防風化學成分藥理作用研究進展及質量標志物預測分析△

常潞，荊文光，程顯隆，魏鋒*，馬雙成*

1.中國藥科大學 中藥學院，江蘇 南京 211198；

2.中國食品藥品檢定研究院，北京 100050

防風為傘形科植物防風Saposhnikovia divaricate（Turcz.）Schischk.春、秋二季采挖未抽花莖植株的干燥根，載于《神農本草經》，被列為上品，有祛風解表、勝濕、止痛止痙的功效，在臨床上的應用非常廣泛，常用于治療皮膚病、偏正頭痛、消化系統(tǒng)疾病、胃病、呼吸系統(tǒng)疾病、面癱、乳癰癥、內臟脫垂、目眩、耳鳴等多種疾病[1]。防風按生產方式可分為野生防風、仿野生防風和栽培防風。野生防風主產于黑龍江、吉林、遼寧、河北、山東、內蒙古等地；仿野生栽培防風主要集中在內蒙古和黑龍江；栽培防風種植區(qū)域廣泛，山東、河南、甘肅、黑龍江等地均有種植，河北是目前栽培防風的主要產地[2]。目前，隨著野生防風資源逐漸匱乏，栽培防風成為市場上的主流品種，按栽培方式可分為籽播品和秧播品。由于生產方式不同、栽培年限不一，市場上的防風質量良莠不齊，特別是部分栽培品性狀與傳統(tǒng)野生防風性狀差異極大，而《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》）2020 年版的質量控制指標亦不足以區(qū)分不同質量的防風。

按傳統(tǒng)“辨狀論質”評價，防風多以頭節(jié)堅如蚯蚓頭者為好或以黃色而潤者為佳，其外在性狀描述具有抽象性，因此十分有必要通過全面總結防風內在的化學成分，進一步尋找既能體現傳統(tǒng)“辨狀論質”內涵又能真正代表防風質量的標志物，這對于防風藥材和飲片的質量提升具有重大的現實意義。

劉昌孝院士于2016 年提出了質量標志物（quality marker，Q-marker）的全新概念，并將其用于多種中藥的質量評價與質量控制，明確了篩選Qmarker 的五原則：特有性、有效性、傳遞與溯源、可測性、配伍環(huán)境，為中藥質量評價提供了新的思路和方法[3]。但中藥質量特別是作為原料的中藥材質量的形成過程是一個復雜的體系，道地性和生產規(guī)范性是其質量形成的關鍵，在傳統(tǒng)藥效物質尚不明確的情況下，牢牢把握道地性和生產規(guī)范性亦是保證中藥材質量的重要手段?；诖耍疚膹闹兴幉馁|量形成過程中的關鍵要素出發(fā)，結合Q-marker 的篩選原則，對防風化學成分和藥理作用的研究進展進行歸納總結，并對防風的Q-marker 進行預測分析，以期為其質量控制研究提供參考。

1 化學成分

防風的化學成分主要包括色原酮類、香豆素類、多糖類和揮發(fā)油類，目前已見報道的化學成分包括香豆素類41 個、色原酮類22 個、多糖類9 個、有機酸類7個、聚乙炔類2個、甾醇類4個、腺苷類1個、嘧啶類1 個、酯類3 個和生物堿類1 個。此外，防風中還含有一些甘油酯類成分、揮發(fā)油、微量元素等。

1.1 色原酮類

色原酮類成分是防風發(fā)揮解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎的主要活性成分，也是防風中備受關注的一類成分。Liu等[4]使用制備型高速逆流色譜從防風中分離得到4個色原酮類化合物茅亥酚苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷和3'-O-glucosylhamaudol。Ma等[5]在防風70%甲醇提取部位中分離得到2 個新的色原酮苷類化合物，分別為(3'S)-3'-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranosyl hamaudol 和(2'S)-4'-O-β-Dapiofuranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranosyl visamminol。Yang等[6]總結了防風中鑒定出的17 個色原酮類化合物，其中3-O-乙酰亥茅酚、升麻素、升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇和5-O-甲基維斯阿米醇苷為主要成分。目前，已經從防風中分離得到了22 個色原酮類成分[4-15]，見表1和圖1。

