基于金納米籠的控釋給藥系統(tǒng)研究進(jìn)展*

李春明，趙騰月，陳萬(wàn)一△

（1.重慶大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院，重慶 400030； 2.鄭州大學(xué)，河南 鄭州 450001）

金納米籠（AuNCs）是具有中空多孔結(jié)構(gòu)的新型納米材料，可由銀納米立方體與氯金酸通過(guò)電化學(xué)置換反應(yīng)制得［1］。因粒徑均一、尺寸可調(diào)、穩(wěn)定性高、生物相容性好等優(yōu)點(diǎn)，進(jìn)入21 世紀(jì)以來(lái)，其在疾病診斷、靶向給藥、藥物控釋等領(lǐng)域得到了廣泛研究。相較于其他實(shí)心納米材料，AuNCs 在高效載藥方面更具有優(yōu)勢(shì)，但如不加修飾而直接用于載藥，藥物會(huì)在到達(dá)靶部位前過(guò)早釋放，從而導(dǎo)致靶部位藥物濃度過(guò)低，使療效降低、藥物毒副作用增加［2?4］。因此，為防止藥物分子過(guò)早釋放，開(kāi)發(fā)控釋功能化的AuNCs 十分必要。近年來(lái)，研究人員設(shè)計(jì)了多類(lèi)型“閥門(mén)”封堵AuNCs 的孔洞，實(shí)現(xiàn)了對(duì)AuNCs 的控釋化修飾?，F(xiàn)對(duì)基于A(yíng)uNCs 的單一及聯(lián)合刺激響應(yīng)控釋型給藥系統(tǒng)進(jìn)行分析，以期為納米材料的控釋功能化修飾及應(yīng)用提供參考。

1 單一刺激響應(yīng)控釋型

1.1 溫度響應(yīng)控釋型

溫度響應(yīng)控釋型給藥系統(tǒng)是在構(gòu)建給藥系統(tǒng)時(shí)引入溫度敏感性材料，當(dāng)溫度變化時(shí)，溫度敏感性材料的理化性質(zhì)發(fā)生變化，從而控制藥物的釋放［5］。其中相變材料（PCM）和溫度響應(yīng)性聚合物作為代表性的溫度敏感性材料，在基于A(yíng)uNCs 的控釋給藥系統(tǒng)中的應(yīng)用較廣泛。

1 ?十四醇是一種脂肪醇類(lèi)PCM，具有較低的毒性和較好的生物相容性，其相變溫度為38～39 ℃，稍高于人的正常體溫（37 ℃）。1 ?十四醇在周?chē)鷾囟鹊陀谄湎嘧儨囟葧r(shí)以白色固體形式存在，高于其相變溫度時(shí)以液態(tài)形式存在。因此能同時(shí)作為載藥介質(zhì)和“溫敏性開(kāi)關(guān)”，用于構(gòu)建溫度敏感型給藥系統(tǒng)。在較高溫度下，將PCM 與熒光染料或藥物［如羅丹明6G［6?7］、自由基引發(fā)劑［8］、anti ?miR ?181b［9］、吲哚菁綠（ICG）［10］、阿霉素［11?12］、尼羅紅［12］、鈣離子［13］、亞硒酸［14］等］混合裝入AuNCs 內(nèi)腔；降低溫度后，PCM 的固化使得染料或藥物分子封裝于A(yíng)uNCs 內(nèi)腔。直接加熱時(shí)，局部溫度升高，使PCM 快速熔化并從AuNCs 孔洞流出，同時(shí)釋放出負(fù)載的染料或藥物分子。由于A(yíng)uNCs 具有良好的光熱和聲熱轉(zhuǎn)化性能，當(dāng)施以近紅外光（NIR）或高強(qiáng)度聚焦超聲時(shí)，AuNCs 產(chǎn)熱導(dǎo)致體系溫度升高，并可通過(guò)控制NIR 或高強(qiáng)度聚焦超聲的強(qiáng)度和作用時(shí)間來(lái)調(diào)節(jié)升溫過(guò)程，從而有效地控制負(fù)載藥物的釋放。

