貴州金絲桃的化學(xué)成分研究

周獻(xiàn)冬，林親雄，楊新洲

(中南民族大學(xué) 藥學(xué)院，湖北 武漢 430074)

藤黃科（Guttiferae）金絲桃屬（Hypericum）植物在中國各地均有分布，主要集中于華東、川北、貴州、新疆等地，該屬植物在民間有2 400 余年的用藥歷史，主要有清熱解毒、散瘀止痛、祛風(fēng)濕等功效[1].據(jù)報(bào)道，金絲桃屬植物中主要含有黃酮類、氧雜蒽酮類、多環(huán)多異戊烯基取代間苯三酚衍生物（PPAPs）等多種化學(xué)成分，如鄧憬童等[2]從川鄂金絲桃中分離出的15 個(gè)化合物中涵蓋了黃酮類、甾體類、三萜類、飽和脂肪酸酯類、氧雜蒽酮類、多環(huán)多異戊烯基取代間苯三酚衍生物等多種類型.其中PPAPs 因其復(fù)雜獨(dú)特的化學(xué)結(jié)構(gòu)和多樣的藥理活性而倍受關(guān)注.

貴州金絲桃（Hypericum kouytchenseLévl）為金絲桃屬灌木，生長于海拔1 500～2 000 m 的草地、山坡、河灘、多石地.本種分布較狹，主要分布于貴州威寧、畢節(jié)、黔西、金沙、印江、江口、盤縣、平壩、普安、息烽、清鎮(zhèn)等地[3].該物種資源較少，2013年被列入《中國生物多樣性紅色名錄—高等植物卷》，無危（LC），其果實(shí)及根供藥用，果作連翹代用品，根能祛風(fēng)、止咳、下乳、調(diào)經(jīng)補(bǔ)血、并可治跌打損傷[4].從金絲桃屬其他植物中已分離出許多有價(jià)值的化合物，而目前關(guān)于貴州金絲桃的化學(xué)成分報(bào)道較少.本課題組認(rèn)為貴州金絲桃有較大的研究價(jià)值和前景，因此綜合利用各種分離提取技術(shù)對產(chǎn)自于貴州省黔西南盤縣的貴州金絲桃乙酸乙酯提取部位中的化學(xué)成分進(jìn)行了分離純化，最終分離鑒定了17 個(gè)化合物，其中有16 個(gè)化合物為首次從該植物中分離得到，涵蓋了三萜類、氧雜蒽酮類、二苯并呋喃類以及酚酸類等多種類型化合物.

1 實(shí)驗(yàn)材料與方法

1.1 儀器和材料Bruker DRX-600 MHz 核磁共振儀（德國Bruker 公司）；Waters ACQUITY SQD MS液相質(zhì)譜聯(lián)用儀，Waters 2535 半制備型HPLC 儀、Waters 2998 DAD 檢測器、Waters 2707 自動進(jìn)樣器（美國Waters 公司）；YMC-Pack diol 柱（150 mm ×φ10 mm,5 μm，日本YMC公司）；Betasil C18 柱(250 mm ×φ10 mm,5 μm,美國Thermo 公司）；HP-20 大孔樹脂（日本三菱公司）；柱層析硅膠、GF254薄層硅膠板（煙臺江友硅膠開發(fā)有限公司）；Sephadex LH-20 葡聚糖凝膠（美國Amersham 公司）；色譜級乙腈、正己烷、異丙醇（美國TEDIA 試劑公司）.

1.2 植物來源植物樣品于2018 年8 月采集于貴州省黔西南盤縣，由中南民族大學(xué)藥學(xué)院萬定榮教授鑒定為藤黃科金絲桃屬植物貴州金絲桃（Hypericum kouytchenseLévl）.植物標(biāo)本樣品（No.SC0876）現(xiàn)存放于湖北省武漢市中南民族大學(xué)藥學(xué)院植物標(biāo)本庫.

