趙懿穎 徐靖敏 李芳 白云旭 宋雯佩 李彩琴
(仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院園藝園林學(xué)院,廣東 廣州 510225)
氫氣(H2,hydrogen)在常溫常壓下是一種極易燃燒的氣體,具有還原性,性質(zhì)穩(wěn)定,過去大部分生物學(xué)家一直認為氫氣是一種生理性惰性氣體。直到2007年,Ohsawa等提出氫氣具有選擇性抗氧化的作用[1]。近年來,學(xué)者對氫氣在植物學(xué)上的作用的研究逐漸增多,發(fā)現(xiàn)氫氣可協(xié)助植物對抗氧化應(yīng)激[2],具有調(diào)節(jié)植物生長發(fā)育[3,4]、改善土壤環(huán)境[5]、增強植物抗逆境能力[6-8]、提高植物品質(zhì)[9,10]等作用。
富氫水(HRW,hydrogen-rich water)是目前利用氫氣的一種較為理想的方法,關(guān)于HRW的植物學(xué)效應(yīng)的研究陸續(xù)展開,HRW與傳統(tǒng)化學(xué)藥劑相比安全無污染、成本低,在農(nóng)業(yè)應(yīng)用上有廣闊的前景,但若要HRW在農(nóng)業(yè)上有切實廣泛的應(yīng)用,還需進一步揭示HRW在植物中的作用機理。研究表明,HRW預(yù)處理能顯著促進種子萌發(fā)但具有濃度依賴效應(yīng),低濃度的HRW對水稻種子的萌發(fā)率無顯著作用,而經(jīng)過50%HRW預(yù)處理后水稻種子的萌發(fā)率明顯提高[11]。HRW對種子萌發(fā)的促進作用與種子α/β淀粉酶的活性的激活,加速還原糖和可溶性糖生成密切相關(guān)[12,13]。此外,研究還表明HRW對植物生長發(fā)育、抗逆境脅迫、保鮮貯藏等起著一定的積極作用。田婧蕓等發(fā)現(xiàn),HRW處理能顯著增加玉米幼苗的根長、表面積、體積及根系平均直徑,以緩解鹽脅迫對玉米幼苗根系結(jié)構(gòu)的破壞[14]。半飽和濃度的HRW對黃瓜幼苗的株高、莖粗、鮮重、葉面積、可溶性糖和可溶性蛋白的含量均有顯著提高作用[15]。宋韻瓊等發(fā)現(xiàn),不同濃度HRW浸泡種球和澆灌植株均可顯著增加小蒼蘭葉片長度和葉片寬度,縮短開花用時,并且一定程度上增加了花莖長度、花朵直徑和小花數(shù)量[16]。丁芳芳等研究表明,HRW澆灌對中藥材當歸生長發(fā)育具有一定的促進調(diào)節(jié)作用,能顯著增加當歸葉片長度、寬度,增大葉面積,增強光合作物積累,從而提高當歸產(chǎn)量[17]。紫外光(UV-A)的照射有利于植物花青苷含量的提高,HRW可通過重建植物體內(nèi)活性氧(ROS)的穩(wěn)態(tài)、提高花青苷合成相關(guān)基因的表達,誘導(dǎo)UV-A下積累更多花青苷[18]。HRW具有延緩植物衰老的作用,80% HRW處理可以通過調(diào)節(jié)抗氧化系統(tǒng)降低獼猴桃呼吸強度及果實腐爛率[19];50% HRW處理可以發(fā)揮三華李果實的最佳保鮮效果,好果率、單果重、果實硬度和果實品質(zhì)均得到了最大程度保持,延緩了果實在貯藏過程中的成熟和衰老,延長貨架期[20];HRW可通過保持水分平衡和膜穩(wěn)定性提高了鮮切花的瓶插壽命[21,22]。以水稻、番茄、黃瓜等為試驗材料,通過不同濃度的HRW處理,證明可以在一定程度上增強植物抗非生物脅迫(高溫、干旱、重金屬)和抗病菌(灰霉病)侵染的能力[2,6,7,23]。
HRW是一種新型藥劑,相比于其他的生長調(diào)節(jié)劑和保鮮劑,具有清潔環(huán)保,對環(huán)境造成的污染較小等優(yōu)點,在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用前景廣闊。本研究以“Micro-Tom”番茄為材料,通過不同濃度HRW灌溉植株,分析HRW對番茄種子萌發(fā)、坐果率、果實縱橫經(jīng)、單果鮮重及單株產(chǎn)量的影響,旨在豐富富氫水的植物學(xué)功能,為提出有效、安全、綠色環(huán)保的調(diào)控植物生長發(fā)育的新策略和技術(shù)提供科學(xué)依據(jù)。