溫度響應(yīng)性聚合物是一類(lèi)能對(duì)外部溫度刺激產(chǎn)生響應(yīng)行為的聚合物。當(dāng)周?chē)鷾囟劝l(fā)生微小改變時(shí)，聚合物的理化性質(zhì)將相應(yīng)發(fā)生變化，這使其在藥物控釋?zhuān)?5］、組織工程［16］等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。聚（N?異丙基丙烯酰胺）是最常見(jiàn)的一種溫度響應(yīng)性聚合物，可作為智能涂層包覆于A(yíng)uNCs 或其復(fù)合納米粒（如金納米籠二氧化硅復(fù)合納米粒AuNC@mSiO2）的外表面，實(shí)現(xiàn)藥物控釋。室溫下，聚（N?異丙基丙烯酰胺）分子鏈上的酰胺基團(tuán)能與周?chē)肿有纬蓺滏I，使聚合物鏈伸展而實(shí)現(xiàn)對(duì)AuNCs 孔洞的封堵；當(dāng)溫度升高到其低臨界溶解溫度（LCST）以上時(shí)，聚合物與水分子間的氫鍵斷裂，使得聚合物鏈?zhǔn)湛s，體積變小，實(shí)現(xiàn)負(fù)載藥物的觸發(fā)釋放［17］。另外，還可通過(guò)N?異丙基丙烯酰胺（NIPAAm）與其他親水或疏水性單體共聚，靈活調(diào)節(jié)共聚物的LCST范圍。YAVUZ 等［18］研究了表面修飾有NIPAAm 與丙烯酰胺（AAm）的溫敏性共聚物pNIPAAm ?co ?pAAm 的金納米籠在近紅外激光作用下的藥物控釋行為，該類(lèi)溫敏性共聚物的鏈構(gòu)象在LCST 時(shí)發(fā)生改變，其LCST 可通過(guò)改變共聚時(shí)AAm 的比例，實(shí)現(xiàn)30～50 ℃的調(diào)控。AuNCs 在合適的局域表面等離子體共振（LSPR）波長(zhǎng)的近紅外激光作用下產(chǎn)生光熱效應(yīng)，體系溫度升高（＞LCST）時(shí)，使AuNCs 表面該類(lèi)溫敏性共聚物的鏈皺縮而將AuNCs 的孔洞打開(kāi)，釋放出藥物；當(dāng)關(guān)閉近紅外激光，體系溫度下降（＜LCST）時(shí)，該類(lèi)溫敏性共聚物的鏈重新舒展并堵住AuNCs 的孔洞，終止藥物釋放。此外，也可運(yùn)用比NIR 激光系統(tǒng)具有更深穿透力的高強(qiáng)度聚焦超聲使載藥體系溫度升高，實(shí)現(xiàn)藥物的受控釋放［19］。

謝君［20］首先制備了AuNCs，負(fù)載酪氨酸酶相關(guān)蛋白2（TRP2）后，在其表面包覆脂質(zhì)體（Lipos），然后連接靶向分子CD11c 抗體（aCD11c）并插入免疫佐劑單磷酰脂質(zhì)A（MPLA），最終產(chǎn)物命名為L(zhǎng)ipos ?AuNCs ?MPLA ?aCD11c ?TRP2，Lipos ?AuNCs 作為載體裝載TRP2可減少其降解，還能將TRP2和MPLA 靶向共遞送至樹(shù)突狀細(xì)胞；Lipos ?AuNCs 對(duì)TRP2 的包封率高達(dá)（82.3 ± 5.7）%，對(duì)Lipos ?AuNCs ?TRP2 在25 ℃和37 ℃時(shí)的體外釋放研究結(jié)果表明，TRP2于37 ℃時(shí)的釋放速度顯著高于25 ℃時(shí)，說(shuō)明溫度升高有利于提高磷脂雙分子層的流動(dòng)性，使其更易被破壞而釋放藥物；動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Lipos ?AuNCs ?TRP2 經(jīng)皮下注射進(jìn)入C57小鼠體內(nèi)，由于aCD11c的靶向作用而被樹(shù)突狀細(xì)胞快速攝取，TRP2經(jīng)72 h后幾乎完全釋放。血液生化和組織病理學(xué)結(jié)果均表明，Lipos ?AuNCs在C57小鼠體內(nèi)的生物相容性良好，可作為T(mén)RP2、MPLA 及aCD11c的共同載體用于黑色素瘤抗原肽疫苗的進(jìn)一步研究。