1.3 提取與分離取40 kg 貴州金絲桃的干燥地上部分，粉碎后用80%的乙醇冷浸提取5次，合并提取液，減壓濃縮，得到浸膏3.9 kg.總浸膏用適量熱蒸餾水懸浮分散后，依次使用乙酸乙酯、正丁醇對其進(jìn)行萃取，分別得到1.6 kg 的乙酸乙酯部位以及1.4 kg 的正丁醇部位提取物.采用正相硅膠柱層析對乙酸乙酯部位浸膏（1.6 kg）進(jìn)行粗分，以二氯甲烷-甲醇梯度洗脫（體積比 100∶1→80∶1→50∶1→30∶1→15∶1→10∶1→5∶1→3∶1→0∶1），采用TLC 對收集得到的濃縮液進(jìn)行檢測，合并后得到10 個(gè)組分，記為Fr.A～ Fr.J.

Fr.A 有白色晶體析出，過濾后得到化合物1（95.6 mg）.Fr.B 用大孔樹脂柱色譜進(jìn)一步分離，以乙醇-水梯度洗脫（體積分?jǐn)?shù) 30%→50%→60%→70%→75%→80%→85%→90%），TLC 檢測后合并為10 個(gè)組分，記為Fr.Ba～Fr.Bj.Fr.Bb 有黃色沉淀析出，過濾后經(jīng)高效液相色譜（Betasil C18柱，乙腈-水，體積比10∶90→100∶0，流動相含有0.1%的甲酸）分離得到化合物3（71.7 mg，tR=11.49 min）、化合物16（50.1 mg，tR=16.19 min）.Fr.Bd 有黃色沉淀析出，過濾后經(jīng)高效液相色譜（Betasil C18柱，乙腈-水，體積比45∶55 等度洗脫，流動相含有0.1%的甲酸）分離得到化合物9（12.2 mg，tR=10.80 min）、化合物8（94 mg，tR=16.54 min）、化合物10（35.1 mg，tR=18.31 min）.Fr.Be 經(jīng)過正相硅膠柱層析初步分離，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫（體積比 100∶0→70∶1→50∶1→30∶1→20∶1→15∶1→5∶1→3∶1→0∶1），經(jīng)TLC 檢測合并分為Fr.Be-1～Fr.Be-9 共9 個(gè)組分.Fr.Be-2 經(jīng)高效液相色譜（Betasil C18柱，乙腈-水，體積比50∶50→100∶0，流動相含有0.1%的甲酸）分離得到化合物4（5.2 mg，tR=12.50 min）.Fr.Be-3 有黃色晶體析出，抽濾得到化合物14（62.3 mg）.Fr.Be-4經(jīng)高效液相色譜（Betasil C18柱，乙腈-水，體積比35∶65→100∶0，流動相含有0.1%的甲酸）分離得到化合物15（27.8 mg，tR=19.91 min）、化合物7（21.7 mg，tR=20.27 min）.Fr.Be-5 經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱色譜分離后再進(jìn)一步經(jīng)高效液相色譜（Betasil C18柱，乙腈-水，體積比35∶65→100∶0，流動相含有0.1%的甲酸）純化得到化合物17（5.4 mg，tR=11.20 min）、化合物5（3.2 mg，tR=17.91 min）、化合物6（12 mg，tR=20.61 min）.Fr.Be-6 高效液相色譜（Betasil C18柱，乙腈-水，體積比50∶50→90∶10，流動相含有0.1%的甲酸）分離純化得到化合物12（7.7 mg，tR=15.12 min）.Fr.Be-7 經(jīng)正相半制備色譜（YMC-Pack diol柱，正己烷-正己烷/異丙醇（體積比7∶3），體積比65∶35→30∶70）分離純化得到化合物13（3 mg，tR=13.48 min）、化合物11（7.9 mg，tR=15.56 min）.Fr.Bh 結(jié)晶析出化合物2（5 mg）.

2 結(jié)果與討論

2.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果綜合應(yīng)用HP-20 大孔樹脂柱層析、正相硅膠柱層析、Sephadex LH-20 凝膠柱色譜、半制備高效液相色譜等多種分離方法對貴州金絲桃（H.kouytchense）乙酸乙酯部位進(jìn)行分離純化，運(yùn)用NMR、MS 等現(xiàn)代波譜方法鑒定化學(xué)結(jié)構(gòu)，從貴州金絲桃乙酸乙酯部位提取物中分離得到了17 個(gè)化合物，分別鑒定為無羈萜（1）、白樺脂酸（2）、3,4-二羥基-2-甲氧基氧雜蒽酮（3）、1,3-二羥基-2-甲氧基氧雜蒽酮（4）、1,3-二羥基-5-甲氧基氧雜蒽酮（5）、1,5-二羥基-6,7-二甲氧基氧雜蒽酮（6）、2,3-二甲氧基氧雜蒽酮（7）、cadensin D（8）、subalatin（9）、kielcorin（10）、異巴西紅厚殼素（11）、toxyloxanthone B（12）、2-deprenylrheediaxanthone B（13）、1,7-二羥基氧雜蒽酮（14）、3-羥基-1,4,7-三甲氧基二苯并呋喃（15）、咖啡酸乙酯（16）、苯甲酸（17）.化合物按照結(jié)構(gòu)類型可以分為三萜類、氧雜蒽酮類、二苯并呋喃類以及酚酸類化合物.結(jié)構(gòu)見圖1.

