長(zhǎng)鏈非編碼RNA在腎間質(zhì)纖維化中的研究進(jìn)展

何婷婷，鄒循亮

(遵義醫(yī)科大學(xué)第五附屬(珠海)醫(yī)院腎內(nèi)科，廣東 珠海 519100)

腎間質(zhì)纖維化是腎實(shí)質(zhì)內(nèi)瘢痕的堆積，代表幾乎所有慢性和進(jìn)展性腎病共同的最終途徑[1]。慢性腎臟病是一種進(jìn)展性疾病，一旦進(jìn)展至終末期腎病需行腎透析或腎移植治療[2]。據(jù)統(tǒng)計(jì)，慢性腎臟病的全球發(fā)病率約為10%[1]。因此，改善或延緩腎間質(zhì)纖維化向終末期腎病進(jìn)展，不僅可延長(zhǎng)腎臟病藥物治療向腎臟替代治療的時(shí)間，還可減輕患者家庭經(jīng)濟(jì)壓力，節(jié)約醫(yī)療資源。但目前尚無(wú)針對(duì)腎間質(zhì)纖維化的特效藥物，無(wú)法逆轉(zhuǎn)其進(jìn)展為終末期腎病的進(jìn)程。近年來(lái)，長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long non-coding RNA，lncRNA)已成為調(diào)控基因表達(dá)、多種生物學(xué)過(guò)程的關(guān)鍵調(diào)控因子[3]。lncRNA可參與腎臟纖維化的炎癥反應(yīng)[4]、細(xì)胞增殖[5-6]、凋亡[7]等病理過(guò)程，還可與轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)/Smad3信號(hào)通路相互作用調(diào)控腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)展[8-9]。此外，lncRNA還可與微RNA(microRNA，miRNA)競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，共同調(diào)控腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)程[10]。但目前關(guān)于lncRNA在腎間質(zhì)纖維化中的研究尚不成熟?，F(xiàn)就lncRNA在腎間質(zhì)纖維化中的研究進(jìn)展予以綜述。

1 lncRNA概述

lncRNA是一類長(zhǎng)度超過(guò)200個(gè)核苷酸的RNA，不編碼蛋白質(zhì)。第一個(gè)lncRNA H19于1984年由Pachnis等[11]鑒定發(fā)現(xiàn)。目前人類基因組中已識(shí)別出15 778個(gè)lncRNA，這些基因產(chǎn)生了27 908個(gè)轉(zhuǎn)錄本[12]。

lncRNA可作為主調(diào)控因子影響miRNA和信使RNA的表達(dá)，還可改變?nèi)旧|(zhì)結(jié)構(gòu)。富含核的lncRNA可通過(guò)與染色質(zhì)重構(gòu)復(fù)合體相互作用調(diào)節(jié)同一染色體(順式)或另一條染色體(反式)上基因的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)；細(xì)胞質(zhì)lncRNA可通過(guò)與miRNA反應(yīng)元件交互作用調(diào)節(jié)miRNA的功能和表達(dá)，起到miRNA海綿的作用；此外，lncRNA還可靶向調(diào)節(jié)信使RNA的表達(dá)[13]。lncRNA是異質(zhì)RNA，但其與編碼蛋白質(zhì)的信使RNA有某些相似之處，可被RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄為類似的組蛋白修飾譜，并可進(jìn)行轉(zhuǎn)錄后修飾，如 5′-加帽、聚腺苷酸化和剪接[14]。同時(shí)，lncRNA與信使RNA也存在差異。與信使RNA相比，lncRNA外顯子和內(nèi)含子較長(zhǎng)，且無(wú)完善的蛋白質(zhì)編碼潛力；lncRNA的外顯子較祖先重復(fù)序列更保守，其啟動(dòng)子較蛋白質(zhì)編碼基因的啟動(dòng)子也更保守[15]。有證據(jù)表明，lncRNA具有重要的生物學(xué)功能[16]。lncRNA參與各種重要的生物行為過(guò)程，如細(xì)胞周期控制、分化和免疫反應(yīng)[17]，既具有組織特異性，又可廣泛表達(dá)[18]。近年來(lái)，隨著基因組學(xué)的發(fā)展以及高通量測(cè)序技術(shù)、原位雜交技術(shù)等的不斷發(fā)展，lncRNA在腫瘤相關(guān)疾病中的研究更廣泛，其在腎間質(zhì)纖維化中的研究也逐步完善，但具體的機(jī)制目前仍未明確。

