二次免疫在豬瘟活疫苗免疫效果中的應(yīng)用

謝馨梅

（廣西柳城縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 545200)

1 概念闡述

所謂二次免疫是指動(dòng)物免疫系統(tǒng)遭受某類外來病原（或抗原）初次入侵刺激后，促使機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生記憶效應(yīng)。一般而言，初次免疫應(yīng)答的速度較慢，長(zhǎng)達(dá)數(shù)周時(shí)間才能清除抗原，且抗原清除可能不徹底，產(chǎn)生的有效抗體也會(huì)逐漸下降，并維持在適當(dāng)水平。當(dāng)二次免疫抗原再次入侵豬體，由于之前其體內(nèi)已產(chǎn)生一部分抗體能識(shí)別該抗原，其免疫系統(tǒng)會(huì)快速響應(yīng)，并分泌大量抗體快速清除體內(nèi)豬瘟抗原，此過程包括抗原遞呈、淋巴細(xì)胞活化、免疫分子形成及免疫效應(yīng)發(fā)生等一系列被動(dòng)免疫反應(yīng)。二次免疫的作用原理是繼初次免疫形成記憶細(xì)胞后，再次以特定抗原刺激促進(jìn)倍數(shù)分裂，產(chǎn)生效應(yīng)T 細(xì)胞和漿細(xì)胞來增強(qiáng)對(duì)抗抗原的能力；特點(diǎn)是強(qiáng)度更強(qiáng)、更迅速、持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)[1-2]。

2 豬瘟活疫苗的選用

目前，國(guó)內(nèi)市場(chǎng)對(duì)癥防控豬瘟主要使用豬瘟活疫苗(I) -乳兔苗、豬瘟活疫苗(II) -細(xì)胞苗、豬瘟活疫苗(I) -脾淋苗等3 種疫苗。為確保上述疫苗能正常產(chǎn)生免疫應(yīng)答，同時(shí)盡量減少免疫應(yīng)激反應(yīng)（免疫失?。?，要注意結(jié)合實(shí)際揚(yáng)長(zhǎng)避短、正確選擇和使用疫苗。

2.1 乳兔苗

該苗宜作肌肉或皮下注射。該疫苗適宜保存溫度為-15℃以下、避光保存，有效期為12 個(gè)月。疫苗稀釋后，也要放在冷鏈設(shè)備（冷藏包/冷藏箱）內(nèi)運(yùn)輸及保存，嚴(yán)禁結(jié)凍或反復(fù)凍融。一般情況下，若當(dāng)?shù)貧鉁卦?5℃左右，稀釋后應(yīng)在6h內(nèi)用完；若當(dāng)?shù)貧鉁貫?5～27℃，最好在3h 內(nèi)用完，否則可能導(dǎo)致疫苗降效或失效。疫苗接種時(shí)間節(jié)點(diǎn)最好是進(jìn)食后或進(jìn)食前2～3h。遵照瓶簽注明頭份以無菌生理鹽水稀釋（1mL/頭份），大小豬均為1mL。禁止與菌苗同時(shí)注射，以免互相干擾、招致免疫失敗。個(gè)別豬接種疫苗后可能發(fā)生輕微不良反應(yīng)，如“食欲下降、暫時(shí)不食、精神委頓、嗜睡、輕微皮膚色變”等，這個(gè)過程通常在2～3 天后可自行恢復(fù)，如有過敏反應(yīng)，嚴(yán)重者可考慮注射腎上腺素施救。

2.2 細(xì)胞苗

該疫苗適用于大小豬普免。養(yǎng)殖者按標(biāo)簽注明的用法用量稀釋后作皮下或肌內(nèi)注射（1 頭份/mL），接種注射后1 周左右產(chǎn)生免疫應(yīng)答（抗體），免疫期為12 個(gè)月。要注意該疫苗應(yīng)在-15℃以下保存，可保證有效期達(dá)18 個(gè)月左右，高于-15℃保存或縮短有效期或?qū)е陆敌?、失效。豬瘟流行期不宜使用該疫苗，稀釋后的疫苗也應(yīng)冷鏈保存，禁止置放于常溫環(huán)境或反復(fù)凍融，并限于2h 以內(nèi)用完，超出2h 勉強(qiáng)使用可致免疫失敗或致不良應(yīng)激。近年規(guī)?；B(yǎng)豬實(shí)踐認(rèn)為，斷奶前仔豬每頭接種4 頭份疫苗有利于避免母源抗體干擾；育成豬二次免疫每頭接種2～4 頭份效價(jià)成績(jī)最佳。

