腫瘤微環(huán)境對(duì)套細(xì)胞淋巴瘤作用的研究進(jìn)展

王云君 于國(guó)華

1 濱州醫(yī)學(xué)院第二臨床醫(yī)學(xué)院 山東 煙臺(tái) 264003；2 毓璜頂醫(yī)院病理科 山東 煙臺(tái) 264000

套細(xì)胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma，MCL)是一種成熟的B細(xì)胞腫瘤，占非霍奇金淋巴瘤的5%～10%。MCL患者預(yù)后較差，中位總生存期(OS)為3～5年[1]。MCL鏡下形態(tài)較單一，由小至中等大小的淋巴樣細(xì)胞構(gòu)成，核輕微至顯著不規(guī)則，類(lèi)似于中心細(xì)胞，通常伴有ccnd1的易位。MCL的遺傳學(xué)特征是易位t(11;14)(q13;q32)和在Pre-B細(xì)胞中獲得的ccnd1過(guò)表達(dá)。最常見(jiàn)的MCL形式來(lái)自于成熟的B細(xì)胞，這些細(xì)胞繞過(guò)生發(fā)中心，沒(méi)有攜帶或攜帶有限數(shù)量的ighv突變。第二種亞型同樣來(lái)自t(11;14)的細(xì)胞，但結(jié)合了生發(fā)中心，攜帶了較高數(shù)量的ighv突變。淋巴結(jié)是最常累及部位，脾、骨髓也較常累及[2]。80%患者診斷時(shí)處于晚期(Ⅲ～Ⅳ期)，且常伴骨髓和外周血浸潤(rùn)。80%～90%的患者累及胃腸道，30%～50%的患者伴2種以上結(jié)外病變[3-4]。針對(duì)MCL不同的生長(zhǎng)模式，MCL可以被劃分為三種不同的組織亞型：套區(qū)型、結(jié)節(jié)型和彌漫型。這些生長(zhǎng)模式在一定程度上反映了腫瘤細(xì)胞與非惡性細(xì)胞相互作用的不同方式。在一些臨床研究中，生長(zhǎng)模式的類(lèi)型與患者預(yù)后的差異有關(guān)，但與腫瘤細(xì)胞增殖等其他病理參數(shù)相比，相關(guān)性不足，預(yù)測(cè)能力較差。對(duì)于MCL的治療方法，目前臨床使用較多的有化學(xué)免疫療法和自體干細(xì)胞移植。盡管最初的治療策略可達(dá)到較高的緩解率，但大多數(shù)患者會(huì)復(fù)發(fā)。經(jīng)證實(shí)，自體干細(xì)胞移植后維持利妥昔單抗可提高存活率[5-7]。MCL有擴(kuò)散和歸巢到不同組織間隔的傾向，而腫瘤細(xì)胞的運(yùn)輸和歸巢是一個(gè)復(fù)雜的、受到高度調(diào)控的過(guò)程，在這個(gè)過(guò)程中，淋巴瘤細(xì)胞需要通過(guò)趨化因子受體和粘附分子的表達(dá)和反應(yīng)性被基質(zhì)細(xì)胞衍生的趨化因子梯度吸引并保留在組織中。越來(lái)越多的研究表明，MCL的微環(huán)境會(huì)對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程產(chǎn)生一定影響，本文將對(duì)MCL微環(huán)境中主要的影響因素進(jìn)行概述。

