犬利什曼原蟲病檢查與防控

時文賢，趙瑞彬，張繼彪

（河南省安陽市殷都區(qū)畜牧服務(wù)中心，河南 安陽 455000）

利什曼原蟲病又稱黑熱病，是由利什曼原蟲引起的人獸共患慢性寄生蟲病，蟲體寄生于宿主巨噬細胞或網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞。病原由吸血昆蟲白蛉通過叮咬傳播。

1 病原

犬利什曼原蟲病由鞭毛蟲綱錐體蟲科利什曼屬的杜氏利什曼原蟲引起。利什曼原蟲生活史有前鞭毛體和無鞭毛體兩個時期。前鞭毛體呈柳葉形，狹長，直徑12～16 μm，蟲體內(nèi)有一較大圓胞核和棒狀動基體，動基體處有一根彎曲的鞭毛游離蟲體外。無鞭毛體呈卵圓形，蟲體較小，直徑約2～6 μm，多見于感染動物的巨噬細胞或網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞內(nèi)。在姬姆薩或瑞氏染色涂片上，細胞質(zhì)呈淡藍色，有一較大胞核呈深紅色，位于蟲體一端，動基體呈細桿狀，位于另一端。

2 流行病學(xué)

2.1 易感動物 本病嚙齒類動物、犬科動物易感，所有犬種，不分年齡和性別均可發(fā)病，人類偶爾感染。

2.2 傳染來源 犬是利什曼原蟲的天然宿主，病犬是重要感染源。

2.3 傳播途徑 該病主要通過吸血昆蟲—中華白蛉叮咬傳染。受氣候、季節(jié)因素影響，本病多呈地方性流行。

3 臨床癥狀

本病潛伏期較長，發(fā)病過程緩慢，犬感染后可能4～5個月才出現(xiàn)癥狀。皮膚型主要癥狀是患犬口唇、眼瞼、耳朵、四肢、尾部等處皮膚出現(xiàn)丘疹、結(jié)節(jié)、膿腫、淺層潰瘍或脫毛。內(nèi)臟型主要癥狀有眼周脫毛、有濕疹，聲音沙啞、食欲不振、消瘦等，其他癥狀有體溫升高、貧血、精神萎頓等。

4 病理變化

病犬巨噬細胞大量破壞和增生，細胞增生致使肝、脾、淋巴結(jié)腫大，脾功能亢進，血細胞在脾內(nèi)遭到大量破壞。

皮膚型主要表現(xiàn)為皮膚有炎癥，內(nèi)臟型主要表現(xiàn)為有廣泛性皮炎，漿膜、黏膜蒼白并有出血斑點，肝、脾腫大或出現(xiàn)腹水，淋巴結(jié)腫脹，有的衰弱、呼吸困難。

5 免疫學(xué)檢查

犬利什曼原蟲抗體快速檢測卡采用免疫層析技術(shù)，能定性檢測犬類血清、血漿或全血中的利什曼原蟲抗體。

5.1 采樣及樣品處理 保定犬只，前肢淺皮下頭靜脈采血1.5～2 mL 后，按每分鐘2 000～3 000轉(zhuǎn)離心5 min 分離出血清，也可采用加抗凝劑的全血或未加抗凝劑的全血作檢測樣本。

5.2 加樣及檢測 檢測卡放于平整、干凈的臺面上。用吸管向加樣孔滴加10 μL 樣本，再滴加3 滴樣品緩沖液，這時酒紅色的液體會流過觀察窗，如液體未流動，可輕壓加樣孔與觀察窗之間的區(qū)域，幫助液體釋放。檢測卡室溫下放置5～10 min判斷結(jié)果，超過10 min的結(jié)果無效。

5.3 結(jié)果判定 如果質(zhì)控線C 出現(xiàn)一條紫紅色或紅色條帶，在測試T線無紫紅色條帶出現(xiàn)，則判定為陰性（-）。如果質(zhì)控線C出現(xiàn)一條紫紅色或紅色條帶，在測試線T出現(xiàn)另一條紫紅色條帶，則判定為陽性（＋）。如果質(zhì)控線C未出現(xiàn)紫紅色或紅色條帶，僅T線出現(xiàn)或不出現(xiàn)顏色，則測試失敗或試紙失效。