2.3 脾淋苗

該苗用法為肌肉或皮下注射。首免或二免使用時(shí)遵循瓶簽注明頭份用無菌生理鹽水按1mL/頭份稀釋，大小豬均1mL。該苗宜在-15℃以下避光保存，有效期為12 個(gè)月；疫苗稀釋后應(yīng)放在冷藏設(shè)備內(nèi)保存，嚴(yán)禁反復(fù)凍融使用；室溫條件下最好在2h 內(nèi)用完，氣溫在15～27℃區(qū)間應(yīng)在3h 內(nèi)用完；最佳注射節(jié)點(diǎn)是進(jìn)食后或進(jìn)食前2～3h。

2.4 注意事項(xiàng)

上述3 種疫苗若在非豬瘟流行區(qū)，對(duì)無母源抗體的幼豬可在斷奶后注射一次疫苗。如處于豬瘟高風(fēng)險(xiǎn)或流行區(qū)域，二次免疫非常必要且非常有效。無論首免或二免，被注射豬必須健康，營(yíng)養(yǎng)不良、高燒發(fā)熱、食欲缺乏等均不宜注射，勉強(qiáng)接種可能導(dǎo)致免疫失敗甚至死亡。疫苗接種所用器械用前嚴(yán)格消毒，堅(jiān)持“1 畜1 針頭”原則，禁止用一顆注射針頭普注整群豬。

3 二次免疫效果影響因子

3.1 疫苗質(zhì)量或貯存不當(dāng)

豬瘟疫苗的質(zhì)量決定其免疫效果，疫苗質(zhì)量受到存儲(chǔ)環(huán)境影響較大，豬瘟疫苗要長(zhǎng)期貯存必須保證環(huán)境溫度低于-15℃，在該環(huán)境下可保存1.5年；但疫苗會(huì)受環(huán)境溫度影響較大，如在0～8℃冷藏環(huán)境時(shí)保質(zhì)期僅為6 個(gè)月，在8～25℃溫度下有效期短至10d，因此，在使用疫苗時(shí)應(yīng)重視疫苗貯存溫度對(duì)疫苗質(zhì)量的影響，嚴(yán)防因溫度處理不當(dāng)導(dǎo)致疫苗質(zhì)量下降或失效。疫苗的注射操作也是導(dǎo)致疫苗價(jià)效的一個(gè)重要影響因素，如在注射器械消毒不嚴(yán)造成有野毒再次污染，不正確使用質(zhì)量差或過期疫苗等也會(huì)直接影響疫苗免疫效果[3]。

3.2 個(gè)體不適

影響免疫效價(jià)的常見原因之一是由于待免畜個(gè)體差異，其中一部分過敏體質(zhì)（亞健康、隱性感染）的豬接種疫苗后不但不會(huì)產(chǎn)生政策免疫應(yīng)答，還可能導(dǎo)致免疫失敗或死亡。適免豬是經(jīng)四診檢查確認(rèn)絕對(duì)健康或假定健康的豬，病豬（陽性豬）、近期康復(fù)豬、臨產(chǎn)母豬、母源抗體保護(hù)豬、受傷豬等均不宜接種疫苗。

3.3 免疫程序不合理

實(shí)踐中，免疫程序不合理、免疫接種時(shí)機(jī)把握不當(dāng)，會(huì)使本次疫苗接種效果受到母源抗體或異源抗體的干擾。如過早對(duì)30 日齡以內(nèi)仔豬進(jìn)行豬瘟疫苗接種，此時(shí)仔豬母源抗體較高，會(huì)直接影響免疫接種，導(dǎo)致無法產(chǎn)生免疫應(yīng)答反應(yīng)；過遲免疫接種，母源抗體已無法保護(hù)豬群，很可能會(huì)造成豬群發(fā)病。因此，豬場(chǎng)要制定實(shí)施切合自場(chǎng)實(shí)際的豬瘟疫苗免疫程序，科學(xué)確定免疫日期、免疫時(shí)機(jī)及適免對(duì)象等。