1 T淋巴細(xì)胞

T淋巴細(xì)胞參與MCL腫瘤微環(huán)境的構(gòu)成。T細(xì)胞包括CD4陽(yáng)性的T細(xì)胞和CD8陽(yáng)性的T細(xì)胞，其中的CD4陽(yáng)性的T細(xì)胞又分為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(regulatory cell，Treg)、濾泡性輔助性T細(xì)胞(follicular regulatory T-cell，Tfh)、輔助性T細(xì)胞(helper T-cell，Th)以及濾泡性調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(follicular regulatory T-cell，Tfr)等[8-9]。Rakhra[10]發(fā)現(xiàn)，CD4陽(yáng)性的T細(xì)胞是癌基因失活后導(dǎo)致細(xì)胞衰老、減少血管生成及促進(jìn)持續(xù)性腫瘤衰退趨化因子的關(guān)鍵，CD4陽(yáng)性T細(xì)胞的缺失可能會(huì)使患者在進(jìn)行腫瘤治療時(shí)無(wú)法取得良好的療效并阻礙腫瘤細(xì)胞的徹底清除。所以，Rakhra等推測(cè)CD4陽(yáng)性T細(xì)胞可能會(huì)在藥物治療時(shí)提高療效，結(jié)合靶向癌基因失活及免疫治療可能成為有效的抗癌療法。最近的研究表明，在外周血液和淋巴結(jié)中， CD4陽(yáng)性的T細(xì)胞數(shù)量和CD4/CD8比值與MCL的OS呈正相關(guān)，侵襲性MCL的CD3、CD4和CD8陽(yáng)性的T細(xì)胞的絕對(duì)計(jì)數(shù)較低,盡管T細(xì)胞水平較低，但Treg對(duì)MCL有負(fù)面影響[11]。在MCL淋巴結(jié)中觀(guān)察到T細(xì)胞程序性細(xì)胞死亡1(PD-1)蛋白的表達(dá)，主要分布在生發(fā)中心，提示與腫瘤細(xì)胞相互作用[12]。除此之外，CD4陽(yáng)性T細(xì)胞可以通過(guò)產(chǎn)生相關(guān)的化學(xué)因子來(lái)刺激具有Th1和Th2活性的CD8陽(yáng)性T細(xì)胞發(fā)揮抗腫瘤效應(yīng)，同時(shí)還可以促進(jìn)CD8陽(yáng)性T細(xì)胞活化并提高CD8陽(yáng)性T細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的破壞能力。除了上述作用，在MCL細(xì)胞上表達(dá)的PD-L1能夠使腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)的T細(xì)胞增殖受到抑制，影響抗原特異性T細(xì)胞應(yīng)答的產(chǎn)生，并使MCL細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞溶解產(chǎn)生耐受性。降低MCL腫瘤細(xì)胞上的PD-L1表達(dá)，可產(chǎn)生更多CD4陽(yáng)性或CD8陽(yáng)性的記憶效應(yīng)T細(xì)胞，該研究結(jié)果表明淋巴瘤細(xì)胞表達(dá)的PD-L1可能導(dǎo)致MCL宿主抗腫瘤免疫應(yīng)答的抑制，并且靶向腫瘤細(xì)胞PD-L1可能是一種提高M(jìn)CL患者免疫治療療效的新方法。

2 巨噬細(xì)胞

MCL組織中存在著大量的巨噬細(xì)胞(粉紅色組織細(xì)胞、上皮樣巨噬細(xì)胞)，但它們?cè)诎l(fā)病機(jī)制或者疾病進(jìn)展中的重要性尚未被系統(tǒng)地研究和闡明。巨噬細(xì)胞數(shù)量較多表明疾病更具侵襲性，在巨噬細(xì)胞豐富的MCL病例中，有絲分裂和淋巴母細(xì)胞樣的細(xì)胞數(shù)量較多。淋巴瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(LAM)和間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞通過(guò)在MCL細(xì)胞上高表達(dá)的G蛋白偶聯(lián)趨化因子受體(CXCR4、CXCR5)來(lái)吸引MCL細(xì)胞。VLA-4整合素(CD49d)通過(guò)與基質(zhì)配體(VCAM-1和纖維連接蛋白)結(jié)合，與趨化因子受體協(xié)同粘附。這些發(fā)現(xiàn)表明，MCL中的巨噬細(xì)胞可能與其他淋巴瘤中的LAM發(fā)揮著類(lèi)似的重要作用，他們之間的這種串?dāng)_導(dǎo)致了耐藥途徑的激活。此外多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞絕對(duì)數(shù)與OS呈負(fù)相關(guān)[13]，淋巴結(jié)中存在CD163陽(yáng)性的巨噬細(xì)胞，提示髓系細(xì)胞在MCL微環(huán)境中的作用。髓系細(xì)胞支持原代MCL細(xì)胞存活，并通過(guò)產(chǎn)生VEGF-C參與淋巴管生成[14]。MCL細(xì)胞和巨噬細(xì)胞之間的相互作用和信號(hào)網(wǎng)絡(luò)值得進(jìn)一步研究。