其還制備了包覆有Lipos 并負(fù)載ICG 和MPLA 的AuNCs（Lipos ?AuNCs ?ICG ?MPLA），能避免ICG 在體內(nèi)外被快速分解或清除，而ICG 能增強(qiáng)Lipos ?AuNCs ?MPLA 的光熱效應(yīng)，外層包覆的是熔點(diǎn)高于室溫的溫敏性脂質(zhì)體，NIR照射AuNCs產(chǎn)生的光熱效應(yīng)使其流動(dòng)性增加而分解，實(shí)現(xiàn)對(duì)ICG的溫敏控釋。

1.2 激光響應(yīng)控釋型

溫度響應(yīng)控釋型AuNCs是利用AuNCs的光熱效應(yīng)誘導(dǎo)藥物釋放，但較低的釋放效率阻礙了其應(yīng)用。XU等［21］對(duì)負(fù)載有鋁酞菁的AuNCs復(fù)合材料施加以780 nm 的飛秒脈沖激光（脈沖100 fs，頻率80 MHz，照射強(qiáng)度50 W/cm2）20 s 后，即可觸發(fā)AuNCs 爆炸分解為大小不一的碎片，從而較充分地釋放出鋁酞菁，發(fā)揮光動(dòng)力治療作用。而相同功率和持續(xù)時(shí)間的780 nm 連續(xù)波激光照射下不會(huì)引起AuNCs 破裂。將該負(fù)載有鋁酞菁的AuNCs 復(fù)合材料分散于去離子水中，經(jīng)上述脈沖激光照射30 s 后，離心并收集上清液中的鋁酞菁，通過(guò)測(cè)定熒光強(qiáng)度計(jì)算鋁酞菁的釋放量。結(jié)果表明，30 s的釋放率約70%，釋放效率大幅升高。此外，該研究還利用了游離鋁酞菁與AuNCs 內(nèi)鋁酞菁間瞬態(tài)壽命的不同，借助時(shí)間分辨瞬態(tài)吸收光譜的實(shí)時(shí)成像功能來(lái)研究藥物釋放動(dòng)力學(xué)，這也將為納米藥物遞送領(lǐng)域相關(guān)研究提供借鑒和參考。

1.3 RNA 響應(yīng)控釋型

惡性腫瘤發(fā)生往往伴隨mRNA 的改變，許多腫瘤抑制因子功能的喪失是由mRNA異常引起的，且mRNA在細(xì)胞中含量豐富，故腫瘤相關(guān)mRNA 可用于引發(fā)載體中藥物的釋放。ZHANG 等［22］利用AuNCs 的空腔裝載抗癌藥物阿霉素（Dox），AuNCs 的表面用特殊“工字形”DNA 結(jié)構(gòu)修飾，實(shí)現(xiàn)對(duì)AuNCs 孔洞的封堵，制備出包含有Dox分子的AuNCs生物探針。該探針進(jìn)入乳腺癌細(xì)胞后，細(xì)胞中需同時(shí)存在3 種mRNA 作為啟動(dòng)開(kāi)關(guān)，通過(guò)與“工字形”DNA 的鏈發(fā)生特異性雜交反應(yīng)，將AuNCs的孔洞打開(kāi)，AuNCs 中的Dox 得以釋放；而在其他不符合條件的細(xì)胞中，無(wú)法進(jìn)行完全鏈雜交置換，則無(wú)法釋放藥物。

李榮華［23］設(shè)計(jì)制備了一種基于A(yíng)uNCs 的DNA 邏輯門(mén)納米機(jī)器，用于檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物miRNA，可精準(zhǔn)識(shí)別細(xì)胞狀態(tài)并控制活細(xì)胞中的藥物釋放。該機(jī)器是通過(guò)在裝載抗癌藥物Dox（本身帶有熒光）的AuNCs 孔洞上封堵一種可編程的G ?四分體器件來(lái)獲得。只有作為刺激因子的2 種miRNA 同時(shí)存在時(shí)，該機(jī)器才可將DNA邏輯門(mén)打開(kāi)而釋放Dox，從而提高了藥物釋放的精準(zhǔn)性。基于此設(shè)計(jì)，該課題組還構(gòu)建了OR，NOR 和XNOR 邏輯門(mén)納米機(jī)器，分別可精準(zhǔn)識(shí)別健康細(xì)胞、初步篩選和精準(zhǔn)識(shí)別癌細(xì)胞并釋放納米機(jī)器內(nèi)的抗腫瘤藥物，與其他類(lèi)型的納米控釋制劑相比，其響應(yīng)的特異性和精準(zhǔn)性得到了顯著增強(qiáng)。另外，雖然該類(lèi)納米控釋制劑的核酸成分具有很高的可編程性和安全性，但也易被核酸酶降解。因此，對(duì)核酸酶具有良好耐受性的邏輯門(mén)納米控釋器件的開(kāi)發(fā)，是一個(gè)亟待解決的問(wèn)題。