3.4 缺失必要的抗體監(jiān)測(cè)

無論首免或二次免疫的有效性皆以抗體檢測(cè)結(jié)果為準(zhǔn)，整場(chǎng)豬群的抗體檢測(cè)合格率常年達(dá)75%以上為安全有效。因此，豬場(chǎng)應(yīng)重視疫苗接種后的抗體抽樣檢測(cè)，通過整群隨機(jī)、有計(jì)劃的抽樣檢測(cè)及時(shí)了解豬瘟疫苗接種后的實(shí)際效價(jià)產(chǎn)生情況，以此判斷當(dāng)前豬群免疫接種豬瘟活疫苗后產(chǎn)生的抗體能否抵御豬瘟病毒的侵襲。

3.5 免疫抑制疾病（PRRS) 危害

豬繁殖和呼吸綜合征會(huì)直接導(dǎo)致豬群免疫力低下，直接影響到接種免疫應(yīng)答產(chǎn)生免疫保護(hù)，豬繁殖和呼吸綜合征對(duì)豬群最為明顯的危害是使肺泡巨噬細(xì)胞嚴(yán)重受損，并導(dǎo)致循環(huán)淋巴細(xì)胞和黏膜纖毛對(duì)巨噬細(xì)胞的祛除作用，直接抑制免疫力，導(dǎo)致病豬較易感染各種疾病或繼發(fā)相關(guān)感染。

3.6 母源抗體的影響

母源抗體是母豬體內(nèi)分泌的一種保護(hù)新生仔豬的重要物質(zhì)，可對(duì)仔豬體質(zhì)有較好的疾病防御和保護(hù)能力，但該物質(zhì)具有典型的雙重性，除了保護(hù)仔豬外，還能對(duì)免疫效果產(chǎn)生不利影響，因此，在對(duì)仔豬進(jìn)行免疫接種時(shí)，應(yīng)充分考慮仔豬體內(nèi)母源抗體滴度對(duì)免疫效果的影響。如在免疫接種時(shí)，仔豬體內(nèi)的母源抗體滴度含量較高，此時(shí)，疫苗病毒會(huì)被母源抗體中和直接導(dǎo)致免疫失敗，不能發(fā)揮出疫苗應(yīng)有的保護(hù)作用。

3.7 藥物影響

一般來說，在接種弱毒疫苗前后禁止抗菌、抗病毒等相關(guān)藥物。因?yàn)槿缑顾鼗蛩沫h(huán)素等藥物的使用可對(duì)豬瘟抗體的生產(chǎn)產(chǎn)生抑制作用，明顯抑制T、B 淋巴細(xì)胞的轉(zhuǎn)化，進(jìn)而對(duì)疫苗接種效果產(chǎn)生不良影響，同時(shí)，抗病毒藥物的使用可直接殺死疫苗的弱毒病株，不能有效發(fā)揮疫苗免疫應(yīng)答反應(yīng)。

3.8 飼養(yǎng)管理的影響

飼養(yǎng)管理可直接對(duì)豬群生長(zhǎng)環(huán)境產(chǎn)生不同影響，如飼養(yǎng)密度高、舍內(nèi)空氣流通不暢直接導(dǎo)致舍內(nèi)空氣中的有害氣體含量偏高，導(dǎo)致豬群長(zhǎng)期遭受不良環(huán)境的刺激，致使免疫反應(yīng)下降，導(dǎo)致免疫失敗。

