蒙藥紫花高烏頭研究進(jìn)展*

席琳?qǐng)D雅， 陳紫葳， 苗佳勇， 青格勒， 斯琴巴特爾， 李旻輝

(1.錫林郭勒盟蒙醫(yī)醫(yī)院，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000；2.包頭醫(yī)學(xué)院；3.內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué))

紫花高烏頭(正名：Aconitum septentrionale Koelle，原名為Aconitum excelsum Reichb)為毛茛科烏頭屬的中生草本植物，全草入蒙藥(蒙藥名：嘎布日地勞)，在《內(nèi)蒙古植物志》第三版、《中華醫(yī)學(xué)百科全書(shū)·蒙醫(yī)分卷》《無(wú)誤蒙藥鑒》以及《認(rèn)藥白晶鑒定》中均有記載。作為一種藥用植物，能夠清肺熱，主治肺熱咳嗽、氣管炎等。其生于森林帶的林下及林緣草甸，產(chǎn)于興安北部(阿爾山市阿爾山和白狼鎮(zhèn))、興安南部(克什克騰旗)、燕山北部(寧城縣)，分布于我國(guó)黑龍江省和遼寧省西北部、蒙古國(guó)北部和俄羅斯(西伯利亞地區(qū))以及歐洲地區(qū)[1-2]。紫花高烏頭在蒙醫(yī)藥中普遍使用，廣泛用于治療慢性支氣管炎等疾病。筆者依據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)，綜述了紫花高烏頭在種子萌發(fā)、化學(xué)成分和含量測(cè)定等相關(guān)研究，為蒙藥紫花高烏頭的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用提供基礎(chǔ)依據(jù)。

1 種子萌發(fā)研究

紫花高烏頭種子萌發(fā)的研究是現(xiàn)階段提升種植率的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，加大紫花高烏頭培育，是藥材供應(yīng)的首選任務(wù)。過(guò)去對(duì)紫花高烏頭種子萌發(fā)研究缺乏重視，無(wú)法提供行之有效的科學(xué)依據(jù)。周麗霞等[3]主要研究了紫花高烏頭種子萌發(fā)在浸種時(shí)間、赤霉素濃度及環(huán)境溫度方面的不同，結(jié)合種子吸水曲線，認(rèn)為種子發(fā)芽前浸泡12～24 h為最好，超過(guò)60 h就會(huì)導(dǎo)致內(nèi)含物滲出，影響種子的重量；赤霉素可以有效打破紫花高烏頭種子的休眠，對(duì)種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)有明顯的提升程度，但對(duì)于不同光照條件，赤霉素的濃度也有所不同，光照條件下以1 000 mg/L為最佳處理濃度，黑暗條件下以500 mg/L為最佳處理濃度；適宜種子萌發(fā)的溫度在15～20 ℃，低溫有利于正常處理或未處理的種子的萌發(fā)，高溫則有利于高濃度的、且經(jīng)赤霉素溶液處理后的種子的萌發(fā)。結(jié)合紫花高烏頭種子萌發(fā)試驗(yàn)。烏日嘎瑪拉等[4]總結(jié)了不同環(huán)境下的種子萌發(fā)特性，研究選取了種子質(zhì)量較高的內(nèi)蒙古錫盟地區(qū)寶格達(dá)山林場(chǎng)的野生種源，清水浸泡24 h后并未打破種子的休眠，而是選取1 000 mg/L的赤霉素，使得紫花高烏頭種子的發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)顯著提升，另外低溫層積處理的種子同樣有助于提高發(fā)芽率和發(fā)芽勢(shì)，并且種子4～6 d后即達(dá)發(fā)芽高峰。