5.4 注意事項 過期或鋁箔袋破損的檢測卡不可使用。檢測卡在室溫（低于30 ℃）陰涼處保存即可，如為冷藏保存，需先將檢測卡恢復(fù)至室溫，再打開使用，防止層析膜吸潮。檢測卡從鋁箔袋中取出后盡快使用，防止試紙條受潮。不要觸摸檢測卡上加樣孔和觀察窗處的層析膜。為確保檢出結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)盡量采用新鮮、無污染的樣本，樣本有大量血脂會干擾檢測結(jié)果，對此應(yīng)離心處理后，避開油脂層取血清部分檢測。采集的血清樣本短期（48 h 內(nèi)）存放置于4 ℃，長期保存置于-20 ℃以下。未加抗凝劑的全血樣本應(yīng)立即進行檢測，如已發(fā)生部分凝血，應(yīng)分離血清進行檢測。加抗凝劑的全血樣本應(yīng)于24 h 內(nèi)進行檢測，且勿冷凍，凍融會使紅細胞破裂溶血，嚴(yán)重影響檢測結(jié)果。

用過的檢測卡、樣本及一次性防護用品作無害化處理，防止引起污染。采樣滴管不能混用，以免引起交叉污染。

6 診斷

根據(jù)犬利什曼原蟲病的臨床癥狀、病理變化和病原檢查及傳播媒介白蛉的分布情況可作出綜合診斷?？筛鶕?jù)皮膚涂片鏡檢、淋巴結(jié)或骨髓穿刺鏡檢、快速檢測卡檢測進行確診。

7 防控措施

7.1 搞好衛(wèi)生 定期清理犬只糞污，勤掃犬舍，保持活動場所通風(fēng)、采光良好、干燥、清潔。

7.2 切斷傳播 白蛉活動季節(jié)開展滅白蛉活動。白蛉活動范圍小，飛行能力弱，以藥物殺滅成蛉為主要的防制措施。白蛉成蟲多棲息于陰暗、無風(fēng)的場所，如墻角、墻縫或洞穴等，可使用高效低毒的農(nóng)藥，如馬拉硫磷、溴氰菊酯、氯氰菊酯等噴灑滅蟲或熏殺滅蟲，也可以使用燈光誘殺白蛉。圈舍可安裝紗窗防白蛉，犬只可佩戴浸漬殺蟲藥物的項圈防白蛉叮咬。

7.3 無害化處理 本病流行地區(qū)加強犬只的管理，定期對犬只進行病原篩查，陽性犬可撲殺，撲殺后無害化處理。不具備無害化處理條件的，撲殺犬可深埋處理，深埋坑遠離公共場所、居民區(qū)、飼養(yǎng)場、飲用水源地等。深埋坑體大小適當(dāng)，坑底應(yīng)高出地下水位，要防滲、防漏，坑底應(yīng)灑一層生石灰或漂白粉等消毒藥，犬尸投入坑內(nèi)，尸體用生石灰或漂白粉消毒，覆土厚度不少于1～1.2 m，深埋處設(shè)警示標(biāo)志。

定期巡查，防止利什曼原蟲病通過流浪犬傳播。

7.4 提高犬只抗病力 加強犬只飼養(yǎng)管理，喂給全價日糧，注意維生素、微量元素的添加，以提高犬的抗病力，使機體能抑制、排斥、消滅利什曼原蟲。

7.5 治療措施 首選治療藥物為五價葡萄糖酸銻鈉，其對利什曼原蟲有強殺傷作用。近年也有應(yīng)用脂肪微粒結(jié)合五價銻劑治療黑熱病的報告。

7.6 聯(lián)防聯(lián)控 實現(xiàn)人的黑熱病信息與犬黑熱病信息互通共享，開展黑熱病流行病學(xué)調(diào)查，快速查明黑熱病的流行情況。堅持“人病獸防、關(guān)口前移”原則，及時防控犬黑熱病向人群傳播，維護公共衛(wèi)生安全。