4 應(yīng)對(duì)策略

4.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

仔豬健康情況直接對(duì)免疫接種有較大影響，健康良好的仔豬可以在較短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生較好的免疫力，但體質(zhì)瘦弱、營(yíng)養(yǎng)狀況欠佳、應(yīng)激反應(yīng)大或有慢性疾病的仔豬，在注射疫苗后產(chǎn)生的免疫效果比較差。因此，提高豬群健康體質(zhì)是加強(qiáng)飼養(yǎng)管理重要的內(nèi)容。在飼養(yǎng)管理中，加強(qiáng)豬群飼養(yǎng)密度、溫濕度、通風(fēng)情況、光照時(shí)間、飼料營(yíng)養(yǎng)含量等管理工作，以保證豬群有一個(gè)良好的生活環(huán)境，提高豬群健康水平，進(jìn)而讓豬群保持良好體質(zhì)。同時(shí)，技術(shù)人員應(yīng)承擔(dān)防疫工作責(zé)任，及時(shí)做好免疫工作，并做好記錄和歸檔。養(yǎng)豬場(chǎng)技術(shù)人員應(yīng)及時(shí)了解豬的健康狀況，發(fā)現(xiàn)免疫失敗時(shí)，應(yīng)及時(shí)對(duì)免疫接種過程中存在的問題進(jìn)行分析，以便采取有效的彌補(bǔ)措施。

同時(shí)，確保飼料有較好的質(zhì)量、均衡的營(yíng)養(yǎng)成分及充足的供給量，在提供高質(zhì)量飼養(yǎng)條件的同時(shí)還應(yīng)嚴(yán)禁使用發(fā)霉變質(zhì)飼料和各種飼料原料等，特別要防止飼料中的玉米霉變，引發(fā)豬瘟免疫失敗或免疫效果降低。強(qiáng)化生物安全管理舉措，有效預(yù)防外來病原通過引種的方式感染本場(chǎng)豬群，堅(jiān)持自繁自養(yǎng)的飼養(yǎng)策略。對(duì)飼養(yǎng)區(qū)采取規(guī)范的消毒、預(yù)防和檢疫措施，嚴(yán)防病原在場(chǎng)內(nèi)傳播流行。同時(shí)，加強(qiáng)豬群飼養(yǎng)密度、溫濕度、光照時(shí)間、空氣流通等方面的管理，為豬群生長(zhǎng)提供一個(gè)較為良好的生長(zhǎng)發(fā)育條件。只要嚴(yán)格執(zhí)行良好的自繁自養(yǎng)和防疫措施，才能促進(jìn)生豬生產(chǎn)取得較好的經(jīng)濟(jì)效益。

4.2 確保疫苗質(zhì)量

不合格的疫苗質(zhì)量是導(dǎo)致抗體水平低或免疫失敗的直接原因。因此，首免和二免要把好疫苗質(zhì)量控制三關(guān)：一是疫苗購(gòu)買關(guān)，選擇有資質(zhì)的生產(chǎn)廠家，豬瘟疫苗經(jīng)效檢合格后出廠，并經(jīng)正規(guī)渠道購(gòu)進(jìn)。二是冷鏈運(yùn)輸關(guān)，疫苗運(yùn)輸環(huán)節(jié)全程按規(guī)定采取冷藏處置，確保疫苗質(zhì)量穩(wěn)定、不變質(zhì)失效。三是疫苗使用關(guān)，在使用期間注意全程冷藏保管，盡量保證疫苗質(zhì)量。禁止使用日光暴曬、疫苗包裝破損、潮解、失真空等因素造成變質(zhì)的疫苗。規(guī)范疫苗接種注射操作，嚴(yán)禁“打飛針”，原則上禁止將兩種以上疫苗同時(shí)接種，以注射豬瘟單苗效果較好，盡量不使用多聯(lián)疫苗。

4.3 規(guī)范使用疫苗

疫苗在稀釋后效價(jià)快速下降，如在15～30℃溫度環(huán)境中，可在3h 內(nèi)變得無效。因此，在常規(guī)免疫接種過程中，應(yīng)嚴(yán)格按照免疫操作流程開展接種，使用的稀釋劑應(yīng)置于4～8℃冰箱預(yù)冷，稀釋后的疫苗應(yīng)保存于適合溫度的冰箱內(nèi)，并在1～2h內(nèi)注射完畢。在注射過程中，禁止使用碘酊或其他消毒劑對(duì)針頭進(jìn)行滅菌消毒，注射部位在消毒完畢后應(yīng)進(jìn)行擦拭干凈再進(jìn)行注射，以避免消毒劑對(duì)疫苗有不良影響。禁止使用不匹配的針頭，并防止打飛針，以避免滅活疫苗受影響或注射劑量出現(xiàn)誤差，導(dǎo)致免疫失敗。注射豬瘟病毒疫苗后可能會(huì)在豬體出現(xiàn)優(yōu)勢(shì)株現(xiàn)象，豬瘟疫苗注射后變成帶毒傳播，導(dǎo)致豬瘟疫情暴發(fā)。

