2020 年河南省牛群結(jié)核病感染情況調(diào)查

趙勝杰 尼 博 盛 敏*

1.河南省動物疫病預防控制中心，鄭州 450000；2.中國動物衛(wèi)生與流行病學中心，山東 青島 266032

牛結(jié)核病是由牛分支結(jié)核桿菌引起的一種慢性消耗性人獸共患病，在我國被列為二類動物疫病，是威脅動物與人類健康和生命安全的重要傳染病之一[1]。牛結(jié)核病對養(yǎng)牛業(yè)尤其是奶牛業(yè)的影響非常嚴重。家畜中以奶牛最易感，牛感染牛分支結(jié)核桿菌后，可引起肺結(jié)核、乳房結(jié)核、腸結(jié)核等，臨床癥狀與感染部位有關[2]。病菌可通過患病牛的鼻分泌物、唾液、糞便、乳汁等傳染給其它牛，健康牛在被污染的環(huán)境中可通過呼吸道和消化道感染，懷孕母牛也會通過胎盤傳播給胎兒，同時也可以通過交配感染[3]。結(jié)核菌素皮膚反應是遲發(fā)型細胞超敏反應，抗原進入機體使機體的免疫T 淋巴細胞致敏，并大量分化增殖，當已致敏的機體再次遭受到抗原入侵時，致敏淋巴細胞就會與之結(jié)合，引起變態(tài)反應性炎癥。因此，對牛只進行結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應試驗可以判斷牛只是否感染結(jié)核分枝桿菌。因飼養(yǎng)密度大、牛只流動頻繁，規(guī)?；鼋Y(jié)核病感染率顯著高于散養(yǎng)戶[4]，通過對規(guī)模牛場進行結(jié)核病監(jiān)測，掌握牛群結(jié)核病流行情況和分布特點，對結(jié)核病的科學防控和公共衛(wèi)生安全具有重大意義。

1 材料與方法

1.1 材 料

本次調(diào)查共檢測規(guī)模牛場168 個，檢測活牛9 295 頭。其中：檢測肉牛場18 個，肉牛1 020 頭；檢測奶牛場149 個，奶牛8 275 頭。檢測所用牛型結(jié)核分枝桿菌提純結(jié)核菌素（purified protein derivative，PPD）購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，生產(chǎn)批號為202001。

1.2 方 法

結(jié)核病檢測采用牛結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應試驗，操作步驟和結(jié)果判定按照《GB/T 18645-2002 動物結(jié)核病診斷技術(shù)》標準執(zhí)行。將牛只頸側(cè)中部上1/3 處被毛剃去，直徑約10 cm，用游標卡尺測量術(shù)部中央皮皺厚度，并做好記錄。將牛型結(jié)核分枝桿菌PPD 稀釋成每毫升含2 萬IU 的稀釋液，以75%酒精消毒剃毛后的術(shù)部，然后在剃毛后的術(shù)部皮內(nèi)注射0.1 mL 稀釋好的牛型結(jié)核分枝桿菌PPD。皮內(nèi)注射72 h 后，仔細觀察局部有無熱痛、腫脹等炎性反應，并用游標卡尺測量皮皺厚度，做好記錄。局部有明顯炎性反應，皮厚差≥4 mm 的，結(jié)果判定為陽性；局部炎性反應不明顯，2 mm≤皮厚差＜4 mm的，結(jié)果判定為疑似；無炎性反應，皮厚差＜2 mm的，結(jié)果判定為陰性。對疑似反應牛只應立即在頸部另一側(cè)以同一批PPD 同一劑量進行第2 次皮內(nèi)注射，再經(jīng)72 h 后觀察反應結(jié)果。對陰性反應牛和疑似反應牛只，應于皮內(nèi)注射后96 h 和120 h 再分別觀察1 次，以防個別牛只出現(xiàn)遲發(fā)型變態(tài)反應。