圖1 化合物 1～17 結(jié)構(gòu)Fig.1 Chemical structures of compounds 1-17

2.2 化合物的波譜數(shù)據(jù)化合物1 C30H50O，白色晶體，ESI-MS：m/z427 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CDCl3)δH：2.39 (2H，m，H-2)，2.27 (1H，m，H-4)，1.96 (1H，m，H-1a)，1.75 (1H，m，H-6b)，1.67 (1H，m，H-1b)，1.18 (3H，s，H-28)，1.05 (3H，s，H-27)，1.00(6H，s，H-26，30)，0.95 (3H，s，H-29)，0.88 (3H，d，J=6.9 Hz，H-23)，0.87 (3H，s，H-25)，0.72 (3H，s，H-24).13C NMR (150 MHz，CDCl3)δC：213.5 (C-3)，59.6 (C-10)，58.4 (C-4)，53.2 (C-8)，42.9 (C-18)，42.3(C-5)，41.7 (C-2)，41.4 (C-6)，39.8 (C-22)，39.4 (C-13)，38.4 (C-14)，37.6 (C-9)，36.1 (C-16)，35.8 (C-19)，35.5(C-11)，35.2 (C-29)，32.9 (C-21)，32.5 (C-28)，32.2 (C-15)，31.9 (C-30)，30.6 (C-12)，30.1 (C-17)，28.3 (C-20)，22.4 (C-1)，20.4 (C-26)，18.8 (C-27)，18.4 (C-7)，18.1(C-25)，14.8 (C-24)，7.0 (C-23).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[5]，故鑒定該化合物為無羈萜.

化合物2 C30H48O3，白色針晶，ESI-MS：m/z457 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CDCl3)δH：4.74(1H，d，J=1.7 Hz，H-29b)，4.61(1H，brs，H-29a)，3.19(1H，dd，J=11.4，4.8 Hz，H-3)，1.70 (3H，s，H-30)，0.97 (3H，s，H-27)，0.96 (3H，s，H-26)，0.93 (3H，s，H-23)，0.82 (3H，s，H-25)，0.75 (3H，s，H-24).13C NMR(150 MHz，CDCl3)δC：180.7 (C-28)，150.6 (C-20)，109.8 (C-29)，79.2 (C-3)，56.4 (C-17)，55.5 (C-5)，50.6(C-9)，49.4 (C-18)，47.0 (C-19)，42.6 (C-14)，40.8 (C-8)，39.0 (C-4)，38.8 (C-1)，38.5 (C-13)，37.3 (C-10)，37.2 (C-22)，34.4 (C-7)，32.3 (C-16)，30.7 (C-21)，29.8(C-15)，28.1 (C-23)，27.5 (C-2)，25.6 (C-12)，21.0 (C-11)，19.5 (C-30)，18.4 (C-6)，16.3 (C-25)，16.2 (C-26)，15.5 (C-24)，14.8 (C-27).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[6]，故鑒定該化合物為白樺脂酸.

化合物3 C14H10O5，黃色粉末，ESI-MS：m/z259 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：8.17(1H，dd，J=8.0，1.7 Hz，H-8)，7.82 (1H，ddd，J=8.7，7.2，1.7 Hz，H-6)，7.63 (1H，m，H-5)，7.43 (1H，ddd，J=8.0，7.2，1.0 Hz，H-7)，7.14 (1H，s，H-1)，3.90 (3H，s，2-OCH3).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：175.0(C-9)，155.4 (C-5a)，146.0 (C-2)，142.4 (C-3)，141.8(C-4)，134.5 (C-6)，133.5 (C-4a)，125.8 (C-8)，123.9(C-7)，120.7 (C-8a)，118.0 (C-5)，112.9 (C-1a)，95.9(C-1)，55.9 (2-OCH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[7]，故鑒定該化合物為3,4-二羥基-2-甲氧基氧雜蒽酮.