通過(guò)學(xué)者們的研究發(fā)現(xiàn)，了解種子萌發(fā)特性，是大規(guī)模種植紫花高烏頭的關(guān)鍵基石，在不同環(huán)境條件下種子萌發(fā)特性的研究尤為重要。紫花高烏頭種子本身具有一定休眠特性，只有通過(guò)赤霉素的處理才可有效催萌發(fā)芽，同樣在種植養(yǎng)護(hù)上也離不開(kāi)特殊藥劑的催化。經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)研究，掌握不同處理方法對(duì)紫花高烏頭種子萌發(fā)的影響程度，以總結(jié)出具有科學(xué)性、有效性的規(guī)律。

2 化學(xué)成分研究

2.1總生物堿 紅艷等[5]采用薄層色譜法從紫花高烏頭總生物堿中分離鑒定了7個(gè)生物堿：lappaconitine、ranaconitine、septentriodine、6-demethyldelsodine、6-methylumbrofine、8-methyl-10-hydroxylycoctonine和8-methyllycoctonine。以上化學(xué)成分對(duì)慢性支氣管炎的治療效果均較好。

2.2二萜生物堿[6]二萜生物堿具有抗炎鎮(zhèn)痛、抗腫瘤和抗心律失常等多種顯著的藥理活性。張樹(shù)祥等[7-8]曾從紫花高烏頭根中分離得到過(guò)12種二萜生物堿，之后董玉等[9]利用硅膠柱層析法分離得到4種二萜化合物。

2.2.1C18-二萜生物堿 C18-二萜生物堿具有抗炎、抗心律失常等活性。根據(jù)C7位基團(tuán)的不同，分為高烏寧堿型和冉烏寧堿型。紫花高烏頭中常見(jiàn)C18-二萜生物堿成分有exceconidine(6-methylumbrofine)、excelsine、拉巴烏頭堿(lappaconitine)和ranaconitine。

2.2.2C19-二萜生物堿 C19-二萜生物堿具有抗炎、抗心律失常等活性。根據(jù)碳骨架和取代基位置可分為烏頭堿型、牛扁堿型、熱解型、內(nèi)酯型、7,17-次裂型和重排型。紫花高烏頭中常見(jiàn)C19-二萜生物堿成分有acoseptridine、acoseptrinine、氨茴酰牛扁堿(anthranoyllycoctonine)、acoseptine、acoseptrigine、acoseptriginine、anthraniloyllycoctonine、anhydrolycaconitine、acoseptridinine、delvestidine、eldelidine、牛扁堿(lycoctonine)、N-acetylsepaconitine、puberaconitine、septerine、瑟佩定(septentriodine)、septentrionine、6-demethyldelphatine、6-O-methyldelcorine、6-O-methyleldelidine、8-O-methyllycaconitine和14-O-methylforesticine。

2.2.3C20-二萜生物堿 C20-二萜生物堿具有抗腫瘤、抗心律失常等活性。主要分為海替定型、光翠雀堿型、阿替生型、納哌啉型、海替生型和維特欽型。紫花高烏頭中常見(jiàn)C20-二萜生物堿成分有阿替新(atisine)、septatisine、septentriosine、septenine、septedine和septedinine。

2.3其它成分 在紫花高烏頭檢測(cè)出的眾多化合物中，高烏甲素與冉烏頭堿是重要的含量測(cè)定成分，作為一項(xiàng)質(zhì)量控制指標(biāo)而受到廣大學(xué)者們的深入探討。此外，桂香等[10]綜述蒙藥紫花高烏頭化學(xué)成分的研究進(jìn)展中，經(jīng)整理發(fā)現(xiàn)除以上新化合物，在紫花高烏頭根莖葉中還含有黃酮成分，利用空氣-乙炔火焰原子吸收光譜測(cè)定出紫花高烏頭的莖葉中有微量元素如Fe、Mn、Cu，另外采用硅膠柱層析法從紫花高烏頭根中分離出甾醇類(lèi)等化學(xué)成分。近年來(lái)玉華等[11]采用硅膠柱色譜法從紫花高烏頭石油醚提取物中首次分離得到5個(gè)甾體類(lèi)化合物和3個(gè)三萜類(lèi)化合物。

