新生兒ABO同型血交叉配血不合原因及安全輸血分析

黨創(chuàng)偉 李自鋒 劉釗鋒 丁帥 周峰 李紅娜 宋惠娜

禹州市人民醫(yī)院(許昌市感染性疾病病原體研究重點實驗室)，河南省禹州市 461670

輸血是臨床重要的治療方法，伴有貧血、先天性心臟病、血液病等新生兒通常需要接受輸血治療以維持身體健康、挽救生命[1]。隨著社會經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展、醫(yī)療水平的不斷提升，輸血安全受到更為廣泛的重視。交叉配血試驗的主要目的是檢查供血者、受血者紅細(xì)胞血型抗原與抗體成分能否相容，從而為受血者提供適宜血液，是保證輸血安全的根本前提與有效途徑[2-3]。但在交叉配血過程中常出現(xiàn)ABO同型血交叉配血不合現(xiàn)象，嚴(yán)重影響臨床用血[4]。因此，對交叉配血不合問題進(jìn)行綜合分析，找出其中原因并采取合理輸血策略和措施，才能有效減少輸血不良反應(yīng)。本研究選取我院收治的105例ABO同型血交叉配血不合新生兒為研究對象，對交叉配血不合的主要原因進(jìn)行了分析并制訂了相應(yīng)的輸血策略和措施，使患兒得到安全的輸血治療?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年6月至2020年4月我院收治的ABO同型血交叉配血不合新生兒105例為研究對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)Coomb′s試驗證實為ABO同型血交叉配血不合；家屬簽署干預(yù)研究知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：有出血傾向或血液處于高凝狀態(tài)；伴發(fā)感染性疾??；有嚴(yán)重并發(fā)癥；正在接受免疫抑制劑與激素治療。納入分析的105例新生兒中女48例、男57例；日齡1～28 d，平均(14.13±6.46)d；體質(zhì)量2.9～4.3 kg，平均(3.48±0.22)kg；疾病類型：血液病21例、先天性心臟病45例、早產(chǎn)兒貧血23例、意外傷10例、其他6例。

1.2 方法

1.2.1 儀器及試劑 (1)儀器。血液學(xué)離心機(jī)(日本久保田公司，型號：KA-2200)、恒溫水浴箱(常州市國旺儀器制造有限公司，型號：HHW-420.600.)、全自動血型及配血分析系統(tǒng)(美國強(qiáng)生公司，型號：Ortho Autovue)。(2)試劑?？笿k、抗Le定型試劑，購自BIOSCOT?公司；RhD、ABO、抗人球蛋白檢測卡，購自瑞士達(dá)亞美公司，抗N、抗C、抗E、抗A、抗AB、抗B、抗D、抗H、抗M、抗P1、抗e、抗c、ABO血型反定型細(xì)胞、抗體鑒定譜細(xì)胞、抗體篩選細(xì)胞、抗人球蛋白試劑，購自上海市血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司。

1.2.2 方法 采集新生兒EDTA抗凝血2 mL、不抗凝血3 mL，2 000 r/min離心5 min分離紅細(xì)胞、血漿。以微柱凝膠法實施ABO血型正反定型，進(jìn)行Rh血型檢測、自身抗體檢測、Coomb′s試驗、不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定、冷凝集素檢測：(1)自身抗體檢測。使用37 ℃的生理鹽水對新生兒紅細(xì)胞連續(xù)洗滌3次，實施ABO血型正向定型；用洗滌后的紅細(xì)胞吸收血清中自身抗體，再行ABO血型反向定型與同種抗體檢測。(2)不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定。對ABO血型正反定型不相符的血標(biāo)本，以含有10個稀有血型系統(tǒng)抗原的1、2、3號抗體篩選細(xì)胞實施不規(guī)則抗體篩選；對結(jié)果陽性血標(biāo)本，以10個譜細(xì)胞對抗體進(jìn)行特異性鑒定；對有特異性抗體的血標(biāo)本，以含有相應(yīng)抗原紅細(xì)胞實施效價檢測。(3)冷凝集素檢測。將新生兒血清與自身紅細(xì)胞混合，4 ℃放置3 h，用于冷凝集素試驗。(4)Coomb′s試驗。使用37 ℃的生理鹽水對新生兒紅細(xì)胞連續(xù)洗滌3次，以氯化鈉溶液將紅細(xì)胞制備成20 mL/L懸液，行Coomb′s試驗。若結(jié)果呈陽性，將紅細(xì)胞置于56 ℃水浴箱中放散10 min，使用放散后Coomb′s試驗結(jié)果呈陰性的紅細(xì)胞開展ABO、RhD血型檢測，并行交叉配血試驗。采用凝聚胺法驗證交叉配血不合血標(biāo)本，分析交叉配血不合的主要原因，并為患兒制訂相應(yīng)的輸血策略。

