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    神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的研究進(jìn)展

    2022-11-22 10:44:00趙曉初羅兆莉
    關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)分化譜系星形

    趙曉初 羅兆莉 楊 菲 李 纖*

    (1)首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,北京 100069;2)首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)系,北京 100069;3)首都醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院神經(jīng)生物學(xué)學(xué)系,北京 100069)

    神經(jīng)元(neuron)在胚胎發(fā)育中由神經(jīng)祖細(xì)胞(neuroepithelial cells,NEs)經(jīng)過神經(jīng)元發(fā)生相轉(zhuǎn)變?yōu)榉派錉钅z質(zhì)細(xì)胞(radial glial cells,RGs),通過不對稱分裂直接產(chǎn)生,也有一些神經(jīng)元通過中間祖 細(xì)胞(neural progenitors,NPs)間 接 分 化 產(chǎn)生[1]。出生后,中樞神經(jīng)系統(tǒng)(central nervous system,CNS)中的神經(jīng)元再生能力十分匱乏,僅側(cè) 腦 室(lateral ventricle)的 室 管 膜 下 區(qū)(subventricular zone,SVZ)和 海 馬 齒 狀 回(dentate gyrus,DG)的 顆 粒 下 區(qū)(subgranular zone,SGZ)等幾處保留少量來自放射狀膠質(zhì)細(xì)胞系的膠質(zhì)源性纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)陽性細(xì)胞,在內(nèi)源性條件與外源性因素的共同作用下,緩慢生發(fā)少量神經(jīng)元,遷移至所需位置并整合入神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)發(fā)揮功能[2]。

    在神經(jīng)系統(tǒng)疾病中,不可逆的神經(jīng)元丟失是疾病發(fā)生發(fā)展過程中一個(gè)關(guān)鍵且共有的環(huán)節(jié)。帕金森?。≒arkinson’s disease,PD)患者出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)障礙/運(yùn)動(dòng)遲緩、震顫、僵硬和姿勢不穩(wěn)等運(yùn)動(dòng)癥狀,主要源自于黑質(zhì)致密部中的多巴胺(dopamine,DA)能神經(jīng)元的丟失[3];阿爾茨海默?。ˋlzheimer’s disease,AD)患者不同大腦區(qū)域中都能觀測到神經(jīng)元數(shù)量的減少,且海馬CA1區(qū)和內(nèi)嗅皮質(zhì)中神經(jīng)元的丟失與記憶缺陷的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)[4];在腦卒中(stroke)發(fā)生后,每晚1 min得到救治,患者神經(jīng)系統(tǒng)就丟失1.8億個(gè)神經(jīng)元[5],從而導(dǎo)致不可逆的感覺缺失、運(yùn)動(dòng)障礙和精神后遺癥等。因此,尋找能夠進(jìn)行神經(jīng)元補(bǔ)充、神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)整合和功能恢復(fù)的科學(xué)手段,對神經(jīng)系統(tǒng)疾病的臨床改善是十分迫切且必要的。

    中樞神經(jīng)系統(tǒng)的固有細(xì)胞主要包括神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(glia)以及巨噬細(xì)胞等[6]。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)組織中數(shù)量龐大、功能復(fù)雜,人腦中膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量占人類全部中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞的90%[7]。位于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞主要包括星形膠質(zhì)細(xì)胞(astrocytes)、少突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocytes)和小膠質(zhì)細(xì)胞(microglia)等。小膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生于胚胎時(shí)期的卵黃囊并遷入中樞神經(jīng)系統(tǒng)[8],其他的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元均起源于神經(jīng)外胚層(neuroectoderm)[7](圖1)。在胚胎神經(jīng)發(fā)生的過程中,RGs在神經(jīng)發(fā)生后期向膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生相轉(zhuǎn)變,主要生成星形膠質(zhì)細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞[1,9]。其中,星形膠質(zhì)細(xì)胞是腦內(nèi)最豐富的細(xì)胞群之一,約占中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞總數(shù)的50%[10]。在健康的中樞神經(jīng)系統(tǒng)中,星形膠質(zhì)細(xì)胞參與突觸的形成,去除細(xì)胞外液中多余的神經(jīng)遞質(zhì)以實(shí)現(xiàn)神經(jīng)信號的精準(zhǔn)傳遞,并通過與神經(jīng)元的雙向交流來調(diào)節(jié)突觸與神經(jīng)系統(tǒng)功能、行為和信息處理;還能夠通過調(diào)節(jié)局部血流增減葡萄糖與氧氣供應(yīng),并為神經(jīng)元提供葡萄糖或乳酸等作為能量底物[7,11]。少突膠質(zhì)細(xì)胞由RGs經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(oligodendrocyte progenitor cells,OPCs or NG2 cells)分化而來[12],在中樞神經(jīng)系統(tǒng)不同部位占比不同。其在脊髓背側(cè)柱中占總細(xì)胞數(shù)的37%~42%,其中脊髓灰質(zhì)后角占13%~16%,但在大腦皮層和海馬灰質(zhì)僅占4%~5%[13]。少突膠質(zhì)細(xì)胞能夠包裹軸突,在維持軸突的完整、提供支持與緩沖等保護(hù)、輔助神經(jīng)元沿軸突快速有效地進(jìn)行電信號傳導(dǎo)中發(fā)揮關(guān)鍵作用,并通過自身糖代謝為神經(jīng)元軸突提供諸如葡萄糖、乳酸和糖酵解產(chǎn)物等能量底物,支持其電活動(dòng)[14]。小膠質(zhì)細(xì)胞屬于單核細(xì)胞系統(tǒng),約占中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞總數(shù)的5%~10%[15]。小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)再生能力最強(qiáng)的膠質(zhì)細(xì)胞,在合適條件下可達(dá)每日新增20%的增殖速度[16-17],在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中清除碎片和吞噬細(xì)胞、維持神經(jīng)系統(tǒng)穩(wěn)態(tài)[18],并為其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞的發(fā)育等提供支持[16]??偟膩碚f,由于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量眾多,易于增殖,與神經(jīng)元空間位置相近,這為神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元的轉(zhuǎn)分化提供了得天獨(dú)厚的條件。

