厚樸酚與和厚樸酚的提取純化工藝

呂 雪

（本溪化學(xué)工業(yè)學(xué)校，遼寧 本溪 117019）

厚樸為木蘭科木蘭屬植物厚樸與凹葉厚樸的干皮、根皮和枝皮，是中國三大木本藥用植物之一，具有較大的市場需求和藥用價值。厚樸酚與和厚樸酚是厚樸中主要的有效成分，具有較好的抗菌、抗癌和抗凝血活性，是評價厚樸藥材品質(zhì)優(yōu)劣的主要指標之一。為此，論述厚樸中厚樸酚與和厚樸酚的提取純化研究成果，為厚樸的深入開發(fā)利用提供理論參考。

1 厚樸酚與和厚樸酚的提取方法

近年來，厚樸酚、和厚樸酚的提取方法主要包括溶劑提取法、超臨界二氧化碳提取法、酶解法、高壓熱水提取法等，均具有較高的提取率。

1.1 高壓熱水提取法

研究表明，高壓熱水提取法能在短時間內(nèi)得到高提取率的厚樸酚、和厚樸酚和難揮發(fā)性成分，而殘渣可擠壓成型為高密度板材。薩如拉等在常壓、0.9，1.2，1.5，1.7，2.1 MPa等不同壓強條件下對厚樸進行高壓水蒸氣蒸餾，用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀分析蒸餾液和廢液，2.1 MPa高壓水蒸氣蒸餾的收率是常壓水蒸氣蒸餾收的70倍，厚樸酚、和厚樸酚的轉(zhuǎn)移率分別達22.86%和10.85%；雖然其廢液的精油收率為0.9%，但不包含厚樸酚、和厚樸酚，說明目的成分完全被蒸餾。厚樸的蒸餾壓強越高，各成分的提取率越高，但隨著壓強的增加，提取成分有可能發(fā)生化學(xué)變化。

1.2 酶解法提取法

譚洋等的試驗研究報道顯示，酶解法有利于提高凹葉厚樸水提液中厚樸酚與和厚樸酚的轉(zhuǎn)移率。其采用HPLC對酶解處理后的凹葉厚樸水提液中的厚樸酚與和厚樸酚含量進行測定，同時與直接水提法進行對比。經(jīng)過酶解處理過的厚樸，水回流提取厚樸酚與和厚樸酚的轉(zhuǎn)移率分別為88.60%和88.74%，均高于直接用水提?。徊捎脧?fù)合酶預(yù)處理后得到的提取效率高于單一酶預(yù)處理。

1.3 超聲提取法

相關(guān)的試驗研究報道顯示，采用超聲提取厚樸酚與和厚樸酚，可以在浸提過程中粉碎厚樸細胞，釋放其內(nèi)容物，進而縮短提取時間，提高提取率和減少生產(chǎn)成本?？琢岬炔捎谜辉囼炘O(shè)計研究水浴輔助條件下利用超聲提取厚樸中酚類物質(zhì)最佳方案。在乙醇濃度90%、浸泡時間50 min、浸泡溫度60℃、超聲時間20 min的條件下，酚類物質(zhì)的分離效果最優(yōu)，提取率最高。冉志龍采用超聲波輔助萃取技術(shù)實現(xiàn)常溫下提取厚樸中間體產(chǎn)品，大大提高厚樸酚及和厚樸酚提取分離效果，縮短浸取時間，使萃取時間由2.0 h縮短為0.5 h，且提取率達90%以上。

1.4 超臨界二氧化碳提取法

超臨界CO2提取厚樸酚與和厚樸酚的提取效率高、重復(fù)性較好、工藝穩(wěn)定可行，且提取物具有良好的抗氧化活性。例如，楊巖等用正交試驗優(yōu)選厚樸超臨界CO2提取工藝，確定萃取壓力25 MPa、萃取溫度55℃、CO2用量30 kg為最佳參數(shù)。和厚樸酚最佳提取工藝為：壓力15 MPa、萃取溫度50℃、CO2用量25 kg。厚樸超臨界CO2提取物具有抗氧化活性，且分離參數(shù)不同，抗氧化活性有顯著差異。

1.5 溶劑提取法

研究表明，通過正交設(shè)計法優(yōu)選的溶劑提取厚樸提取工藝簡單合理、穩(wěn)定可行。

王崢等采用乙醇回流提取法，以厚樸酚、和厚樸酚提得率為評價指標，選擇乙醇濃度、乙醇用量、提取時間、次數(shù)4個因素采用正價設(shè)計法對提取工藝進行優(yōu)化。料液比為1∶20、乙醇濃度為70%，提取時間為60 min，提取2次，總酚提取量為4.23%。通過正交設(shè)計法優(yōu)選的厚樸提取工藝簡單合理、穩(wěn)定可行。