圖1 防風中的色原酮類化合物結構

表1 防風中的色原酮類成分

1.2 香豆素類

香豆素類成分是防風中另一類主要藥效成分，按其母核結構主要為簡單香豆素、呋喃香豆素和二氫呋喃香豆素。Kim等[11]從防風的乙酸乙酯部分中分離得到9 個香豆素類化合物，并首次分離得到了1 個呋喃香豆素類化合物nodakenin。趙博等[16]首次從防風的甲醇提取物中分離得到4 個香豆素類化合物，分別為異香柑內酯、紫花前胡素、5-甲氧基-7-(3,3-二甲基烯丙氧基)-香豆素、紫花前胡醇當歸酰酯。目前，從防風中分離得到的香豆素類化合物[8-14,16-19]見表2和圖2。

圖2 防風中部分香豆素類成分結構

表2 防風中的香豆素類成分

1.3 揮發(fā)油類

防風中含有大量揮發(fā)油類成分，且以萜類、脂肪烴、烯烴和芳香烴類為主，顯示出抗炎、止血作用[20]。陳勇等[21]采用氣相色譜-質譜法（GC-MS）對防風揮發(fā)油進行分析，從中鑒定出45 個揮發(fā)油類成分。Yu等[22]使用GC-MS 從防風中分離鑒定了39 個揮發(fā)油類化合物。嚴云麗等[23]采用GC-MS 分別鑒定出防風中52 個、關防風中53 個、西防風中48 個、口防風中49 個揮發(fā)油類化合物，除去共有峰，共鑒定出69 個化合物，主要為萜類和鏈狀脂肪族化合物。

1.4 多糖類

多糖是由單糖連接而成的多聚物，因其具有多種生物活性而成為當前研究的熱點。防風多糖在不同產地樣品中含量略有差異，總多糖在藥材中質量分數為1.5%～2.5%。Shimizu等[24]從防風中分離得到2種均一多糖，分別為saponikovan A和saponikovan C。其中saponikovan A 的單糖組成為D-半乳糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖醛酸（摩爾比6∶15∶10）；saponikovan C的單糖組成為D-半乳糖醛酸、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖（摩爾比為27∶7∶8∶8）。王松柏等[25]分離并鑒定了2 個新的酸性雜多糖SPSa和SPSb，并給出兩者單糖組成及摩爾比。戴晶晶等[26]分離鑒定了2 個多糖SPS0 和SPS1，其中SPS0 是一種具多分枝結構的酸性多糖；SPS1 是一種含β-D-吡喃環(huán)的均一多糖，熱穩(wěn)定性較高。Dong等[27]從防風中分離鑒定得到2 個多糖類成分SDNP-1 和SDNP-2。SDNP-1和SDNP-2 由摩爾比約為1∶1 的阿拉伯糖和半乳糖組成。推斷其為具有不同相對分子質量和主鏈的AGⅡ型阿拉伯半乳聚糖。其中，SDNP-2 的主鏈主要由(1→3)-和(1→6)-連接的Galp殘基組成，摩爾比約為1∶3。生物活性評價表明，SDNP-1 有顯著的免疫抑制拮抗作用。多糖類成分是防風發(fā)揮免疫增強作用和抗腫瘤作用的主要活性成分。