    Fig.1 The development of neuronal and glial cells in the central nervous system圖1中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元與神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育過程

    為改善神經(jīng)元丟失這一病理進(jìn)程,學(xué)者們嘗試將非神經(jīng)元細(xì)胞在一定條件下誘導(dǎo)為具有以下特征的神經(jīng)元:具備胞體、軸突與樹突的神經(jīng)元基本形態(tài);表達(dá)Tuj1、MAP2、NeuN、Synapsin等神經(jīng)元標(biāo)志物;具有神經(jīng)元極化特點(diǎn);表面表達(dá)有功能的膜通道蛋白(如電壓門控Na+通道)和能夠被激活的神經(jīng)遞質(zhì)受體(如谷氨酸受體);具備靜息電位、動(dòng)作電位等神經(jīng)元電生理特性;具有形態(tài)(包含突觸小泡等結(jié)構(gòu))和功能(具有自發(fā)的突觸后電流)完整性,能夠整合進(jìn)入神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)并在撤除誘導(dǎo)因素后仍保持神經(jīng)元特性的穩(wěn)定[19]。如前所述,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元位置相近、譜系相同,因而膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化以其原位、直接等優(yōu)點(diǎn),成為逆轉(zhuǎn)神經(jīng)元丟失的潛在有效手段[20],因而作為這一領(lǐng)域中的熱點(diǎn)問題之一,受到了廣泛的關(guān)注與期待。

    所謂轉(zhuǎn)分化(cellular conversion),指通過各種手段對細(xì)胞進(jìn)行基因重編程,使某種細(xì)胞跳過誘導(dǎo)多能干細(xì)胞狀態(tài),直接轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N細(xì)胞并表達(dá)其特征的過程[21]。如能成功實(shí)現(xiàn)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元的轉(zhuǎn)分化,并整合入神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),則中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病病理過程中的神經(jīng)元丟失就可能得到逆轉(zhuǎn),神經(jīng)系統(tǒng)功能就可能得到改善,神經(jīng)系統(tǒng)疾病的臨床治療可能因此產(chǎn)生新的希望。

    1 星形膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的研究進(jìn)展

    中樞神經(jīng)損傷后,受損處原本處于靜止?fàn)顟B(tài)的星形膠質(zhì)細(xì)胞被表皮生長因子(epidermal growth factor,EGF)、纖維生長因子(fibroblast growth factor,F(xiàn)GF)、內(nèi)皮素1(endothelin 1)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)等激活為反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞(reactivated astrocytes),并重新進(jìn)入細(xì)胞周期增殖增生[22-23]。反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞因所受刺激不同,能夠通過不同信號通路改變自身功能并影響其他細(xì)胞,導(dǎo)致神經(jīng)功能障礙[23]。此外,星形膠質(zhì)細(xì)胞長時(shí)程激活會(huì)形成難以降解的膠質(zhì)瘢痕(glial scar),雖然限制了神經(jīng)炎癥的擴(kuò)散,但其在神經(jīng)損傷修復(fù)的過程中會(huì)通過多種復(fù)雜的信號級聯(lián)反應(yīng)產(chǎn)生細(xì)胞毒性分子,抑制突觸與髓鞘的再生、對附近的神經(jīng)通路造成長期負(fù)面影響,導(dǎo)致慢性炎癥或神經(jīng)性疼痛[23]。由于其在刺激下能夠增殖甚至去分化并獲得部分神經(jīng)干細(xì)胞的特性[24-25],星形膠質(zhì)細(xì)胞作為可能向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的一種理想原料成為研究者們的關(guān)注對象。另一方面,將星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元可能減少膠質(zhì)瘢痕對神經(jīng)修復(fù)的長期負(fù)面影響,可能為神經(jīng)損傷后的修復(fù)帶來積極影響。

    研究者們首先將目光聚集在體內(nèi)自然狀態(tài)下的神經(jīng)發(fā)生過程中、對細(xì)胞命運(yùn)改變起到關(guān)鍵作用的轉(zhuǎn)錄因子上,諸如配對框基因6(paired-box 6,Pax6)[26]、少突膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)錄因子2(oligodendrocyte lineage transcription factor 2,Olig2)[27]、原神經(jīng)基因2(neurogenin 2,Ngn2)[28]、神經(jīng)母細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)移因子1(achaete-scute homolog 1,Ascl1)[29]、無 遠(yuǎn) 端 同 源 盒2(distal-less homeobox 2,Dlx2)[30]、神 經(jīng) 分 化 因 子1(neurogenic differentiation 1,NeuroD1)[31]等,希望通過對其轉(zhuǎn)錄活性進(jìn)行操縱,以達(dá)到膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的目的(圖2)。