任虹等比較不同提取溶媒對厚樸中厚樸酚、和厚樸酚含量的影響，研究其提取工藝參數(shù)。采用HPLC法測定不同提取液中厚樸酚與和厚樸酚的含量70%，乙醇熱回流提取效果最佳。不同提取溶媒對厚樸中厚樸酚與和厚樸酚含量有影響，70%乙醇熱回流提取法最好，且工藝簡單合理、穩(wěn)定可行。

2 厚樸酚與和厚樸酚的分離純化

厚樸酚與和厚樸酚的純化方法有閃式硅膠柱色譜法、中壓硅膠柱層析法、萃取-沉淀-結(jié)晶法等，均可獲得較高的純化率。

2.1 閃式硅膠柱色譜法

與傳統(tǒng)工藝相比，閃式硅膠柱色譜法以厚樸總提物為原料，能夠快速、高效純化厚樸總酚，有一些試驗和研究得出相似的結(jié)論。王雯麗等以厚樸總酚的質(zhì)量分數(shù)和收率為指標，確定厚樸總酚的最佳純化工藝。厚樸酚、和厚樸酚在1 100μg/mL內(nèi)的線性關(guān)系良好（r=0.999 9）。厚樸酚、和厚樸酚的tR值分別為9.585 min和6.483 min。最佳工藝為：厚樸60%乙醇提取物，用10倍量的硅膠裝柱，以石油醚-醋酸乙酯（10∶110∶3）作為梯度洗脫溶劑，體積流量選擇5 mL/min，純化得到質(zhì)量分數(shù)＞99.5%厚樸總酚。

2.2 中壓法

與傳統(tǒng)方法相比，中壓硅膠柱層析純化厚樸酚具有操作簡便、分離速度快、分離效果好、生產(chǎn)成本低、有機溶劑揮發(fā)少等優(yōu)點，可用于工業(yè)化生產(chǎn)。杜會茹等以展開劑比例、硅膠量和體積流量為影響因素，以厚樸酚質(zhì)量為評價指標，用Box-Behnken響應(yīng)面法優(yōu)化純化工藝。結(jié)果表明，最佳條件為展開劑比例50%，硅膠量70 g，體積流量30 mL/min，厚樸酚質(zhì)量1.174 2 g，與預(yù)測值（1.176 0 g）接近。黃文杰等考察洗脫液比例、洗脫流速、負載樣品量對純度大于98%厚樸酚的得率影響。當洗脫液為乙酸乙酯與石油醚（體積比1∶1）、洗脫流速30 mL/min、負載樣品量50 g時，分離得到純度98%厚樸酚的產(chǎn)率為59.43%。提取純化工藝可有效提高厚樸酚的純度和收率，且回收的洗脫液經(jīng)簡單干燥、比重校正后可重復(fù)使用，不會造成環(huán)境污染。

2.3 萃取-沉淀-結(jié)晶法

蘇德輝采用選擇性萃取、選擇性沉淀和結(jié)晶方法從厚樸乙醇提取物中純化厚樸酚。用環(huán)己烷提?。弦罕葹?∶6），提取時間為30 min，提取溫度60℃，沉淀劑水∶乙醇為1∶2，萃取和厚樸酚的乙醇水溶液為乙醇∶水=11∶10，萃取厚樸酚的乙醇水溶液為乙醇∶水=16∶10，厚樸酚結(jié)晶溶劑為乙酸乙酯，和厚樸酚的結(jié)晶溶劑為環(huán)己烷。在此條件下，從450 g厚樸皮（厚樸酚含量1.71%，和厚樸酚含量0.68%）中得到2.84 g厚樸酚（純度為98.57%），收率為36.91%。同時得到0.97 g和厚樸酚（純度為98.55%），收率為31.55%。

3 結(jié)語

厚樸是藥食同源植物，厚樸酚與和厚樸酚是其主要有效成分。根據(jù)厚樸酚與和厚樸酚的不同性質(zhì)，采用多種提取純化方法，雖然取得較好的提取率和純化率，但仍存在一定的不足，例如提取成本高、環(huán)境污染等。今后，就對厚樸酚與和厚樸分的提取和純化進行更為深入的研究，找到既經(jīng)濟又可行的提取純化工藝，為厚樸提取的工業(yè)化和規(guī)范化奠定數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。