外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞聯(lián)合血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在非小細(xì)胞肺癌患者中的臨床意義

馮 雨，崔 東，張會(huì)民，劉淵源，李瑞杰，欒加強(qiáng)，徐明星，錢如林

(河南省胸科醫(yī)院，河南 鄭州 450003)

非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)屬于原發(fā)性支氣管肺癌，具有分化低、惡性程度高、生長(zhǎng)快、易發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等特點(diǎn)。其早期無特異性表現(xiàn)，多數(shù)患者在確診時(shí)已錯(cuò)過最佳治療時(shí)機(jī)，只能采取放化療，但其5年生存率不足10%[1，2]。早診斷、早治療是提高NSCLC療效、預(yù)后的關(guān)鍵。血清腫瘤標(biāo)志物具有檢測(cè)方便、無創(chuàng)性和結(jié)果快等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于腫瘤篩查和診斷當(dāng)中。循環(huán)腫瘤細(xì)胞(CTCs)和腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)具有密切的聯(lián)系，具有潛在的診斷價(jià)值[3，4]。兩者均可有效檢測(cè)NSCLC，但甚少有研究將兩者聯(lián)合進(jìn)行檢測(cè)。本研究對(duì)CTCs聯(lián)合腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)在NSCLC患者中的臨床意義進(jìn)行分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2020年1月至2022年1月我院收治的102例NSCLC患者作為研究組，納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合NSCLC診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]；②資料完整；③患者均知情同意參與研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①存在嚴(yán)重器臟疾病或免疫性疾病者；②患有其他惡性腫瘤者；③存在精神疾病或相關(guān)家族史，無法配合研究者。研究組男58例，女44例；年齡(62.51±5.15)歲；臨床分期：Ⅰ～Ⅱ期49例，Ⅲ～Ⅳ期53例。選取同期健康體檢者87例作為對(duì)照組，男48例，女39例，年齡(62.07±5.49)歲。

1.2 方法CTCs檢測(cè)方法：收集3 ml靜脈血，免疫磁珠富集技術(shù)分離CTCs，用熒光原位雜交和免疫熒光染色鑒別CTCs，熒光顯微鏡觀察CTCs。腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)方法：分離5 ml靜脈血，10 min后取出低溫保存，羅氏電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測(cè)癌胚抗原(CEA)、神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、細(xì)胞角蛋白19血清片段21-1(CYFRA21-1)，具體操作方法嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)①比較研究組與對(duì)照組、不同臨床分期患者外周血CTCs、CEA、NSE、CYFRA21-1的表達(dá)情況。②電話隨訪1年，記錄患者預(yù)后，以全因性死亡或復(fù)發(fā)再入院為隨訪終點(diǎn)，將其作為預(yù)后不良的標(biāo)準(zhǔn)，分析影響預(yù)后的因素。③分析CTCs聯(lián)合CEA、NSE、CYFRA21-1對(duì)NSCLC的診斷價(jià)值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差描述，比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗(yàn)。多元Logistic回歸分析影響預(yù)后的因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 研究組與對(duì)照組外周血CTCs、血清腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)情況比較研究組CTCs陽(yáng)性表達(dá)、CEA、NSE、CYFRA21-1水平高于對(duì)照組(P<0.05)。見表1。

2.2 不同臨床分期患者外周血CTCs、CEA、NSE、CYFRA21-1的表達(dá)情況比較Ⅲ～Ⅳ期NSCLC患者CTCs陽(yáng)性表達(dá)、CEA、NSE、CYFRA21-1水平均高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05)。見表2。

2.3 影響NSCLC患者預(yù)后的多因素分析年齡、臨床分期、CTCs、CEA、NSE、CYFRA21-1為NSCLC患者預(yù)后的影響因素(P<0.05)。見表3。

2.4 外周血CTCs聯(lián)合CEA、NSE、CYFRA21-1的診斷價(jià)值分析外周血CTCs聯(lián)合血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)靈敏度、特異度、AUC最高(P<0.05)。見表4。

表1 研究組與對(duì)照組CTCs、血清腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)情況比較

表2 不同臨床分期患者外周血CTCs、CEA、NSE、CYFRA21-1的表達(dá)情況比較

表3 影響NSCLC患者預(yù)后的多因素分析

表4 外周血CTCs聯(lián)合CEA、NSE、CYFRA21-1診斷價(jià)值分析

3 討論

臨床對(duì)NSCLC已進(jìn)行深入研究，仍未完全明確其發(fā)病機(jī)制[6～8]。NSCLC主要采取手術(shù)、放化療、靶向治療等，但依舊會(huì)出現(xiàn)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象；且發(fā)生后臨床再次干預(yù)時(shí)預(yù)后較差。臨床認(rèn)為盡早診斷、治療是預(yù)后的關(guān)鍵。

血清腫瘤標(biāo)志物(CEA、NSE、CYFRA21-1)異常表達(dá)對(duì)臨床診斷NSCLC具有一定的指導(dǎo)作用[9～11]。但CEA、NSE、CYFRA21-1均為非特異性腫瘤相關(guān)抗原，單一腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)特異性和敏感性較差，無法及時(shí)發(fā)現(xiàn)病情。因此臨床急需尋找到一種敏感性強(qiáng)，特異性高的檢測(cè)指標(biāo)，與CEA、NSE、CYFRA21-1進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，從而提高NSCLC早期診斷率，延長(zhǎng)患者的生存率[12～14]。研究發(fā)現(xiàn)，大部分進(jìn)入血液的腫瘤細(xì)胞會(huì)在短時(shí)間內(nèi)死亡，而存活下來的少數(shù)腫瘤細(xì)胞具有高活性和轉(zhuǎn)移潛力，可形成癌栓，且后期可發(fā)展為轉(zhuǎn)移灶進(jìn)入外周循環(huán)，因此在外周血液中檢測(cè)到腫瘤細(xì)胞提示了遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的可能性。CTCs屬于腫瘤細(xì)胞，由實(shí)體瘤或轉(zhuǎn)移灶釋放，CTCs水平的變化可為個(gè)體化疾病診療提供依據(jù)，且外周血獲取簡(jiǎn)單，操作方便，但因此項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)為新技術(shù)，目前在臨床中并無廣泛應(yīng)用[15～17]。本研究發(fā)現(xiàn)研究組、Ⅲ～Ⅳ期患者CTCs陽(yáng)性表達(dá)、血清腫瘤標(biāo)志物水平均高于對(duì)照組、Ⅰ～Ⅱ期患者，說明CTCs、血清腫瘤標(biāo)志物參與NSCLC的發(fā)生及發(fā)展過程，兩者對(duì)NSCLC具有一定的診斷價(jià)值。研究認(rèn)為采用外周血循環(huán)腫瘤細(xì)胞聯(lián)合血清腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)，可大大提高檢測(cè)敏感度，為腫瘤的早期診斷提供依據(jù)，從而提高NSCLC患者生存期[18～20]。本研究還對(duì)兩者預(yù)測(cè)價(jià)值進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，外周血CTCs聯(lián)合CEA、NSE、CYFRA21-1檢測(cè)NSCLC的靈敏度、特異度、AUC最高。說明外周血CTCs、血清腫瘤標(biāo)志物均可有效檢測(cè)NSCLC，但兩者聯(lián)合檢測(cè)臨床診斷價(jià)值更高。此外本文發(fā)現(xiàn)年齡、臨床分期、外周血CTCs、血清腫瘤標(biāo)志物為影響NSCLC患者預(yù)后的因素，說明CTCs、血清腫瘤標(biāo)志物的異常表達(dá)可對(duì)患者預(yù)后造成一定的影響。