    2002年,德國馬克斯·普朗克研究所Magdalena G?tz教授課題組首次發(fā)現(xiàn),如果使用包含Pax6 cDNA的逆轉(zhuǎn)錄病毒,感染出生后5~11 d分離培養(yǎng)的小鼠皮層Pax6-的星形膠質(zhì)細(xì)胞,則能夠成功誘導(dǎo)其轉(zhuǎn)分化為具有神經(jīng)元胞體與突起的形態(tài)、表達(dá)Tuj1和NeuN等標(biāo)志物、并對谷氨酸和γ-氨基丁酸(γ-amino butyric acid,GABA)有反應(yīng)的神經(jīng)元[26]。經(jīng)該團(tuán)隊(duì)探索,Pax6在自然狀態(tài)中是一種在發(fā)育的皮層RGs中表達(dá)的神經(jīng)元命運(yùn)因子[32],在小鼠胚胎皮層中能夠通過上調(diào)Ngn2、下調(diào)Ascl1促進(jìn)神經(jīng)元命運(yùn)的決定[26],在星形膠質(zhì)細(xì)胞[26]與反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞[26]中亦能夠誘導(dǎo)表達(dá)部分早中期神經(jīng)元發(fā)育標(biāo)志物,而這些神經(jīng)元是否具有功能仍待探索[27]。在成年體內(nèi)神經(jīng)發(fā)生中,Olig2是一種與Pax6相互拮抗的轉(zhuǎn)錄因子[33],且Olig2基因和原神經(jīng)基因的不同組合對神經(jīng)外胚層譜系向神經(jīng)元、少突膠質(zhì)細(xì)胞或星形膠質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育有決定性意義[34]。在局部缺血和AD模型小鼠皮質(zhì)內(nèi),使用能夠拮抗內(nèi)源性O(shè)lig2功能的逆轉(zhuǎn)錄病毒感染反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞,可以將其轉(zhuǎn)分化為表達(dá)雙皮質(zhì)素(doublecortin,DCX)的未成熟神經(jīng)元[27]。接著,G?tz教授團(tuán)隊(duì)又使用編碼GFP、Ngn2-IRES-GFP或Ascl1-IRES-GFP的VSV-G假 性逆轉(zhuǎn)錄病毒感染從出生后5~7 d小鼠的大腦皮層中分離培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞,成功將其轉(zhuǎn)分化為具有基本神經(jīng)元形態(tài)特征、GFP與Tuj1雙陽性、能夠接受輸入性刺激并可產(chǎn)生電活動(dòng)的突觸后神經(jīng)元[35],通過膜片鉗等電生理手段對轉(zhuǎn)分化而來的神經(jīng)元的膜電位、突觸活動(dòng)進(jìn)行檢測,通過免疫熒光染色檢測能夠代表神經(jīng)元功能活性的標(biāo)志物Tuj1,首次驗(yàn)證了星形膠質(zhì)細(xì)胞能夠轉(zhuǎn)分化為具備神經(jīng)元電生理特性的、有功能的神經(jīng)元,并提出了不同轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞向不同神經(jīng)元亞型轉(zhuǎn)分化的可能性。隨后學(xué)者們陸續(xù)發(fā)現(xiàn),應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)染從出生后早期(2~7 d)的小鼠皮層中分離培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞,過表達(dá)Ngn2可通過上調(diào)T盒腦1(T-box brain 1,Tbr1)誘導(dǎo)谷氨酸能神經(jīng)元的產(chǎn)生[36],同時(shí)過表達(dá)Dlx2和Ascl1誘導(dǎo)GABA能神經(jīng)元的產(chǎn)生[36],而同時(shí)過表達(dá)Ascl1、LIM同 源 框 轉(zhuǎn) 錄 因 子1(LIM homeobox transcription factor 1 beta,Lmx1b)或核受體相關(guān)因子1(nuclear receptor related factor 1,Nurr1),則使星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為DA能神經(jīng)元[37]。更重要的是,通過適當(dāng)?shù)谋磉_(dá)神經(jīng)外胚層譜系細(xì)胞向神經(jīng)元分化的命運(yùn)決定因子能夠誘導(dǎo)出具備功能性突觸前輸出、能自發(fā)形成神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的誘導(dǎo)神經(jīng)元[36],解決了轉(zhuǎn)分化神經(jīng)元無法整合進(jìn)入神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的問題[35]。此外,膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的效率也從原本的較為低下[26,35],通過一定比例轉(zhuǎn)錄因子的搭配提高到了較高的水平[37]。

