慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA定量檢測(cè)水平與肝功能指標(biāo)的關(guān)系研究

林寶圓 陳志鴻

（1. 漳州市龍海區(qū)石碼社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心 漳州 363199；2. 漳州市第二醫(yī)院門診辦公室 漳州 363100）

慢性乙型肝炎（CHB）以HBV感染為基礎(chǔ)病理，而HBVDNA定量水平除直接反映病毒載量外，也與CHB病情的進(jìn)展、病理反應(yīng)程度、肝臟組織損傷程度及患者預(yù)后密切相關(guān)。肝功能是目前臨床上用于判斷CHB患者病情、HBV感染對(duì)臟器侵襲累及程度、CHB進(jìn)展為肝癌風(fēng)險(xiǎn)及指導(dǎo)治療決策的重要監(jiān)測(cè)指標(biāo)。因此，HBV-DNA定量值與CHB患者肝功能指標(biāo)之間關(guān)系的研究一直為國(guó)際消化科醫(yī)學(xué)關(guān)注的熱點(diǎn)[1-3]。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外諸多文獻(xiàn)報(bào)道分別從肝功能常規(guī)三項(xiàng)（TBil、ALT、AST）、Child-Pugh 評(píng)分、氧化應(yīng)激反應(yīng)等方面廣泛開(kāi)展了CHB患者血清HBV-DNA與肝功能的關(guān)系，且取得了長(zhǎng)足的進(jìn)展[4-5]。而臨床上CHB患者肝功能的檢測(cè)并于僅限于上述指標(biāo)，機(jī)體炎癥反應(yīng)、肝纖維化程度、代償功能均在肝功能的檢測(cè)中具有重要的意義。鑒于此，本文設(shè)計(jì)回顧性研究方案，探討CHB患者HBV-DNA定量與肝功能常規(guī)三項(xiàng)及血清炎癥反應(yīng)指標(biāo)、肝纖維化指標(biāo)、肝代償功能的關(guān)系，以明晰其與患者肝功能指標(biāo)的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

病例收集范圍為2020年1月～2021年5月期間我院消化科收治的CHB患者，根據(jù)樣本容量計(jì)算原則共納入病例80例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）符合CHB相關(guān)診斷指南及規(guī)范；（2）遵循知情告知規(guī)范，取得患者知情同意；（3）病厲資料中提供的病例信息符合本研究需求；排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）現(xiàn)階段確診肝癌或有肝癌史者；（2）合并其他類型的病毒性肝炎疾病者。其中，男48例，女32例；年齡19～78歲，平均（56.46±4.34）歲。

1.2 方法

1.2.1 血清HBV-DNA定量檢測(cè)

血液采集部位：肘靜脈；采集條件：空腹；采集時(shí)間：晨起空腹；采集量：5ml。血液處理?xiàng)l件：離心分離血清；檢測(cè)指標(biāo)：HBV-DNA（定量）；檢測(cè)方法：FQ-PCR。根據(jù)所獲得的血清HBV-DNA定量值，將本組80例患者分為低載量組（DL組：HBV-DNA＜104IU/ml）58例和高載量組（GL組：HBVDNA≧104IU/ml）22例。

1.2.2 肝功能常規(guī)三項(xiàng)檢測(cè)

患者血液采集要求和規(guī)范同上，采集量：5ml。血液處理?xiàng)l件：離心分離血清；檢測(cè)指標(biāo)：TBil、ALT、AST。

1.2.3 血清炎癥反應(yīng)指標(biāo)

患者血液采集要求和規(guī)范同上，采集量：5ml。血液處理?xiàng)l件：離心分離血清；檢測(cè)指標(biāo)：IL-2、IL-6、IL-17。

1.2.4 血清肝纖維化指標(biāo)

患者血液采集要求和規(guī)范同上，采集量：5ml。血液處理?xiàng)l件：離心分離血清；檢測(cè)指標(biāo)：HA、PCⅢ、Ⅳ-C。

1.2.5 肝功能代償

評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：肝功能代償不全分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)；評(píng)價(jià)分級(jí)：正常、輕度不全、中重度不全。并根據(jù)評(píng)價(jià)分級(jí)結(jié)果，將其分為正常組40例，輕度不全組30例，中重度不全組10例。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 不同血清HBV-DNA載量組患者的肝功能常規(guī)三項(xiàng)指標(biāo)、血清炎癥反應(yīng)指標(biāo)、血清肝纖維化指標(biāo)