1.4 酶響應(yīng)控釋型

酶在生物體的代謝過(guò)程中起著催化劑的作用。腫瘤組織常伴隨酶表達(dá)的失調(diào)，如腫瘤細(xì)胞中酯酶、糖苷酶或蛋白酶的表達(dá)水平通常高于正常細(xì)胞。利用靶組織中高表達(dá)的某些酶，可以設(shè)計(jì)酶響應(yīng)控釋型藥物載體。酶響應(yīng)納米載體表面具有特定分子，可通過(guò)腫瘤細(xì)胞內(nèi)外酶的過(guò)度表達(dá)來(lái)識(shí)別和降解，可觸發(fā)藥物控釋的酶有組織蛋白酶B、透明質(zhì)酸酶和基質(zhì)金屬蛋白酶等［24］。

鐘華［25］制備出一種以AuNCs 為內(nèi)核、DNA 納米結(jié)構(gòu)為外殼的核殼結(jié)構(gòu)AuNCs 膠囊，該膠囊利用AuNCs的中空結(jié)構(gòu)裝載藥物，利用DNA 納米結(jié)構(gòu)外殼實(shí)現(xiàn)膠囊的靶向及藥物的封裝和控釋。該膠囊借由細(xì)胞內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞后，其表面的網(wǎng)狀DNA 納米封裝層被溶酶體中脫氧核糖核酸酶降解，結(jié)構(gòu)變得松散，使裝載的Dox 釋放到細(xì)胞中，此過(guò)程可通過(guò)激光共聚焦顯微鏡監(jiān)測(cè)分析。

2 聯(lián)合刺激響應(yīng)控釋型

2.1 溫度-pH 響應(yīng)控釋型

腫瘤組織與正常組織間pH 的差異可用于設(shè)計(jì)制備pH 響應(yīng)控釋型給藥系統(tǒng)，將藥物遞送到腫瘤細(xì)胞中，達(dá)到控制藥物釋放的目的。由于pH 響應(yīng)控釋型給藥系統(tǒng)的研究較成熟，且AuNCs 自身具有優(yōu)異的光熱轉(zhuǎn)化能力，無(wú)需另外的光熱轉(zhuǎn)化試劑，故AuNCs 應(yīng)用于溫度?pH 響應(yīng)控釋型給藥系統(tǒng)具有得天獨(dú)厚的優(yōu)勢(shì)。

ZHAN 等［26］設(shè)計(jì)制備了一種用于腫瘤聯(lián)合治療的復(fù)合納米載藥體系。該載藥體系分為兩部分，一部分是空腔內(nèi)負(fù)載有厄洛替尼的AuNCs，其表面帶有正電荷；另一部分是帶負(fù)電荷的金納米簇@牛血清蛋白粒子（Au Cluster@BSA），通過(guò)靜電吸引吸附在A(yíng)uNCs 表面，作為AuNCs 表面孔洞的封堵劑，防止藥物提前釋放。該載藥體系進(jìn)入腫瘤細(xì)胞后，在內(nèi)涵體和溶酶體的低pH下，Au Cluster@BSA 部分的表面電荷發(fā)生轉(zhuǎn)換，其與AuNCs 之間的靜電吸引減弱，能從AuNCs 表面脫落并導(dǎo)致厄洛替尼的釋放。在NIR 的照射下，AuNCs 產(chǎn)生熱量，升高的溫度進(jìn)一步促進(jìn)藥物釋放的同時(shí)，還可發(fā)揮熱療的作用，協(xié)同厄洛替尼對(duì)EGFR 通路的阻斷作用，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的聯(lián)合治療。