    在過表達(dá)神經(jīng)元命運(yùn)決定相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子介導(dǎo)的星形膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化中,NeuroD1引起了最為廣泛的關(guān)注。NeuroD1是一種具有基本螺旋-環(huán)-螺旋(basic helix-loop-helix,bHLH)結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子,僅在胰島、腸內(nèi)分泌細(xì)胞、胃與神經(jīng)元、神經(jīng)干細(xì)胞中表達(dá)[38-39],對諸如腺苷酸激酶同工酶1(adenylate kinase isozyme 1,AK1)、肌醇1,4,5-三磷酸受體1(inositol 1,4,5-triphosphate receptor 1,IP3R1)、早 期B細(xì) 胞 因子3(early B-cell factor 3,Ebf3)和POU結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子腦3d(brain 3d,Brn3d)等神經(jīng)分化有關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄激活十分重要[40],在胚胎神經(jīng)發(fā)生(尤其是海馬和小腦中顆粒細(xì)胞的生成[41])以及成年神經(jīng)發(fā)生、成熟和存活中均起到?jīng)Q定性作用[42],并能誘導(dǎo)神經(jīng)元的終末分化[43]。通過向1~14個(gè)月齡的小鼠腦內(nèi)立體定位注射VSV-G假型逆轉(zhuǎn)錄病毒,在小鼠腦內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞中過表達(dá)NeuroD1,在腦外傷、AD模型小鼠皮質(zhì)中星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為功能性谷氨酸能神經(jīng)元[44],首次完成了體內(nèi)星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元的轉(zhuǎn)分化[44]。這些新生神經(jīng)元能夠整合入局部神經(jīng)環(huán)路,修復(fù)神經(jīng)元丟失造成的功能喪失[44]。而后,有學(xué)者發(fā)現(xiàn),利用腺相關(guān)病毒9(adeno-associated virus 9,AAV9)穿過血腦屏障,在紋狀體等部的非反應(yīng)性星形膠質(zhì)細(xì)胞中過表達(dá)NeuroD1,在生理狀態(tài)下也能夠成功將其轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元[45]。以上成果為過表達(dá)NeuroD1誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化提供了基礎(chǔ),使學(xué)者們開始嘗試將NeuroD1應(yīng)用于更多疾病模型與臨床轉(zhuǎn)化(表1)。針對神經(jīng)元丟失導(dǎo)致的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,陳功教授團(tuán)隊(duì)使用AAV在缺血性腦卒中小鼠與猴的皮質(zhì)中實(shí)現(xiàn)了過表達(dá)NeuroD1,成功將星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元[39,46];在亨廷頓舞蹈癥(Huntington’s disease,HD)模型小鼠紋狀體中,實(shí)現(xiàn)了同時(shí)過表達(dá)NeuroD1和Dlx2將星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元[47];在脊髓挫傷、刺傷(stab wound lesion)小鼠模型脊髓背角中實(shí)現(xiàn)了過表達(dá)NeuroD1或同時(shí)過表達(dá)NeuroD1和Dlx2,將星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為脊髓神經(jīng)元亞型,并能整合入脊髓神經(jīng)環(huán)路中[48]。針對以神經(jīng)元過度興奮和突然同步放電為特征的癲癇[49],陳功教授團(tuán)隊(duì)成功運(yùn)用基于NeuroD1過表達(dá)的膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的神經(jīng)再生型基因療法,將顳葉癲癇模型大鼠的海馬腦區(qū)的星形膠質(zhì)細(xì)胞原位轉(zhuǎn)分化為抑制性中間神經(jīng)元,有效地降低了癲癇發(fā)作,為難治性顳葉癲癇的治療帶來了新希望[50]。針對星形膠質(zhì)細(xì)胞來源的惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤(glioblastoma,GBM),陳功教授團(tuán)隊(duì)通過NeuroD1在體外將人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為VGluT3+的谷氨酸能神經(jīng)元,為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的治療提供了新的可能[51]。