本試驗所用的番茄品種為“Mirco-Tom”,此番茄品種屬于矮生番茄,生長周期短,2~3個月即可開花結(jié)果,生長習(xí)性確定,果實個體小,產(chǎn)量大,易于實驗操作。
1.2.1 HRW溶液制備與含量測定
試驗共分6組:清水處理為對照,5個HRW濃度(15%、25%、50%、75%和100%)為處理組。參照李彩琴等的方法,將100粒水素球置于去離子水中12h以上制得飽和HRW作為100% HRW,然后將飽和HRW立即用去離子水稀釋,制得相對體積15%、25%、50%和75%的HRW溶液。采用CT-8023富氫測試筆(深圳市柯迪達電子有限公司)測定新制備的飽和HRW中氫氣濃度約為0.7mmol·L-1。
1.2.2 番茄種子萌發(fā)及植株生長試驗
挑選大小一致且健康飽滿的番茄種子,55℃溫水消毒15min,之后分別用清水(對照)、15%、25%、50%、75%、100% HRW浸泡20h,每24粒種子為一次重復(fù),共3次重復(fù)。將處理好的種子分別播種于以泥炭土∶蛭石=2∶1為基質(zhì)的穴盤中,置25℃恒溫培養(yǎng)室(16/8h光暗交替)中培養(yǎng),每粒/穴,每隔2~3d添加不同濃度HRW保持濕潤。從種子放入培養(yǎng)室開始計算天數(shù),每天同一時間觀察種子的萌發(fā)情況,以觀察到種子破土為發(fā)芽標準。
在番茄幼苗長至3葉1心時,選取長勢整齊一致的植株移栽至裝有基質(zhì)的小花盆中繼續(xù)培養(yǎng),基質(zhì)材料為泥炭土∶蛭石=2∶1,之后每隔3~5d澆灌營養(yǎng)液(由不同濃度HRW配制而成),每處理3個重復(fù),每重復(fù)12株苗。3個月后測量番茄植株的莖稈粗度、果實縱橫經(jīng)、單果重,統(tǒng)計開花數(shù)量和坐果數(shù)量等。
1.2.3 種子萌發(fā)及生長發(fā)育指標測定方法
發(fā)芽率:
式中,Gt為第t天的正常發(fā)芽的粒數(shù);N為供試種子數(shù)。
發(fā)芽勢:
式中,n7為種子發(fā)芽置床培養(yǎng)7d時的正常發(fā)芽粒數(shù);N為供試種子數(shù)。
發(fā)芽指數(shù):
式中,Gt為第t天的正常發(fā)芽的粒數(shù);Dt為置床之日算起的日數(shù)。
用游標卡尺測量植株莖桿粗度、果實橫縱徑;用電子天平稱量果實鮮果單重量。
式中,m3為培養(yǎng)3個月后正常坐果數(shù)量;N為植株開花數(shù)量。
用Excel 2010進行數(shù)據(jù)整理,SigmaPlot 10.0軟件進行制圖,SPSS 13.0軟件對數(shù)據(jù)采用LSD法和Duncan法進行一維方差多重比較分析,顯著性水平為P<0.05。
如表1所示,不同濃度HRW處理對番茄種子的萌發(fā)有不同程度的影響。與對照(0% HRW)相比,15%HRW、25%HRW、50%HRW、75%HRW和100%HRW處理后番茄種子最終發(fā)芽率呈下降趨勢,分別降低了4.91%、18.04%、14.75%、1.64%和11.47%,但降低效果并不顯著。75%HRW處理后番茄種子的發(fā)芽勢和發(fā)芽指數(shù)有輕微提升,但與相比對照提升效果并不明顯;25%HRW處理后番茄種子的發(fā)芽勢明顯降低,與對照相比下降了76.21%。100%HRW處理后番茄幼苗根長增長幅度明顯,與對照相比長度增加了31.89%;25%和50% HRW處理后番茄幼苗根長生長較為緩慢,與對照相比根系長度縮短了11.35%和23.78%。