3 粘附分子

MCL具有早期骨髓累及的特點(diǎn)，這在一定程度上與粘附介導(dǎo)的細(xì)胞周期阻滯有關(guān)，淋巴細(xì)胞在血液和淋巴組織之間的運(yùn)輸受到組織特異性趨化因子表達(dá)的調(diào)節(jié)，循環(huán)中的淋巴細(xì)胞通過(guò)黏附分子，如整合素與血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行短暫和可逆的相互作用，這個(gè)過(guò)程被稱(chēng)為“滾動(dòng)”。在管腔內(nèi)皮細(xì)胞表面的趨化因子觸發(fā)整合素的激活，導(dǎo)致細(xì)胞停滯、牢固粘附和跨內(nèi)皮細(xì)胞遷移到趨化因子梯度指導(dǎo)細(xì)胞定位和保留的組織中。有研究表明MCL細(xì)胞表達(dá)高水平的功能性CXCR4和CXCR5趨化因子受體以及VLA-4粘附分子，MCL細(xì)胞以CXCR4和VLA-4依賴(lài)的方式粘附并自發(fā)遷移到骨髓基質(zhì)細(xì)胞，與骨髓基質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)可使MCL細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性[15]。

4 濾泡樹(shù)突狀細(xì)胞(FDCs)

FDCs是間充質(zhì)來(lái)源的細(xì)胞，與反應(yīng)性淋巴結(jié)相比，MCL中FDC、CD23、CD35和CD54的表達(dá)水平較低[16]。FDC的分布可以區(qū)分具有不同預(yù)后的MCL患者組：淋巴結(jié)FDC的彌漫型與結(jié)節(jié)型相比預(yù)后更差，并且FDC通過(guò)細(xì)胞-細(xì)胞接觸機(jī)制支持MCL細(xì)胞存活，但其分子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制尚未明確。在骨髓中，MCL細(xì)胞和間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSC)參與可溶性串?dāng)_，由CXCL12/CXCR4軸和促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活的BAFF驅(qū)動(dòng)[17-18]。

