兒童呼吸道合胞病毒感染臨床特征及其與炎琥寧治療前后免疫細(xì)胞因子的關(guān)系

趙文琴 趙成順

1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)，湖南 長沙 410000；2.湖南省直中醫(yī)醫(yī)院，湖南 株洲 412000

呼吸道合胞病毒（respiratory syn cytial virus，RSV）是一種包膜單股負(fù)鏈RNA 病毒，屬于肺病毒科正肺病毒屬，單負(fù)鏈病毒目。RSV 感染在嬰幼兒中最為常見，可引發(fā)毛細(xì)支氣管炎、哮喘、病毒性肺炎等呼吸道疾病，若不及時治療易并發(fā)支原體、衣原體、真菌等病原菌感染，不利于患兒預(yù)后[1-2]。因此，明確RSV 感染患兒臨床特征有助于指導(dǎo)疾病的預(yù)防與早期診斷，以便及時采取針對性抗病毒治療，改善患兒預(yù)后。炎琥寧是近年來廣泛用于治療兒童病毒性肺炎及病毒性上呼吸道感染的藥物，具有清熱解毒、抗炎、抗病毒等功效[3-4]。本研究選取2019 年9 月至2021 年3 月湖南省直中醫(yī)醫(yī)院兒科收治的下呼吸道感染患兒為研究對象，探究兒童RSV 感染臨床特征及其與炎琥寧治療前后免疫細(xì)胞因子的相關(guān)性，為臨床RSV 感染的治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年9 月至2021 年3 月湖南省直中醫(yī)醫(yī)院兒科收治的下呼吸道感染患兒210 例，均通過鼻咽拭子進(jìn)行病毒檢測，將RSV 病毒檢測陽性的患兒按照隨機(jī)數(shù)表法分為對照組和研究組，每組各27 例。研究組男15 例，女12 例，平均年齡（7.29±1.54）歲，平均病程（3.14±0.87）d。對照組男13 例，女14 例，平均年齡（7.33±1.12）歲，平均病程（3.27±0.94）d。納入標(biāo)準(zhǔn)：①有急性下呼吸道感染癥狀，如咳嗽、喘息、咽痛、胸悶等；②年齡≤13 歲；③患兒家屬知情并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①肝腎功能不全者；②有先天性肺部疾病者。兩組患兒一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞ 0.05），具有可比性。本研究經(jīng)湖南省直中醫(yī)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審批并通過（編輯號：201906269）。

1.2 方法

1.2.1 病毒檢測方法 通過鼻咽拭子進(jìn)行病毒檢測，采用核酸提取試劑盒（美國Thermo Scientific 公司）及熒光定量RT-PCR 方法提取檢測病毒核酸。1.2.2 治療方法 對照組采用布地奈德吸入氣霧劑（魯南貝特制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20030987，規(guī)格：0.1 mg×200 撳）、異丙托溴銨吸入溶液（山東京衛(wèi)制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字H20184025，規(guī)格：250 μg）進(jìn)行常規(guī)治療，布地奈德吸入氣霧劑200 ～400 μg/d，分成2 ～4 次使用，異丙托溴銨吸入溶液0.4 ～1.0 ml/d，分成3 ～4 次使用，共治療7 d。研究組在對照組的基礎(chǔ)上加用炎琥寧注射液（武漢長聯(lián)來福制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20046052，規(guī) 格：0.2 g）5 ～8 mg/kg 與5% 葡 萄糖注射液稀釋后靜脈滴注，每天1 次，7 d 為一療程。

1.3 觀察指標(biāo)

肺功能指標(biāo)水平測定采用德國JAEGE 公司生產(chǎn)的Master Screen PFT 肺功能儀，包括1 秒用力呼氣 量（forced expiratory volume in 1 second，F(xiàn)EV1）、用力肺活量（forced expiratory volume to forced vital capacity ratio，F(xiàn)VC），兩項(xiàng)指標(biāo)分別于治療前、治療7 d 后由同一名醫(yī)師操作測定并評估。分別于治療前和治療7 d 后抽取患兒靜脈血5 ml，2000 r/min 離心8 min 后取上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定血清Th1 輔助細(xì)胞（T-helper-1 cell，Th1）、Th2 輔助細(xì)胞（T-helper-2 cell，Th2）、Th1/Th2、γ-干擾素（gamma-interferon，IFN-γ）濃度。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）描述計(jì)量資料，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，采用Pearson 相關(guān)性分析探究肺功能與免疫細(xì)胞因子的相關(guān)性。P＜ 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 患兒病毒感染情況

210 例下呼吸道感染患兒中，RSV 檢測結(jié)果陽性率為25.71%（54/210），RSV 感染患兒的主要癥狀為咳嗽（98.15%）、咽痛/咽紅（98.15%）、喘息（64.81%）。

2.2 兩組患者治療前后肺功能指標(biāo)比較

治療后，兩組FEV1、FVC 顯著升高，且研究組顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），見表1。

表1 兩組患者治療前后肺功能指標(biāo)比較（%，x ± s）

2.3 兩組患者治療前后免疫細(xì)胞因子比較

治療后，兩組IFN-γ、Th1、Th1/Th2 水平顯著升高，且研究組高于對照組；Th2 水平下降，且研究組低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），見表2。

