豬流行性腹瀉病毒（PEDV）的致病機(jī)制及防控措施

王勇衛(wèi)

（睢縣畜牧發(fā)展服務(wù)中心，河南 睢縣 476900）

豬流行性腹瀉病毒（PEDV）是冠狀病毒科甲型冠狀病毒屬的成員之一，可引起新生仔豬的急性腹瀉、嘔吐、脫水甚至死亡。PEDV的主要傳播途徑是糞便，在豬與豬及豬場與豬場之間有時(shí)候通過糞便空氣也發(fā)生傳播。新生豬感染PEDV會(huì)導(dǎo)致糞便病毒脫落，并增加促炎和先天免疫反應(yīng)。經(jīng)口服免疫母豬體內(nèi)的PEDV特異性IgA效應(yīng)細(xì)胞和記憶B 細(xì)胞在母豬乳源性免疫和仔豬被動(dòng)保護(hù)中起重要作用。

20 世紀(jì)70 年代末，PEDV首次出現(xiàn)在英國，1973 年在中國首次報(bào)道，在2011年檢測到SINDEL PEDV毒株，可能是由G1a CV777譜系經(jīng)典毒株和PEDV G2株之間的重組事件引起的。

2016-2017 年研究者在腹瀉豬身上發(fā)現(xiàn)了另一種新的甲型冠狀病毒（BAT HKU2-like），在基因上不同，但在臨床上與其他病毒相似，并被命名為豬急性腹瀉綜合征冠狀病毒（SADS-CoV）。由于豬腸道冠狀病毒引起的臨床癥狀難以區(qū)分。因此，鑒別診斷是控制豬病毒性流行性腹瀉的關(guān)鍵。本文就PEDV 感染的病原學(xué)、傳播學(xué)、致病機(jī)制及防控等方面的最新研究進(jìn)展作一綜述。

1 病原學(xué)

1.1 PEDV結(jié)構(gòu)與基因組組織

PEDV粒子具有多形性，直徑95～190 nm，包括長度約18 nm 的纖突。PEDV 有一個(gè)約28kb 的單鏈正向RNA 基因組（不包括聚A-尾），編碼4種結(jié)構(gòu)蛋白，即S、包膜（E）、膜（M）和核衣殼（N）蛋白，16種非結(jié)構(gòu)蛋白和一個(gè)輔助蛋白ORF3。許多非結(jié)構(gòu)和結(jié)構(gòu)蛋白在體外抑制I型和III型干擾素反應(yīng)（IFN）。S蛋白對(duì)于與特定宿主細(xì)胞受體的相互作用、介導(dǎo)病毒結(jié)合和進(jìn)入以及合胞體的形成以及誘導(dǎo)中和抗體至關(guān)重要。S蛋白分為S1和S2亞基。N-末端S1亞基包含受體結(jié)合域，C-末端S2 亞基負(fù)責(zé)膜融合。輔助蛋白ORF3是一種離子通道蛋白，對(duì)于病毒的體外復(fù)制是必不可少的。

1.2 PEDV 的血清學(xué)特性及其與其他豬或動(dòng)物冠狀病毒的交叉反應(yīng)性

通過酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、免疫印跡和免疫沉淀或VN試驗(yàn)檢測PEDV和貓傳染性腹膜炎病毒（FIPV）之間的抗原交叉反應(yīng)或交叉中和。盡管沒有檢測到PEDV和TGEV 之間的血清學(xué)交叉中和，但研究人員發(fā)現(xiàn)PEDV和TGEV之間存在一些抗原交叉活性，這是基于其N蛋白N-末端區(qū)域的至少兩個(gè)保守表位，以及通過M 蛋白或整個(gè)病毒顆粒。截?cái)郚 蛋白的N 末端區(qū)域或避免基于M 或純化的全病毒的血清學(xué)檢測可能會(huì)消除PEDV和TGEV的共同表位或降低血清學(xué)檢測可能的交叉反應(yīng)。針對(duì)PDCoV 的多克隆超免疫抗血清與PEDV 沒有交叉反應(yīng)。在N、M和E蛋白和整個(gè)PEDV顆粒中，只有PEDV的M蛋白1/12來自PDCoV感染豬的恢復(fù)期血清中顯示出交叉反應(yīng)。對(duì)于SADS-CoV，抗N 蛋白的單抗與PEDV、TGEV 或PDCoV不發(fā)生交叉反應(yīng)。

2 傳播

2.1 直接或間接接觸傳播

糞便-口腔途徑是通過受感染豬的糞便或嘔吐物直接傳播PEDV的主要途徑。PEDV在養(yǎng)殖場內(nèi)及養(yǎng)殖場之間的間接接觸傳播也很頻繁，特別是通過其他受污染的污染體傳播，包括：運(yùn)輸拖車、養(yǎng)殖場人員的手、鞋服、飼料、飼料配料和添加劑，以及飼料箱。PEDV在室溫下在飼料箱上保持傳染性35 d。PEDV交叉污染也發(fā)生在飼料制造過程中。