1.5 其他類

防風中還含有20 個其他類成分，包括7 個有機酸類、2個聚乙炔類、4個甾醇類、1個腺苷類、1個嘧啶類、3個酯類、1個糖醇類和1個生物堿類成分，見表3。

表3 防風中其他類化合物

2 藥理作用

2.1 解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎作用

祛風解表、勝濕止痛是防風的傳統(tǒng)功效。眾多學者利用現代藥理學方法針對防風解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎等活性做了大量研究工作。楊波等[29]通過乙酸致小鼠扭體實驗、小鼠耳腫脹實驗及2,4-二硝基苯酚致熱實驗探究防風CO2超臨界流體提取物的有效性，結果表明，防風CO2超臨界提取物有鎮(zhèn)痛、抗炎、解熱作用。薛寶云等[30]采用酵母致熱法、乙酸致痛法、溫熱致痛法及二甲苯致炎法分別研究了防風中升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎及抗血小板聚集作用，證明2 個色原酮苷類化合物均可降低大鼠體溫，使乙酸致大鼠扭體次數減少，提高溫熱痛閥，減輕二甲苯引起的耳腫脹，對腺苷二磷酸（ADP）誘導的血小板聚集有明顯的抑制作用，具有良好的解熱、鎮(zhèn)痛、抗炎及抗血小板聚集作用，與防風的傳統(tǒng)功效相符合。

趙娟等[31]研究了防風色原酮提取物對大鼠膠原誘導性關節(jié)炎的作用，結果表明，防風色原酮提取物能控制大鼠膠原誘導性關節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展，其機制可能與抑制促炎細胞因子有關。Kong等[32]研究結果表明，防風色原酮類提取物通過降低膠原誘導性關節(jié)炎大鼠關節(jié)滑膜和軟骨中核轉錄因子-κB（NF-κB）水平，抑制磷酸化的細胞外調節(jié)蛋白激酶（p-ERK）、磷酸化氨基末端蛋白激酶（p-JNK）和磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38 抗體（p-p38）的表達發(fā)揮抗炎作用。戴錦娜[33]采用角叉菜膠致大鼠足腫脹急性炎癥模型和大鼠佐劑性關節(jié)炎慢性炎癥模型，系統(tǒng)考察了防風的抗炎作用，結果表明，防風能顯著抑制角叉菜膠引起的大鼠急性足腫脹，且大劑量的防風對佐劑性關節(jié)炎大鼠繼發(fā)性足腫脹即免疫反應性炎癥有顯著的抑制作用。Wang等[34]采用異硫氰酸熒光素致敏誘導制備特應性皮炎小鼠模型，探究玉屏風散抗過敏性炎癥的機制，證明玉屏風散中的防風可能通過調節(jié)NF-κB-胸腺間質淋巴細胞生成素/白細胞介素-33（NF-κB-TSLP/IL-33）通路減輕特應性皮炎初期的過敏性炎癥。Li等[35]采用膠原誘導性關節(jié)炎大鼠模型結合超高效液相色譜-四級桿飛行時間質譜法，研究防風湯對膠原誘導性關節(jié)炎大鼠的藥效學作用及其作用機制，結果表明，防風湯通過調節(jié)色氨酸代謝、甘油磷脂分解代謝、初級膽汁酸生物合成和脂肪酸代謝起到有效緩解風濕性關節(jié)炎的作用。

王長林等[36]研究結果表明，荊芥、防風2味藥物單獨應用具有一定的抗炎、解熱鎮(zhèn)痛和抑制家兔離體腸管蠕動作用。兩藥配合應用則顯示出明顯的協(xié)同作用，抗炎、解熱鎮(zhèn)痛作用更為明顯；毒性實驗結果表明2味藥物臨床使用安全。