2 結(jié) 果

2.1 交叉配血不合主要原因 105例新生兒ABO同型血交叉配血不合的主要原因有不規(guī)則抗體37例(35.24%)、冷凝集素24例(22.86%)、自身抗體陽性20例(19.05%)、溶血病13例(12.38%)、血漿蛋白異常7例(6.67%)、擴(kuò)容與止血藥物4例(3.81%)。

2.2 配血方法對交叉配血結(jié)果的影響 對105例新生兒交叉配血不合的血標(biāo)本，采用微柱凝膠法進(jìn)行交叉配血的結(jié)果顯示，主側(cè)配血不合72例、次側(cè)配血不合19例、主次側(cè)配血均不合14例；采用凝聚胺法進(jìn)行交叉配血的結(jié)果顯示，主側(cè)配血不合72例、次側(cè)配血不合19例、主次側(cè)配血均不合14例。

2.3 交叉配血不合輸血策略 (1)不規(guī)則抗體：鑒定抗體特異性，為患兒選取抗原為陰性的血液。(2)冷凝集素：4 ℃下吸收自身抗體，并在37 ℃下進(jìn)行交叉配血。(3)自身抗體：行自身抗體吸收試驗。(4)血漿蛋白異常：洗滌紅細(xì)胞。(5)溶血?。盒锌谷饲虻鞍自囼?、吸收放散試驗。(6)擴(kuò)容與止血藥物：洗滌紅細(xì)胞。

3 討 論

輸血在臨床治療中發(fā)揮著重要作用，尤其是在急診搶救患者中具有不可替代的地位[5]。輸血前行交叉配血試驗是保證輸血有效性與安全性的重要舉措，若出現(xiàn)ABO同型血交叉配血不合現(xiàn)象，應(yīng)立即找出原因并制訂出相應(yīng)的策略和措施，為患者安全輸血提供保障[6]。

本研究結(jié)果顯示，由不規(guī)則抗體引發(fā)的新生兒ABO同型血交叉配血不合占35.24%。不規(guī)則抗體多為輸血或妊娠時Rh血型不合形成的IgG型抗體，是引發(fā)新生兒溶血病、溶血性輸血反應(yīng)、ABO血型正反定型不符與交叉配血不合主要因素[7-8]。針對這種情況，可在了解新生兒臨床診斷、輸血史、母親妊娠史等情況的前提下，以譜細(xì)胞、抗體篩選細(xì)胞實施不規(guī)則抗體篩選及特異性鑒定，選取無相應(yīng)抗原供血標(biāo)本對患兒進(jìn)行交叉配血。

本研究結(jié)果顯示，由冷凝集素引發(fā)的新生兒ABO同型血交叉配血不合占22.86%。當(dāng)新生兒患有某種疾病時，其血清中含有高效價冷凝集素，溫度較低時具備活性，會干擾血型鑒定與交叉配血試驗結(jié)果[9-10]。針對這種情況，可使用37 ℃的生理鹽水對新生兒紅細(xì)胞進(jìn)行連續(xù)洗滌，置于4 ℃下，在吸收血清中冷凝集素后再進(jìn)行血型鑒定及交叉配血試驗可有效消除冷凝集素干擾。