表2 兩組患者治療前后炎性因子比較（x ± s）

2.4 肺功能與免疫細(xì)胞因子的相關(guān)性分析

Pearson 相關(guān)性分析結(jié)果顯示，F(xiàn)EV1與Th1 呈正相關(guān)（r=0.191，P=0.015）、與Th2 呈負(fù)相關(guān)（r=-0.201，P=0.008），F(xiàn)EV1、FVC 與Th1/Th2 均 呈 正 相 關(guān)（r=0.662，P＜ 0.001；r=0.429，P＜ 0.001）。見表3。

表3 肺功能與免疫細(xì)胞因子的相關(guān)性分析

3 討論

RSV 主要通過與唾液或黏液飛沫密切接觸傳播。RSV 在鼻咽和上呼吸道的上皮細(xì)胞中復(fù)制一小段時間后，釋放的病毒顆?？赡苻D(zhuǎn)移到下呼吸道的細(xì)支氣管或肺泡。患兒感染RSV 后，其免疫反應(yīng)導(dǎo)致中性粒細(xì)胞浸潤并縮小氣道，引起細(xì)支氣管炎等呼吸道疾病，并伴隨發(fā)燒、流鼻涕、鼻塞、咳嗽、胸悶等常見癥狀。在病毒性和非典型細(xì)菌性呼吸道病原體篩查中，RSV 是導(dǎo)致5 歲以下兒童急性呼吸道感染的最常見病原體，也是合并感染中極為常見的病原體[5]。本研究納入210 例下呼吸道感染患兒中，RSV 檢測結(jié)果陽性率為25.71%。任康軼等[6]對2066 例2 歲以下急性下呼吸道感染患兒進(jìn)行病毒原檢測，RSV 檢測結(jié)果陽性率為39.98%。本研究結(jié)果顯示，由RSV 感染所致下呼吸道感染病例以咳嗽、喘息、咽痛/咽紅癥狀為主，與任少龍等[7]的報(bào)道相符。

RSV 主要感染初級氣道上皮細(xì)胞，也可以感染其他結(jié)構(gòu)性氣道和免疫細(xì)胞。RSV 通常激活TLR2、TLR3 和TLR4 等受體，這些受體可反過來促進(jìn)炎性細(xì)胞因子的表達(dá)和分泌，引發(fā)免疫反應(yīng)，導(dǎo)致Th2、IL-4 等炎性因子釋放增加[8-9]。但大量炎性因子殺滅病原菌的同時也會損傷氣管組織，加劇氣道高反應(yīng)性和喘息癥狀，影響肺部功能。本研究結(jié)果顯示，治療后，兩組FEV1、FVC、IFN-γ、Th1、Th1/Th2 水平顯著升高，且研究組高于對照組，Th2 水平下降，且研究組低于對照組（P＜ 0.05），提示炎琥寧治療有利于減輕炎癥反應(yīng)，改善氣道高反應(yīng)性，調(diào)節(jié)Th1/Th2平衡，與郝文東等[10]的研究結(jié)果大致相符。炎琥寧系穿心蓮提取物經(jīng)酯化、脫水、成鹽精制而成，其中穿心蓮性味苦寒，可發(fā)揮清熱解毒、涼血消腫等功效[11]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，炎琥寧能抑制早期毛細(xì)血管通透性增高與炎性滲出和水腫，對流感病毒、呼吸道病毒等多種病毒都具有滅活作用[12]。

細(xì)胞免疫為病毒感染的防御機(jī)制之一，樹突狀細(xì)胞（DC）HLA Ⅰ類抗原將CD4+T 細(xì)胞極化為Th1細(xì)胞，DC HLA Ⅱ類分子的抗原使CD4+T 細(xì)胞極化成為Th2 細(xì)胞。Th1 細(xì)胞輔助細(xì)胞免疫應(yīng)答，產(chǎn)生免疫細(xì)胞因子白介素（interleukin，IL）-2、IL-12 和IFN-γ，發(fā)揮炎癥抑制、減輕氣道損傷作用[13]。Th2細(xì)胞輔助體液免疫應(yīng)答，產(chǎn)生免疫細(xì)胞因子IL-4、IL-5、IL-6 和IL-10，參與體液免疫的發(fā)展，并在超敏反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。IFN-γ 抑制Th2 細(xì)胞的增殖，促進(jìn)Th0 細(xì)胞向Th1 細(xì)胞轉(zhuǎn)化。在RSV 感染患兒中，IFN-γ 的產(chǎn)生被完全抑制，這種效應(yīng)有利于Th2 型體液反應(yīng)。多項(xiàng)研究表明，RSV 感染的嚴(yán)重程度與Th1/Th2 的失衡關(guān)系密切[14-16]。本研究也得出類似結(jié)論，F(xiàn)EV1與Th1 呈正相關(guān)、與Th2 呈負(fù)相關(guān)，F(xiàn)EV1、FVC 與Th1/Th2 均呈正相關(guān)（P＜ 0.05），進(jìn)一步說明RSV 感染患兒的肺功能與Th1/Th2 平衡有關(guān)，而炎琥寧的抗病毒和免疫調(diào)節(jié)作用有利于改善肺功能并能促進(jìn)Th1/Th2 恢復(fù)平衡。

綜上，RSV 感染患兒的臨床特征以咳嗽、咽痛/ 咽紅、喘息為主，Th1/Th2 平衡與肺功能存在相關(guān)性，采用炎琥寧治療可通過改善肺功能從而發(fā)揮對Th1、Th2 等免疫細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用。