2.2 抗過敏作用

在中醫(yī)臨床實踐中，過敏性疾病與風邪、毒邪及體質密切相關，防風作為祛風良藥，在眾多治療過敏性疾病的中成藥中均有使用，說明防風配合其他中藥使用具有一定的抗過敏作用。陳子珺等[37]采用離體器官實驗法、血清藥理學及整體動物實驗法研究防風的抗過敏作用，結果顯示，防風-刺蒺藜（1∶1）合煎劑能顯著抑制組胺所致的豚鼠離體器官平滑肌收縮，且防風對組胺所致的藥物性哮喘及卵白蛋白所致的過敏性休克有一定的緩解作用。吳賢波等[38]采用胰蛋白酶刺激小鼠肥大細胞瘤細胞P815的方法制備肥大細胞脫顆粒模型，研究防風抗過敏作用的機制，結果表明防風醇提物可能通過抑制蛋白酶激活受體-2（PAR-2）表達、阻斷肥大細胞脫顆粒、選擇性減少相關細胞因子分泌，繼而抑制肥大細胞“瀑布效應”，發(fā)揮抗過敏作用。耿玉梅等[39]采用免疫因子水平變化考察防風多糖對卵蛋白致大鼠過敏性鼻炎模型的治療作用，證明防風多糖可通過下調過敏性鼻炎大鼠血清中IL-4、IL-5 水平，上調可溶性二聚體細胞因子γ-干擾素（IFN-γ）、IL-12 水平，調節(jié)輔助性T 細胞1/2（Th1/Th2）淋巴細胞亞群平衡和機體免疫應答，減輕鼻黏膜充血炎癥，起到抗過敏性鼻炎的作用，作用機制可能是抑制免疫因子的生成和釋放。Jia等[40]通過建立G 蛋白耦聯受體X2-細胞膜色譜-高效液相色譜-離子阱-飛行時間質譜法（MRGPRX2-CMC-HPLC-IT-TOF-MS）對防風中抗過敏成分進行篩選和鑒定，結果顯示防風中的升麻素、升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷對致敏豚鼠離體氣管收縮、回腸平滑肌過敏性收縮及2,4-二硝基氯苯所致的遲發(fā)型超敏反應均具有明顯抑制作用。Yu等[41]研究了防風提取物對過敏性接觸性皮炎模型小鼠的影響及其發(fā)揮作用的機制，結果表明，防風80%乙醇提取物能阻止幼稚T 細胞向Th1分化，抑制IFN-γ和T-bet mRNA 在淋巴細胞中的表達，可有效治療小鼠過敏性接觸性皮炎。

2.3 抗腫瘤作用

Ding等[42]研究了防風多糖對人組織細胞淋巴瘤細胞U937，人乳腺癌細胞MCF-7、MDA-MB-231的生長，以及小鼠MDA-MB231 細胞異種移植模型中腫瘤生長的影響，研究結果表明防風多糖可能是一種潛在的乳腺癌抑制劑。李莉等[43]研究表明，防風在體內可抑制骨肉瘤細胞S180 移植瘤生長。孫曉紅等[44]采用電子顯微鏡、流式細胞儀、DNA 末端原位標記染色法等，觀察防風對胃癌細胞SGC-7901生長的抑制作用及作用機制，證明防風對SGC-7901細胞生長的抑制作用隨濃度和時間的增加而增強，其既可誘導SGC-7901 細胞凋亡，也可直接殺死腫瘤細胞。Tai等[45]在體外研究防風70%乙醇提取物對白血病和乳腺癌細胞的作用，結果表明，防風70%乙醇提取物與較低濃度的喜樹堿或紫杉醇的組合可以獲得與高濃度喜樹堿或紫杉醇相當的抗腫瘤細胞增殖活性。Kuo等[46]檢測了防風乙醇提取物對K562、Raji、Wish、HeLa、Calu-1 和Vero 細胞增殖的影響，研究防風乙醇提取物的抗腫瘤作用，證明從防風提取物中純化得到的人參炔醇有較高的抗腫瘤活性，其作用可能與阻斷cyclin E mRNA 表達有關。而Rosskopf等[47]的研究表明防風中的香豆素在質量濃度高于100 μg·mL-1時顯示出良好的抗腫瘤活性。

2.4 抗氧化作用

多項研究表明，防風中分離出的多糖和香豆素類化合物，如升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、歐前胡素和石防風素等，具有顯著的抗氧化活性[48-49]。Tai等[45]研究結果表明，防風70%乙醇提取物對細菌脂多糖激活的RAW264.7 細胞具有抗氧化、抗炎和保護作用。張澤慶等[50]采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基清除實驗研究防風中多糖類成分的抗氧化作用，證明多糖類成分A-SPS 對羥基自由基和DPPH 自由基具有較強的清除作用。李麗等[51]采用Folin-Ciocalteu法測定防風不同提取物的總酚含量，并采用DPPH 法測定防風不同提取物的抗氧化活性，結果表明，超聲120 min 得到的防風80%乙醇提取物表現出很強的抗氧化活性，但其抗氧化活性與總酚含量沒有必然關系。鐘才寧等[52]利用DPPH法檢測防風揮發(fā)油的自由基清除率，表明防風揮發(fā)油類成分具有一定的自由基清除能力。孟瑤[53]從防風中分離得到了4 種多糖SDP1～SDP4，通過自由基清除實驗證明4 種防風多糖均能保護雙氧水（H2O2）損傷的RAW264.7細胞，保護作用呈劑量依賴性。