2 lncRNA與腎纖維化的相關(guān)性

既往研究表明，lncRNA在梗阻性腎病[19]、糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)[20]、晶體性腎病[21]、狼瘡性腎炎[22]等疾病中的表達(dá)異常。lncRNA可通過(guò)不同途徑加重或延緩腎臟疾病中相關(guān)間質(zhì)纖維化的病理生理進(jìn)程。

2.1調(diào)節(jié)TGF-β/Smad3信號(hào)通路 TGF-β已被公認(rèn)為所有類型纖維化中的促纖維化細(xì)胞因子[23]。TGF-β/Smad3信號(hào)通過(guò)與多種lncRNA相互作用在纖維化中起重要作用。TGF-β1通過(guò)上調(diào)HK-2細(xì)胞中的lncRNA肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT1)的表達(dá)誘導(dǎo)腎纖維化[8]。lncRNA MALAT1在腫瘤細(xì)胞增殖、肌細(xì)胞生成以及突觸發(fā)生中均具有重要作用[9]。Liu等[8]研究顯示，單側(cè)輸尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction，UUO)模型大鼠腎纖維化組織中的lncRNA MALAT1表達(dá)上調(diào)，TGF-β1通過(guò)上調(diào)HK-2細(xì)胞中的lncRNA MALAT1表達(dá)誘導(dǎo)纖維化進(jìn)程，過(guò)表達(dá)lncRNA MALAT1可誘導(dǎo)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition，EMT)、增強(qiáng)細(xì)胞活力、促進(jìn)HK-2細(xì)胞的增殖和遷移潛力，而敲低lncRNA MALAT1則可抑制TGF-β1誘導(dǎo)的EMT、細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)沉積以及HK-2細(xì)胞的增殖和遷移；該研究還顯示，lncRNA MALAT1可通過(guò)海綿miR-145激活黏著斑激酶的表達(dá)增強(qiáng)TGF-β1誘導(dǎo)的腎纖維化效應(yīng)，提示lncRNA MALAT1/miR-145/黏著斑激酶軸參與UUO模型大鼠的腎纖維化進(jìn)程。另有研究顯示，lncRNA H19可下調(diào)miR-29a的表達(dá)、激活TGF-β/Smad3信號(hào)通路，從而誘導(dǎo)內(nèi)皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，促進(jìn)腎間質(zhì)纖維化[24]。Xu等[25]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA Erbb4-IR是一種Smad3依賴性lncRNA，可通過(guò)抑制miR-29b的表達(dá)促進(jìn)晚期糖基化終末產(chǎn)物誘導(dǎo)的小鼠系膜細(xì)胞和管狀上皮細(xì)胞中的膠原蛋白(collagen，Col)-Ⅰ和Col-Ⅳ表達(dá)，從而導(dǎo)致2型糖尿病小鼠的腎纖維化。也有研究表明，lncRNA Erbb4-IR可通過(guò)下調(diào)Smad7的表達(dá)參與TGF-β/Smad3介導(dǎo)的腎纖維化[26]。Sun等[27]證實(shí)，被TGF-β激活的lncRNA(lncRNA activated by TGF-β，lncRNA ATB)過(guò)表達(dá)可導(dǎo)致人腎近端腎小管上皮細(xì)胞中的炎癥因子水平升高以及細(xì)胞凋亡和衰老加重，這可能是由于lncRNA ATB過(guò)表達(dá)激活TGF-β/Smad2/3信號(hào)通路所致。此外，lncRNA TCON_00088786和lncRNA TCON_01496394被證實(shí)受TGF-β時(shí)間和劑量依賴性調(diào)控，lncRNA TCON_00088786基因下調(diào)可抑制Col-ⅠA1和Col-ⅢA1基因信使RNA的表達(dá)，而lncRNA TCON_01496394基因下調(diào)可降低結(jié)締組織生長(zhǎng)因子和纖連蛋白(fibronectin，F(xiàn)N)1信使RNA表達(dá)，提示lncRNA TCON_00088786和lncRNA TCON_01496394可促進(jìn)腎纖維化[28]。