3 藥理作用研究

在桂香等[10-11]文獻(xiàn)綜述報(bào)道，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明紫花高烏頭具有鎮(zhèn)咳祛痰、鎮(zhèn)靜解熱作用，對(duì)豚鼠離體腸具有抑制回腸收縮作用，對(duì)嗎啡依賴的動(dòng)物起到戒斷作用。韓瑞蘭等[12-14]通過(guò)多次藥理實(shí)驗(yàn)早已證明了紫花高烏頭醇提物有治療慢性支氣管炎的作用，對(duì)豚鼠離體氣管平滑肌具有舒張作用，在模型大鼠肺組織能顯著降低1L-1β的含量，減少炎性反應(yīng)，控制慢性支氣管炎。通過(guò)觀察發(fā)現(xiàn)，紫花高烏頭全草醇提物在長(zhǎng)期用藥中對(duì)肝臟功能并沒(méi)有顯著影響，但是可以使得血液中白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白以及血小板的數(shù)量顯著提高，由于血小板和紅細(xì)胞數(shù)量的增加，可能就導(dǎo)致血液黏滯度增加。針對(duì)蒙藥紫花高烏頭治療慢性支氣管炎的有效部位及作用機(jī)制的研究，張新迪等[15]采用系統(tǒng)溶劑法萃取了紫花高烏頭80 %醇提物，以研究不同溶劑萃取部分的治療作用。結(jié)果表明蒙藥紫花高烏頭確實(shí)可以改善慢性支氣管炎大鼠的一些體征狀況，且發(fā)揮主要治療作用的活性成分以三氯甲烷萃取部分最為顯著。可能的原因是通過(guò)調(diào)整大鼠肺組織TNF-α含量，去除炎癥誘導(dǎo)因素，使分泌的TNF-α含量減少；另外，大鼠肺組織1L-4、1L-10含量增加，機(jī)體抗炎細(xì)胞因子的活性增強(qiáng)，以保持機(jī)體間抗炎細(xì)胞因子平衡，從而達(dá)到治療作用。溫愛(ài)平等[16]通過(guò)成分提取及活性研究實(shí)驗(yàn)，得出紫花高烏頭多糖成分清除DPPH自由基、羥基自由基的能力顯著，表明出強(qiáng)抗氧化活性。蒙藥紫花高烏頭的藥理作用主要表現(xiàn)在蒙醫(yī)臨床治療呼吸系統(tǒng)疾病、治愈慢性支氣管炎及引起的一系列癥狀上。

4 含量測(cè)定研究

4.1苯酚-硫酸比色法 溫愛(ài)平等[16]通過(guò)水提醇沉法提取紫花高烏頭的多糖成分，采用料液比1:25，提取2次、每次3h的最佳工藝正交試驗(yàn)。用苯酚-硫酸法測(cè)定紫花高烏頭各部位的含量，得到紫花高烏頭根中所含多糖成分的含量最多，莖中最少。

4.2高效液相色譜法 史巧霞等[17-18]采用HPLC法、C18色譜柱，以流動(dòng)相乙腈-0.05 mol/L乙酸銨水溶液梯度洗脫，流速1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，柱溫30℃，對(duì)紫花高烏頭中高烏甲素及冉烏頭堿進(jìn)行含量測(cè)定。同時(shí)采用高相液相色譜-二極管陣列檢測(cè)(HPLC-DAD)技術(shù)建立了紫花高烏頭指紋圖譜。此測(cè)定方法準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)，重復(fù)性好。趙小梅等[19]采用C18色譜柱，選擇乙腈-0.04 mol/L醋酸銨水溶液梯度洗脫體系，測(cè)定了10批次紫花高烏頭藥材中高烏甲素與冉烏頭堿的含量。此方法拖尾得到改善，分離度較好。