2.5 對血液系統(tǒng)的作用

防風在臨床上常與其他中藥配伍用于心血管系統(tǒng)疾病如卒中、高血壓等的治療，說明其復方制劑有祛風、通絡、活血等功效。高英等[54]研究結果表明，防風CO2超臨界流體提取物可縮短小鼠出血時間，縮短大鼠凝血酶原時間（PT）及活化部分凝血活酶時間（APTT），體現出促凝血作用。根據其延長大鼠優(yōu)球蛋白溶解時間（ELT）的趨勢，提示其可能有降低纖溶活性的作用。李文等[1]采用乙酸致炎法、抗凝血和血液流變學方法研究防風對小鼠血液的影響，表明防風有效部位有明顯的抗炎、降低血漿黏度、延長凝血酶原時間和抗血小板聚集作用。朱惠京等[55]研究防風正丁醇提取物對大鼠血液流變學的影響，結果表明防風正丁醇提取物可減低大鼠全血高切黏度、低切黏度、血漿黏度、纖維蛋白原含量、血球壓積及全血還原黏度，證明防風正丁醇提取物有一定的活血化瘀作用。吳禎久等[56]給小鼠腹腔注射防風正丁醇提取物，研究其抗凝作用，也得到類似結果。張曉穎[57]研究表明防風具有增強桃紅四物湯活血化瘀功能的作用。此外，也有研究表明防風正丁醇萃取物有一定抗血小板黏附及血栓形成的作用[58]。

2.6 調節(jié)免疫作用

防風水提取液和防風多糖有增強機體免疫功能的作用[59]，動物實驗結果顯示，防風不僅能提高小鼠的非特異性免疫，還對細胞免疫和體液免疫功能具有明顯的增強作用[60]。周勇等[61]通過比較防風多糖的體內和體外抑瘤作用研究防風多糖的免疫調節(jié)作用，結果表明其抑瘤作用是通過促進宿主免疫系統(tǒng)功能實現。黃健[62]采用黏膜免疫損傷小鼠研究防風多糖的免疫調節(jié)作用，研究證明防風多糖有較好的提高非特異性免疫的作用。Dong等[27]從防風中分離得到2個多糖SDNP-1和SDNP-2，采用RAW264.7細胞進行細胞活力測定，顯示多糖SDNP-2 對免疫抑制表現出強烈的拮抗作用，SDNP-1則沒有顯示出效果。王玲[63]研究發(fā)現防風提取物能顯著提高小鼠腹腔巨噬細胞吞噬百分率和吞噬指數，表明防風具有明顯增強機體免疫功能的作用。

2.7 其他作用

李高峰等[64]研究發(fā)現防風多糖能夠提高切除卵巢后骨質疏松大鼠的骨密度，其可能通過調節(jié)腫瘤壞死因子-α、IL-6 水平而發(fā)揮作用。黃亞男[65]研究結果，防風對三氧化二砷造成的大鼠組織病理損傷有一定程度的保護作用。姜超等[66]采用四氯化碳誘導小鼠急性肝損傷模型研究防風提取物對肝臟的保護作用，結果表明防風水提物和醇提物高劑量能顯著降低小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶、天冬氨酸氨基轉移酶活性，降低肝勻漿中丙二醛含量，提高超氧化物歧化酶活性，證明防風提取物具有一定的保肝作用，其作用機制可能與抗脂質過氧化有關。梁瑞峰等[67]采用大鼠腹瀉模型研究防風不同提取部位的止瀉作用，結果表明石油醚部位和正丁醇部位是其止瀉的活性部位，且兩者對腸道不同亞型的水通道蛋白（AQP）調控具有差異。譚許朋[68]采用感染后腸易激綜合征（PI-IBS）大鼠模型研究防風對腸黏膜機械屏障的影響及對Caco-2 細胞屏障的作用，結果表明防風有保護腸屏障的作用。