lncRNA對(duì)TGF-β/Smad3信號(hào)通路的調(diào)節(jié)不僅具有促纖維化作用，還可抑制纖維化。研究顯示，在DN小鼠模型和TGF-β1誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞中，lnc-TSI(TGF-β/Smad3-interacting lncRNA)可作為內(nèi)源性TGF-β1/Smad3通路的抑制劑，減少Snail1、Col-Ⅰ和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smooth muscle actin，α-SMA)的表達(dá)[29]。此外，過(guò)表達(dá)lncRNA母系表達(dá)基因3(maternally expressed gene 3，MEG3)也可抑制TGF-β1誘導(dǎo)的表型變化、細(xì)胞活力和細(xì)胞增殖[30]。lncRNA生長(zhǎng)阻滯特異性轉(zhuǎn)錄因子5(growth arrest-specific transcript 5，GAS5)是一種可調(diào)節(jié)成纖維細(xì)胞激活和增殖的因子[31]。lncRNA GAS5可通過(guò)與Smad3結(jié)合抑制成纖維過(guò)程、增強(qiáng)金屬依賴性蛋白磷酸酶1A與Smad3的結(jié)合、促進(jìn)Smad3去磷酸化，從而抑制成纖維細(xì)胞的活化以及Col-ⅠA1和α-SMA的合成；此外，lncRNA GAS5過(guò)表達(dá)還可通過(guò)抑制TGF-β誘導(dǎo)的c-Jun氨基端激酶磷酸化減少成纖維細(xì)胞增殖[32]。還有研究發(fā)現(xiàn)，沉默聚集在細(xì)胞核中的lncRNA Rian，可導(dǎo)致Smad2、Smad3、Col-ⅠA1和α-SMA表達(dá)上調(diào)，加重腎纖維化[33]。

綜上，不同的lncRNA可通過(guò)不同的作用位點(diǎn)調(diào)節(jié)TGF-β/Smad3信號(hào)通路，加重腎纖維化或改善腎纖維化。但過(guò)表達(dá)可抑制TGF-β/Smad3信號(hào)通路的lncRNA或敲除(沉默)可促進(jìn)TGF-β/Smad3信號(hào)通路的lncRNA是否可改善或延緩腎纖維化的進(jìn)展，仍需未來(lái)進(jìn)一步研究探討。