5 細(xì)胞因子

腫瘤的生長(zhǎng)受輔助細(xì)胞的調(diào)節(jié)，如基質(zhì)細(xì)胞、髓樣細(xì)胞和微環(huán)境中的一些淋巴免疫細(xì)胞。這些細(xì)胞分泌細(xì)胞因子、趨化因子和其他與腫瘤存活、發(fā)展和轉(zhuǎn)移相關(guān)的分子[19]。微環(huán)境中的細(xì)胞因子的自分泌和旁分泌可能在MCL生態(tài)位中起主要作用。MCL患者血液中存在多種細(xì)胞因子和趨化因子，如白細(xì)胞介素IL-12、CXCL-10、IL-8、CCL3和CCL4，其中一些與不良預(yù)后有關(guān)(IL-8、CCL3和CCL4)，原代MCL細(xì)胞表達(dá)IL-10、BAFF、IGF-1[20]或IL-6(IL-6R和CD5)受體[21]，從而實(shí)現(xiàn)有效的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和存活。BCR信號(hào)可誘導(dǎo)IL-1b、IL-6、IL-8、IL-10、TNFa和VEGFA等多種細(xì)胞因子的自分泌，證實(shí)了該信號(hào)通路在MCL病理生理過(guò)程中的重要作用[22]。IL-6是一種多效性細(xì)胞因子，可激發(fā)廣泛的生理或病理行為。IL-6與其受體結(jié)合，影響組織修復(fù)、神經(jīng)分化、骨代謝、造血、炎癥和免疫調(diào)節(jié)[23]。最后，IL-6增加急性時(shí)相蛋白的表達(dá)，如C-反應(yīng)蛋白，以獨(dú)立的機(jī)制保護(hù)腫瘤細(xì)胞免受化療藥物誘導(dǎo)的凋亡，并刺激腫瘤細(xì)胞分泌更多的IL-6。有研究表明，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞為MCL細(xì)胞提供旁分泌的IL-6，這些IL-6對(duì)化療藥物誘導(dǎo)的IL-6-/gp80LOW細(xì)胞凋亡有保護(hù)作用。外源性IL-6對(duì)化療藥物誘導(dǎo)的IL-6+/gp80+的MCL細(xì)胞凋亡也有額外的保護(hù)，此外，MSCs通過(guò)旁分泌CXCL12、CXCL13或BAFF支持MCL細(xì)胞存活[18]。趨化因子CXCL12、CXCL13和CCL19分別與MCL細(xì)胞中高表達(dá)的趨化因子受體CXCR4、CXCR5和CCR7結(jié)合，控制著MCL細(xì)胞的趨化作用，CXCL12、CXCL13和CCL19等趨化因子分別與MCL細(xì)胞高表達(dá)的趨化因子受體CXCR4、CXCR5和CCR7結(jié)合。CXCL12可以吸引正常的B細(xì)胞，但CCL19對(duì)MCL細(xì)胞的歸巢是特異的。MCL還通過(guò)分泌趨化因子來(lái)吸引輔助細(xì)胞，從而塑造其腫瘤微環(huán)境。在人體正常細(xì)胞中存在少量的細(xì)胞因子的表達(dá)，但與正常的B細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞中CCL4和CCL5的表達(dá)增加，除此之外它們能吸引單核細(xì)胞。在MCL血液樣本中也檢測(cè)到CCL17和CCL22，這表明它們?cè)诹馨徒Y(jié)中免疫細(xì)胞(如單核細(xì)胞或T細(xì)胞)的募集中發(fā)揮作用[24]。除了支持腫瘤細(xì)胞生存外，可溶性因子也參與了MCL細(xì)胞的增殖，IL-4或IL-10增強(qiáng)了CD40L依賴(lài)的增殖。IL-6和IL-10激活STAT3，STAT3信號(hào)的結(jié)構(gòu)性激活使血液系統(tǒng)惡性腫瘤細(xì)胞對(duì)凋亡產(chǎn)生抵抗。抑制造血系統(tǒng)STAT3信號(hào)可誘導(dǎo)多組分抗腫瘤免疫，而STAT3在MCL細(xì)胞中的組成性激活依賴(lài)于IL-6介導(dǎo)的信號(hào)的持續(xù)存在。Baran-Marszak等[22]研究發(fā)現(xiàn)，MCL細(xì)胞STAT3的磷酸化依賴(lài)于IL-6或IL-10的自分泌，和BCR誘導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)，阻斷IL-6而不是IL-10信號(hào)通路是抑制MCL細(xì)胞STAT3磷酸化的關(guān)鍵。所以阻斷IL-6介導(dǎo)的STAT3激活可以提高M(jìn)CL細(xì)胞對(duì)化療藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性的敏感性。

隨著對(duì)MCL研究的深入，越來(lái)越多的研究體現(xiàn)了腫瘤微環(huán)境對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展及預(yù)后有著不可忽視的影響。盡管目前有些機(jī)制和原理還未能完全闡明，但為未來(lái)的MCL的研究提供了一個(gè)方向，為未來(lái)靶向治療提供一個(gè)新的思路。