    眾多研究結(jié)果展現(xiàn)了通過過表達(dá)NeuroD1操縱星形膠質(zhì)細(xì)胞命運(yùn),使其高效轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的可能性,以及這一手段在臨床應(yīng)用中的巨大潛在前景。然而近期,過表達(dá)NeuroD1誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的可能性受到了質(zhì)疑與廣泛討論。德州州立大學(xué)西南醫(yī)學(xué)中心張春立教授認(rèn)為,由于基因編輯技術(shù)的缺陷,僅僅依據(jù)病毒表達(dá)的熒光報(bào)告基因(例如GFP或mCherry)作為判定新生神經(jīng)元來源,并不能作為轉(zhuǎn)分化的金標(biāo)準(zhǔn):AAV病毒攜帶的基因可能串聯(lián)或重組,導(dǎo)致NeuroD1序列對于熒光報(bào)告基因原本應(yīng)有的順式調(diào)節(jié)作用變成一種類似于反式調(diào)節(jié)作用,導(dǎo)致熒光報(bào)告基因的異常表達(dá)[52];同時(shí)由于AAV、慢病毒會(huì)發(fā)生泄漏,因此報(bào)告基因能夠表達(dá)在原位神經(jīng)元中,而非被基因編輯的星形膠質(zhì)細(xì)胞中[52]。張春立教授團(tuán)隊(duì)還通過譜系追蹤法等多種手段證明,“轉(zhuǎn)分化的神經(jīng)元”在譜系追蹤中無法追溯至過表達(dá)NeuroD1的星形膠質(zhì)細(xì)胞,而是來源于本就存在的原位神經(jīng)元[53]。面對質(zhì)疑,陳功教授團(tuán)隊(duì)通過轉(zhuǎn)錄組測序(RNAsequencing)等手段發(fā)現(xiàn)NeuroD1在星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的過程中發(fā)揮出強(qiáng)大的驅(qū)動(dòng)力,并觸發(fā)了快速的轉(zhuǎn)錄組學(xué)變化[54]。同時(shí)他們利用雙光子活體成像展示了星形膠質(zhì)細(xì)胞(包括譜系追蹤膠質(zhì)細(xì)胞)逐步轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元的過程,并發(fā)現(xiàn)NeuroD1在不同腦區(qū)中誘導(dǎo)轉(zhuǎn)分化形成不同類型的神經(jīng)元,再次驗(yàn)證了過表達(dá)NeuroD1可以誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的結(jié)論[55]。陳功教授認(rèn)為,張春立教授團(tuán)隊(duì)未能成功將星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元有多種可能原因,包括:a.AAV滴度超過安全劑量導(dǎo)致神經(jīng)元泄漏與膠質(zhì)細(xì)胞損傷;b.轉(zhuǎn)分化現(xiàn)象觀察窗口期過短導(dǎo)致現(xiàn)象未出現(xiàn);c.NeuroD1表達(dá)量不足以克服tdTomato標(biāo)記的星形膠質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化阻力等[56]。目前,盡管通過過表達(dá)NeuroD1誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化這一手段表現(xiàn)出令人期待的潛力,但NeuroD1過表達(dá)能否使星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的問題仍在探討,且NeuroD1如何介導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的分子機(jī)制也未被明確解答,再加上AAV、慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒的使用可能導(dǎo)致一系列臨床安全問題,NeuroD1距離真正應(yīng)用于臨床仍然道阻且長。

    Table 1 Results of neuroregenerative therapy based on overexpression of NeuroD1 in disease models表1基于過表達(dá)NeuroD1的神經(jīng)再生療法在疾病模型中的研究成果

    不同于上述將神經(jīng)元命運(yùn)決定相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子上調(diào)的“加法”策略,“減法”策略旨在通過在非神經(jīng)元細(xì)胞中敲低在神經(jīng)分化過程中自然下調(diào)的關(guān)鍵抑制性轉(zhuǎn)錄因子來誘導(dǎo)生成神經(jīng)元?!皽p法”策略中備受關(guān)注的轉(zhuǎn)錄因子是多嘧啶區(qū)結(jié)合蛋白(recombinant polypyrimidine tract binding protein,

    Ptbp)。Ptbp是一類核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)聚嘧啶區(qū)結(jié)合蛋白,在哺乳動(dòng)物中包括Ptbp1~3三個(gè)成員。其中Ptbp1在哺乳動(dòng)物除神經(jīng)元外的大多數(shù)組織細(xì)胞中表達(dá),能夠調(diào)節(jié)可變剪接、信使RNA(messenger RNA,mRNA)翻譯與mRNA穩(wěn)定性等,從而維持神經(jīng)元基因主要抑制因子的活性,抑制細(xì)胞向神經(jīng)元分化的傾向[57]。敲減Ptbp1是將成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的充分且必要的條件[58],利用小發(fā)夾RNA(short hairpin RNA,shRNA)在星形膠質(zhì)細(xì)胞中敲減Ptbp1,也能夠?qū)⑵滢D(zhuǎn)分化為功能性神經(jīng)元,并可在PD小鼠模型中誘導(dǎo)產(chǎn)生新的有功能的DA能神經(jīng)元、重建受損神經(jīng)環(huán)路、恢復(fù)紋狀體多巴胺水平,并有效挽救DA能神經(jīng)元損失,減輕PD小鼠模型的運(yùn)動(dòng)功能障礙[59-60],在老年小鼠中也完成了神經(jīng)元的轉(zhuǎn)分化和功能整合[61]。使用CRISPR-CasRx系統(tǒng)將Müller膠質(zhì)細(xì)胞中的Ptbp1基因敲減,也被證明在完整和受損的成熟視網(wǎng)膜中將膠質(zhì)細(xì)胞在體轉(zhuǎn)分化為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞,并建立中央投射,在藥物性視網(wǎng)膜損傷的小鼠模型中部分恢復(fù)了視覺功能[60]。這些研究為膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元提供了新的思路、手段與證據(jù),為PD及其他神經(jīng)退行性疾病提供了極具前景的治療策略和方法。