2.2調(diào)節(jié)miRNA miRNA在哺乳動(dòng)物不同的生理調(diào)節(jié)過(guò)程中發(fā)揮重要作用，如控制心臟和腎臟的發(fā)育、結(jié)構(gòu)和功能[34]。有研究表明，miRNA還參與纖維化等病理生理過(guò)程，可作為纖維化的促進(jìn)劑或抑制劑[35]。Liu等[10]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA MALAT1可通過(guò)海綿miR-145抑制體內(nèi)外纖維化模型靶基因E盒結(jié)合鋅指蛋白2的表達(dá)，從而誘導(dǎo)內(nèi)皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化和腎纖維化。也有研究表明，Opa相互作用蛋白5反義RNA 1可通過(guò)與miR-30c-5p結(jié)合促進(jìn)上皮鈣黏素、神經(jīng)鈣黏素、TGF-β1、α-SMA的蛋白表達(dá)，加重DN的EMT和腎臟纖維化[36]。Cao等[37]通過(guò)針對(duì)UUO模型以及TGF-β誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞的體外研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA漿細(xì)胞瘤變異易位1(plasmacytoma variant translocation 1，PVT1)可通過(guò)海綿miR-181a-5p抑制miR-181a-5p對(duì)TGF-β1受體的靶向作用，導(dǎo)致α-SMA的表達(dá)增加和上皮鈣黏素的表達(dá)降低，加重腎纖維化。Wang等[38]研究認(rèn)為，lncRNA GAS5通過(guò)海綿miR-96-5p，使HK-2細(xì)胞中的FN增加，從而導(dǎo)致腎纖維化程度加重。Huang等[39]研究發(fā)現(xiàn)，LINC00667可通過(guò)調(diào)節(jié)miR-34c的表達(dá)顯著抑制腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞中Col-Ⅰ和Col-Ⅳ的表達(dá)，降低腎間質(zhì)成纖維化細(xì)胞的增殖和侵襲能力，增加細(xì)胞凋亡率，改善腎臟纖維化。Zhang等[40]研究顯示，lncRNA?；撬嵘险{(diào)基因1可直接與miR-29b-3p結(jié)合并作為競(jìng)爭(zhēng)性內(nèi)源性RNA發(fā)揮作用，導(dǎo)致由腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)激活誘導(dǎo)的腎纖維化加重，這可能與miR-29b-3p通過(guò)負(fù)調(diào)節(jié)腎臟中組織纖維化相關(guān)基因(Col-Ⅰ和Col-Ⅲ)的表達(dá)抑制部分EMT的作用減弱相關(guān)。Li等[41]通過(guò)建立體內(nèi)及體外腎纖維化模型發(fā)現(xiàn)，lncRNA核富集轉(zhuǎn)錄本1(nuclear enriched abundant transcript 1，NEAT1)通過(guò)海綿miR-129直接抑制其與Col-Ⅰ的結(jié)合，導(dǎo)致腎纖維化的EMT過(guò)程和炎癥反應(yīng)增強(qiáng)。還有研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA PVT1作為miR-1207-5p的海綿，與miR-1207-5p對(duì)TGF-β1、FN1表達(dá)的負(fù)性影響形成競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系[42]。研究證實(shí)，lncRNA 細(xì)胞周期蛋白依賴激酶抑制因子2B反義RNA1過(guò)表達(dá)可與miR-424-5p競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，從而促進(jìn)FN1、Col-Ⅰ和Col-Ⅳ的表達(dá)，加重腎間質(zhì)纖維化[43]。Li等[44]發(fā)現(xiàn)，一水草酸鈣可上調(diào)HK-2細(xì)胞中的lncRNA同源異形盒基因A11-反義RNA表達(dá)，lncRNA同源異形盒基因A11-反義RNA過(guò)表達(dá)可通過(guò)海綿miR-124-3p調(diào)節(jié)單核細(xì)胞趨化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)的表達(dá)抑制細(xì)胞增殖，加重細(xì)胞凋亡和細(xì)胞損傷。Wang等[45]研究證實(shí)，lncRNA?；撬嵘险{(diào)基因1可通過(guò)調(diào)節(jié)miR-377靶向過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ的表達(dá)下調(diào)線粒體生物能量學(xué)，緩解DN中的ECM積累；同時(shí)，還可通過(guò)靶向miR-21促進(jìn)金屬蛋白酶組織抑制劑3的表達(dá)，抑制腎臟纖維化。此外，作為miR-27a的海綿，lncRNA LINC01619也可通過(guò)激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)腎纖維化[46]。

此外，lncRNA也可通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miRNA抑制腎纖維化。生物信息學(xué)分析、雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)和RNA免疫沉淀檢測(cè)均證實(shí)，lncRNA 1700020I14Rik可作為內(nèi)源性競(jìng)爭(zhēng)性RNA調(diào)控miR-34a-5p的表達(dá)，緩解DN細(xì)胞增殖和纖維化[47]。Zhou等[48]發(fā)現(xiàn)，UUO模型中的lncRNA TCON_00088786和miR-132水平升高，沉默lncRNA TCON_00088786可降低miR-132水平，抑制間質(zhì)纖維化的發(fā)展。另有研究顯示，沉默UUO模型中的lncRNA同源異形盒基因轉(zhuǎn)錄反義RNA可上調(diào)miR-124的表達(dá)，從而緩解EMT和腎間質(zhì)纖維化，表明lncRNA同源異形盒基因轉(zhuǎn)錄反義RNA可作為腎間質(zhì)纖維化的潛在治療靶點(diǎn)[49]。Ge等[50]研究顯示，lncRNA GAS5可作為miR-221的內(nèi)源性海綿，通過(guò)直接靶向方式和Ago2依賴方式上調(diào)沉默信息調(diào)節(jié)因子1的表達(dá)并抑制系膜細(xì)胞增殖和纖維化。還有研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA GAS5可通過(guò)直接調(diào)節(jié)miR-21活性減輕腎纖維化，且血漿lncRNA GAS5水平與腎小球?yàn)V過(guò)率呈正相關(guān)，而尿GAS5水平與腎小球?yàn)V過(guò)率呈負(fù)相關(guān)，因此lncRNA GAS5可作為監(jiān)測(cè)慢性腎臟病進(jìn)展的替代生物標(biāo)志物[51]。