化合物4 C14H10O5，黃色晶體，ESI-MS：m/z259 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CDCl3)δH：13.12(1H，s，OH)，8.25 (1H，dd，J=8.1，1.5 Hz，H-8)，7.72(1H，ddd，J=8.4，7.2，1.5 Hz，H-6)，7.45 (1H，dd，J=8.4，1.0 Hz，H-5)，7.38 (1H，ddd，J=8.1，7.2，1.0 Hz，H-7)，6.60 (1H，s，H-4)，4.05 (3H，s，2-OCH3).13C NMR (150 MHz，CDCl3)δC：181.6 (C-9)，156.5 (C-4b)，156.2 (C-4a)，153.6 (C-3)，153.5 (C-1)，135.2 (C-6)，129.7 (C-2)，125.9 (C-8)，124.1 (C-7)，120.3 (C-8a)，117.8 (C-5)，104.2 (C-8b)，93.6 (C-4)，61.1 (2-OCH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[8]，故鑒定該化合物為1,3-二羥基-2-甲氧基氧雜蒽酮.

化合物5 C14H10O5，黃色晶體，ESI-MS：m/z259 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：12.80 (1H，s，1-OH)，7.65 (1H，dd，J=8.0，1.4 Hz，H-8)，7.49 (1H，dd，J=8.0，1.4 Hz，H-6)，7.37 (1H，t，J=8.0 Hz，H-7)，6.38 (1H，d，J=2.0 Hz，H-4)，6.19 (1H，d，J=2.0 Hz，H-2)，3.96 (3H，s，5-OCH3).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：179.6 (C-9)，166.8 (C-3)，162.8(C-1)，157.2 (C-4a)，147.9 (C-5)，145.4 (C-4b)，124.0(C-7)，120.6 (C-8a)，116.6 (C-8)，115.7 (C-6)，101.9(C-8b)，98.5 (C-2)，94.3 (C-4)，56.2 (5-OCH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[9]，故鑒定該化合物為1,3-二羥基-5-甲氧基氧雜蒽酮.

化合物6 C15H12O6，黃色粉末，ESI-MS：m/z289 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：12.88 (1H，s，OH)，7.67 (1H，t，J=8.4 Hz，H-3)，7.28(1H，s，H-8)，7.09 (1H，d，J=8.4 Hz，H-4)，6.78 (1H，d，J=8.4 Hz，H-2)，3.92 (3H，s，6-OCH3)，3.91 (3H，s，7-OCH3).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：180.4 (C-9)，160.8 (C-1)，155.5 (C-4a)，148.1 (C-7)，146.5 (C-6)，146.3 (C-10a)，136.5 (C-3)，135.0 (C-5)，111.3 (C-8a)，109.9 (C-2)，107.7 (C-9a)，107.2 (C-4)，99.4 (C-8)，61.0 (6-OCH3)，56.1 (7-OCH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[10]，故鑒定該化合物為1,5-二羥基-6,7-二甲氧基氧雜蒽酮.

化合物7 C15H12O4，黃色粉末，ESI-MS：m/z257 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：8.23(1H，dd，J=7.9，1.7 Hz，H-8)，7.79 (1H，ddd，J=8.7，7.1，1.7 Hz，H-6)，7.56 (1H，s，H-1)，7.54 (1H，m，H-5)，7.43 (1H，ddd，J=7.9，7.1，1.0 Hz，H-7)，7.10 (1H，s，H-4)，4.02 (3H，s，3-OCH3)，3.94 (3H，s，2-OCH3).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：175.6 (C-9)，156.9 (C-4a，10a)，153.2 (C-3)，148.0 (C-2)，135.0 (C-6)，126.8(C-8)，124.7 (C-7)，122.3 (C-8a)，118.7 (C-5)，115.4(C-9a)，105.8 (C-1)，100.8 (C-4)，56.8 (2-OCH3)，56.3(3-OCH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致，故鑒定該化合物為2,3-二甲氧基氧雜蒽酮.