3 Q-marker預測分析

由于中藥成分復雜，品種多樣，且質量易受到種植、采收、加工等多種因素影響，導致中藥質量良莠不齊，難以監(jiān)管。為了進一步規(guī)范中藥質量研究及質量標準建立，劉昌孝等[3]提出了Q-marker 概念，即存在于中藥材或中藥產品（如中藥飲片、中藥煎劑、中藥提取物、中成藥制劑）中固有的或加工制備過程中形成的、與中藥功能屬性密切相關的化學物質，并以此作為反映中藥安全性和有效性的標示性物質。

防風主產于我國東北及華北地區(qū)，在陜西、甘肅、青海等地亦產[69]。過去防風的使用以野生品為主，隨著野生資源逐漸匱乏，大量習用品防風與栽培品防風涌進市場，藥材質量良莠不齊，對防風的規(guī)范使用造成了困難。王麗麗等[70]通過一測多評法測定了防風中4個色原酮類成分的含量。薛雪等[71]建立了防風中升麻素及4 個色原酮類成分含量之和的近紅外光譜預測模型，用于準確快速地預測防風中升麻素及4 個色原酮類成分含量之和。這些研究為防風的質量指標的選擇提供了依據，但真正能反映防風道地性、生產規(guī)范性的質量指標依然研究不足，亟待行之有效的質量評價策略和方法保障防風藥材、飲片的質量。本文基于中藥質量形成過程，結合Q-marker 篩選的原則及防風藥材自身特性，從道地性、生產規(guī)范性和真實性、藥效藥性關聯性及化學成分可測性這4 方面對防風的Q-marker 進行預測分析。

3.1 基于道地性的Q-marker預測分析

從古至今，防風的產地經歷了從南到北的遷移過程，因此目前防風沒有確切的道地產區(qū)。目前栽培防風占市場份額約90%，主產于河北、內蒙古。野生品占市場份額約10%，主產于內蒙古及東北地區(qū)。市場上認為產自內蒙古、黑龍江的防風品質較佳，因此認為內蒙古、黑龍江為防風的道地產區(qū)[72]。霍金海等[73]通過超高效液相色譜-飛行時間質譜法（UPLC-Q-TOF-MS/MS）結合主成分分析探究26 個道地產區(qū)及其他產地的78 批防風的質量差異性標記物，表明不同產地防風中5-O-甲基維斯阿米醇苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇、亥茅酚苷、3'-O-乙酰亥茅酚、3'-O-當歸酰亥茅酚、紫花前胡苷元含量差異較大，可作為防風產地區(qū)分的關鍵Q-marker。ledeouriellol、亥茅酚、補骨脂素、花椒毒素也可以在一定程度上表征關防風與其他產地防風的差異，可以作為質量差異標志物來鑒定關防風。郭駿騏等[74]以升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷作為標志物對來自吉林、河北、內蒙古的30 批防風飲片的質量等級進行了劃分，結果表明來自內蒙古的飲片質量較好。Batsukh等[75]采用液相色譜-質譜法（LC-MS）結合核磁共振（NMR）鑒定化合物結構，采用高效液相色譜法-二極管陣列檢測器（HPLC-DAD）檢測了44 批來自蒙古國和8 批來自中國的防風樣品，研究表明，蒙古國的防風樣品的升麻素苷含量顯著高于中國。因此，5-O-甲基維斯阿米醇苷、升麻素、升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇、亥茅酚苷、3'-O-乙酰亥茅酚、3'-O-當歸乙酰亥茅酚、紫花前胡苷元，ledeouriellol、亥茅酚、補骨脂素、花椒毒素可能是區(qū)分防風道地性的潛在的Q-marker。