    針對Ptbp1,許多團(tuán)隊(duì)亦發(fā)文表示需要重新審視通過敲減Ptbp1誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的可能。在兩種譜系小鼠皮層中運(yùn)用CRISPR-CasRx進(jìn)行敲減時(shí),未觀測到內(nèi)源Ptbp1表達(dá)量的明顯降低,也沒有在譜系追蹤時(shí)觀察到膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的現(xiàn)象[53];使用shRNA進(jìn)行敲減時(shí),雖然觀測到內(nèi)源Ptbp1敲減,但未觀測到譜系標(biāo)記的星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元[53];通過CRISPRCasRx或shRNA敲減Ptbp1都無法將Müller膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞[62];星形膠質(zhì)細(xì)胞特異性譜系追蹤下通過shRNA和反義寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASO)敲減Ptbp1均無法在生理或PD病理狀態(tài)下,將星形膠質(zhì)細(xì)胞直接轉(zhuǎn)分化為DA能神經(jīng)元并改善小鼠運(yùn)動(dòng)障礙[63];利用遺傳譜系示蹤和單細(xì)胞測序譜系追蹤,通過傳統(tǒng)基因編輯方法進(jìn)行Ptbp1敲除,同樣未能觀測到視網(wǎng)膜Müller膠質(zhì)細(xì)胞或皮層、紋狀體的星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化[64]。約翰·霍普金斯大學(xué)Seth Blackshaw教授認(rèn)為,之前研究成果中觀察到的失明小鼠的視覺恢復(fù)和PD小鼠的行為恢復(fù)可能是特異性啟動(dòng)子GFAP在內(nèi)源性神經(jīng)元中的異位表達(dá)或在Ptbp1的脫靶效應(yīng)所致[65]。針對Ptbp1的討論仍在繼續(xù),盡管質(zhì)疑聲頻起,但Ptbp1在胚胎發(fā)育的過程中的確對神經(jīng)分化表現(xiàn)出十分有力的抑制作用[66],故而敲減Ptbp1誘導(dǎo)星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化具備一定的理論可行性,此后的實(shí)驗(yàn)中應(yīng)秉著更加審慎的態(tài)度持續(xù)探究與探討。

    2 小膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的研究進(jìn)展

    盡管星形膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量多,且與神經(jīng)元同為神經(jīng)外胚層譜系的成員,但其再生能力相對較弱[67]。相較而言,小膠質(zhì)細(xì)胞是分布在整個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的常駐免疫細(xì)胞,再生能力十分強(qiáng)大,且腦外傷、腦卒中、神經(jīng)退行性疾病等病理改變均能夠引起其大量的激活和增殖[68]。另外,小膠質(zhì)細(xì)胞的消除基本不會(huì)在健康成年小鼠引起明顯的副作用,反而能在病理狀態(tài)下一定程度上通過減輕小膠質(zhì)細(xì)胞引起的炎癥而緩解中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理改變[68]。因此,近兩年學(xué)者們將目光投向了小膠質(zhì)細(xì)胞,對其是否具備轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的潛能進(jìn)行了研究和探討。

    2019年,九州大學(xué)Nakashima團(tuán)隊(duì)實(shí)現(xiàn)了通過慢病毒在小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)過表達(dá)NeuroD1,在體外、體內(nèi)都成功誘導(dǎo)了小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為表達(dá)Tuj1與MAP2ab等神經(jīng)元標(biāo)志物,有神經(jīng)元基本特性且與原代神經(jīng)元基因表達(dá)譜一致的神經(jīng)元[69](圖2)。在轉(zhuǎn)分化成功的神經(jīng)元中,VGluT1+的谷氨酸能神經(jīng)元占比約75%,GAD67+的GABA能神經(jīng)元占比約25%[69]。在分子層面,NeuroD1的過表達(dá)能夠通過調(diào)節(jié)組蛋白修飾與DNA甲基化水平,通過表觀遺傳調(diào)控神經(jīng)元轉(zhuǎn)錄激活Scrt1與Meis3兩種轉(zhuǎn)錄因子,再通過轉(zhuǎn)錄抑制Mafb與Lyl1兩種小膠質(zhì)細(xì)胞免疫相關(guān)基因,加速小膠質(zhì)細(xì)胞特性的消失[69]。這一研究首次提出了小膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的可能,使神經(jīng)原位再生與細(xì)胞替代療法有了新的潛在選擇,具有較高的臨床價(jià)值與轉(zhuǎn)化意義。

    然而也有觀點(diǎn)認(rèn)為,小膠質(zhì)細(xì)胞屬于單核細(xì)胞系,由胚胎早期卵黃囊髓系祖細(xì)胞分化產(chǎn)生[8],而神經(jīng)元屬于神經(jīng)外胚層譜系,由RGs分化產(chǎn)生[70],與小膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)育譜系差別較大,小膠質(zhì)細(xì)胞不具備向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的理論可行性[68]:包括NeuroD1在內(nèi)的轉(zhuǎn)分化誘導(dǎo)因子均在神經(jīng)外胚層譜系RGs分化的過程中參與決定細(xì)胞的命運(yùn)[42],并不表達(dá)在小膠質(zhì)細(xì)胞所在的髓系譜系中,所以髓系譜系中不一定存在支撐神經(jīng)外胚層譜系細(xì)胞命運(yùn)決定的下游元件。2021年,有研究通過譜系追蹤和活細(xì)胞成像等技術(shù)發(fā)現(xiàn),使用慢病毒過表達(dá)NeuroD1,無法誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元,反而表達(dá)NeuroD1的小膠質(zhì)細(xì)胞發(fā)生大規(guī)模死亡[68]。這也印證了之前陳功教授團(tuán)隊(duì)亦無法通過NeuroD1誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的結(jié)果[44]。針對NeuroD1能否誘導(dǎo)小膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的討論仍在繼續(xù),如若成功,小膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元的轉(zhuǎn)分化這一手段的臨床應(yīng)用前景巨大。