2 結(jié)果與分析

2.1 總體情況

2020 年共對來自河南省168 個規(guī)模牛場的9 295 頭活牛進行了牛型結(jié)核菌素PPD 皮內(nèi)變態(tài)反應檢測，檢出陽性場點16 個，陽性活牛73 頭，平均場群陽性率和個體陽性率分別為9.52%和0.79%。

2.2 不同種類牛群感染情況

按肉牛和奶牛對檢測結(jié)果進行分析，結(jié)果顯示：肉牛群體中未檢出結(jié)核陽性個體；奶牛群體中，結(jié)核場群陽性率和個體陽性率分別為10.74%和0.88%。2020 年河南省不同牛群結(jié)核病流行情況見表1。

表1 2020 年河南不同牛群結(jié)核病流行情況

2.3 不同規(guī)模奶牛場感染情況

將所調(diào)查奶牛場按存欄量大小劃分為≤500頭、501～1 000 頭和＞1 000 頭3 個等級，并對檢測結(jié)果進行群間分布統(tǒng)計分析，結(jié)果顯示：存欄量≤500 頭的規(guī)模奶牛場結(jié)核病場群陽性率和個體陽性率分別為13.75%和1.30%，存欄量介于501～1 000頭的奶牛場結(jié)核病場群陽性率和個體陽性率分別為9.68%和0.54%，存欄量＞1 000 頭的大規(guī)模奶牛場結(jié)核病場群陽性率和個體陽性率分別為5.26%和0.52%。存欄量≤500 頭的規(guī)模奶牛場場群陽性率和個體陽性率均為最高，不同存欄量規(guī)模奶牛場個體陽性率和場群陽性率均隨存欄量的上升呈下降趨勢；不同規(guī)模場點場群陽性率差異顯著；1 000 頭以上場點的個體陽性率顯著低于500 頭以下場點，且與501～1 000 頭場點無顯著差異（表2）。

表2 2020 年河南省不同規(guī)模奶牛場結(jié)核病流行情況

2.4 不同區(qū)域奶牛場感染情況

將所調(diào)查奶牛場按其所在地域分為豫東、豫西、豫南、豫北和豫中5 個區(qū)域，并對檢測結(jié)果進行空間分布統(tǒng)計分析，結(jié)果顯示：在本次調(diào)查中，豫東、豫南和豫中地區(qū)無結(jié)核陽性牛只檢出；豫西地區(qū)規(guī)模奶牛場結(jié)核病場群陽性率和個體陽性率均為最高，分別為66.67%和8.48%，顯著高于其他區(qū)域；豫北地區(qū)規(guī)模奶牛場結(jié)核病場群陽性率和個體陽性率分別為10.53%和0.89%（表3）。

表3 2020 年河南省不同區(qū)域奶牛場結(jié)核病流行情況

3 討 論

從規(guī)模牛場結(jié)核病分布情況來看，河南省牛群結(jié)核病具有一定的群間分布特征。規(guī)模奶牛場結(jié)核病平均個體陽性率和場群陽性率分別為0.88%和10.74%，而規(guī)模肉牛場在本次檢測中未檢出結(jié)核病陽性個體，這可能與肉牛養(yǎng)殖周期短且流動相對較少有關；奶牛群體中，存欄量在500 頭以下的奶牛場結(jié)核病個體陽性率和場群陽性率均為最高，且隨存欄量增加，個體陽性率和場群陽性率均呈逐漸下降趨勢。這可能與不同規(guī)模奶牛場對引種、生物安全和凈化等工作的重視程度和管理水平不同有關[2]。本次調(diào)查發(fā)現(xiàn)，河南省牛群結(jié)核病具有明顯的空間分布特征，陽性牛只主要分布在豫西和豫北地區(qū)，其中豫西地區(qū)奶牛結(jié)核病感染情況尤為嚴重，場群陽性率和個體陽性率高達66.67%和8.48%。