以上研究表明，lncRNA可通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miRNA促進(jìn)或抑制腎纖維化。但miRNA種類繁多，其自身即可在腎纖維化中發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，而miRNA與lncRNA相互作用會(huì)形成一個(gè)交織成網(wǎng)的復(fù)雜體系，是否可在這種復(fù)雜的關(guān)系中找到抗腎纖維化的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)，還需未來(lái)進(jìn)一步研究探討。

2.3調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng) 炎癥反應(yīng)是腎間質(zhì)纖維化進(jìn)展的主要原因之一，抑制炎癥反應(yīng)可改善或延緩腎間質(zhì)纖維化向終末期腎病進(jìn)展，延長(zhǎng)腎臟病藥物治療向腎臟替代治療的時(shí)間[52]。Zhang等[4]研究顯示，lncRNA LRNA9884可直接與MCP-1結(jié)合在轉(zhuǎn)錄水平上增強(qiáng)MCP-1啟動(dòng)子的活性，進(jìn)而加重急進(jìn)型炎癥導(dǎo)致的腎損傷。Peng等[53]通過(guò)建立DN模型發(fā)現(xiàn)，lncRNA NONHSAG053901直接與早期生長(zhǎng)反應(yīng)因子1結(jié)合后，再與TGF-β相互作用，促進(jìn)促炎細(xì)胞因子釋放，加重早期生長(zhǎng)反應(yīng)因子1/TGF-β介導(dǎo)的腎臟炎癥。另有研究證實(shí)，lncRNA MEG3通過(guò)早期生長(zhǎng)反應(yīng)因子1/Toll樣受體4信號(hào)通路上調(diào)纖維化相關(guān)蛋白TGF-β1、α-SMA的表達(dá)，提高腫瘤壞死因子-α、C反應(yīng)蛋白、白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-1β、IL-6、MCP-1等炎癥細(xì)胞因子水平，加重腎間質(zhì)纖維化[54]。研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA Gm4419過(guò)表達(dá)不僅可促進(jìn)高糖誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞ECM成分FN1和Col-Ⅳ分泌，還可促進(jìn)炎癥反應(yīng)；lncRNA Gm4419可直接與核因子κB的p50序列相互作用，促進(jìn)其從細(xì)胞質(zhì)穿梭至細(xì)胞核，從而促進(jìn)核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3炎癥小體的形成和lncRNA Gm4419轉(zhuǎn)錄[55]。此外，過(guò)表達(dá)lncRNA Ptprd-IR也可通過(guò)上調(diào)TGF-β1和IL-1β誘導(dǎo)的核因子κB驅(qū)動(dòng)的促炎細(xì)胞因子的表達(dá)增強(qiáng)炎癥反應(yīng)，加重腎纖維化[56]。超聲微泡在體內(nèi)可有效介導(dǎo)lncRNA Arid2-IR(AT-rich interactive domain 2-IR)短發(fā)夾RNA的表達(dá)，加重炎癥反應(yīng)，而下調(diào)lncRNA Arid2-IR的表達(dá)可顯著抑制UUO模型腎臟的炎癥反應(yīng)[57]。

lncRNA不僅具有促進(jìn)炎癥反應(yīng)、加重腎纖維化的作用，還具有抑制炎癥反應(yīng)、改善腎纖維化的作用。lncRNA GAS5可通過(guò)募集Zeste基因增強(qiáng)子同源物2至基質(zhì)金屬蛋白酶9啟動(dòng)子區(qū)域下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶9的表達(dá)，進(jìn)而抑制腎間質(zhì)纖維化和炎癥[58]。目前有關(guān)lncRNA與主要抗炎細(xì)胞因子IL-10[59]及先天性淋巴樣細(xì)胞[60]之間關(guān)系的研究較少。