    3 NG2膠質(zhì)細(xì)胞與少突膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的研究進(jìn)展

    少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(OPCs,也稱為NG2膠質(zhì)細(xì)胞),作為成年哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最常見的祖細(xì)胞,終身具備增殖分化的能力,能夠隨時(shí)重新激活增殖,或分化為少突膠質(zhì)細(xì)胞或星形膠質(zhì)細(xì)胞[71]。相較星形膠質(zhì)細(xì)胞,NG2膠質(zhì)細(xì)胞具備卓越的增殖分化能力,可能成為源源不斷的原料;而相較小膠質(zhì)細(xì)胞,NG2膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元譜系一致,向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的可行性更高。因此,NG2膠質(zhì)細(xì)胞走入神經(jīng)再生領(lǐng)域?qū)W者的視野,成為誘導(dǎo)向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的優(yōu)良候選對象(圖2)。

    學(xué)者們同樣希望通過特異性高表達(dá)神經(jīng)元的轉(zhuǎn)錄因子或拮抗NG2膠質(zhì)細(xì)胞中抑制神經(jīng)元命運(yùn)的轉(zhuǎn)錄因子,誘導(dǎo)NG2膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元。性別決定區(qū)Y盒蛋白2(sex-determining region Ybox2,Sox2)在神經(jīng)發(fā)育中,對神經(jīng)干細(xì)胞特性的維持及神經(jīng)元亞型的分化中起重要作用[72]。在刺傷后的小鼠大腦皮質(zhì)中利用逆轉(zhuǎn)錄病毒單獨(dú)過表達(dá)Sox2或同時(shí)過表達(dá)Sox2與Ascl1,可誘導(dǎo)NG2膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為DCX+的神經(jīng)元[73]。隨后,Sox2的上調(diào)也被發(fā)現(xiàn)能在脊髓損傷中誘導(dǎo)NG2膠質(zhì)細(xì)胞重編程為神經(jīng)元,并促進(jìn)新生神經(jīng)元與神經(jīng)通路形成突觸連接與脊髓損傷后的功能恢復(fù)[74]。此外,在成年小鼠紋狀體NG2膠質(zhì)細(xì)胞中利用慢病毒同時(shí)過表達(dá)Ascl1、Lmx1a和Nurr1,能夠?qū)⑵滢D(zhuǎn)分化為GABA能和谷氨酸能神經(jīng)元,并長時(shí)間保持穩(wěn)定的功能性神經(jīng)元電生理特性[75]。

    在星形膠質(zhì)細(xì)胞與小膠質(zhì)細(xì)胞中爭議頗多的NeuroD1與Ptbp1兩種因子,也在NG2膠質(zhì)細(xì)胞與少突膠質(zhì)細(xì)胞的轉(zhuǎn)分化中受到關(guān)注。通過過表達(dá)NeuroD1,可以將體外培養(yǎng)的小鼠皮層NG2膠質(zhì)細(xì)胞和腦外傷小鼠的皮層NG2膠質(zhì)細(xì)胞,轉(zhuǎn)分化為有功能的谷氨酸能和GABA能神經(jīng)元[44];通過慢病毒轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的小鼠皮層少突膠質(zhì)細(xì)胞過表達(dá)NeuroD1,也能將其轉(zhuǎn)分化為NeuN和MAP2ab雙陽性的神經(jīng)元[69]。在小鼠紋狀體少突膠質(zhì)細(xì)胞中敲減Ptbp1,成功誘導(dǎo)其轉(zhuǎn)分化為表現(xiàn)出正常電生理特性的成熟神經(jīng)元[76]。目前,NG2膠質(zhì)細(xì)胞/少突膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化似乎已成為膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化中爭議最少的部分,未來可能為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,尤其是脊髓相關(guān)疾病帶來新的希望。

    Fig.2 Glial cell-neuron conversion圖2膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元的轉(zhuǎn)分化

    4 討論與展望

    使用干細(xì)胞重編程(reprogramming)為神經(jīng)元,是最早嘗試的以補(bǔ)充丟失神經(jīng)元為治療策略的研究方向。已有研究發(fā)現(xiàn),人和小鼠源的骨髓來源的間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow-derived stromal mesenchymal stem cells,BMSCs)可在體外、體內(nèi)分化,重編程為神經(jīng)元[77-78],人與小鼠源的成纖維細(xì)胞等體細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)狀態(tài)重編程為神經(jīng)干/祖細(xì)胞后并最終分化為功能性神經(jīng)元[79-82]。雖然這些研究成果,均為疾病狀態(tài)下神經(jīng)元再生的治療策略奠定了基礎(chǔ)[83],但體外重編程耗時(shí)長而移植窗口短,體內(nèi)重編程難以實(shí)現(xiàn),同時(shí)誘導(dǎo)多能干細(xì)胞向神經(jīng)元的分化存在效率低、整合難、易癌變和高免疫原性等問題,極大地降低了其臨床轉(zhuǎn)化性[84-87]。

    目前,使用星形膠質(zhì)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、NG2膠質(zhì)細(xì)胞等神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,在離體或在體模型上向神經(jīng)元的轉(zhuǎn)分化,均已取得一定的研究進(jìn)展,也是目前神經(jīng)再生領(lǐng)域的熱門話題。就目前的研究進(jìn)展而言,膠質(zhì)細(xì)胞存在實(shí)現(xiàn)在體、原位、安全轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的可能,一旦實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定高效的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化,將為神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療帶來新的希望。