4.4 選擇適宜的免疫規(guī)程

豬瘟免疫正常的母豬，生產(chǎn)后的仔豬均可通過吸食初乳獲取母源抗體，這些母源抗體可有效避免仔豬感染豬瘟等相關(guān)疾病。3～5 日齡的仔豬其母源抗體的中和價(jià)效一般為1∶64～1∶128，此時(shí)免疫力較強(qiáng)，很少感染疾??；生長(zhǎng)至20～25 日齡時(shí)，如果體內(nèi)母源抗體中和在1∶32 以上時(shí)，其保護(hù)率高達(dá)75%以上，可保護(hù)仔豬免受豬瘟的強(qiáng)毒性侵?jǐn)_。但隨仔豬日齡的增長(zhǎng)，其身體內(nèi)的母源抗體滴度降低，此時(shí)身體抵抗力也受到不同程度的影響。因此，建議仔豬在25～30 日齡時(shí)可考慮進(jìn)行首免，每頭仔豬可使用豬瘟細(xì)胞苗4 頭份或豬瘟脾淋苗1 頭份的量劑進(jìn)行接種；生長(zhǎng)至60～70 日齡時(shí)，可考慮對(duì)豬群進(jìn)行二次免疫，量劑參考首免。特別是在豬瘟暴發(fā)嚴(yán)重或多發(fā)威脅區(qū)域的飼養(yǎng)戶可考慮在以上基礎(chǔ)上提前進(jìn)行免疫接種，量劑酌情參考上一次注射量劑。母豬可在產(chǎn)后20～25d 進(jìn)行豬瘟補(bǔ)免。種用公豬可考慮在每年春秋兩季各進(jìn)行免疫接種，量劑按照豬瘟細(xì)胞苗5頭份或豬瘟脾淋苗1 頭份進(jìn)行，可使豬群得到較好的免疫保護(hù)。

4.5 遵守藥物使用規(guī)范

在日常使用的獸藥中有眾多獸藥對(duì)機(jī)體B 淋巴細(xì)胞增殖有抑制作用，如卡那霉素、氟苯尼考、利巴韋林、磺胺類等藥物，這些藥物可對(duì)病毒性疫苗有重大影響，直接影響免疫效果，特別是在免疫接種前后這段時(shí)間，使用這些藥物可直接導(dǎo)致豬體白細(xì)胞數(shù)量減少，對(duì)免疫接種應(yīng)答反應(yīng)產(chǎn)生不良影響。

4.6 減少免疫抑制性疾病帶來的影響

抑制免疫接種的疾病很多，這類疾病一旦感染豬群可導(dǎo)致免疫器官遭受破壞，致使免疫接種失敗，主要包括豬圓環(huán)病、豬繁殖和呼吸綜合征、豬偽狂犬病、豬哮喘等免疫抑制性疾病。因此，在養(yǎng)豬生產(chǎn)中應(yīng)根據(jù)本場(chǎng)實(shí)際疫情防控情況，科學(xué)合理的制定有針對(duì)性的免疫規(guī)程，充分考慮本場(chǎng)某些疾病預(yù)防和控制等實(shí)際情況，預(yù)估與分析本場(chǎng)內(nèi)的豬瘟免疫情況、母源抗體檢測(cè)水平、免疫應(yīng)答效果、隱性臨床感染情況及疫苗實(shí)際價(jià)效等情況，以更好地確定有針對(duì)性的免疫接種規(guī)程。同時(shí)，在接種時(shí)還應(yīng)充分考慮母豬的分娩高峰季節(jié)、疫病暴發(fā)高峰期等實(shí)際情況，結(jié)合抗體水平進(jìn)行有針對(duì)性的豬瘟免疫，最大限度地減少豬瘟疾病帶來的損失。