3.2 基于生產規(guī)范性和真實性的Q-marker預測分析

《中國藥典》2020 年版中防風需以未抽薹的干燥根入藥，但市場上的商品防風?；煊幸恍┮殉檗返姆里L。為此，韓忠明等[76]通過在防風不同生長階段進行采樣檢測，發(fā)現其防風的升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚這4 個色原酮含量在抽薹后顯著下降，與未抽薹的防風有顯著差別，因此可將升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚這4 個色原酮作為鑒定未抽薹防風與抽薹防風的Q-marker。據報道，抽薹后的防風解熱作用僅為抽薹前的55%[77]。Wang等[78]以5-O-甲基維斯阿米醇苷和升麻素苷為指標建立了一個快速檢定不同產地、不同生長年限防風樣品的超高效液相色譜-紫外法（UHPLC-UV），并對結果進行非靶向代謝組學和化學計量學分析，研究結果表明2～3 年的關防風質量更佳。Yoshitomi等[15]采用液相色譜-高分辨質譜法（LC-HR-MS）代謝組學研究防風和前胡的特征性標志物，結果表明5-O-甲基維斯阿米醇苷為防風中的特有性物質，可以用來區(qū)分防風和前胡。王思淼等[79]采用UPLC-Q-TOF-MS/MS 對1、2、3 年生防風樣本進行檢測，并根據結果分析其香豆素類物質的積累規(guī)律，結果表明補骨脂素含量隨生長年限逐年增加，8-羥基補骨脂素在2 年生防風中含量最高。因此，升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、亥茅酚、8-羥基補骨脂素和補骨脂素可能是防風生產規(guī)范性和真實性的Q-marker。

3.3 基于藥效藥性關聯性的Q-marker預測分析

防風味辛、甘，性微溫，歸膀胱、肝、脾經，能祛風解表、勝濕止痛、止痙，用于感冒頭痛、風濕痹痛、風疹瘙癢、破傷風。根據分子藥性假說，辛溫藥性多與揮發(fā)油相關，甘味與多糖相關。現代藥理學研究表明，防風具有解熱鎮(zhèn)痛、抗炎、抗菌、抗過敏、增強免疫、抗腫瘤的作用。其中抗過敏、增強免疫和抗腫瘤作用與多糖有關，解熱鎮(zhèn)痛作用與揮發(fā)油和色原酮有關。Chen等[80]通過酶聯免疫試驗和蛋白質印跡分析評估了升麻素苷對脂多糖誘導的小鼠急性肺損傷的影響，表明升麻素苷通過抑制絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）和NF-κB 信號通路的激活顯示出抗炎作用。Khan等[81]采用脂多糖刺激小鼠巨噬細胞，研究防風中川白芷內酯的抗炎作用，結果顯示川白芷內酯通過下調NF-κB 通路減少細胞促炎因子腫瘤壞死因子和白細胞介素起到抗炎作用。洪敏等[82]應用2,4-二硝基氯苯制備小鼠變態(tài)反應性接觸性皮炎模型，考察人參炔醇對模型小鼠耳廓腫脹的影響，結果顯示人參炔醇對實驗性遲發(fā)型超敏反應有顯著的抑制作用，該作用可能與抑制T 細胞增殖和IFN-γ的分泌有關。戴錦娜[33]制備了大鼠佐劑性關節(jié)炎模型，鑒定了防風5 個入血成分升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、5-O-甲基維斯阿米醇和亥茅酚苷。因此，人參炔醇、茅亥酚苷、升麻素、升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷、5-O-甲基維斯阿米醇和川白芷內酯可能是防風藥材潛在的Q-marker，當然這些指標的藥理作用仍要結合防風的臨床核心功效進行驗證。