ZHANG 等［27］合成了一種新型的聚己內(nèi)酯?金納米籠/氫氧化鐵?聚丙烯酸［PCL ?AuNCs/Fe（OH）3?PAA］復(fù)合納米材料，其疏水性質(zhì)的AuNCs 一端，可負(fù)載多烯紫杉醇（Dtxl），而帶有負(fù)電荷的Fe（OH）3?PAA一端，可負(fù)載正電荷的Dox，因而具備雙重載藥的特性。PAA 是pH 敏感性聚合物，而Fe（OH）3納米粒在酸性環(huán)境中不穩(wěn)定，因此在酸性pH 刺激下，Dox 可從破碎的Fe（OH）3?PAA 部分爆發(fā)性釋放。在較弱的NIR 激光照射強(qiáng)度（0.5 W/cm2）下，AuNCs 內(nèi)部比Fe（OH）3?PAA端產(chǎn)熱更高，AuNCs 內(nèi)部Dtxl 的溶解度增加并加速釋放，并能使硫代的PCL 與復(fù)合納米粒分離，但對(duì)Fe（OH）3?PAA 結(jié)構(gòu)域中的Dox 釋放影響較小；在較高照射強(qiáng)度的NIR 激光照射下，誘發(fā)AuNCs 和Fe（OH）3?PAA 結(jié)構(gòu)域產(chǎn)生更多的熱量，因而能觀(guān)察到2種藥物的同時(shí)釋放。由于該復(fù)合納米粒子的靈活性，可通過(guò)酸性pH 和較低照射強(qiáng)度的NIR 激光照射來(lái)較為靈活地調(diào)節(jié)Dox和Dtxl 2種藥物的釋放順序。

王玉中［28］首先在A(yíng)uNC 表面合成了帶有乙烯基的聚乙烯薄層，然后利用N?異丙基丙烯酰胺與甲基丙烯酸在其表面原位聚合而包裹了厚度10～20 nm 的P（NIPAm ?co ?MAA）凝膠層，最終成功制備出包裹有智能凝膠的核殼結(jié)構(gòu)的復(fù)合納米粒AuNCs@PS/DVB@P（NIPAm ?co ?MAA）。該復(fù)合納米粒具備P（NIPAm ?co ?MAA）的溫度和pH 雙敏感特性，能根據(jù)周?chē)h(huán)境的溫度、pH 或兩者的共同變化發(fā)生構(gòu)造上的緊縮與松展變化。結(jié)果證明，與單一響應(yīng)的納米粒相比，具有溫度?pH 雙耦合響應(yīng)特性的該智能核殼結(jié)構(gòu)納米粒更能對(duì)外界環(huán)境的細(xì)微干擾而作出變化，從而能精準(zhǔn)地控制其中藥物的釋放。

房杰［29］首先制備出AuNCs 粒子，然后采用靜電吸附誘導(dǎo)融合的方法，將具有pH 敏感特性的脂質(zhì)體包裹在A(yíng)uNCs 表面，然后在脂質(zhì)體表面進(jìn)行腫瘤細(xì)胞靶向劑轉(zhuǎn)鐵蛋白（Tf）修飾，得到Au@Liposome ?Tf 復(fù)合納米粒，其釋藥速率隨pH 的降低而加快，在模擬腫瘤部位的酸性環(huán)境（pH5.2）的藥物釋放率是正常組織pH 環(huán)境（pH7.4）的4倍以上。此外，AuNCs的光熱效應(yīng)能有效地促進(jìn)納米粒的藥物釋放，在酸性pH 和光熱效應(yīng)的雙重激發(fā)下，2 h左右藥物便可釋放完全。

2.2 溫度-氧化還原響應(yīng)控釋型

谷胱甘肽（GSH）是人體內(nèi)重要的抗氧化劑，保護(hù)細(xì)胞成分免受活性氧的損傷。細(xì)胞內(nèi)環(huán)境中的GSH濃度比細(xì)胞外基質(zhì)中高約1 000 倍，大多數(shù)腫瘤細(xì)胞內(nèi)GSH 濃度至少比正常細(xì)胞內(nèi)高4 倍［30］。由于其硫醇?硫醇交換性質(zhì)，GSH 可分解二硫鍵，或通過(guò)金硫鍵等取代附著在金表面的配體。因此，GSH 是腫瘤細(xì)胞內(nèi)藥物釋放的潛在觸發(fā)因素［31］。當(dāng)?shù)竭_(dá)腫瘤細(xì)胞內(nèi)后，GSH 濃度的增加會(huì)導(dǎo)致金硫鍵斷裂并打開(kāi)AuNCs 的孔洞而釋放藥物。該刺激響應(yīng)策略常結(jié)合AuNCs 的光熱轉(zhuǎn)化及溫度響應(yīng)釋放特點(diǎn)，共同用于藥物的控釋。