2.2 氣溶膠（間接接觸）傳播

糞便-鼻腔途徑是豬與豬之間或養(yǎng)殖場與養(yǎng)殖場（長達(dá)16公里）之間通過霧化PEDV顆?？諝鈧鞑EDV的另一種途徑，PEDV顆粒在哺乳豬中具有很強(qiáng)的傳染性。通過空氣傳播的PEDV發(fā)生在哺育新生仔豬的分娩豬群中，這些新生仔豬對(duì)該病毒高度敏感。在距離臨床豬較遠(yuǎn)的地方飼養(yǎng)的幼豬的鼻腔經(jīng)常呈PEDV RNA 陽性。霧化PEDV 不僅感染豬的腸道，而且還感染鼻腔上皮。然而，與新生仔豬相比，可能需要更高劑量的霧化PEDV才能感染斷奶和年長的豬。

3 PEDV的致病機(jī)理

3.1 PEDV的細(xì)胞受體

豬小腸黏膜中的氨基肽酶N（APN），這是一種150kDa 的糖基化跨膜蛋白，初步確定為PEDV 的細(xì)胞受體。然而，豬APN 可能不是PEDV 的主要細(xì)胞表面受體。同時(shí)，APN 基因敲除的豬容易感染PEDV，但不會(huì)感染使用APN 作為細(xì)胞受體的TGEV。細(xì)胞膜膽固醇或兩種細(xì)胞表面分子，如唾液酸和封閉素，分別表達(dá)在分泌型（杯狀）或吸收型腸細(xì)胞的頂面，部分參與了PEDV 與腸細(xì)胞的結(jié)合和進(jìn)入。PEDV 的毒株，如細(xì)胞培養(yǎng)適應(yīng)型與野生型，可能是通過唾液酸進(jìn)入細(xì)胞的一個(gè)因素。

3.2 病理生理學(xué)

PEDV 引起的腹瀉是由于受感染的腸細(xì)胞大量丟失和功能障礙引起的吸收不良和消化不良的結(jié)果，隨后刷狀緣膜結(jié)合消化酶減少。嘔吐和食欲下降會(huì)加劇脫水。由于碳酸氫鹽的丟失，PEDV 感染的仔豬還表現(xiàn)出高鉀血癥和酸中毒。心肌收縮力因酸中毒和脫水而受損。在臨床感染豬的小腸中，絨毛腸細(xì)胞的緊密連接或黏附連接被破壞。連接蛋白的表達(dá)也降低或改變，隨后跨上皮阻力降低。在臨床期間，小腸中杯狀細(xì)胞的數(shù)量顯著減少，然后是粘蛋白量減少。受損的腸道完整性可能導(dǎo)致吸收腸腔食物和細(xì)菌，從而引起過敏反應(yīng)和合并感染。

4 預(yù)防和控制策略

4.1 加強(qiáng)生物安全是作為預(yù)防和控制病毒的首要策略

例如對(duì)運(yùn)輸車和其他潛在污染物進(jìn)行去污和消毒，提供安全的飼料或飼料添加劑，以及對(duì)養(yǎng)豬場和農(nóng)場工人采取嚴(yán)格的衛(wèi)生措施，對(duì)于防止PEDV的直接或間接接觸傳播至關(guān)重要。PEDV 從感染PEDV 的農(nóng)場向其他人或野生動(dòng)物的溢出也應(yīng)通過嚴(yán)格的檢疫過程進(jìn)行控制，其中應(yīng)包括在腹瀉終止和疾病得到控制之前不得移動(dòng)豬。

4.2 強(qiáng)加免疫預(yù)防也是作為控制病毒的策略

為了維持或增強(qiáng)口服活疫苗在分娩豬群中引發(fā)的豬群免疫力，肌內(nèi)注射活PEDV 或滅活的佐劑全病毒PEDV疫苗在分娩前4～5 d或2 w進(jìn)行一次或兩次免疫可有效提高GALT 中PEDV 特異性IgA 記憶B 細(xì)胞陽性母豬的泌乳免疫。許多候選疫苗或產(chǎn)品已經(jīng)在中國和世界范圍內(nèi)進(jìn)行了測試和開發(fā)。與單獨(dú)的IM 活疫苗或單獨(dú)的反饋相比，IM 活疫苗加強(qiáng)劑加反饋在減少哺乳仔豬死亡人數(shù)方面更有效。用滅活的PEDV進(jìn)行初免和加強(qiáng)IM疫苗接種對(duì)仔豬免受PEDV感染提供了保護(hù)。因此，啟動(dòng)和加強(qiáng)疫苗接種，通過使用活PEDV 口服或IM 疫苗接種途徑經(jīng)常用于母體免疫PEDV感染。