根據(jù)1.2.1-1.2.4血清學(xué)檢測(cè)結(jié)果，對(duì)比分析GL組和DL組患者肝功能常規(guī)三項(xiàng)指標(biāo)、血清炎癥反應(yīng)指標(biāo)、血清肝纖維化指標(biāo)。

1.3.2 不同血清HBV-DNA載量患者的肝功能代償狀態(tài)

根據(jù)1.2.5肝功能代償分級(jí)結(jié)果，對(duì)比分析GL組和DL組患者肝功能代償狀態(tài)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS20.0軟件，計(jì)數(shù)、計(jì)量數(shù)據(jù)記為百分比（n/%）、標(biāo)準(zhǔn)差（±s），χ2、t檢驗(yàn)， P＜0.05提示差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 GL組和DL組患者肝功能常規(guī)三項(xiàng)指標(biāo)比較

GL組患者血清肝功能常規(guī)三項(xiàng)指標(biāo)TBil、ALT、AST均高于 DL 組（t=8.686，P=0.011；t=10.757，P=0.009；t=11.667，P=0.000），見(jiàn)圖1。

圖1 GL組和DL組患者血清TBil、ALT、AST比較

2.2 GL組和DL組患者血清炎癥反應(yīng)指標(biāo)比較

GL組患者血清炎癥反應(yīng)指標(biāo)IL-2、IL-6、IL-17均高于 DL 組（t=11.243，P=0.000；t=9.687，P=0.011；t=10.445，P=0.008），見(jiàn)圖2。

圖2 GL組和DL組患者血清IL-2、IL-6、IL-17比較

2.3 GL組和DL組患者血清肝纖維化指標(biāo)比較

GL組患者血清肝纖維化指標(biāo)HA、PCⅢ、Ⅳ-C均高于 DL 組（t=10.854，P=0.007；t=9.143，P=0.010；t=11.556，P=0.002），見(jiàn)圖3。

圖3 GL組和DL組患者血清HA、PCⅢ、Ⅳ-C比較

2.4 GL組和DL組患者的肝功能代償狀態(tài)

GL組患者肝功能代償中重度不全者比例為13.64%，高于DL組的0（P＜0.05）；GL組患者肝功能代償正常者比例為45.45%，低于DL組的68.97%（P＜0.05），見(jiàn)表1。

表1 GL組和DL組患者的肝功能代償狀態(tài)比較（n/%）

3 討論

在社會(huì)環(huán)境日漸復(fù)雜及人們生活習(xí)慣不斷變化的背景下，我國(guó)肝病的發(fā)病率日趨升高，加強(qiáng)肝病防治已成為當(dāng)前公共衛(wèi)生事業(yè)關(guān)注的重點(diǎn)。然而臨床實(shí)踐中，肝病的發(fā)生、發(fā)展作為多種病生理因素、社會(huì)因素、行為因素及環(huán)境因素共同參與的復(fù)雜過(guò)程，準(zhǔn)確了解其病理機(jī)制，密切監(jiān)測(cè)其病情進(jìn)展進(jìn)程，是促進(jìn)臨床科學(xué)決策，完善肝病診療體系及預(yù)防肝病對(duì)其他重要器官造成累及的關(guān)鍵，同時(shí)對(duì)優(yōu)化配置醫(yī)療資源，減輕家庭社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)具有重要的意義。HBV-DNA定量水平作為乙肝臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的重要指標(biāo)，其指標(biāo)值主要反映患者血液中乙肝病毒含量，進(jìn)而提示HBV感染對(duì)臟器侵襲累及程度。而2021年，中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)指出，應(yīng)加強(qiáng)乙肝患者HBV-DNA定量水平的密切監(jiān)測(cè)，并根據(jù)監(jiān)測(cè)所得值評(píng)估乙肝病毒在患者體內(nèi)的復(fù)制水平，同時(shí)以循證醫(yī)學(xué)為指導(dǎo)，分析其與乙肝患者病情、病理、預(yù)后的關(guān)系，從而指導(dǎo)臨床治療、療效判斷。在肝病的防治中，肝功能的檢測(cè)一直是判斷患者病情進(jìn)展及不良預(yù)后風(fēng)險(xiǎn)的重要檢測(cè)項(xiàng)目，而通過(guò)分析CHB患者HBV-DNA載量與肝功能之間的關(guān)系，有利于臨床通過(guò)HBV-DNA定量水平及時(shí)監(jiān)測(cè)患者肝功能的變化，并予以前饋性、針對(duì)性的干預(yù)。本研究中，主要從肝細(xì)胞炎性損傷、肝纖維化程度、肝功能代償狀態(tài)三方面分析了CHB患者HBV-DNA定量水平與肝功能的關(guān)系，研究結(jié)果顯示：

