2 送檢時(shí)間

2017 年5 月24 日將4 只病羊送貴州省動(dòng)物疫病研究室檢測(cè)。

1.3 檢測(cè)方法

對(duì)4 只病羊進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室剖檢和病原核酸檢測(cè)，檢測(cè)試劑盒來源于北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司，試劑批號(hào)為20160512P。

2 結(jié)果與分析

2.1 剖檢觀察

經(jīng)剖檢觀察，4 只病羊結(jié)果顯示：3 只病羊口腔生瘡，2 只病羊腸系膜淋巴結(jié)充血、腫大，2 只病羊胃腸鼓氣，1 只病羊肝臟淤血，2 只病羊心包積液，2只病羊肺臟干酪樣壞死，1 只氣管點(diǎn)狀出血，1 只病羊肺臟與胸壁組織粘連。

2.2 病原核酸檢測(cè)

1）羊口瘡PCR 病原核酸檢測(cè)。取口瘡、水泡皮組織充分研磨或咽喉棉拭子，加入PBS 溶液混合均勻，提取基因組DNA，采用特異性引物（目的片段1 137 bp），進(jìn)行羊口瘡PCR 病原核酸檢測(cè)，結(jié)果如圖1 所示。由圖1 可知，送檢樣本檢出1 137 bp的羊口瘡病毒特異性目的基因條帶。

2）支原體病原核酸檢測(cè)。取肺臟組織充分研磨后，加入適量的PBS 溶液混合均勻后，提取基因組DNA，采用世紀(jì)元亨支原體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行PCR 檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果見圖2。由圖2 可知，送檢樣本檢出602 bp 的目的條帶。

3）口蹄疫病原核酸檢測(cè)。取水泡皮組織進(jìn)行充分研磨，加入適量PBS 溶液混勻；提取RNA，采用世紀(jì)元亨口蹄疫檢測(cè)試劑盒進(jìn)行口蹄疫的RT-PCR檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如圖3 所示。由圖3 可知，送檢樣本中未檢出口蹄疫病毒目的條帶。

4）小反芻獸疫病原核酸檢測(cè)。取肺臟、淋巴結(jié)組織充分研磨，加入適量PBS 溶液混勻；提取RNA，采用世紀(jì)元亨小反芻獸疫檢測(cè)試劑盒進(jìn)行小反芻獸疫的RT-PCR 檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果如圖4 所示。由圖4可知，送檢樣本未檢出小反芻獸疫病毒目的條帶。

2.3 口瘡病毒和支原體混合感染防治與凈化

1）羊口瘡防治。治療時(shí)，用竹片或攝子去掉患羊痂皮，創(chuàng)面先用0.1%高錳酸鉀溶液沖洗，選用2%龍膽紫或3%碘酊甘油涂擦，然后用磺胺類藥物和青霉素粉劑撒布創(chuàng)面，2 次/d，1 個(gè)療程7 d，連續(xù)治療7 d 后，隔3 d 再進(jìn)行下一個(gè)療程，直至痊愈。平時(shí)預(yù)防，一是不喂干硬和帶有芒刺的飼草，二是添加適量食鹽以減少羊亂啃食硬物導(dǎo)致皮膚、黏膜損傷。

2）羊支原體肺炎防治。治療時(shí)，選用“氟苯尼考+安乃近”，可取得較好的效果。平時(shí)避開懷孕時(shí)間段，采用“鹽酸多西環(huán)素+維生素C”溶于飲水或拌料，每3 個(gè)月預(yù)防性給藥1 次。

3）疫病凈化。①加強(qiáng)羊場(chǎng)消毒。羊口瘡、支原體對(duì)環(huán)境不良因素的抵抗力非常弱，絕大多數(shù)消毒劑和獸醫(yī)臨床常用的消毒方法都能輕易將其殺滅[2]。選用2%氫氧化鈉溶液、10%石灰乳或過氧乙酸等交替使用，對(duì)圈舍、飼養(yǎng)器具及周圍環(huán)境進(jìn)行消毒。第一階段3 個(gè)月內(nèi)每周消毒1 次，第二階段3 個(gè)月內(nèi)每月消毒不低于2 次，半年以后每月消毒不低于1次直至凈化徹底。②加強(qiáng)羊群免疫接種。制定免疫程序，加強(qiáng)羊群口蹄疫、小反芻獸疫、羊痘、羊傳染性胸膜肺炎、羊口瘡等疫苗的接種，做好羊布病的監(jiān)測(cè)工作。

4）羊場(chǎng)疫病凈化。

2017-2020 年，對(duì)該場(chǎng)采取消毒、防疫等疫病凈化措施，羊口瘡發(fā)病率、流產(chǎn)和死胎現(xiàn)象、羔羊死亡率發(fā)生了明顯變化。

①成年羊、育成羊、羔羊的羊口瘡發(fā)病率分別從2017 年的6.28%、9.38%、27.97%下降到2020 年的3.39%、5.63%、10.48%（表1）。

表1 2017-2020 年羊口瘡發(fā)病情況

②流產(chǎn)、死胎母羊占比分別從2017 年的12.36%、10.11%下降到2020 年的4.46%、3.18%（表2）。

表2 2017-2020 年母羊流產(chǎn)、死胎情況

③3 月齡內(nèi)的羔羊死亡率已從2017 年的54.25%下降到8.14%（表3）。

表3 2017-2020 年3 月齡內(nèi)羔羊死亡情況

3 結(jié) 論

3.1 病羊剖檢可見具有羊口瘡和支原體感染癥狀

剖檢病羊可見，不同程度呈現(xiàn)口腔生瘡，腸系膜淋巴結(jié)充血、腫大，胃腸鼓氣，肝臟表面有病灶，心包積液，肺臟干酪樣壞死，肺臟與胸壁組織黏連，氣管點(diǎn)狀出血等。

3.2 病原核酸檢測(cè)進(jìn)一步判斷為羊口瘡病毒和支原體混合感染

通過對(duì)羊口瘡、支原體、口蹄疫、小反芻獸疫等4 個(gè)病種的PCR 病原核酸檢測(cè)，檢出1 137 bp 的羊口瘡病毒特異性目的基因條帶和602 bp 的支原體目的基因條帶，未檢出口蹄疫病毒、小反芻獸疫病毒的目的基因條帶。

3.3 對(duì)該場(chǎng)開展4 年的疫病凈化已取得顯著成效

2017-2020 年通過對(duì)該場(chǎng)開展疫病凈化，成年羊、育成羊、羔羊的羊口瘡發(fā)病率分別從2017 年的6.28%、9.38%、27.97%下降到2020 年的3.39%、5.63%、10.48%；流產(chǎn)、死胎占比分別從2017 年的12.36%、10.11%下降到2020 年的4.46%、3.18%；3月齡內(nèi)的羔羊死亡率從54.25%下降到8.14%，疫病凈化取得了顯著效果。