本研究結(jié)果顯示，由自身抗體陽性所引發(fā)的新生兒ABO同型血交叉配血不合占19.05%。早產(chǎn)兒胎內(nèi)骨髓外造血過早停止，胎兒出生后機(jī)體快速生長發(fā)育，易引起新生兒貧血；貧血新生兒紅細(xì)胞被自身抗體致敏后會引發(fā)Coomb′s試驗結(jié)果陽性，與所有供血者紅細(xì)胞進(jìn)行交叉配血試驗均不合[11-12]。針對這種情況，可使用紅細(xì)胞吸收自身抗體后的血清及特異性抗體對抗原呈陰性的紅細(xì)胞進(jìn)行間接Coomb′s試驗主側(cè)配血；對抗體特異性不能確定的新生兒，在病情危重必須及時輸血時，可少量緩慢輸注主側(cè)配血凝集最弱的Rh、ABO血型或與新生兒同型的洗滌紅細(xì)胞。

本研究結(jié)果顯示，由溶血病所引發(fā)的新生兒ABO同型血交叉配血不合占12.38%?；加腥苎〉男律鷥海浼t細(xì)胞可與不規(guī)則抗體、IgG型抗A(B)結(jié)合，或因其血清中含有不規(guī)則抗體、IgG型抗A(B)，在交叉配血時會引發(fā)主側(cè)與次側(cè)不合[13]。在這種情況下，溶血病新生兒的紅細(xì)胞直接Coomb′s試驗結(jié)果呈陽性，次側(cè)配血多不合，因此可只行主側(cè)配血，不行次側(cè)配血；對ABO新生兒溶血病患兒可選擇O型紅細(xì)胞與新生兒血清行主側(cè)配血，對非ABO新生兒溶血病患兒可選擇不含相應(yīng)抗原紅細(xì)胞與新生兒血清進(jìn)行主側(cè)配血，從而成功配血為患兒進(jìn)行輸血治療。

本研究結(jié)果顯示，由血漿蛋白異常所引發(fā)的新生兒ABO同型血交叉配血不合占6.67%。這是由于供血者血標(biāo)本在未充分抗凝或新生兒血漿內(nèi)含有大量纖維蛋白原，在行交叉配血試驗時纖維蛋白原被激活，凝集時形成凝塊；或新生兒血清球蛋白大量增加導(dǎo)致紅細(xì)胞間Zeta電位降低而形成假凝集，會對交叉配血結(jié)果造成嚴(yán)重影響[14]。針對這種情況，可在配血試管中添加少許生理鹽水消除凝集，若凝集仍難以消除，可將血標(biāo)本放置于37～43 ℃下孵育10 min，離心處理，并連續(xù)洗滌紅細(xì)胞3次，然后再行交叉配血試驗；也可使用血清標(biāo)本行交叉配血，這樣可有效消除纖維蛋白原的干擾，從而成功配血為患兒進(jìn)行輸血治療。

本研究結(jié)果顯示，由擴(kuò)容與止血藥物所引發(fā)的新生兒ABO同型血交叉配血不合占3.81%。擴(kuò)容藥物能吸附于紅細(xì)胞表面，形成假凝集，而止血藥物能使得血小板聚集，兩種藥物均會對交叉配血試驗結(jié)果造成干擾[15]。針對這種情況，可在配血試管中添加少許生理鹽水消除凝集，或連續(xù)洗滌紅細(xì)胞3次再行試驗，也可在輸注擴(kuò)容與止血藥物前采集血標(biāo)本，可有效排除藥物對血型鑒定、交叉配血的影響，從而成功配血為患兒進(jìn)行輸血治療。

本研究結(jié)果顯示，采用微柱凝膠法進(jìn)行交叉配血，105例患兒的血標(biāo)本中主側(cè)配血不合、次側(cè)配血不合、主次側(cè)配血均不合分別有72、19、14例。微柱凝膠法雖然具有操作簡單、靈敏度高等優(yōu)勢，但也易引發(fā)假陽性，造成交叉配血不合，當(dāng)出現(xiàn)ABO同型血交叉配血不合時需對血標(biāo)本適當(dāng)處理，同時采用凝聚胺法進(jìn)行驗證試驗。新生兒ABO同型血交叉配血不合主要由冷凝集素、自身抗體、不規(guī)則抗體、血漿蛋白異常、溶血病、擴(kuò)容與止血藥物等因素引發(fā)，采取相關(guān)策略和措施，開展相關(guān)試驗，可為患兒選擇合適血液進(jìn)行安全輸血治療。