河南省規(guī)模奶牛場結(jié)核病感染情況調(diào)查[2]顯示：2018 年河南省奶牛結(jié)核病場群陽性率和個體陽性率分別為8.55%和1.36%；存欄量500 頭以下奶牛場結(jié)核病場群陽性率和個體陽性率分別為13.41%和2.86%，存欄量500 頭以上奶牛場結(jié)核病場群陽性率和個體陽性率分別為2.80%和0.08%；豫東、豫西、豫南、豫北和豫中5 個區(qū)域中，除豫南地區(qū)無陽性個體檢出外，其他區(qū)域均有陽性檢出，且豫西地區(qū)場群陽性率和個體陽性率均為最高。與2018 年相比，本次調(diào)查結(jié)果顯示：整體上，河南省奶牛結(jié)核病個體陽性率有所下降，但場群陽性率卻有所上升，個體陽性率下降主要體現(xiàn)在存欄量500 頭以下奶牛場，存欄量500 頭以上奶牛場場群陽性率及個體陽性率較2018 年均有所上升。奶牛結(jié)核病分布區(qū)域縮小，但豫西地區(qū)感染情況仍然嚴重，且豫北地區(qū)場群陽性率和個體陽性率均有所上升。

目前，多數(shù)地區(qū)采用單純的牛型結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應作為臨床檢測牛結(jié)核病的標準，雖然其具敏感性高、操作簡單和試劑成本低等特點，但與比較變態(tài)反應和γ-干擾素試驗相比，其特異性較差，此外還存在著勞動強度大、檢測周期長和結(jié)果判斷主觀性強等缺陷。牛γ 干擾素試驗被認為是除變態(tài)反應以外的最具有應用前途的一種新型試驗方法，已經(jīng)成為很多發(fā)達國家的法定牛結(jié)核檢疫方法。γ-干擾素試驗具有較好的敏感性和特異性，且與比較皮試具有很好的符合率[5]。將皮內(nèi)變態(tài)反應和γ-干擾素試驗相結(jié)合可有效減少假陰性反應，更有利于牛結(jié)核病的防控與凈化[6]。

奶牛結(jié)核病具有持續(xù)感染、普遍病程長等特點，防控奶牛結(jié)核病必須定期開展檢測工作，應重點監(jiān)測乳用牛和種用牛，對產(chǎn)奶牛、種用牛進行全覆蓋檢測，對肉牛、耕牛及其家畜進行抽檢，對檢測確診為陽性家畜應按照相關技術(shù)規(guī)范進行撲殺和無害化處理[7]。牛場應堅持自繁自養(yǎng)的原則，如果需要補充牛群，要做好引種檢疫，確定陰性者才可引進，經(jīng)隔離觀察和再次檢疫后方可混群飼養(yǎng)[8]。

4 結(jié) 論

本次調(diào)查共檢測168 個規(guī)模牛場的9 295 頭活牛，其中：檢測肉牛場18 個，肉牛1 020 頭，未檢出結(jié)核陽性牛只；檢測奶牛場149 個，奶牛8 275頭，奶牛結(jié)核病場群陽性率和個體陽性率分別為10.74%和0.88%。存欄量≤500 頭的規(guī)模奶牛場場群陽性率和個體陽性率均為最高，個體陽性率和場群陽性率均隨存欄量的上升呈下降趨勢。豫西和豫北地區(qū)感染情況較為嚴重，豫東、豫南和豫中地區(qū)在本次調(diào)查中無陽性檢出。值得關注的是，與2018年相比，河南省奶牛結(jié)核病個體陽性率下降，但場群陽性率卻上升，流行范圍縮小，但個別區(qū)域內(nèi)場群陽性率和個體陽性率卻上升。河南省規(guī)模牛場結(jié)核病具有明顯的群間和空間分布特征，牛結(jié)核病主要流行于奶牛場群，尤其是存欄量≤500 頭的奶牛場群，需加強牛群流動監(jiān)管，針對不同區(qū)域和場群制定相應防控和凈化措施，按場群和區(qū)域來逐步推進牛結(jié)核病的防控和凈化工作。