2.4調(diào)節(jié)腎臟細(xì)胞凋亡 凋亡是所有主要類型的腎駐留細(xì)胞維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要機(jī)制[61]。持續(xù)、大量的細(xì)胞凋亡可導(dǎo)致腎ECM沉積、腎小管上皮細(xì)胞肥大以及腎小球基底膜受損，進(jìn)而導(dǎo)致腎小管間質(zhì)纖維化[62]。Qin等[7]通過(guò)高糖誘導(dǎo)人足細(xì)胞CIHP-1發(fā)現(xiàn)，腫瘤易感性候選基因15可通過(guò)海綿miR-43c從492移位至509位，從而降低miR-43c對(duì)足細(xì)胞凋亡的抑制作用。lncRNA PVT1在DN小鼠足細(xì)胞中過(guò)表達(dá)，可促進(jìn)足細(xì)胞損傷和凋亡[63]。此外，TGF-β1和FN分別被認(rèn)為是纖維化發(fā)病機(jī)制中的關(guān)鍵細(xì)胞因子和ECM成分，PVT1上調(diào)可導(dǎo)致足細(xì)胞損傷和凋亡，促進(jìn)TGF-β1和FN1積累[64]。DN患者的lncRNA銀屑病易感相關(guān)RNA基因表達(dá)水平升高，而體外實(shí)驗(yàn)表明，過(guò)表達(dá)lncRNA銀屑病易感相關(guān)RNA基因可降低高糖培養(yǎng)小鼠足細(xì)胞的活力，并增強(qiáng)Smad7的表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)足細(xì)胞凋亡，加重腎臟損傷和纖維化[65]。此外，在高糖培養(yǎng)條件下，下調(diào)lncRNA Gm5524表達(dá)和過(guò)表達(dá)lncRNA Gm15645均可誘導(dǎo)小鼠足細(xì)胞凋亡，降低細(xì)胞自噬[66]。lncRNA LOC105374325也可通過(guò)調(diào)節(jié)足細(xì)胞凋亡參與腎纖維化過(guò)程[67]。Shihabudeen Haider Ali等[68]研究顯示，lncRNA MEG3沉默可減少其與多嘧啶結(jié)合蛋白3的結(jié)合，導(dǎo)致腎血管內(nèi)皮細(xì)胞DNA雙鏈斷裂增加；同時(shí)，lncRNA MEG3沉默還可激活p53信號(hào)，上調(diào)p53靶基因的表達(dá)，加速腎血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡和腎間質(zhì)纖維化。

lncRNA也可抑制腎細(xì)胞凋亡，改善腎間質(zhì)纖維化。Min和Xie[69]研究發(fā)現(xiàn)，lncRNA腫瘤易感性候選基因在DN小鼠和體外系膜細(xì)胞中過(guò)表達(dá)可調(diào)節(jié)miR-144/細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子2軸，減輕DN的細(xì)胞凋亡和纖維化程度。Qin等[70]發(fā)現(xiàn)，鉛暴露可抑制腎小管上皮細(xì)胞活力，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，同時(shí)抑制腎小管上皮細(xì)胞lncRNA Uc.173的表達(dá)，且該抑制作用具有時(shí)間和劑量依賴性，上調(diào)lncRNA Uc.173可顯著抑制鉛誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。Li等[71]發(fā)現(xiàn)，lncRNA MALAT1靶向miR-23c可直接抑制ELAVL1(embryonic lethal abnormal vision-like 1)及其下游核苷酸結(jié)合寡聚化結(jié)構(gòu)域樣受體蛋白3的表達(dá)，拮抗miR-23c則可抑制其靶蛋白ELAVL1的作用，進(jìn)而抑制高血糖誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，緩解腎纖維化。Meng等[72]研究表明，lncRNA?；撬嵘险{(diào)基因1可通過(guò)抑制轉(zhuǎn)錄因子PU.1的表達(dá)影響腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和凋亡，改善腎間質(zhì)纖維化。

綜上，細(xì)胞凋亡原為細(xì)胞自我保護(hù)的主動(dòng)性死亡過(guò)程，適當(dāng)?shù)牡蛲鲇欣诰S持腎臟細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，但過(guò)度的、持續(xù)性的凋亡則會(huì)打破內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，導(dǎo)致腎間質(zhì)纖維化。lncRNA可直接導(dǎo)致(或改善)腎臟細(xì)胞凋亡，亦可作用于其他分子或通路導(dǎo)致(或改善)腎臟細(xì)胞凋亡，但具體的作用機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究明確。