4.3薄層色譜法 史巧霞等[17]采用薄層色譜法以高烏甲素、冉烏頭堿為對(duì)照品，以正己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇(4:7:8:2)為展開(kāi)劑，在紫外光燈的觀察下，發(fā)現(xiàn)了供試品與對(duì)照品在色譜中相應(yīng)位置顯示相同的藍(lán)色斑點(diǎn)。該測(cè)定方法簡(jiǎn)便易行，且分離度好。

4.4紫外—可見(jiàn)分光光度法 任文栓等[20]采用分光光度法測(cè)定酯型生物堿的含量，選擇檢測(cè)波長(zhǎng)520 nm測(cè)定吸光度，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行計(jì)算。該測(cè)定方法同樣簡(jiǎn)便易行，結(jié)果準(zhǔn)確。

生物堿含量測(cè)定是鑒定紫花高烏頭藥材的重要指標(biāo)，采用不同方法對(duì)其定性分析，同時(shí)建立HPLC指紋圖譜，能夠很好地用于紫花高烏頭質(zhì)量評(píng)價(jià)分析。

5 臨床治療研究

紫花高烏頭的臨床觀察研究甚少，僅在早期，蒙藥紫花高烏頭被制成糖漿劑給予225例受試者[21]，每日4次，一次口服25 mL，療效判定顯示總有效率達(dá)96.89 %。由于研究較早，臨床受試患者較少，對(duì)于臨床治療研究分析亟需提升。

6 小結(jié)

從有關(guān)紫花高烏頭的文獻(xiàn)中，能夠清楚地了解到蒙藥紫花高烏頭藥材多半源于野生，若沒(méi)有栽培品的補(bǔ)給，野生資源很有可能急速下降。因此加大種植研究，打破種子自身的休眠特性，提升發(fā)芽率，合理利用生物藥劑，完善紫花高烏頭種植的外部條件是保證紫花高烏頭產(chǎn)出的良好保證。應(yīng)充分研究紫花高烏頭的化學(xué)成分如高烏甲素、冉烏頭堿等，開(kāi)發(fā)、利用和加大紫花高烏頭在各方面的應(yīng)用。在藥理作用上紫花高烏頭對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的鎮(zhèn)靜解熱作用、總堿的抗心律失常作用、慢性支氣管炎治愈機(jī)制等作用要更進(jìn)一步地研究。在含量測(cè)定方面，除野生紫花高烏頭藥材的生物堿含量需達(dá)到要求，不同環(huán)境條件下栽培品也需達(dá)標(biāo)；同樣，其有效檢測(cè)的手段則需要更為廣泛的研究。

由于對(duì)蒙藥紫花高烏頭合理的采收、引種馴化及臨床治療等方面的研究報(bào)道相對(duì)甚少，特別是其作為蒙藥藥材重要的品種，在醫(yī)療領(lǐng)域中起到不可替代的作用，因此在臨床研究方面亟需科學(xué)依據(jù)以證實(shí)紫花高烏頭的藥用穩(wěn)定性。

綜上所述，紫花高烏頭在來(lái)源上大量依靠野生，苛刻的種植環(huán)境、種植技術(shù)是藥材供不應(yīng)求的隱患因素。另外，老舊的臨床觀察手段使得蒙醫(yī)臨床治療研究缺乏科學(xué)性的依據(jù)，需從真正的用藥目的上下手，進(jìn)行更深入的臨床試驗(yàn)研究。所以，筆者希望在民族醫(yī)藥政策的強(qiáng)力支撐下，標(biāo)準(zhǔn)化的研究可以為蒙藥紫花高烏頭帶來(lái)療效可靠、安全穩(wěn)定的新藥發(fā)展方向，大力發(fā)展國(guó)內(nèi)市場(chǎng)，在蒙藥紫花高烏頭藥材上開(kāi)發(fā)上做出重大成果。