    星形膠質(zhì)細(xì)胞和NG2膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)外胚層譜系分化而來的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,研究者們已成功利用多種手段將其誘導(dǎo)為新生神經(jīng)元,整合到現(xiàn)有的神經(jīng)元回路中在體內(nèi)形成正確連接,并在一些突出的神經(jīng)系統(tǒng)疾病(包括PD、AD和HD)的小鼠模型上,實(shí)現(xiàn)了基于星形膠質(zhì)細(xì)胞/NG2膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化神經(jīng)元再生的可行性。與此同時(shí),研究者們對在星形膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)過表達(dá)NeuroD1或敲減Ptbp1等部分轉(zhuǎn)錄因子的編輯,是否具備介導(dǎo)轉(zhuǎn)分化的功能、對現(xiàn)有研究在實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的合理性與邏輯性等問題存疑,因此通過操縱NeuroD1和Ptbp1的表達(dá),進(jìn)而誘導(dǎo)膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的可行性仍在探討。

    值得思考的是,在轉(zhuǎn)分化的誘導(dǎo)過程中,使用病毒載體插入整合的手段進(jìn)行轉(zhuǎn)錄因子的過表達(dá)或敲減,不僅存在很大的不確定性(如病毒攜帶基因插入方向不定、基因可能存在串聯(lián)、病毒可能發(fā)生泄漏等),也可能存在巨大的安全風(fēng)險(xiǎn)(載體基因組整合入人類基因組易致瘤等)[87-88]。以上問題,為科學(xué)研究結(jié)果結(jié)論是否精準(zhǔn)與可重復(fù),以及臨床應(yīng)用是否靶向與安全帶來隱患。因此,如更改轉(zhuǎn)錄因子的遞送手段,改用細(xì)胞因子或化合物以納米材料為載體進(jìn)行定向投遞等手段取代基因治療途徑,改變膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)譜,將其誘導(dǎo)為神經(jīng)元,或許能增加解決目前在安全性和倫理上遇到的瓶頸問題。

    另外,現(xiàn)有研究多使用標(biāo)志物共表達(dá)的實(shí)驗(yàn)判定新生神經(jīng)元的來源,但受限于現(xiàn)存遞送技術(shù)的高滴度依賴性與易發(fā)生泄漏等缺陷,標(biāo)志物共表達(dá)也許不再是證明神經(jīng)元來源的最佳判斷標(biāo)準(zhǔn)。因此,使用并基于需求開發(fā)更加精準(zhǔn)的技術(shù),驗(yàn)證新生神經(jīng)元的來源是平息質(zhì)疑與進(jìn)行進(jìn)一步探索的最優(yōu)選擇。譜系追蹤,是目前干細(xì)胞領(lǐng)域的“金標(biāo)準(zhǔn)”,且目前中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)全部膠質(zhì)細(xì)胞種類都可以使用基于Cre-loxP系統(tǒng)的報(bào)告基因進(jìn)行永久追蹤,因此使用譜系追蹤等方式,或許能夠更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)恼撟C新生神經(jīng)元的來源[52]。目前,星形膠質(zhì)細(xì)胞/NG2膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化中各因子的作用機(jī)制尚不完全明確,且大多在非靈長動(dòng)物和體外培養(yǎng)的人膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)實(shí)踐,因此,在這一領(lǐng)域中,以下問題亟待進(jìn)一步探索:a.安全高效的因子遞送手段的開發(fā);b.膠質(zhì)細(xì)胞成功轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的判定標(biāo)準(zhǔn)的確立;c.誘導(dǎo)因子在轉(zhuǎn)分化過程中作用機(jī)制的探索;d.在靈長動(dòng)物和人腦中重復(fù)結(jié)論。

    相對于與神經(jīng)元同譜系的兩種膠質(zhì)細(xì)胞,小膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化則道阻且長。盡管有研究提出小膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的可能,但針對小膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的理論與實(shí)驗(yàn)證據(jù)都顯得較為匱乏,只有嚴(yán)謹(jǐn)明確的譜系追蹤、設(shè)計(jì)合理的對照組、明確的活體/活細(xì)胞成像證據(jù)與殺死該細(xì)胞后轉(zhuǎn)分化現(xiàn)象的消失,才能證明膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化現(xiàn)象的真實(shí)存在[68]。目前,小膠質(zhì)細(xì)胞能夠通過某種誘導(dǎo)轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的論斷仍未得到公認(rèn)。未來應(yīng)設(shè)計(jì)更加嚴(yán)謹(jǐn)合理的研究思路,通過更加科學(xué)準(zhǔn)確的技術(shù)手段,獲取更加翔實(shí)確鑿的實(shí)驗(yàn)證據(jù),以確定小膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的可能性。

    總而言之,膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的研究正迅速發(fā)展,并已經(jīng)取得一系列顯著的成果。盡管目前針對一些研究存在部分質(zhì)疑,但討論與質(zhì)疑是推動(dòng)科學(xué)發(fā)展的原動(dòng)力,相信在未來這一領(lǐng)域的面紗終將揭開,膠質(zhì)細(xì)胞-神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的研究也終將為中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的患者帶來福音。

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