3.4 基于化學成分可測性的Q-marker預測分析

良好的可測性是Q-marker 的必要條件。色原酮類、香豆素類、多糖類、揮發(fā)油類都是防風的重要活性成分，但多糖類結構復雜，純化困難，給檢測帶來了一定的不便。色原酮類成分由于廣受關注，已經研究出了許多簡便且準確的檢測方式。Li等[83]通過響應面法優(yōu)化防風中4 個色原酮類成分的提取方式，開發(fā)了一套超聲波輔助提取方式用于最大限度地提取防風中的4個色原酮類成分。盧泳等[84]采用近紅外光譜結合偏最小二乘法建立了2 個色原酮成分質量分數間的定量校正模型，可快速、準確地對防風中的升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷進行定量分析。趙博等[85]建立了同時測定防風中升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、印枳樹皮苷、防風靈和亥茅酚苷6 個主要有效成分含量的HPLCDAD。李碩等[86]運用灰色關聯度法測定防風中的總多糖、醇浸出物、升麻素、升麻素苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷和亥茅酚苷的含量，構建防風質量評價模型，結果表明，該模型與防風商品質量等級標準相符合。Seo等[87]用升麻素、升麻素苷、歐前胡素、7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、佛手柑內酯、亥茅酚苷、5-O-甲基維斯阿米醇苷作為指標構建了HPLC-光電二極管陣列檢測器（PDA），用來區(qū)分防風、北沙參和前胡?？梢姺里L中的升麻素苷、升麻素、5-O-甲基維斯阿米醇苷、亥茅酚苷、歐前胡素、7-β-D-吡喃葡萄糖苷、佛手柑內酯具有良好的可測性，可以作為防風藥材潛在的Q-marker。

4 結語

防風在我國分布廣泛，藥效突出，但其藥效物質基礎和藥理作用機制目前尚不明確，能夠真正反映防風內在質量的指標一直未確立。本文在總結近10 年防風化學成分和藥理作用的基礎上，結合Qmarker的篩選原則，對防風中的Q-marker進行預測，結果表明部分色原酮和香豆素類化合物，如補骨脂素、亥茅酚苷、歐前胡素等可作為防風潛在的Qmarker。

近年來，由于防風野生資源短缺，出現了仿野生栽培品和家種栽培品，家種栽培也出現不同的栽培方式，這些生產加工的各方因素對于防風品質的影響需進一步探究。鐘芬[88]比較了栽培防風與野生防風的質量差異，結果表明，栽培品和野生品的性狀和顯微特征有較大差別，理化指標沒有明顯差別。種子栽培防風和移栽防風在根型上有較大差別，顯微上差別較小。在質量指標方面，野生品的5-O-甲基維斯阿米醇苷和升麻素苷含量高于栽培品，河北栽培品中這2 個色原酮含量與野生品相當，種子栽培品中這2 個色原酮含量高于移栽品。栽培品的醇溶性浸出物含量比野生品高10%。不同產地及不同播種方式栽培品的醇溶性浸出物含量沒有明顯差別。安國栽培防風水溶性浸出物含量最高，高于東北栽培防風和野生防風。栽培防風的多糖含量高于野生防風，扦插防風的多糖含量高于種子栽培防風。野生防風和東北栽培防風的揮發(fā)油得率相當，安國栽培品種防風揮發(fā)油得率較低。因此，不能確定栽培品與野生品是否起到一樣的藥效?！吨袊幍洹?020年版將升麻素苷和5-O-甲基維斯阿米醇苷作為含量測定的質量指標，但王浩等[89]研究表明不同規(guī)格防風的5-O-甲基維斯阿米醇苷與升麻素苷含量的和既無顯著性差異也無相關性。同時升麻素、亥茅酚苷含量與不同防風規(guī)格存在顯著相關性，且野生防風升麻素、亥茅酚苷至少為栽培防風的2 倍以上，且不同等級防風藥材商品與內在含量大多呈負相關，即等級較高的藥材內在指標性含量較低，這可能與根莖類藥材次生代謝產物主要存在于韌皮部相關，提示僅以藥材大小劃分等級較為片面，往往不能很好地反映藥材的內在質量。因此，以道地性、生產規(guī)范性較好的防風藥材為研究對象，充分挖掘能體現防風藥材生長、生產和加工規(guī)律的特異性質量指標，篩選和確立反映其內在真實質量和體現其臨床核心功效的Q-marker勢在必行。