從圖1可知,不同濃度HRW處理后番茄植株莖桿粗度均有不同程度的增長。與對照相比,100%HRW處理對莖桿粗度的影響差異不顯著;15%HRW、25%HRW、50%HRW和75%HRW處理均顯著增加了番茄植株的莖桿粗度,與對照相比分別增加了4.57%、13.05%、6.76%和3.48%,其中25%HRW處理的增加作用最顯著。
表1 不同濃度HRW對番茄種子萌發(fā)的影響
圖1 不同濃度HRW對番茄植株莖粗的影響
從圖2可知,不同濃度HRW處理后番茄坐果率均有不同程度的提高。與對照相比,75%HRW處理對坐果率的影響差異不顯著;15%HRW、25%HRW、50%HRW和100%HRW處理均顯著提高了番茄植株的坐果能力,與對照相比提高了分別提高了18.01%、11.81%、18.32%和53.49%,其中100%HRW處理的提升效果最為顯著。
圖2 不同濃度HRW對番茄植株坐果率的影響
由表2可知,與對照相比,25%HRW、50%HRW和75%HRW處理后,番茄果實橫徑和縱徑均顯著增加,增加幅度在2.34%~6.14%,15%HRW和100% HRW處理后果實橫徑和縱徑變化效果不顯著。番茄果實單果鮮重在25%HRW和50%HRW處理后顯著提高,與對照相比分別增加了13.37%和17.16%;100%HRW處理后單果鮮重最低,與對照相比減少了12.13%;15%HRW和75%HRW處理后果實單果鮮重變化不顯著。番茄單株產(chǎn)量在15%HRW、25%HRW、50%HRW和100%HRW處理后顯著提高,與對照相比分別增加了56.37%、53.48%、99.65%和41.98%,其中50% HRW處理的增產(chǎn)效果最為顯著;75% HRW處理后果實單株產(chǎn)量變化不顯著。
表2 不同濃度HRW對番茄果實橫徑、縱徑、單果重和產(chǎn)量的影響
有研究顯示,通過不同濃度富氫水處理能夠促進種子萌發(fā),如丁芳芳等認為,使用10%HRW浸泡當歸種子后,其發(fā)芽率、發(fā)芽勢及發(fā)芽指數(shù)均能提高[13];汪艷平等認為,15%HRW和50%HRW處理對扦插豬籠草的發(fā)芽率、生根率、根長均有增加,且在不同品種之間不同濃度的HRW效果不同[24]。在本試驗中發(fā)現(xiàn),大多數(shù)濃度HRW對番茄種子的發(fā)芽率及發(fā)芽指數(shù)影響效果均不明顯,25% HRW處理后的番茄種子發(fā)芽勢有明顯下降。本試驗所用HRW處理起不到促進番茄種子萌發(fā)的作用,反而有輕微抑制效果,這與前人研究有明顯不同,可能與不同物種種子自身的特性有關(guān),或者所用富氫水的制備方法不同所致。已有研究表明,α-淀粉酶活性和過氧化物酶(POD)活性會隨著種子的萌芽力增強而提高[13,25],因此可通過種子內(nèi)的酶活性變化進一步分析HRW對種子萌發(fā)的作用。本研究也發(fā)現(xiàn)100% HRW處理可顯著促進番茄幼苗根的生長,這與前人的研究是一致的[26],但不同的濃度起到的效果不一樣。
本試驗還通過測定不同濃度HRW處理后番茄植株坐果率、果實單果鮮重和單株產(chǎn)量發(fā)現(xiàn),100%HRW處理能提高坐果率,25%HRW和50%HRW處理均能提高番茄果實單果鮮重和單株產(chǎn)量,且50%HRW處理增產(chǎn)效果最大,表明富氫水處理能夠促進植物生長發(fā)育,提高植物生物量的積累和產(chǎn)量[3,4,26]。
本試驗通過生長發(fā)育各項指標測定,對不同濃度富氫水處理的效果進行了比較,試驗結(jié)果表明,HRW雖對番茄種子的萌發(fā)無明顯作用,但HRW對番茄植株的生長發(fā)育具有很好的促進效果,其中100%HRW可顯著提高番茄坐果率;50%HRW對番茄果實單果鮮重和單株產(chǎn)量的影響較為顯著。本研究使用的富氫水處理操作簡便、使用成本低、綠色環(huán)保,可為開展氫氣對農(nóng)作物生長發(fā)育及產(chǎn)量的研究或推廣應(yīng)用提供參考。