化合物8 C25H22O9，淺黃色粉末，ESI-MS：m/z467 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：8.21(1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-8)，7.85 (1H，m，H-6)，7.69(1H，d，J=8.3 Hz，H-5)，7.48 (1H，m，H-7)，7.21 (1H，s，H-1)，6.79 (2H，s，H-2′，6′)，5.11 (1H，t，J=5.2 Hz，H-8′)，5.07 (1H，d，J=7.9 Hz，H-7′)，4.45 (1H，m，H-9′)，3.87 (3H，s，2-OCH3)，3.78 (6H，s，3′，5′-OCH3)，3.46(1H，m，H-9′).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：174.8 (C-9)，155.3 (C-10a)，148.0 (C-5′，3′)，145.9 (C-2)，141.3 (C-4a)，139.6 (C-3)，136.3 (C-4′)，134.8 (C-6)，132.6 (C-4)，125.9 (C-8)，125.6 (C-1′)，124.4 (C-7)，120.8 (C-8a)，118.2 (C-5)，114.0 (C-9a)，105.7 (C-2′，6′)，96.5 (C-1)，77.8 (C-8′)，76.7 (C-7′)，59.9 (C-9′)，56.2 (3′，5′-OCH3)，55.8 (2-OCH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[11]，故鑒定該化合物為cadensin D.

化合物9 C24H20O9，淺黃色粉末，ESI-MS：m/z453 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：9.93(1H，s，2-OH)，8.59 (1H，s，4′-OH)，8.17 (1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-8)，7.83 (1H，ddd，J=8.0，7.1，1.6 Hz，H-6)，7.66 (1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，7.46 (1H，m，H-7)，7.16 (1H，s，H-1)，6.80 (2H，s，H-2′，6′)，5.08 (1H，d，J=7.8 Hz，H-7′)，4.42 (1H，m，H-8′)，3.78 (6H，s，3′，5′-OCH3)，3.74(1H，m，H-9′)，3.46 (1H，dt，J=12.0，4.6 Hz，H-9′).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：174.9 (C-9)，155.4 (C-10a)，148.0 (C-5′，3′)，143.8 (C-2)，140.0 (C-4a)，139.3 (C-3)，136.2 (C-4′)，134.7 (C-6)，132.7 (C-4)，125.9 (C-8)，125.8 (C-1′)，124.1 (C-7)，120.7 (C-8a)，118.1 (C-5)，114.3 (C-9a)，105.6 (C-2′，6′)，100.1 (C-1)，77.7 (C-8′)，76.5 (C-7′)，59.9 (C-9′)，56.2 (3′，5′-OCH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[12]，故鑒定該化合物為subalatin.

化合物10 C24H20O8，淺黃色晶體，ESI-MS：m/z437 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，DMSO-d6)δH：9.24 (1H，s，4′-OH)，8.20 (1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-8)，7.85 (1H，m，H-6)，7.68 (1H，d，J=8.4 Hz，H-5)，7.48(1H，dd，J=8.0，2.0 Hz，H-7)，7.20 (1H，s，H-1)，7.07(1H，d，J=1.9 Hz，H-2′)，6.91 (1H，dd，J=8.1，1.9 Hz，H-6′)，6.84 (1H，d，J=8.1 Hz，H-5′)，5.09 (1H，d，J=7.9 Hz，H-7′)，4.41 (1H，m，H-8′)，3.86 (3H，s，3′-OCH3)，3.79 (3H，s，2-OCH3)，3.74 (1H，m，H-9′)，3.44 (1H，m，H-9′).13C NMR (150 MHz，DMSO-d6)δC：174.8 (C-9)，155.3 (C-10a)，147.7 (C-3′)，147.3(C-4′)，145.9 (C-2)，141.3 (C-4a)，139.6 (C-3)，134.9(C-6)，132.5 (C-4)，126.6 (C-1′)，125.9 (C-8)，124.3(C-7)，120.9 (C-6′)，120.8 (C-8a)，118.1 (C-5)，115.4(C-5′)，113.9 (C-9a)，112.1 (C-2′)，96.5 (C-1)，77.8(C-8′)，76.4 (C-7′)，59.9 (C-9′)，55.8 (2，3′-OCH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[13]，故鑒定該化合物為kielcorin.