ZHANG 等［32］構(gòu)建了一種基于A(yíng)uNCs 的多功能復(fù)合納米材料，該納米材料是將兩親性嵌段共聚物生物素?聚乙二醇?聚姜黃素（Biotin ?PEG ?PCDA，BPP）通過(guò)金硫鍵修飾在A(yíng)uNCs 的表面，然后裝載含Dox 的1 ?十四醇來(lái)構(gòu)建AuNCs@DBPP，AuNCs@DBPP 在體溫（37 ℃）和血液GSH 低濃度水平（5 μmol/L）下2 h 藥物釋放量?jī)H為9%。而在1 ?十四醇的熔點(diǎn)、細(xì)胞內(nèi)高濃度GSH（5 mmol/L）時(shí)會(huì)顯著觸發(fā)Dox 釋放，2 h 的釋放量達(dá)75%。

SHI 等［33］開(kāi)發(fā)了一種基于A(yíng)uNC 的控釋給藥系統(tǒng)用于阿爾茨海默癥的治療。他們首先制備了苯硼酸（PBA）修飾的金納米籠（AuNCs ?PBA），再將作為堵孔試劑的人免疫球蛋白G（IgG）通過(guò)其鄰二醇與苯硼酸形成硼酯鍵，連接在A(yíng)uNCs ?PBA 外表面，實(shí)現(xiàn)對(duì)金屬螯合劑的封堵，藥物的控釋依賴(lài)于2 種機(jī)制：第一種是H2O2可將芳基硼酯氧化成酚類(lèi)，導(dǎo)致堵孔劑IgG 的脫落和負(fù)載藥物的釋放；第二種釋放機(jī)制是AuNCs吸收NIR而產(chǎn)熱引起硼酯鍵的斷裂，其受NIR照射產(chǎn)熱可用于遙控藥物的釋放。該設(shè)計(jì)將內(nèi)源性刺激與外源性刺激相結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了藥物的精準(zhǔn)遞送，具有無(wú)創(chuàng)、遠(yuǎn)程的特點(diǎn)。

2.3 RNA-離子響應(yīng)控釋型

李榮華［23］設(shè)計(jì)制備了一種由雙重miRNA 引發(fā)、細(xì)胞內(nèi)源Mg2+輔助藥物釋放的AuNCs 藥物遞送探針（AuNCs@DNA/ Dox），該探針可實(shí)現(xiàn)熒光成像引導(dǎo)的靶向性化學(xué)?光熱協(xié)同治療腫瘤。研究者先在A(yíng)uNCs表面設(shè)計(jì)并修飾了DNA 納米鎖?架橋式結(jié)構(gòu)，用于封堵AuNCs表面的孔洞。人乳腺癌MCF ?7細(xì)胞中特有的高表達(dá)miRNA ?155 和miRNA ?21 同時(shí)存在時(shí)，納米鎖中部分DNA鏈形成DNA酶結(jié)構(gòu)，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)Mg2+存在時(shí)發(fā)生酶切反應(yīng)，將DNA 納米鎖打開(kāi)，從而釋放出包裹在A(yíng)uNCs 里的抗癌藥物Dox。該控釋給藥系統(tǒng)能控制藥物精準(zhǔn)、有效地在人乳腺癌細(xì)胞中釋放，達(dá)到靶向、控釋的效果。值得指出的是，該過(guò)程利用了DNA 酶循環(huán)放大反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)了化療藥物的自發(fā)循環(huán)釋放，減少了化療藥物的使用量，為新型控釋制劑的研發(fā)提供了思路。

2.4 溫度-pH-酶響應(yīng)控釋型

WANG 等［34］以AuNCs 為主體、透明質(zhì)酸（HA）為封蓋試劑，成功構(gòu)建了一種多重刺激響應(yīng)型藥物控釋平臺(tái)AuNCs ?HA，由于封蓋試劑HA 只有在細(xì)胞內(nèi)的內(nèi)涵體或溶酶體中才被其中的透明質(zhì)酸酶降解，故只有AuNCs ?HA 進(jìn)入到腫瘤細(xì)胞內(nèi)，才會(huì)在熱、酸性pH 和透明質(zhì)酸酶的多重刺激下精準(zhǔn)釋放藥物。在進(jìn)入腫瘤細(xì)胞前，即使施加近紅外光照射，AuNCs ?HA也不會(huì)提前釋放藥物。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該多重刺激響應(yīng)的AuNCs ?HA 納米平臺(tái)，達(dá)到了較好的光熱和化學(xué)藥物治療協(xié)同治療效果。