在肝細(xì)胞炎性損傷中，GL組患者血清炎癥反應(yīng)指標(biāo)IL-2、IL-6、IL-17均高于DL組（P＜0.05），即隨CHB患者HBVDNA載量的增加，機(jī)體炎癥反應(yīng)加重，提示肝細(xì)胞炎性損傷加重。HBV感染作為激活機(jī)體炎癥反應(yīng)信號(hào)通路的始動(dòng)因素，隨HBV-DNA載量的升高，造成各種促炎因子、炎癥細(xì)胞因子的釋放量隨之升高。并在炎癥反應(yīng)的作用下，一方面，中性粒細(xì)胞對(duì)肝臟組織造成浸潤(rùn)，其釋放的ROS及細(xì)胞毒素導(dǎo)致肝細(xì)胞的損傷、凋亡，造成患者肝功能下降；另一方面，患者肝臟組織中的NK細(xì)胞數(shù)量大幅增加、激活，并在IFNγ的作用下進(jìn)一步造成NKT細(xì)胞被激活，誘導(dǎo)肝細(xì)胞出現(xiàn)炎性損傷。因此，HBV-DNA定量水平的升高提示肝細(xì)胞炎性損傷的加重，間接說(shuō)明患者肝功能的下降。在既往文獻(xiàn)報(bào)道中，有學(xué)者探討了CHB患者血清相關(guān)因子與HBV DNA載量之間的關(guān)系，并證實(shí)前后者之間成正相關(guān)性（P＜0.05）[6]。

在肝纖維化程度中，GL組患者血清肝纖維化指標(biāo)HA、PCⅢ、Ⅳ-C均高于DL組（P＜0.05），即CHB患者肝纖維化病理過(guò)程的演變趨勢(shì)隨HBV-DNA載量的變化而變化，且具有惡性循環(huán)機(jī)制。已有研究表明，人體在發(fā)生HBV感染后會(huì)出現(xiàn)以肝纖維化、肝硬化為主要表現(xiàn)的肝臟病理學(xué)變化[7-8]。而該病理機(jī)制主要是因?yàn)镠BV作為嗜肝病毒，對(duì)人體造成侵襲后快速激起機(jī)體的免疫應(yīng)答，在激活炎癥反應(yīng)并造成肝細(xì)胞炎性損傷、凋亡的基礎(chǔ)上造成肝細(xì)胞外基質(zhì)的異常分布及大量沉積，進(jìn)而出現(xiàn)纖維組織增生、纖維化。而臨床上隨著HBV-DNA載量的增加，提示HBV在患者體內(nèi)復(fù)制水平的升高，其激活的免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)進(jìn)一步加劇，最終造成肝纖維化程度的加重，肝功能的下降。與此同時(shí)，也有大量的真實(shí)病例研究和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)HBV感染與肝纖維化病理變化之間的相關(guān)機(jī)制進(jìn)行了研究，表明二者之間同樣具有正相關(guān)性（P＜0.05），且關(guān)聯(lián)機(jī)制較為復(fù)雜[9-10]。

最后在肝功能的綜合分析中，GL組患者肝功能代償中重度不全者比例為13.64%，高于DL組的0（P＜0.05）；GL組患者肝功能代償正常者比例為45.45%，低于DL組的68.97%（P＜0.05）；且GL組患者血清肝功能常規(guī)三項(xiàng)指標(biāo)TBil、ALT、AST均高于DL組（P＜0.05）。即隨CHB患者HBV-DNA載量的增加，患者肝功能、肝代償功能趨于下降，而上文所述的炎癥反應(yīng)、肝纖維化則在該機(jī)制中發(fā)揮了重要的參與作用。

綜上，隨CHB患者HBV-DNA載量的增加，患者肝細(xì)胞炎性損傷加重，肝纖維化程度加重，肝功能代償不全加劇，并在其共同作用下造成患者肝功能下降。因此，臨床上可通過(guò)對(duì)患者HBV-DNA定量水平的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，合理評(píng)估患者肝細(xì)胞炎性損傷程度及肝纖維化程度，并據(jù)此判斷肝功能，指導(dǎo)臨床科學(xué)決策患者的診療方案及預(yù)后轉(zhuǎn)歸，以提高疾病防治效果。同時(shí)，今后的課題論證中應(yīng)進(jìn)一步優(yōu)化研究路徑，豐富樣本量，從更多的客觀指標(biāo)上探討HBV與肝病病生理特征的關(guān)系。