化合物11 C18H14O6，黃色固體，ESI-MS：m/z327 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3OD)δH：7.60(1H，d，J=8.7 Hz，H-8)，7.05 (1H，d，J=10.1 Hz，H-14)，6.89 (1H，d，J=8.7 Hz，H-7)，6.14 (1H，s，H-2)，5.69(1H，d，J=10.1 Hz，H-13)，1.47 (6H，s，15，16-CH3).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：182.0 (C-9)，164.2(C-1)，161.7 (C-3)，153.6 (C-4a)，153.2 (C-6)，147.8(C-10a)，133.9 (C-5)，128.2 (C-13)，117.8 (C-8)，116.2(C-14)，114.9 (C-8a)，113.9 (C-7)，103.8 (C-9a)，102.6(C-4)，99.7 (C-2)，79.3 (C-12)，28.5 (C-15，16).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[14]，故鑒定該化合物為異巴西紅厚殼素.

化合物12 C18H14O6，黃色粉末，ESI-MS：m/z327 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，Acetone-d6)δH：13.39 (1H，s，1-OH)，8.03 (1H，d，J=10.2 Hz，H-14)，6.82 (1H，s，H-5)，6.33 (1H，d，J=2.1 Hz，H-4)，6.20(1H，d，J=2.1 Hz，H-2)，5.93 (1H，d，J=10.2 Hz，H-13)，1.46 (6H，s，H-15，16).13C NMR (150 MHz，Acetoned6)δC：183.1 (C-9)，165.5 (C-1)，164.8 (C-3)，158.2 (C-6)，154.1 (C-4a)，153.8 (C-10a)，138.8 (C-7)，133.6 (C-13)，121.5 (C-14)，120.9 (C-8)，108.4 (C-8a)，103.9 (C-9a)，103.5 (C-5)，98.7 (C-2)，93.9 (C-4)，76.8 (C-12)，27.1 (C-15，16).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[15]，故鑒定該化合物為toxyloxanthone B.

化合物13 C18H16O6，黃色固體，ESI-MS：m/z329 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3OD)δH：7.58(1H，d，J=8.7 Hz，H-8)，6.88 (1H，d，J=8.7 Hz，H--7)，6.13 (1H，s，H-2)，4.53 (1H，q，J=6.6 Hz，H-12)，1.62(3H，s，H-14)，1.40 (3H，d，J=6.6 Hz，H-16)，1.33 (3H，s，H-15).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：181.9 (C-9)，167.3 (C-1)，165.3 (C-3)，154.4 (C-4a)，153.2 (C-6)，147.8 (C-4b)，134.2 (C-5)，117.6 (C-8)，115.1 (C-8a)，114.4 (C-4)，113.4 (C-7)，103.9 (C-8b)，94.1 (C-2)，92.3 (C-12)，44.9 (C-13)，25.9 (C-14)，21.4 (C-16)，14.6 (C-15).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[16]，故鑒定該化合物為2-deprenylrheediaxanthone B.

化合物14 C13H8O4，黃色針晶，ESI-MS：m/z229 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3OD)δH：7.62(1H，t，J=8.4 Hz，H-3)，7.51 (1H，d，J=3.0 Hz，H-8)，7.43 (1H，d，J=9.0 Hz，H-5)，7.31 (1H，dd，J=9.0，3.0 Hz，H-6)，6.95 (1H，dd，J=8.4，0.8 Hz，H-4)，6.73 (1H，dd，J=8.4，0.8 Hz，H-2).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：183.5 (C-9)，162.9 (C-1)，157.8 (C-4a)，155.6 (C-7)，151.5 (C-10a)，137.9 (C-3)，126.4 (C-6)，122.2 (C-8a)，120.3 (C-5)，110.7 (C-2)，109.5 (C-9a)，109.2 (C-4)，108.1 (C-8).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[17]，故鑒定該化合物為1,7-二羥基氧雜蒽酮.