2.5調(diào)節(jié)腎臟細(xì)胞增殖 系膜細(xì)胞異常和過(guò)度增殖均在糖尿病相關(guān)間質(zhì)纖維化的病理生理過(guò)程中起重要作用[73]。因此，抑制系膜細(xì)胞的增殖在糖尿病相關(guān)腎間質(zhì)纖維化的進(jìn)程中尤為重要。Yang等[5]發(fā)現(xiàn)，UUO模型小鼠的lncRNA Arid2-IR表達(dá)較高。在小鼠系膜細(xì)胞中過(guò)表達(dá)富含AT的lncRNA有助于系膜細(xì)胞增殖，并促進(jìn)ECM成分Col-Ⅰ和α-SMA分泌，共同促進(jìn)腎纖維化。Li等[6]發(fā)現(xiàn)，lncRNA NEAT1除靶向miR-27-3p和E盒結(jié)合鋅指蛋白1外，還可負(fù)調(diào)控miR-23c，而抑制miR-23c可抵消NEAT1對(duì)高濃度葡萄糖誘導(dǎo)的小鼠系膜細(xì)胞增殖、纖維化和EMT的抑制作用。

此外，上調(diào)lncRNA CYP4B1-PS1-001的表達(dá)可抑制小鼠腎小球系膜細(xì)胞增殖和纖維化，表現(xiàn)為Col-Ⅰ、G1/S期特異性細(xì)胞周期蛋白D1和成纖維蛋白的異常表達(dá)[74]。研究還證實(shí)，lncRNA CYP4B1-PS1-001在DN早期顯著降低，由于lncRNA CYP4B1-PS1-001過(guò)表達(dá)可調(diào)節(jié)核苷的泛素化和降解，因此可逆轉(zhuǎn)系膜細(xì)胞增殖和纖維化[75]。隨著波形蛋白水平的升高和上皮鈣黏素水平的降低，草酸鈣誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞中的lncRNA CHCHD4P4表達(dá)上調(diào)，從而影響細(xì)胞增殖[76]。Wang等[77]研究顯示，lncRNA ENSMUST00000147869在DN模型中顯著下調(diào)，lncRNA ENSMUST00000147869過(guò)表達(dá)可通過(guò)調(diào)控花生四烯酸細(xì)胞色素P450ω12a基因的表達(dá)抑制系膜細(xì)胞增殖和纖維化。Chen等[20]證明，lncRNA SOX2OT可通過(guò)調(diào)節(jié)蛋白激酶B/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路介導(dǎo)的自噬減少DN系膜細(xì)胞增殖和纖維化。以上研究顯示，lncRNA可促進(jìn)或抑制系膜細(xì)胞的增殖，但lncRNA種類繁多，是否還存在其他通過(guò)調(diào)節(jié)系膜細(xì)胞增殖對(duì)纖維化形成產(chǎn)生負(fù)面影響的lncRNA，仍需未來(lái)進(jìn)一步研究探索。

3 小 結(jié)

目前關(guān)于lncRNA在腎癌、DN、慢性腎臟病、急性腎損傷、移植物腎病等相關(guān)領(lǐng)域的研究已取得一定進(jìn)展，通過(guò)藥物或基因技術(shù)靶向特定的lncRNA也有望成為防治腎間質(zhì)纖維化的新途徑。但目前大多數(shù)lncRNA在腎間質(zhì)纖維化中的作用機(jī)制及功能定位尚未明確，闡明具體機(jī)制仍有許多問(wèn)題需要解決：①相關(guān)lncRNA是否可作為功能性RNA分子；②明確與lncRNA相互作用的蛋白質(zhì)；③定義lncRNA與基因組DNA或RNA結(jié)合的位置以及細(xì)胞內(nèi)的精確位置；④確定RNA-蛋白質(zhì)成分整合、控制細(xì)胞功能的機(jī)制。由此可見(jiàn)，還應(yīng)開展更深層次的基礎(chǔ)研究，以揭示lncRNA的生物學(xué)效應(yīng)，實(shí)現(xiàn)臨床精準(zhǔn)治療。