還有研究者在A(yíng)uNCs，HA 的基礎(chǔ)上，分別修飾各種功能分子，包括熱響應(yīng)共聚物P（NIPAM ?co ?Am）、肝癌特異性黏附肽A54或聚乙二醇等，開(kāi)發(fā)了其他靶向控釋制劑，實(shí)現(xiàn)了納米給藥系統(tǒng)的多重刺激響應(yīng)型釋藥及腫瘤的聯(lián)合治療，以及藥物的精準(zhǔn)控釋?zhuān)吡税胁课坏乃幬餄舛?，減輕了毒副作用［35?37］。

由于該類(lèi)型的AuNCs 控釋給藥系統(tǒng)具有三重刺激響應(yīng)性，更能提高藥物控釋的精準(zhǔn)性，但也使得三重刺激響應(yīng)性的設(shè)計(jì)及作用發(fā)揮更加復(fù)雜，其制備成本及臨床轉(zhuǎn)化難度也隨之增加。

3 結(jié)語(yǔ)

與單一刺激響應(yīng)控釋型載體比較，聯(lián)合刺激響應(yīng)控釋型載體可更好地調(diào)控藥物釋放，在藥物遞送過(guò)程中表現(xiàn)出更高的效率及特異性。

對(duì)AuNCs 進(jìn)行控釋化修飾，可減少循環(huán)過(guò)程中的藥物泄露，實(shí)現(xiàn)靶部位的響應(yīng)性釋藥。近年來(lái)，研究人員設(shè)計(jì)并制備出不同機(jī)制的AuNCs 控釋給藥系統(tǒng)，以期達(dá)到對(duì)所負(fù)載藥物的減毒增效目的。其中，pH、RNA、酶等內(nèi)源性刺激存在于腫瘤微環(huán)境或腫瘤細(xì)胞內(nèi)部，無(wú)需外部設(shè)備來(lái)觸發(fā)藥物釋放，具有非侵入性、治療成本低的優(yōu)點(diǎn)，但也存在人工干預(yù)度低等缺點(diǎn)，從而影響內(nèi)源刺激響應(yīng)型AuNCs 的功效；腫瘤組織的異質(zhì)性，也會(huì)限制內(nèi)源刺激響應(yīng)型AuNCs 的臨床轉(zhuǎn)化能力。與內(nèi)源性刺激比較，超聲波，激光等外源性刺激，可通過(guò)調(diào)節(jié)刺激的位置、時(shí)間和強(qiáng)度來(lái)靈活地控制藥物釋放，但施加的外部刺激可能會(huì)影響正常的生理組織，且需要技術(shù)人員借助設(shè)備來(lái)實(shí)現(xiàn)，因此會(huì)增加治療成本。隨著控釋給藥系統(tǒng)向著精準(zhǔn)化、智能化發(fā)展，賦予AuNCs 多重刺激響應(yīng)性能是一種行之有效的策略，但其存在設(shè)計(jì)制備更加復(fù)雜、質(zhì)量控制難度大等問(wèn)題。

值得指出的是，對(duì)刺激響應(yīng)型AuNCs 的藥物釋放行為研究，大多數(shù)僅處于體外的概念性驗(yàn)證階段；對(duì)其安全性的研究，盡管都聲稱(chēng)毒性小、生物相容性好，但均僅停留在細(xì)胞或動(dòng)物水平，尚未進(jìn)入臨床研究階段。故未來(lái)還需對(duì)其在人體內(nèi)的安全性、有效性等方面開(kāi)展進(jìn)一步的研究工作。隨著醫(yī)學(xué)、藥學(xué)和材料學(xué)等相關(guān)學(xué)科的不斷發(fā)展，更多基于新材料、新機(jī)制的AuNCs 控釋給藥系統(tǒng)將被成功構(gòu)建，并在疾病診療等領(lǐng)域發(fā)揮更大作用。