化合物15 C15H14O5，ESI-MS：m/z275 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CDCl3)δH：6.84 (1H，d，J=8.8 Hz，H-9)，6.57 (1H，d，J=2.9 Hz，H-6)，6.44 (1H，dd，J=8.8，2.9 Hz，H-8)，6.23 (1H，s，H-2)，3.91 (3H，s，4-OCH3)，3.83 (3H，s，1-OCH3)，3.74 (3H，s，7-OCH3).13C NMR (150 MHz，CDCl3)δC：156.2 (C-7)，144.3 (C-4a)，143.9 (C-1)，142.0 (C-5a)，136.5 (C-3)，134.8 (C-9a)，128.3 (C-4)，125.4 (C-9b)，116.6 (C-9)，108.8 (C-8)，102.5 (C-6)，93.7 (C-2)，61.8 (4-OCH3)，56.4 (1-OCH3)，55.7 (7-OCH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[18]，故鑒定該化合物為3-羥基-1,4,7-三甲氧基二苯并呋喃.

化合物16 C11H12O4，淺棕色固體，ESI-MS：m/z209 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3OD)δH：7.53 (1H，d，J=15.9 Hz，H-α)，7.03 (1H，d，J=2.1 Hz，H-2)，6.94 (1H，dd，J=8.2，2.1 Hz，H-6)，6.77 (1H，d，J=8.2 Hz，H-5)，6.25 (1H，d，J=15.9 Hz，H-β)，4.21(2H，q，J=7.1 Hz，-OCH2-)，1.31 (3H，t，J=7.1 Hz，-CH3).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：169.3 (C=O)，149.6 (C-α)，146.8 (C-3)，146.7 (C-4)，127.7 (C-1)，122.9 (C-6)，116.5 (C-5)，115.2 (C-2)，115.0 (C-β)，61.4 (-OCH2-)，14.6 (-CH3).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[19]，故鑒定該化合物為咖啡酸乙酯.

化合物17 C7H6O2,白色粉末，ESI-MS：m/z123 [M+H]+.1H NMR (600 MHz，CD3ODδH)：8.03(2H，m，H-2，6)，7.59 (1H，m，H-4)，7.44 (2H，m，H-3，5).13C NMR (150 MHz，CD3OD)δC：169.9 (C-7)，134.0 (C-4)，132.0 (C-1)，130.7 (C-2，6)，129.5 (C-3，5).其波譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道的化合物基本一致[20]，故鑒定該化合物為苯甲酸.

3 結(jié)論

運(yùn)用NMR、MS 等現(xiàn)代波譜方法鑒定化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，從貴州金絲桃（H.kyouytchense）乙酸乙酯部位提取物中分離鑒定了17 個(gè)化合物，分別鑒定為無羈萜（1）、白樺脂酸（2）、3,4-二羥基-2-甲氧基氧雜蒽酮（3）、1,3-二羥基-2-甲氧基氧雜蒽酮（4）、1,3-二羥基-5-甲氧基氧雜蒽酮（5）、1,5-二羥基-6,7-二甲氧基氧雜蒽酮（6）、2,3-二甲氧基氧雜蒽酮（7）、cadensin D（8）、subalatin（9）、kielcorin（10）、異巴西紅厚殼素（11）、toxyloxanthone B（12）、2-deprenylrheediaxanthone B（13）、1,7-二羥基氧雜蒽酮（14）、3-羥基-1,4,7-三甲氧基二苯并呋喃（15）、咖啡酸乙酯（16）、苯甲酸（17）.除化合物14外，其余化合物均為首次從該植物中分離得到.現(xiàn)有研究表明，多環(huán)多異戊烯基取代的間苯三酚衍生物（PPAPs）類天然產(chǎn)物是藤黃科植物的標(biāo)志性化學(xué)成分[21]，但目前在貴州金絲桃中尚未分離得到該類化合物，而本課題組也正在對該植物的其他組分進(jìn)行研究，爭取分離得到該類結(jié)構(gòu)新穎復(fù)雜的天然產(chǎn)物.本文報(bào)道的17 個(gè)化合物主要是以氧雜蒽酮類為主，其中化合物1～2 為三萜類化合物，化合物3～14 為氧雜蒽酮類化合物，化合物15 為二苯并呋喃類化合物，化合物16～17 為酚酸類化合物.分離得到的化合物1、化合物6、化合物13 在已有報(bào)道中表明具有良好的生物活性：無羈萜在基礎(chǔ)狀態(tài)下能明顯改善L6 肌細(xì)胞的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)[22]，1,5-二羥基-6,7-二甲氧基氧雜蒽酮有較好的抗氧化活性[10]，2-deprenylrheediaxanthone B 表現(xiàn)出一定的抗炎活性[23].